分子生物學(xué)實驗常用貯液與溶液配置

分子生物學(xué)實驗常用貯液與溶液配置1mol/L亞精胺（Spermidine）:溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammoniumacetate）：將77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔徑的濾膜過濾除菌。10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（組分V或分子生物學(xué)試劑級，無DNA酶）于9.5ml水中（為減少變性，須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水，分成小份貯存于-20℃?；蜣D(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇至微量離心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。8mol/L乙酸鉀（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100ml。1mol/L氯化鉀（KCl）：溶解7.46g氯化鉀于足量的水中，加水定容到100ml。3mol/L乙酸鈉（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。0.5mol/LEDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。LS溶于約lH（2，100ml。1mol/LHCl：加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的水中。25mg/mlIPGT：溶解250mg的IPGT（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份貯存于-20℃。1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。100mmol/L174mg苯甲基磺酰氟于足量的異丙醇中，10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于-20℃。20mg/mlK（proteinase200mgL9.5mlK10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。10mg/mlRnase（DNase）（DNase－freeRNase）10mg1ml10mmol/L（pH5.0）。溶解后于水浴中煮DNA1mol/LTris－HClpH20℃貯存。（配制過程中要戴手套）5mol/L氯化鈉（NaCl）：溶解29.2g氯化鈉于足量的水中，定容至100ml。10N氫氧化鈉（NaOH）：溶解400g氫氧化鈉顆粒于約0.9L水的燒杯中（磁力攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。10％SDS（十二烷基硫酸鈉）：稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L的水的燒杯中，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使終體積為100ml。100％三氯乙酸500gTCA100ml2.5％X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用鋁箔包裹裝液管，貯存于-20℃。100×Denhardt試劑（Denhardt'sregent）成分及終濃度2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）

配制100ml溶液各成分的用量2g2%BSA（組分V）水

2g2g加水至總體積為100ml依照上表稱取各組分，溶于水中定容。過濾除菌及雜質(zhì)，分裝成小份于-20℃貯存。10×標準DNA連接酶緩沖液（standardDNAligasebuffer）（粘端、平端連接）成分及終濃度0.5mol/LTris-HCl100mmol/L100mmol/LDTT2mmol/LATP5mmol/L鹽酸亞精胺（可選）0.5mg/mlBS（組分（可選水

配制10ml溶液各成分的用量5ml1mol/L貯液1ml1mol/L貯液1ml1mol/L貯液200ul100mmol/L50ul1mmol/L貯液0.5ml10mg/mL貯液2.25ml將配制好的緩沖液分裝成小份，貯存于-20℃。100mmol/LdNTP溶液（dNTPsolutions）可以購買到100mmol/L純dNTPs貯液，-80℃可貯存至少6個月。10mmol/LdNTP混合液成分及終濃度成分及終濃度配制20ul溶液各成分的用量10mmol/LdATP10mmol/LdCTP2ul100mmol/LdATP貯液2ul100mmol/LdCTP貯液10mmol/LdGTP10mmol/LdTTP10mmol/LdGTP10mmol/LdTTP水2ul100mmol/LdGTP2ul100mmol/LdTTP12ul20％PEG8000/2.5MNaCl成分及終濃度質(zhì)量濃度為20醇2.5mol/L水

配制10ml溶液各成分的用量20g50ml5mol/L氯化鈉或14.6g化鈉補足100ml解。20×SSC成分及終濃度成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量300mmol/L檸檬酸三鈉（二水）3mol/L氯化鈉水88.2g175.3g1L溶解檸檬酸三鈉（二水）和氯化鈉于約0.9L水中，加幾滴10NNaOH溶液調(diào)pH為7.0，用水補足體積至1L。DEPC（焦碳酸二乙酯）處理水100ulDEPC于100ml水中，使DEPC0.137℃溫浴h5inCDEPCTris甲酰胺（deionizedformamide）DowexXG8Whatman1磷酸緩沖液（phosphatebuffer）1mol/L的磷酸二氫鈉（單堿）和1mol/L磷酸氫二鈉（雙堿）pH1mol/L的磷酸二氫鈉1mol/L磷酸二氫鈉1mol/L磷酸二氫鈉1mol/L（ml）pH值（ml）8771236.08501506.18151856.27752256.37352656.46853156.56253756.65654356.75104906.84505506.93906107.03306707.12807207.2TE（用于懸浮和貯存DNA）成分及終濃度10mmol/LTris－HCl1mmol/LEDTA水

配制100ml溶液各成分的用量1ml1mol/LTris-HCl（pH7.4-8.0，25℃）200ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）98.8mlTris緩沖液（Tris-HClbuffer）121gTris0.9L下加一定量的濃鹽酸（11.6N），1L。濃鹽酸的體積（濃鹽酸的體積（ml）pH8.6142128.53846566671.3769.08.88.68.48.28.07.87.67.47.2二.電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液電泳緩沖液二.電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液50×Tris-乙酸（TAE）緩沖液成分及終濃度2mol/LTris1mol/L乙酸100mmol/L水

配制1L溶液各成分的用量242g57.1ml的冰乙酸（17.4mol/L）200ml?0.5mol/LEDTA（pH200ml?0.5mol/LEDTA（pH8.0）補足1L5×Tris-硼酸（TBE）緩沖液成分及終濃度 配制1L溶液各成分的用量445mmol/LTris堿445mmol/L硼酸鹽10mmol/LEDTA水

54g27.5g硼酸20ml?0.5mol/LEDTA（pH8.0）補足1L染料1％溴酚藍（bromophenolblue）加1g水溶性鈉型溴酚藍于100ml水中，攪拌或渦旋混合直到完全溶解。1％二甲苯青FF（xylenecyanoleFF）溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。10mg/ml?溴化乙錠（ethidiumbromide）小心稱取1g溴化乙錠，轉(zhuǎn)移到廣口瓶中，加100ml水，用磁力攪拌器攪拌直到完全溶解。用鋁箔包裹裝液管，于4℃貯存。凝膠上樣液（gelloadingsolutions）6×堿性凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度0.3N氫氧化鈉6mmol/LEDTA18％聚蔗糖（400型0.15％溴甲酚綠0.25％二甲苯青FF水

配制10ml溶液各成分用量300ul10N氫氧化鈉120ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.8g15mg25mg補足到10ml6×聚蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度0.15％二甲苯青FF5mmol/LEDTA15％聚蔗糖（400型）水

配制10ml溶液各成分用量1.5ml1％溴酚藍1.5ml1％二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.5g補足到10ml6×溴酚藍/二甲苯青/聚蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度0.25％二甲苯青FF15％聚蔗糖（400型）水

配制10ml溶液各成分用量2.5ml1％溴酚藍2.5ml1％二甲苯青FF1.5g補足到10ml6×甘油凝膠上樣液（4℃貯存）成分及終濃度成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量0.15％溴酚藍1.5ml1％溴酚藍0.15％二甲苯青FF5mmol/LEDTA50％甘油水

1.5ml1％二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）3ml3.9ml6×蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度0.15％二甲苯青FF5mmol/LEDTA40％聚蔗糖水

配制10ml溶液各成分用量1.5ml1％溴酚藍1.5ml1％二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）4g補足到10ml10×十二烷基硫酸鈉/甘油凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度0.2％溴酚藍0.2％二甲苯青FF200mmol/L0.1％SDS三.常用培養(yǎng)基水三.常用培養(yǎng)基

配制10ml溶液各成分用量20mg20mg4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)100ul10％SDS5ml補足到10mlLB培?基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨蛋白胨10g酵母提取物5g氯化鈉10g1NpH7.01L。注：瓊脂平板12g/L7g/L。SOB培?基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨蛋白胨20g酵母提取物5g氯化鈉0.5g1mol/L氯化鉀2.5ml用水補足體積到1L。分成100ml的小份，高壓滅菌。培?基冷卻到室溫后，再在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂。SOC培?基SOB100ml1ml1mol/L2ml1mol/L（18g100ml0.22um）。TB培?基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨蛋白胨12g酵母提取物24g甘油甘油4ml各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60℃，再加100ml滅菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4100ml0.22um。2×YT培?基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨蛋白胨16g酵母提取物10g氯化鈉4ml1NpH7.01L。注：瓊脂平板12g/L7g/L。YPD培?基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水補足體積為1L后，高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前，對色氨酸營?缺陷型每升培?基添加1.6g色氨酸，因為YPD培?基是色氨酸限制型培?基。為了配制平板，需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。四.常用抗生素氨芐青霉素（ampicillin）（100mg/ml）四.常用抗生素溶解1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。羧芐青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧芐青霉素二鈉鹽于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）1g10ml20℃貯存。37.5ug/ml100ug/ml卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml