依達(dá)拉奉對(duì)離體兔肺臟保存效果的實(shí)驗(yàn)研究

依達(dá)拉奉對(duì)離體兔肺臟保存效果的實(shí)驗(yàn)研究

作者：周慶玲，孫強(qiáng)，徐長(zhǎng)憲，孫金輝，孟國(guó)偉【摘要】

目的探討依達(dá)拉奉對(duì)離體兔肺臟保存質(zhì)量的影響。方法健康大白兔12只，按照隨機(jī)原則，分為L(zhǎng)PD組（n=6）和E組（n=6）。LPD組用低鉀右旋糖酐（LPD）液行肺灌洗及肺保存，E組用含依達(dá)拉奉20mg/L的LPD液行肺灌洗及肺保存。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取肺靜脈血標(biāo)本作血?dú)夥治黾爸苽溲鍦y(cè)定丙二醛(MDA)含量與超氧化物歧化酶（SOD）活性；取肺組織標(biāo)本測(cè)干／濕重及送病理。結(jié)果兩組肺靜脈血PaO2、PaCO2、血漿丙二醛(MDA)含量及SOD活性、肺組織干／濕重比（D/W）均無顯著差異(P>0.05)。肺組織病理結(jié)果顯示兩組均有肺組織毛細(xì)血管輕度充血，肺泡結(jié)構(gòu)尚可，肺泡間質(zhì)少量粒細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡腔內(nèi)輕度滲出及少量紅細(xì)胞。結(jié)論在離體冷保存6h再灌注的兔肺模型，依達(dá)拉奉未顯示出明顯優(yōu)于低鉀右旋糖酐液(LPD)的保護(hù)效果?！娟P(guān)鍵詞】

低鉀右旋糖酐液；依達(dá)拉奉；肺保存TheEffectofEdaravoneonIsolatedRabbitLungPreservationAbstract:OBJECTIVEToinvestigatethepulmonarypreservationeffectofEdaravoneonisolatedrabbitlung.METHODS12rabbitswererandomlydividedinto2groups:LPDgroup(n=6),lungsflushedandpreservedwithLPDsolution;

Edaravonegroup(n=6):lungsflushedandpreservedwithLPDsolutionplusEdaravone20mg/L.Alllungswerereperfusedwithvenousbloodfor10minutesafter6hourscoldpreservation.BloodsampleswereanalyzedforPO2,PCO2,serumMDAandSOD.Lungtissue

wet-to-dryweightratiocompared,samplesofleftlungtissueweresentforhistologicevaluation.RESULTSPaO2andPaCO2levels,serumMDAandSOD,andLungtissueD/Wratioshowednosignificantdifferencebetweentwogroups(P>0.05);histologicevaluationshowedmildchangesinlungtissueinbothgroups.CONCLUSIONLPDsolutionplusedaravoneandLPDsolutionshowedsimilarprotectiveeffectsonisolatedrabbitlungpreservation.Keywords：LPDsolution；Edaravone；lungpreservation自從Cooper等1983年在加拿大多倫多大學(xué)醫(yī)院首次成功地為一位肺纖維化晚期患者實(shí)施了單肺移植手術(shù)［1］，之后的二十余年，肺移植逐漸成為治療終末期肺部疾患的有效手段。但是，供肺短缺、移植早期的肺缺血再灌注損傷(lungischemiareperfusioninjury)依然是限制肺移植在臨床上廣泛應(yīng)用的主要因素。因此，如何延長(zhǎng)器官保存時(shí)間，改善保存器官移植后功能，減輕移植器官的缺血再灌注損傷是亟需探索的重點(diǎn)之一。

肺缺血再灌注損傷的重要原因之一就是氧自由基形成。依達(dá)拉奉是一種自由基清除劑，通過清除自由基，抑制脂質(zhì)過氧化，對(duì)多種臟器及組織的缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。Ito等的研究發(fā)現(xiàn)依達(dá)拉奉對(duì)大鼠腸缺血導(dǎo)致的肺損傷有保護(hù)作用，能減少白細(xì)胞浸潤(rùn)，減輕脂質(zhì)過氧化，抑制肺內(nèi)致炎性細(xì)胞因子IL-6mRNA表達(dá)［2］。本研究在低鉀右旋糖酐液(LPD)液中加入依達(dá)拉奉20mg/L，觀察其對(duì)離體兔肺的保護(hù)作用。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康大白兔12只，雌雄不拘，體重（3000±200）g（購(gòu)于山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）。

1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑盒美國(guó)E150型紐邦（NEWPORT）呼吸機(jī)；德國(guó)產(chǎn)StokertⅡ體外循環(huán)機(jī)的雙泵頭；德國(guó)產(chǎn)Sartoriusanalytic分析天平；北京醫(yī)用離心器廠生產(chǎn)LDZ5-2型低速離心儀；山東濰坊醫(yī)藥器械公司生產(chǎn)立鶴牌電熱恒溫干燥箱；福建新大陸生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)722S可見光分光光度計(jì)；國(guó)產(chǎn)恒溫水浴箱；美國(guó)雅培公司的i-STAT血?dú)馍治鰞x；.丙二醛（MDA）試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒以及蛋白定量測(cè)定試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所；依達(dá)拉奉（必存）注射液系江蘇先聲藥業(yè)生產(chǎn)，規(guī)格10mg/5ml,生產(chǎn)批號(hào)80-041101。1.3動(dòng)物模型制備兔經(jīng)耳緣靜脈建立靜脈通路，靜脈注射氯胺酮2mg/kg，氯化琥珀膽堿1mg/kg，麻醉后仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)。頸部正中切口，氣管切開插管，接E150型紐邦（NEWPORT）呼吸機(jī)輔助呼吸，吸氧濃度21%，呼吸頻率40～50次/分，潮氣量15ml/kg。兔去毛消毒，前正中線開胸，剪除縱隔胸膜，切除胸腺暴露氣管，打開心包，游離上下腔靜脈。肝素3mg/kg經(jīng)右心耳進(jìn)行肝素化，經(jīng)右室流出道插入16GA肺動(dòng)脈灌注管并固定。右房插管收集自體靜脈血入真空密閉儲(chǔ)血袋,回收血量約(150±20)ml，紅細(xì)胞壓積（Hct）（0.35±0.03），生理鹽水稀釋至Hct0.25,密閉保存，以備再灌注用。待心臟停跳時(shí),經(jīng)右室流出道肺動(dòng)脈插管，用置于60cm高度、預(yù)冷4℃的肺保存液沖洗肺臟,同時(shí)切開左心耳引流。沖洗期間繼續(xù)肺通氣。灌注總量60ml/kg，沖洗完畢，完整游離出心肺組織，吸氣末結(jié)扎氣管使肺處于膨脹狀態(tài)，置于4℃與灌洗液相同的保護(hù)液中保存。于4℃環(huán)境中保存6h，再行離體復(fù)灌。復(fù)灌時(shí)參照LSWang模型［3］，取出心肺組織，氣管插管接呼吸機(jī)呼吸參數(shù)如同前述。固定好肺動(dòng)脈灌注管，同時(shí)用滾壓泵（德國(guó)StokertⅡ體外循環(huán)機(jī)的雙泵頭，泵管采用停