ca1500凝血儀原理及操作注意事項課件

凝固法基本測試原理是光學法的散射光檢測（用660nm光電二極管檢測散射光強度的變化），還并用了百分比方式的測定原理：當試劑加入標本后，凝血開始啟動，隨之光學出現(xiàn)變化，儀器把這種光學的變化描繪成凝固曲線：把開始出現(xiàn)凝集的起始點作為0%、把完全凝固的終點作為100%、把50%變化點處作為凝固時間（報告點），當測定含有干擾物（黃疸、溶血、高脂血癥等）或低纖維蛋白原血癥的特殊標本時，其作為起始點的0%的基線會隨之上移或下移,相當于扣除本底干擾.凝固法測試項目以上凝固法檢測原理所測定的項目包括了最常用的如PT、APTT、FIB、TT、內(nèi)源凝血因子（FVIII、XI、XI、XII），外源凝血因子（FII、V、VII、X）等發(fā)色底物法：血漿、試劑、底物混合發(fā)生反應(yīng)，根據(jù)吸光度變化，計算結(jié)果是通過測定產(chǎn)色物質(zhì)的吸光度變化，以推算待測物的含量，這種方法屬生物化學法，其基本原理是：試劑中為人工合成的含某種酶裂解位點的短肽，與產(chǎn)色物質(zhì)如對硝基苯胺(pNA)連接，待檢物品中含有活性酶或無活性的酶原被加入的激活劑活化，在檢測過程中產(chǎn)色物質(zhì)被解離下來，使被檢物品出現(xiàn)顏色變化，其與被檢物含量呈一定的數(shù)量關(guān)系。此方法以酶學方法為基礎(chǔ)，可檢測項目包括如：AT-III、Plg、PC、PS、FM、PAI，Tpa，α2-AP等。免疫分析法：血漿與乳膠試劑發(fā)生反應(yīng)

以被檢物作為抗原，制備相應(yīng)的多克隆抗體，利用抗原抗體的特異結(jié)合反應(yīng)來對被檢物進行定性和定量檢測，在凝血儀上多采用免疫比濁法測定，其基本原理是當一定波長的光線通過反應(yīng)混合液時，被其中抗原抗體反應(yīng)形成的免疫復合物吸收而減弱，在一定范圍內(nèi)，其吸光度與復合物量呈正相關(guān)，因此當抗體量固定時，根據(jù)復合物的吸光度值，即可推算出待測抗原含量，可測定項目如D-二聚體、vWF因子、FDP等1.樣本采集穿刺要一針見血，避免淤血，氣泡，溶血和組織液污染；為避免血液當中有組織液的滲入，采血時以第二或第三管樣品做凝血測試管為佳；如果從導管取樣，則需用生理鹽水沖洗管道，前面5ml血不能使用；采血后立即與抗凝劑充分混合，盡快送往實驗室；采血量必須準確，如果少于計劃量的90%，則不能使用；不能在靜脈穿刺部位或附近部位采樣；2.樣本處理血漿分離：采樣后60分鐘內(nèi)進行；分離血漿應(yīng)在3000r/min離心10分鐘，務(wù)使血小板去除；盛血漿容器應(yīng)加塞，防止PH改變；血漿存放時間不能太久：室溫存放在2個小時以內(nèi)，2-8攝氏度，不能大于4個3.試劑TT:每瓶用5ml專用緩沖液溶解,須放置室溫10分鐘后才使用；機上有效期（15℃）：10小時PT：每瓶用4ml蒸餾水溶解,須放置室溫或37℃30分鐘后才使用；機上放置時間長，有沉淀，可稍加混勻。溶解時要輕轉(zhuǎn)動容器，避免劇烈振蕩4.影響測定結(jié)果的因素抗凝劑：草酸鈉、EDTA、肝素不適于作抗凝劑；嚴重黃疸，脂血，重度溶血會影響測定結(jié)果，如是因抽血不當或采血時機不當引起的，應(yīng)盡可能重抽血。使用纖溶藥物，如雙香豆素，鏈激酶，尿酶等可使凝固時間延長；超過治療劑量的肝素使凝固時間延長；FDP增加使凝固時間延長；某些藥物，如口服避孕藥，雌激素，天門冬酰胺酶，鈉絡(luò)酮等影響測試結(jié)果；樣本采集和處