糖化簡介0623課件

糖化血紅蛋白KH-101糖化血紅蛋白分析儀簡介糖化血紅蛋白KH-101糖化血紅蛋白分析儀簡介目錄1.糖尿病基礎(chǔ)知識及現(xiàn)狀2.血糖診斷指標3.糖化血紅蛋白指標4.糖化血紅蛋白標準化現(xiàn)狀5.糖化血紅蛋白測量方法及原理6.主要糖化血紅蛋白儀器簡介7.凱特KH—101糖化血紅蛋白分析儀簡介目錄1.糖尿病基礎(chǔ)知識及現(xiàn)狀1.1什么是糖尿病糖尿?。河捎谝葝u素分泌不足或胰島素作用低下而引起的糖代謝絮亂性疾病，其特征是高血糖癥，典型病癥可出現(xiàn)多尿、多飲、多食、消瘦等表現(xiàn)，即三多一少癥狀。在我國糖尿病和糖尿病前期患病率目前分別高達9.7%和15.5%，以此推算中國有9240萬成年人患有糖尿病，有1.482億人處于糖尿病前期，現(xiàn)代生活方式是糖尿病高發(fā)的重要原因，并成為一種危險的趨勢。1.糖尿病基礎(chǔ)知識及現(xiàn)狀1.1什么是糖尿病1.2糖尿病的分型Ⅰ型糖尿病：約占糖尿病病人總數(shù)10%，多數(shù)發(fā)生于兒童和青少年，主要是由多種因素引起的胰腺β細胞功能減退，導致胰島素分泌的絕對不足，即Ⅰ型糖尿病就是胰島素分泌得少了。Ⅱ型糖尿?。杭s占糖尿病病人總數(shù)的90%，多數(shù)發(fā)生于35歲以后的中老年人，主要是機體對胰島素的作用產(chǎn)生抵抗，導致胰島素分泌的相對不足，即Ⅱ型糖尿病就是胰島素的效能下降了。1.2糖尿病的分型1.3糖尿病的危害急性并發(fā)癥：除常見的感染外，還有糖尿病酮癥酸中毒、高滲性非酮癥糖尿病性昏迷、乳酸酸中毒糖尿病性昏迷等。慢性并發(fā)癥：主要是微血管病變，如腎臟病變、眼底病變、神經(jīng)病變，另外大血管病變?nèi)鐒用}硬化及心、腦、腎等病變和高血壓等。糖尿病中晚期的治療過程痛苦，治療費用昂貴，嚴重降低生活質(zhì)量，威脅生命，并且嚴重的并發(fā)癥將導致死亡。1.3糖尿病的危害1.4早期診斷是關(guān)鍵，治療糖尿病的五架馬車知識教育控制飲食適度運動藥物治療密切監(jiān)測返回目錄1.4早期診斷是關(guān)鍵，治療糖尿病的五架馬車2.血糖診斷指標2.1血糖參數(shù)空腹血糖：簡稱FPG，它是指無碳水化合物攝入至少8小時以上的血糖。餐后2h血糖：簡稱2hPG。任意時間血糖（隨機血糖）：簡稱RPG。糖耐量試驗：簡稱OGTT，它是指75克葡萄糖溶于250-300毫升水空腹5分鐘內(nèi)飲完。OGTT2hPG是定量標準化的餐后血糖?？崭寡鞘軗p：簡稱IFG。糖耐量異常：簡稱IGT。2.血糖診斷指標2.2血糖診斷標準

空腹血糖FPG(mmol/L)OGTT2hPG(mmol/L)正常糖耐量3.9–6.1

＜7.8糖耐量減退6.1–7.0

7.8–11.1糖尿病≥7.0

≥11.1注：任意時間血糖RPG（隨機血糖）≥11.1mmol/L，可以確診為糖尿病。2.2血糖診斷標準2.3血糖診斷的缺點FPG和OGTT診斷符合率不高血糖變異率高重現(xiàn)性差測定前誤差-葡萄糖酵解測定誤差-部分方法偏倚大OGTT實施困難返回目錄2.3血糖診斷的缺點3.糖化血紅蛋白指標3.1什么是糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白是血液中紅細胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物。血糖和血紅蛋白的結(jié)合生成糖化血紅蛋白是不可逆反應(yīng)，并與血糖濃度成正比，且保持120天左右，所以可以觀測到120天內(nèi)的平均血糖水平。糖化血紅蛋白的英文代號是HbA1c。糖化血紅蛋白測試通?？梢苑从郴颊?-12周的血糖控制情況。血糖是從食物中的碳水化合物分解而來的血液中的單糖,通常僅指葡萄糖。血糖測試結(jié)果反映的是即刻的血糖水平。糖化血紅蛋白是糖尿病診斷新標準和治療監(jiān)測的“金標準”。

3.糖化血紅蛋白指標3.1什么是糖化血紅蛋白隨著人們對糖尿病知識的逐步了解，多數(shù)人已意識到空腹和餐后2小時血糖監(jiān)測的重要性，并常常把二者的測定值作為控制血糖的標準。其實不然，空腹和餐后2小時血糖是診斷糖尿病的標準，而衡量糖尿病控制水平的標準是糖化血紅蛋白。糖化血紅蛋白的測定結(jié)果以百分率表示，指的是和葡萄糖結(jié)合的血紅蛋白占全部血紅蛋白的比例?？崭寡呛筒秃笱鞘欠从衬骋痪唧w時間的血糖水平，容易受到進食和糖代謝等相關(guān)因素的影響。糖化血紅蛋白可以穩(wěn)定可靠地反映出檢測前120天內(nèi)的平均血糖水平，且受抽血時間，是否空腹，是否使用胰島素等因素干擾不大。因此，國際糖尿病聯(lián)盟推出了新版的亞太糖尿病防治指南，明確規(guī)定糖化血紅蛋白是國際公認的糖尿病監(jiān)控"金標準"。如果空腹血糖或餐后血糖控制不好，糖化血紅蛋白就不可能達標。隨著人們對糖尿病知識的逐步了解，多數(shù)人已意識到空腹和餐后2小3.2血紅蛋白組成人體血液中正常血紅蛋白（Hb）有三種血紅蛋白亞組分組成：血紅蛋白A（HbA）、血紅蛋白F（HbF）和血紅蛋白A2（HbA2）。成人血紅蛋白中主要含有血紅蛋白A（HbA），約占血紅蛋白的95%～97%。血紅蛋白A（HbA）又由兩種亞組分組成：糖化血紅蛋白A1（HbA1）（5%～7%）和非糖化血紅蛋白A0（HbA0）（90%）。糖化血紅蛋白（HbA1）是血紅蛋白（Hb）與糖類（如葡萄糖、6-磷酸葡萄糖或1.6-二磷酸果糖）經(jīng)非酶促結(jié)合而成。它的合成過程是緩慢且不可逆的，它積累并持續(xù)于紅細胞120天的生命期中，其合成速率與紅細胞所處環(huán)境中糖的濃度成正比。糖濃度越高，糖化血紅蛋白的濃度則可能越高。糖化血紅蛋白（HbA1）又有三種亞組分：HbA1a、HbA1b和HbA1c。其中，HbA1c約占HbA1的75%～80%，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。因此，HbA1c在總血紅蛋白（Hb）中所占的比例，能夠反映出檢測前120天內(nèi)的平均血糖水平。3.2血紅蛋白組成糖化簡介0623課件3.3糖化血紅蛋白的臨床意義糖尿病患者血糖總體控制情況的指標有助于糖尿病慢性并發(fā)癥的認識指導對血糖的調(diào)整對判斷糖尿病的不同階段有一定的意義區(qū)別應(yīng)激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的檢測意義3.3糖化血紅蛋白的臨床意義3.4糖尿病診斷標準1）血紅蛋白A1c水平≥6.5%。2）FPG≥126mg/dl(7.0mmol/l)。空腹定義為至少8h內(nèi)無熱量攝入。3）口服糖耐量試驗時2h血糖≥200mg/dl(11.1mmol/l)。4）在伴有典型的高血糖或高血糖危象癥狀的患者，隨機血糖≥200mg/dl(11.1mmol/l)。在無明確高血糖時，應(yīng)通過重復檢測來證實標準1-3。3.4糖尿病診斷標準3.5糖化血紅蛋白診斷指標正常糖化血紅蛋白：4.0%≤HbA1c≤6.0%糖化血紅蛋白的高危區(qū)：6.0%＜HbA1c≤6.5%糖尿病的診斷切點：HbA1c＞6.5%

糖化血紅蛋白與血糖的控制情況4%～6%：血糖控制正常。6%～7%：血糖控制比較理想。7%～8%：血糖控制一般。8%～9%：控制不理想，需加強血糖控制，多注意飲食結(jié)構(gòu)及運動，并在醫(yī)生指導下調(diào)整治療方案。＞9%：血糖控制很差，是慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險因素，可能引發(fā)糖尿病性腎病、動脈硬化、白內(nèi)障等并發(fā)癥，并有可能出現(xiàn)酮癥酸中毒等急性合并癥。3.5糖化血紅蛋白診斷指標3.6糖化血紅蛋白診斷的優(yōu)點診斷不要求病人空腹抽血，檢測方便。糖化血紅蛋白生成后穩(wěn)定不易分解，能反映機體2-3個月的平均血糖水平，不需要反復頻繁檢查。檢測結(jié)果準確，診斷符合率高，可標準化。結(jié)果抗干擾能力強，不受飲食運動等因素的影響。對治療效果的監(jiān)測調(diào)整控制有重要作用。可以提前3-5年預測糖尿病的發(fā)生。3.6糖化血紅蛋白診斷的優(yōu)點3.7糖化血紅蛋白的局限性部分血紅蛋白亞型（如HbF）會干擾HbA1c測定。部分疾?。ㄈ缒I臟疾病、溶血性貧血等）改變紅細胞壽命使HbA1c不準確。對進展迅速的Ⅰ型糖尿病,HbA1c趕不上血糖變化的速度。返回目錄3.7糖化血紅蛋白的局限性4.糖化血紅蛋白標準化現(xiàn)狀4.1糖尿病國際研究機構(gòu)IFCC國際臨床化學和實驗室聯(lián)合會IDF國際糖尿病聯(lián)盟ADA美國糖尿病協(xié)會EASD歐洲糖尿病協(xié)會NGSP美國糖尿病標準化項目組織4.糖化血紅蛋白標準化現(xiàn)狀4.1糖尿病國際研究機構(gòu)4.2糖尿病現(xiàn)有國際標準IFCC：國際臨床檢驗標準，適用全球。NGSP：美國糖化血紅蛋白標準化項目，適用全球。DCCT：美國糖尿病控制與并發(fā)癥試驗，試驗開始于美國，

針對Ⅰ型糖尿病患者所做的試驗。UKPDS：英國前瞻性糖尿病研究，研究開始于英國，針對Ⅱ型糖尿病患者所做的試驗JDS：日本糖尿病協(xié)會，適用于日本。SCC：瑞典臨床化學會，適用于北歐地區(qū)。4.2糖尿病現(xiàn)有國際標準4.32010年糖化血紅蛋白全球標準化共識HbA1c必須全球標準化以IFCC為唯一參考系統(tǒng)根據(jù)IFCC-NGSP主導公式計算出NGSP衍生單位（%）根據(jù)HbA1c計算出平均血糖值A(chǔ)DAG4.32010年糖化血紅蛋白全球標準化共識4.4關(guān)于IFCC/NGSP/ADAG的說明IFCC濃度：特異性高，誤差小，但操作復雜耗時長，費用高，僅能用于標準化檢測，臨床推廣尚需時日。NGSP：面積百分比(%)，此方法雖然存在變異糖化血紅蛋白等因素干擾的缺陷，仍是目前最廣泛使用的HbA1c參考系統(tǒng)。ADAG(A1cderivedaverageglucose平均血糖)：糖尿病的問題是血糖問題而不是血紅蛋白問題，糖化血紅蛋白使患者不易理解，平均血糖eAG使醫(yī)生和患者更易溝通并使患者更好了解自己的病情。研究結(jié)果表明：IFCC濃度與NGSP﹑平均血糖之間有很好的相關(guān)性，可表示為：NGSP(%)=0.09148×IFCC+2.152eAG(mmol/L)=1.59×NGSP-2.59返回目錄4.4關(guān)于IFCC/NGSP/ADAG的說明5.糖化血紅蛋白測量方法及原理5.1陽離子液相層析法測試原理：基于不同組分帶正電荷的不同進行分離，通過離子交換柱達到分析HbA1c的效果。分型：高壓、低壓、手工高壓：用高壓系統(tǒng)（幾十公斤的壓力）實現(xiàn)分離低壓：用低壓系統(tǒng)（幾公斤的壓力）實現(xiàn)分離手工：在常壓條件下進行手工微柱操作實現(xiàn)分離HPLC為高壓液相層析法，糖化血紅蛋白分析的金標準，LPLC為低壓液相層析法，經(jīng)過優(yōu)化其結(jié)果準確性是所有方法中最接近HPLC的檢測方法。5.糖化血紅蛋白測量方法及原理5.1陽離子液相層析法5.2硼酸親和層析法測試原理：利用硼酸鹽能夠與血紅蛋白分子發(fā)生可逆結(jié)合反應(yīng)的性質(zhì)。分型：干式（如小旋風），濕式（如普銳姆斯）干式：采用卡片為分析裝置進行測試濕式：采用硼酸親和層析柱進行測試比較：濕式的準確性和重復性都好于干式。硼酸親和層析法只能測量總糖化血紅蛋白，但目前沒有證據(jù)證明總糖化血紅蛋白和糖尿病并發(fā)癥的風險有直接關(guān)系。5.2硼酸親和層析法5.3免疫比濁法測試原理：以糖化血紅蛋白作為抗原，利用抗原和抗體反應(yīng)原理進行測定。分型：散射、透射散射：從不同的角度測量抗原抗體復合物微粒的散射光強度和濁度的變化。透射：主要檢測抗原抗體復合物所形成的濁度。特點：散射比濁法較透射比濁法準確性好。但免疫比濁法受血紅蛋白變異體影響較大，其準確性及重復性受到嚴重挑戰(zhàn)。5.3免疫比濁法5.4其他方法電泳法：利用糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白在電場中所帶電荷不同，從而等電點及泳動速度不同進行分離檢測。目前電泳法的商品化儀器很少，無法普及使用。酶法：將全血溶成溶血液，利用酶將血紅蛋白酶解消化成的最終產(chǎn)物利用其顏色變化程度可以得知樣本中糖化血紅蛋白的含量。目前酶法尚無足夠的臨床數(shù)據(jù)驗證，其前景并不明朗。此外，還有化學發(fā)光法、等電點聚集法等。返回目錄

5.4其他方法6.主要糖化血紅蛋白儀器簡介6.1伯樂D-10

測試方法：高壓陽離子液相層析法儀器特點：全自動的HPLC儀器，簡單的操作程序，原始樣品管上機，一次可處理10個樣本，每個樣本在3分鐘之內(nèi)即可完成測定。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.主要糖化血紅蛋白儀器簡介6.2希森美康G7,G8測試方法：高壓陽離子液相層析法儀器特點：操作簡便，標本無需前處理，原始樣品試管可直接上機，全血或稀釋樣本都可直接檢測，檢測結(jié)果精準，速度快（每個測試僅需1.2分鐘）。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.2希森美康G7,G86.3愛科來HA-8160測試方法：高壓陽離子液相層析法儀器特點：全自動快速處理，每個樣本僅需要90秒，批量處理臨床標本（一次性上樣100份），自動去除不穩(wěn)定性血紅蛋白，檢測準確度高、重復性好、易操作。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.3愛科來HA-81606.4普銳姆斯PrimusHPLC測試方法：高壓液相親和層析法（濕式）儀器特點：自動加樣器可配置多種型號的采血管，變異系數(shù)小于2%，檢測快速，每個測試需2分鐘，抗干擾性強，唯一采用高壓液相親和層析法測量HbA1c的全自動儀器。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.4普銳姆斯PrimusHPLC6.5英國DrewDS5測試方法：低壓離子交換液相層析法儀器特點：使用DS5分配器可排除不穩(wěn)定血紅蛋白成分，操作系統(tǒng)簡便，采用圖形化符號提示操作步驟。儀器缺點：柱效低，無恒溫控制，衛(wèi)生部質(zhì)評不佳。6.5英國DrewDS56.6挪威小旋風NycoCardReaderII測試方法：硼酸親和層析法（干式）儀器特點：多參數(shù)檢測儀器、易于使用、體積小，儀器成本較低。儀器缺點：準確性和重復性較差，操作繁瑣，試劑成本高。6.6挪威小旋風NycoCardReaderII6.7國賽特種蛋白Nephstar測試方法：散射免疫比濁法儀器特點：智能化設(shè)計，中英文界面，操作非常簡單，無需制作標準曲線，不用做空白對照，成本較低。儀器缺點：日間精密度和抗干擾能力較差。6.7國賽特種蛋白Nephstar6.8奧迪康A(chǔ)C6600測試方法：離子交換液相層析法儀器特點：獨創(chuàng)的HbA1C四梯度洗脫法，體積小，操作簡單。儀器缺點：儀器故障率較高。6.8奧迪康A(chǔ)C6600目前主要儀器分為三大類：高壓液相層析儀器，準確性好，購置價格高（終端價格30萬以上），使用成本高（終端價格30元以上），維護復雜，適用于高端實驗室。POCT即時檢測儀器，大多采用硼酸親和層析法和免疫比濁法，方法學及溯源性存在問題，而且大多不帶校準品和質(zhì)控品，準確性重復性低，結(jié)果不可靠，儀器購置價格低（終端價格1萬-數(shù)萬），使用成本高（終端價格30元上下），使用過程繁瑣，其檢測結(jié)果嚴格意義上不能用于臨床糖尿病診斷，僅可用于糖尿病篩查。低壓液相層析儀器，其方法學原理與高壓液相層析法完全一致，溯源性好，如采用高效層析柱和恒溫控制，配套校準品和質(zhì)控品，其準確性重復性接近高壓液相層析法，CV以小于3%，完全達到NGSP1級實驗室的要求，其購置價格低（終端價格幾萬元），使用成本低（終端價格30元以下），維護簡單，維護成本低（幾乎沒有易損件），完全適用于各級醫(yī)院實驗室，而且體積小使用簡單，可以適用于內(nèi)分泌門診即時檢測。目前主要儀器分為三大類：高壓液相(HPLC)與低壓液相(LPLC)的區(qū)別返回目錄高壓液相(HPLC)與低壓液相(LPLC)的區(qū)別返回目錄7.凱特KH—101糖化血紅蛋白分析儀簡介7.1儀器外觀

1-彩色觸摸顯示屏2-試劑包3-自動進樣機構(gòu)

4-打印機5-分離檢測機構(gòu)6-樣品恒溫處理裝置7.凱特KH—101糖化血紅蛋白分析儀簡介7.1儀器外觀7.2儀器結(jié)構(gòu)

由分析系統(tǒng)、操作系統(tǒng)、試劑系統(tǒng)組成。分析系統(tǒng)

KH-101分析儀分析系統(tǒng)由自動取樣機構(gòu)、樣品分離裝置（層析柱）和檢測單元組成。操作系統(tǒng)

Linux操作系統(tǒng)，全觸摸屏操作

顯示：7英寸彩色液晶顯示屏

打印功能：打印內(nèi)容可選，可打印完整的檢驗報告單、統(tǒng)計參數(shù)、質(zhì)量控制圖等

系統(tǒng)接口：RS-232標準接口，條形碼掃描設(shè)備輸入口，USB接口（軟件更新）試劑系統(tǒng)

試劑包：1個，每個試劑包內(nèi)含A標500ml、B標300ml和溶血劑300ml，并具有試劑余量記憶功能7.2儀器結(jié)構(gòu)7.3儀器工作原理儀器具有全自動采樣、溶血、溫育、進樣、分離、檢測、計算、打印和顯示輸出、數(shù)據(jù)儲存功能的一體化全自動分析系統(tǒng)。只需將血樣置于樣品盤的樣品杯內(nèi)，即可自動地完成全部分析過程。它是一套低壓液相色譜系統(tǒng)，采用離子交換法測定糖化血紅蛋白（HbA1c），與離子交換高效液相色譜法（HPLC）法的工作過程和原理一致，具有經(jīng)典準確的方法學原理。該色譜系統(tǒng)以能與陽離子進行高效可逆交換-洗脫的樹脂材料為固定相，以電解質(zhì)溶液為流動相，采用六通閥進樣和梯度洗脫技術(shù)提高分離效能，使具有陽離子特征的各類糖化血紅蛋白得到高效和重現(xiàn)的分離。7.3儀器工作原理糖化血紅蛋白并不是單一物質(zhì)。血紅蛋白有4個亞基，成人絕大多數(shù)為α2β2，這兩種亞基都可被糖基化。糖基化可發(fā)生在亞基N端的纈氨酸，也可發(fā)生在鏈內(nèi)的賴氨酸上。各種糖化血紅蛋白中，最重要的一種是HbA1c，即α2(β-纈-1-脫氧果糖)2。2010年美國糖尿病協(xié)會(ADA)的標準中，已經(jīng)將HbA1c≥6.5%作為診斷糖尿病的標準之一。各類糖化血紅蛋白具有不同程度的陽離子特性，在弱陽離子型色譜柱上具有不同程度的結(jié)合力，當電解質(zhì)溶液流過色譜柱時，各類糖化血紅蛋白將在不同的時間被洗脫下來，經(jīng)比色池進行光度檢測。KH-101型全自動糖化血紅蛋白分析儀可清晰地區(qū)分HbA1ab、HbA1c和HbA0，并準確地獲得HbA1c的水平。糖化血紅蛋白并不是單一物質(zhì)。血紅蛋白有4個亞基，成人絕大多數(shù)梯度洗脫原理：

血紅蛋白的糖化會導致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。在弱的陽離子交換劑中，伴有增加的離子濃度和（或）pH下降，在經(jīng)過陽離子交換層析柱時，可被經(jīng)偏酸的緩沖液平衡過的樹脂所吸附。由于糖化血紅蛋白各亞組分和非糖化血紅蛋白所帶正電荷各不相同，所以附著力不同。糖化血紅蛋白分子正電荷較少附著力較低，非糖化血紅蛋白分子正電荷較多附著力較高。用不同pH值的緩沖液就可以分次洗脫出3種含糖成分的血紅蛋白，即：HbA1a、HbA1b和HbA1c，最后將附著力最強的非糖化血紅蛋白也洗脫出來。梯度洗脫原理：7.4KH—101儀器操作安裝層析柱、泵管和試劑包，打開電源，儀器啟動，自檢。儀器界面由菜單欄、工作區(qū)、狀態(tài)/提示欄構(gòu)成。菜單欄

工作區(qū)

狀態(tài)/提示欄

7.4KH—101儀器操作菜單欄

由狀態(tài)、樣品輸入、結(jié)果、服務(wù)構(gòu)成。工作區(qū)

顯示菜單欄中各菜單項內(nèi)的功能鍵和相關(guān)信息。狀態(tài)/提示欄

由顯示日期和時間、系統(tǒng)的工作狀態(tài)、系統(tǒng)的警告、打印機狀態(tài)等組成。菜單欄樣品輸入

本儀器具有機內(nèi)自動溶血功能，用戶只需將15ul~20ul全血樣品加入到樣品杯（因Hba1c是一個相對值，加樣量無太嚴格要求），即可進行測試。如果是預先溶血標本，用戶可選擇菜單上的預溶血選項。注意同一盤樣品不能同時出現(xiàn)兩種不同的溶血模式。

在樣品輸入菜單，用戶可以編輯輸入樣品杯的位置，ID號，測試開始后儀器可以通過不同的顏色提示樣品是否測試完成。綠色表示待測樣品，藍色表示測試完成。樣品輸入樣品盤共20個樣品位，2個急診位（E1和E2）、2個質(zhì)控位（QC1和QC2）。用戶在輸入完樣品信息，檢查無誤后，點擊運行按鈕，儀器則將自動完成測試。在測試過程中，如有急診樣品，可放在E1、E2位置，儀器將優(yōu)先進行測試。如有特殊情況需要終止測試，可點擊停止按鈕，儀器將在完成當前樣品檢測后停止測量。點擊校準按鈕，儀器可以輸入2個待測校準品，測試完成后結(jié)果將儲存并在校準菜單中顯示。用戶需認真核對實際樣品的位置與輸入相符，否則儀器的樣品杯傳感器將終止測量，防止溶血劑溢出。樣品盤共20個樣品位，2個急診位（E1和E2）、2個質(zhì)控位（狀態(tài)欄

能夠觀察實時的測試曲線和了解測試進度，如發(fā)現(xiàn)曲線明顯異常，可點擊放棄測試鍵，儀器將在20秒內(nèi)退出本次測量，同時樣品盤上的待測樣品也將暫停測量，方便用戶處置。狀態(tài)欄結(jié)果欄

可顯示當天所有測試的結(jié)果。如需想得到更詳細的情況，可通過輸入NO.號或ID號進行查詢，查詢成功后將顯示含有圖形在內(nèi)的詳細測試結(jié)果信息。其中zero表示基線吸光度，max1表示HbA1c峰的最大吸光度，max2表示血紅蛋白主峰的最大吸光度。如需查詢本月的歷史記錄，直接輸入需查詢的日期即可。查詢后的結(jié)果可通過點擊打印鍵由打印機打印。結(jié)果欄結(jié)果打印格式

Date：樣品測量時間

Number：樣品序號

Well：樣品位置號

ID：樣品編號，可以由1-18位數(shù)字或字母組成

NGSP：美國糖化血紅蛋白標準化計劃

IFCC：國際臨床化學和實驗室樣品管理委員會

Area：HbA1a+b，HbA1c，Hb的實際面積

%:HbA1a+b，HbA1c所占比例

圖形為可選擇打印項目，建議用戶開啟，以方便發(fā)現(xiàn)異常的曲線。正確的色譜圖要求：

1）1分鐘左右開始出現(xiàn)HbA1a+b曲線；

2）曲線光滑、無毛刺；

3）HbAo曲線的結(jié)束峰下降結(jié)束點與基線基本一致。結(jié)果打印格式服務(wù)欄

服務(wù)欄：

時間、試劑、質(zhì)控、保養(yǎng)、走紙、工程菜單、數(shù)據(jù)發(fā)送以及設(shè)置。服務(wù)欄時間

更改系統(tǒng)時間，如有更改需要重新啟動儀器。試劑

更換試劑時，點擊“試劑鍵”，按儀器界面的提示逐一完成更換工作，每完成一項工作請點擊相應(yīng)的按鈕，最后，“試劑灌注”按鈕被點亮，點擊后自動進行試劑灌注。時間質(zhì)控

質(zhì)控菜單用于質(zhì)控結(jié)果的統(tǒng)計、保存和顯示，可以自動生成標準的質(zhì)控圖。

注意，進行QC測試后，無論是QC1還是QC2儀器只保存當天最后一個測試結(jié)果。質(zhì)控維護與校準去蛋白：在樣品杯中加入1.5ml的去蛋白液，放到樣品盤的清洗孔位，點擊去蛋白按鈕即可。每更換試劑包后立刻進行一次去蛋白。液路灌注當液路系統(tǒng)中有氣泡時，可以通過液路灌注排除。校準如果在樣品輸入菜單中申請校準品，并測試并完成后，儀器將自動顯示校準品的測試結(jié)果；或者將校準品當作普通樣品測試多次，取得平均值后手工輸入到儀器中（這種方法需在測試前將因子的斜率和截距分別設(shè)為1和0）。點擊校準按鈕，儀器可以自動計算出斜率和截距。如果需要，也可以手工點擊修改因子。注意：建議用戶在更換試劑包和層析柱后都要進行校準，以確保測量的準確性。維護與校準走紙

點擊按鍵后，打印機將走紙，方便用戶安裝打印紙。工程菜單

工程師專用的維修菜單，用戶如需要可在公司的指導下進行操作。此操作有一定的危險性，需防止機械損壞等意外情況的發(fā)生。進入密碼為“123”。走紙數(shù)據(jù)發(fā)送點擊后，可以將儀器當天的測量結(jié)果，通過RS232接口發(fā)送到計算機。設(shè)置通過此菜單，設(shè)置打印機的狀態(tài)、轉(zhuǎn)換語言文字、修改參考值范圍。其中語言和參考值范圍需點擊解鎖按鈕，然后輸入密碼“123”后才能修改。設(shè)置完成后需點擊保存/退出。修改語言后，需重新開機才能生效。數(shù)據(jù)發(fā)送7.5

儀器維護與保養(yǎng)每日維護

開機后，確認儀器自檢通過；

當操作樣本和廢棄材料時，應(yīng)該戴手套；

檢查打印機并確認打印紙足夠，不足時請安裝打印紙；

檢查試劑包余量，廢液是否溢出；

試劑包中提供的試劑含有對人體有害物質(zhì)，避免皮膚接觸或攝入，如皮膚或眼睛不慎接觸，用水徹底清洗，并尋求醫(yī)藥護理。7.5儀器維護與保養(yǎng)

定期維護

定期清潔儀器，清潔儀器時操作人員必須戴手套，使用軟布蘸取適量蒸餾水或75%的酒精，對儀器進行清潔。擦拭時應(yīng)避免液體流入儀器內(nèi)，造成儀器損壞。

在每次更換試劑時，建議用戶肉眼檢查分析儀各管路和部件是否有漏液。

進樣針在用過一段時間后，外表可能有一層血樣凝固物，應(yīng)使進樣針抬至最高位置后，應(yīng)及時用軟布或紙擦拭進樣針。

檢查蠕動泵運行是否異常。每使用3個試劑包后，應(yīng)及時更換增壓泵泵管。

管道檢查:在每次更換試劑時，建議肉眼檢查各管路和部件是否有漏液；測量結(jié)束后，檢查分析儀各管路和部件是否有堵塞，如有應(yīng)及時清理疏通。儀器表面的清潔：儀器表面清洗可用軟布蘸取75%的適量酒精或無腐蝕性洗滌液擦拭，切勿使用硬物擦刮，以免損傷儀器表面。清洗結(jié)束后，應(yīng)待儀器表面干燥后方可重新使用儀器。注意：儀器表面清洗潔，須在儀器斷電狀態(tài)下進行操作。糖化簡介0623課件儀器閑置時的處理:取出試劑包，塞上包的接嘴塞保存，專用接頭塞需妥善保管；取下層析柱，擦凈并保存在包裝盒里（確保層析柱內(nèi)樹脂不干燥）；松開泵管；關(guān)閉電源。注意：

儀器閑置一段時間后再次使用時，須進行儀器自檢和系統(tǒng)清洗，然后連續(xù)測定任意同一樣本直到穩(wěn)定方可進行正常測量。儀器閑置時的處理:配套耗材使用說明

本產(chǎn)品必須使用深圳市凱特生物醫(yī)療電子科技有限公司生產(chǎn)和提供的配套試劑，切勿使用非本公司的試劑。

試劑在使用過程中應(yīng)保持密封，試劑的揮發(fā)將會造成分析結(jié)果不準確。

儀器配套試劑含有A洗脫液、B洗脫液、C溶血劑、層析柱。A洗脫液、B洗脫液、C溶血劑，在規(guī)定貯存條件下，未啟封貯存效期1年，開封后，保質(zhì)期90天，用戶不得使用過期試劑；層析柱能確保至少150個測試，不建議用戶過量使用層析柱。配套耗材使用說明7.6

儀器常見故障及排除顯示故障代號的分析及含義Error1#試劑包感應(yīng)模塊報錯Error2#配液閥報錯Error3#樣品針報錯Error4#樣品盤原點報錯Error5#樣品盤杯號報錯Error7#沒有試劑包Error8#非法試劑包ErrorA#溶血劑未到位ErrorB#液路傳感器報錯沒有發(fā)現(xiàn)樣品杯沒有在要測試的樣品盤位置發(fā)現(xiàn)樣品杯光源燈強度太低空白吸光度〉0.4沒有發(fā)現(xiàn)試劑包儀器未感應(yīng)到試劑包7.6儀器常見故障及排除Error1#試劑包感應(yīng)模塊報錯打印機輸出的錯誤提示及含意1.Warning:HbA1cPeakLow!HbA1c峰太小。常見于樣品不足、嚴重貧血、儀器工作異常等情況。2.Warning:ZeroUnusual！基線不穩(wěn)。常見于液路系統(tǒng)中有氣泡。3.Warning:HbA1cPeakOvertimeHbA1c峰出峰時間異常。常見于層析柱失效，液路系統(tǒng)異常。4.Warning:HbPeakOvertimeHb主峰出峰時間異常。常見于液路系統(tǒng)異常。打印機輸出的錯誤提示及含意1.Warning:HbA1cP故障排除：當顯示屏出現(xiàn)“Error1#”提示時，請與維修工程師聯(lián)系當顯示屏出現(xiàn)“Error2#”提示時，可進入工程菜單查配液閥的工作狀況，在確保不漏夜的情況下調(diào)整固定螺絲的松緊度，必要時請與維修工程師聯(lián)系。當顯示屏出現(xiàn)“Error3#”提示時，檢查升降機構(gòu)有無灰塵或異物，必要時請與維修工程師聯(lián)系。當顯示屏出現(xiàn)“Error4#”提示時，請與維修工程師聯(lián)系。當顯示屏出現(xiàn)“Error5#”提示時，請與維修工程師聯(lián)系。當顯示屏出現(xiàn)“沒有發(fā)現(xiàn)試劑包”提示時，請檢查試劑包是否安裝到位，試劑出液口的堵嘴有無去除，試劑包是否余量不足。必要時請與維修工程師聯(lián)系。故障排除：當顯示屏出現(xiàn)“Error7#”提示時，請更換新的試劑包。當顯示屏出現(xiàn)“Error8#”提示時，請檢查試劑包是否安裝到位，試劑出液口的堵嘴有無去除，試劑包是否余量不足。必要時請與維修工程師聯(lián)系。當顯示屏出現(xiàn)“沒有發(fā)現(xiàn)樣品杯”提示時，請檢查樣品是否正確的放在樣品盤上，樣品盤有無準確安裝到位，卡銷有無對準，是否使用非標準的樣品杯等。當顯示屏出現(xiàn)“ErrorA#”提示時，請檢查試劑包是否安裝到位，樣品泵是否需要更換，管路、閥是否有堵塞、漏夜、誤動作等異?，F(xiàn)象。當顯示屏出現(xiàn)“ErrorB#”提示時，請檢查液路傳感器及管路是否安裝正確。當打印機提示HbA1cPeakLow。提示HbA1c峰過低，應(yīng)檢查樣品是否不足或異常，儀器液路系統(tǒng)有無堵塞等情況。當顯示屏出現(xiàn)“Error7#”提示時，請更換新的試劑包。當打印機出現(xiàn)ZeroUnusual！提示、洗脫曲線異常波動、洗脫曲線變粗的情況時，用戶可以進入保養(yǎng)/校準菜單，點擊“液路灌注”按鈕，去除液路系統(tǒng)中的氣泡。此過程可以進行多次，直到狀態(tài)提示欄內(nèi)的吸光度值降低及平穩(wěn)，提示液路系統(tǒng)中的氣泡已經(jīng)被去除后為止。當打印機出現(xiàn)HbA1cPeakOvertime！或HbPeakOvertime！提示洗脫曲線的出現(xiàn)的時間延遲或根本就沒有出現(xiàn)。應(yīng)檢查是否沒有樣品、層析柱是否已失效、蠕動泵是否能正常泵出試劑、液路系統(tǒng)有無漏夜等情況。注意：通過以上方法仍不能排除故障，需與本公司售后服務(wù)或者本公司各辦事處聯(lián)系。注意：在本設(shè)備報廢時，請按當?shù)赜嘘P(guān)環(huán)保部門的要求進行處理。當打印機出現(xiàn)ZeroUnusual！提示、洗脫曲線異常波動7.7

國內(nèi)同類糖化血紅蛋白分析儀的比較項目名稱鎮(zhèn)江奧迪康A(chǔ)C6600南京勞垃

JL-760深圳凱特

KH-101顯示操作5英寸點陣式單色背光LCD液晶顯示器、單任務(wù)操作4.3英寸液晶、彩屏顯示單任務(wù)操作7英寸彩色LCD顯示器。內(nèi)容豐富界面直觀、圖形化顯示。多任務(wù)操作系統(tǒng)，測試時可同時操作多個頁面功能。試劑組成

4瓶洗脫液1瓶溶血液在儀器內(nèi)分別連接

外接廢液瓶3瓶洗脫液、1瓶溶血液，分別在儀器外連接外接廢液瓶一體化的試劑（含廢液袋）。試劑不易污染、更換方法簡單方便、減少了廢液對操作人員及工作環(huán)境的生物污染。系統(tǒng)自動提示試劑余量、無需檢查、更換更方便。

試劑瓶在儀器外占用工作臺面，無余量提示，經(jīng)常要查幾種試劑的缺少、經(jīng)常要人工檢查試劑的余量，廢液瓶容易造成生物污染。試劑耗用330人份/12320mL（約37.3mL/人份）200人份/9000mL（約45mL/人份）150人份/1100mL（約7.3mL/人份）7.7國內(nèi)同類糖化血紅蛋白分析儀的比較項目名稱鎮(zhèn)江奧迪康樣品杯檢測系統(tǒng)無無有樣品杯檢測系統(tǒng)能防止空白樣品位的誤檢，導致溶血劑錯加空白位，污染儀器。檢測速度5分鐘（機外）+5分鐘需手工操作5分鐘+5分鐘(自動)＜4分鐘（自動）試劑信息卡人工更新、外插式人工更新、外插式試劑包內(nèi)置卡片信息分離效率手工微柱法大顆粒離子交換樹脂。5分鐘加溫溶血，不能完全分離出穩(wěn)定的和不穩(wěn)定的糖化血紅蛋白，使結(jié)果偏高。手工微柱法大顆粒離子交換樹脂。5分鐘加溫溶血，不能完全分離出穩(wěn)定的和不穩(wěn)定的糖化血紅蛋白，使結(jié)果偏高。改性微型顆粒離子交換樹脂。4分鐘內(nèi)加溫溶血且完成整個測量過程，分離效率高，能夠有效分離穩(wěn)定的和不穩(wěn)定的糖化血紅蛋白，提高了結(jié)果的可靠性。HPLC的相關(guān)性差差好樣品杯無無有樣品杯檢測系統(tǒng)能防止空白樣品位的誤檢，導致溶血劑7.8

KH-101糖化分析儀的局限性

KH-101及同類產(chǎn)品，是屬于低壓液相的分析儀，由于它不能夠?qū)⒀t蛋白（Hb）中的血紅蛋白F（HbF）和血紅蛋白A2（HbA2）進行分離。

因此，它只能用來診斷非妊娠相關(guān)的糖尿病，其HbA1c測量結(jié)果可能會受到以下因素的干擾：

1、失血或溶血性貧血引起的紅細胞生存期的改變

2、地中海貧血HbF

3、HbS或HbC等變異血紅蛋白

4、黃疸和高脂血癥

5、乙?；t蛋白（阿司匹林）

6、氨基甲酰化血紅蛋白（腎衰竭）返回目錄7.8KH-101糖化分析儀的局限性返回目錄

謝謝

糖化血紅蛋白KH-101糖化血紅蛋白分析儀簡介糖化血紅蛋白KH-101糖化血紅蛋白分析儀簡介目錄1.糖尿病基礎(chǔ)知識及現(xiàn)狀2.血糖診斷指標3.糖化血紅蛋白指標4.糖化血紅蛋白標準化現(xiàn)狀5.糖化血紅蛋白測量方法及原理6.主要糖化血紅蛋白儀器簡介7.凱特KH—101糖化血紅蛋白分析儀簡介目錄1.糖尿病基礎(chǔ)知識及現(xiàn)狀1.1什么是糖尿病糖尿?。河捎谝葝u素分泌不足或胰島素作用低下而引起的糖代謝絮亂性疾病，其特征是高血糖癥，典型病癥可出現(xiàn)多尿、多飲、多食、消瘦等表現(xiàn)，即三多一少癥狀。在我國糖尿病和糖尿病前期患病率目前分別高達9.7%和15.5%，以此推算中國有9240萬成年人患有糖尿病，有1.482億人處于糖尿病前期，現(xiàn)代生活方式是糖尿病高發(fā)的重要原因，并成為一種危險的趨勢。1.糖尿病基礎(chǔ)知識及現(xiàn)狀1.1什么是糖尿病1.2糖尿病的分型Ⅰ型糖尿?。杭s占糖尿病病人總數(shù)10%，多數(shù)發(fā)生于兒童和青少年，主要是由多種因素引起的胰腺β細胞功能減退，導致胰島素分泌的絕對不足，即Ⅰ型糖尿病就是胰島素分泌得少了。Ⅱ型糖尿病：約占糖尿病病人總數(shù)的90%，多數(shù)發(fā)生于35歲以后的中老年人，主要是機體對胰島素的作用產(chǎn)生抵抗，導致胰島素分泌的相對不足，即Ⅱ型糖尿病就是胰島素的效能下降了。1.2糖尿病的分型1.3糖尿病的危害急性并發(fā)癥：除常見的感染外，還有糖尿病酮癥酸中毒、高滲性非酮癥糖尿病性昏迷、乳酸酸中毒糖尿病性昏迷等。慢性并發(fā)癥：主要是微血管病變，如腎臟病變、眼底病變、神經(jīng)病變，另外大血管病變?nèi)鐒用}硬化及心、腦、腎等病變和高血壓等。糖尿病中晚期的治療過程痛苦，治療費用昂貴，嚴重降低生活質(zhì)量，威脅生命，并且嚴重的并發(fā)癥將導致死亡。1.3糖尿病的危害1.4早期診斷是關(guān)鍵，治療糖尿病的五架馬車知識教育控制飲食適度運動藥物治療密切監(jiān)測返回目錄1.4早期診斷是關(guān)鍵，治療糖尿病的五架馬車2.血糖診斷指標2.1血糖參數(shù)空腹血糖：簡稱FPG，它是指無碳水化合物攝入至少8小時以上的血糖。餐后2h血糖：簡稱2hPG。任意時間血糖（隨機血糖）：簡稱RPG。糖耐量試驗：簡稱OGTT，它是指75克葡萄糖溶于250-300毫升水空腹5分鐘內(nèi)飲完。OGTT2hPG是定量標準化的餐后血糖。空腹血糖受損：簡稱IFG。糖耐量異常：簡稱IGT。2.血糖診斷指標2.2血糖診斷標準

空腹血糖FPG(mmol/L)OGTT2hPG(mmol/L)正常糖耐量3.9–6.1

＜7.8糖耐量減退6.1–7.0

7.8–11.1糖尿病≥7.0

≥11.1注：任意時間血糖RPG（隨機血糖）≥11.1mmol/L，可以確診為糖尿病。2.2血糖診斷標準2.3血糖診斷的缺點FPG和OGTT診斷符合率不高血糖變異率高重現(xiàn)性差測定前誤差-葡萄糖酵解測定誤差-部分方法偏倚大OGTT實施困難返回目錄2.3血糖診斷的缺點3.糖化血紅蛋白指標3.1什么是糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白是血液中紅細胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物。血糖和血紅蛋白的結(jié)合生成糖化血紅蛋白是不可逆反應(yīng)，并與血糖濃度成正比，且保持120天左右，所以可以觀測到120天內(nèi)的平均血糖水平。糖化血紅蛋白的英文代號是HbA1c。糖化血紅蛋白測試通?？梢苑从郴颊?-12周的血糖控制情況。血糖是從食物中的碳水化合物分解而來的血液中的單糖,通常僅指葡萄糖。血糖測試結(jié)果反映的是即刻的血糖水平。糖化血紅蛋白是糖尿病診斷新標準和治療監(jiān)測的“金標準”。

3.糖化血紅蛋白指標3.1什么是糖化血紅蛋白隨著人們對糖尿病知識的逐步了解，多數(shù)人已意識到空腹和餐后2小時血糖監(jiān)測的重要性，并常常把二者的測定值作為控制血糖的標準。其實不然，空腹和餐后2小時血糖是診斷糖尿病的標準，而衡量糖尿病控制水平的標準是糖化血紅蛋白。糖化血紅蛋白的測定結(jié)果以百分率表示，指的是和葡萄糖結(jié)合的血紅蛋白占全部血紅蛋白的比例?？崭寡呛筒秃笱鞘欠从衬骋痪唧w時間的血糖水平，容易受到進食和糖代謝等相關(guān)因素的影響。糖化血紅蛋白可以穩(wěn)定可靠地反映出檢測前120天內(nèi)的平均血糖水平，且受抽血時間，是否空腹，是否使用胰島素等因素干擾不大。因此，國際糖尿病聯(lián)盟推出了新版的亞太糖尿病防治指南，明確規(guī)定糖化血紅蛋白是國際公認的糖尿病監(jiān)控"金標準"。如果空腹血糖或餐后血糖控制不好，糖化血紅蛋白就不可能達標。隨著人們對糖尿病知識的逐步了解，多數(shù)人已意識到空腹和餐后2小3.2血紅蛋白組成人體血液中正常血紅蛋白（Hb）有三種血紅蛋白亞組分組成：血紅蛋白A（HbA）、血紅蛋白F（HbF）和血紅蛋白A2（HbA2）。成人血紅蛋白中主要含有血紅蛋白A（HbA），約占血紅蛋白的95%～97%。血紅蛋白A（HbA）又由兩種亞組分組成：糖化血紅蛋白A1（HbA1）（5%～7%）和非糖化血紅蛋白A0（HbA0）（90%）。糖化血紅蛋白（HbA1）是血紅蛋白（Hb）與糖類（如葡萄糖、6-磷酸葡萄糖或1.6-二磷酸果糖）經(jīng)非酶促結(jié)合而成。它的合成過程是緩慢且不可逆的，它積累并持續(xù)于紅細胞120天的生命期中，其合成速率與紅細胞所處環(huán)境中糖的濃度成正比。糖濃度越高，糖化血紅蛋白的濃度則可能越高。糖化血紅蛋白（HbA1）又有三種亞組分：HbA1a、HbA1b和HbA1c。其中，HbA1c約占HbA1的75%～80%，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。因此，HbA1c在總血紅蛋白（Hb）中所占的比例，能夠反映出檢測前120天內(nèi)的平均血糖水平。3.2血紅蛋白組成糖化簡介0623課件3.3糖化血紅蛋白的臨床意義糖尿病患者血糖總體控制情況的指標有助于糖尿病慢性并發(fā)癥的認識指導對血糖的調(diào)整對判斷糖尿病的不同階段有一定的意義區(qū)別應(yīng)激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的檢測意義3.3糖化血紅蛋白的臨床意義3.4糖尿病診斷標準1）血紅蛋白A1c水平≥6.5%。2）FPG≥126mg/dl(7.0mmol/l)。空腹定義為至少8h內(nèi)無熱量攝入。3）口服糖耐量試驗時2h血糖≥200mg/dl(11.1mmol/l)。4）在伴有典型的高血糖或高血糖危象癥狀的患者，隨機血糖≥200mg/dl(11.1mmol/l)。在無明確高血糖時，應(yīng)通過重復檢測來證實標準1-3。3.4糖尿病診斷標準3.5糖化血紅蛋白診斷指標正常糖化血紅蛋白：4.0%≤HbA1c≤6.0%糖化血紅蛋白的高危區(qū)：6.0%＜HbA1c≤6.5%糖尿病的診斷切點：HbA1c＞6.5%

糖化血紅蛋白與血糖的控制情況4%～6%：血糖控制正常。6%～7%：血糖控制比較理想。7%～8%：血糖控制一般。8%～9%：控制不理想，需加強血糖控制，多注意飲食結(jié)構(gòu)及運動，并在醫(yī)生指導下調(diào)整治療方案。＞9%：血糖控制很差，是慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險因素，可能引發(fā)糖尿病性腎病、動脈硬化、白內(nèi)障等并發(fā)癥，并有可能出現(xiàn)酮癥酸中毒等急性合并癥。3.5糖化血紅蛋白診斷指標3.6糖化血紅蛋白診斷的優(yōu)點診斷不要求病人空腹抽血，檢測方便。糖化血紅蛋白生成后穩(wěn)定不易分解，能反映機體2-3個月的平均血糖水平，不需要反復頻繁檢查。檢測結(jié)果準確，診斷符合率高，可標準化。結(jié)果抗干擾能力強，不受飲食運動等因素的影響。對治療效果的監(jiān)測調(diào)整控制有重要作用。可以提前3-5年預測糖尿病的發(fā)生。3.6糖化血紅蛋白診斷的優(yōu)點3.7糖化血紅蛋白的局限性部分血紅蛋白亞型（如HbF）會干擾HbA1c測定。部分疾?。ㄈ缒I臟疾病、溶血性貧血等）改變紅細胞壽命使HbA1c不準確。對進展迅速的Ⅰ型糖尿病,HbA1c趕不上血糖變化的速度。返回目錄3.7糖化血紅蛋白的局限性4.糖化血紅蛋白標準化現(xiàn)狀4.1糖尿病國際研究機構(gòu)IFCC國際臨床化學和實驗室聯(lián)合會IDF國際糖尿病聯(lián)盟ADA美國糖尿病協(xié)會EASD歐洲糖尿病協(xié)會NGSP美國糖尿病標準化項目組織4.糖化血紅蛋白標準化現(xiàn)狀4.1糖尿病國際研究機構(gòu)4.2糖尿病現(xiàn)有國際標準IFCC：國際臨床檢驗標準，適用全球。NGSP：美國糖化血紅蛋白標準化項目，適用全球。DCCT：美國糖尿病控制與并發(fā)癥試驗，試驗開始于美國，

針對Ⅰ型糖尿病患者所做的試驗。UKPDS：英國前瞻性糖尿病研究，研究開始于英國，針對Ⅱ型糖尿病患者所做的試驗JDS：日本糖尿病協(xié)會，適用于日本。SCC：瑞典臨床化學會，適用于北歐地區(qū)。4.2糖尿病現(xiàn)有國際標準4.32010年糖化血紅蛋白全球標準化共識HbA1c必須全球標準化以IFCC為唯一參考系統(tǒng)根據(jù)IFCC-NGSP主導公式計算出NGSP衍生單位（%）根據(jù)HbA1c計算出平均血糖值A(chǔ)DAG4.32010年糖化血紅蛋白全球標準化共識4.4關(guān)于IFCC/NGSP/ADAG的說明IFCC濃度：特異性高，誤差小，但操作復雜耗時長，費用高，僅能用于標準化檢測，臨床推廣尚需時日。NGSP：面積百分比(%)，此方法雖然存在變異糖化血紅蛋白等因素干擾的缺陷，仍是目前最廣泛使用的HbA1c參考系統(tǒng)。ADAG(A1cderivedaverageglucose平均血糖)：糖尿病的問題是血糖問題而不是血紅蛋白問題，糖化血紅蛋白使患者不易理解，平均血糖eAG使醫(yī)生和患者更易溝通并使患者更好了解自己的病情。研究結(jié)果表明：IFCC濃度與NGSP﹑平均血糖之間有很好的相關(guān)性，可表示為：NGSP(%)=0.09148×IFCC+2.152eAG(mmol/L)=1.59×NGSP-2.59返回目錄4.4關(guān)于IFCC/NGSP/ADAG的說明5.糖化血紅蛋白測量方法及原理5.1陽離子液相層析法測試原理：基于不同組分帶正電荷的不同進行分離，通過離子交換柱達到分析HbA1c的效果。分型：高壓、低壓、手工高壓：用高壓系統(tǒng)（幾十公斤的壓力）實現(xiàn)分離低壓：用低壓系統(tǒng)（幾公斤的壓力）實現(xiàn)分離手工：在常壓條件下進行手工微柱操作實現(xiàn)分離HPLC為高壓液相層析法，糖化血紅蛋白分析的金標準，LPLC為低壓液相層析法，經(jīng)過優(yōu)化其結(jié)果準確性是所有方法中最接近HPLC的檢測方法。5.糖化血紅蛋白測量方法及原理5.1陽離子液相層析法5.2硼酸親和層析法測試原理：利用硼酸鹽能夠與血紅蛋白分子發(fā)生可逆結(jié)合反應(yīng)的性質(zhì)。分型：干式（如小旋風），濕式（如普銳姆斯）干式：采用卡片為分析裝置進行測試濕式：采用硼酸親和層析柱進行測試比較：濕式的準確性和重復性都好于干式。硼酸親和層析法只能測量總糖化血紅蛋白，但目前沒有證據(jù)證明總糖化血紅蛋白和糖尿病并發(fā)癥的風險有直接關(guān)系。5.2硼酸親和層析法5.3免疫比濁法測試原理：以糖化血紅蛋白作為抗原，利用抗原和抗體反應(yīng)原理進行測定。分型：散射、透射散射：從不同的角度測量抗原抗體復合物微粒的散射光強度和濁度的變化。透射：主要檢測抗原抗體復合物所形成的濁度。特點：散射比濁法較透射比濁法準確性好。但免疫比濁法受血紅蛋白變異體影響較大，其準確性及重復性受到嚴重挑戰(zhàn)。5.3免疫比濁法5.4其他方法電泳法：利用糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白在電場中所帶電荷不同，從而等電點及泳動速度不同進行分離檢測。目前電泳法的商品化儀器很少，無法普及使用。酶法：將全血溶成溶血液，利用酶將血紅蛋白酶解消化成的最終產(chǎn)物利用其顏色變化程度可以得知樣本中糖化血紅蛋白的含量。目前酶法尚無足夠的臨床數(shù)據(jù)驗證，其前景并不明朗。此外，還有化學發(fā)光法、等電點聚集法等。返回目錄

5.4其他方法6.主要糖化血紅蛋白儀器簡介6.1伯樂D-10

測試方法：高壓陽離子液相層析法儀器特點：全自動的HPLC儀器，簡單的操作程序，原始樣品管上機，一次可處理10個樣本，每個樣本在3分鐘之內(nèi)即可完成測定。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.主要糖化血紅蛋白儀器簡介6.2希森美康G7,G8測試方法：高壓陽離子液相層析法儀器特點：操作簡便，標本無需前處理，原始樣品試管可直接上機，全血或稀釋樣本都可直接檢測，檢測結(jié)果精準，速度快（每個測試僅需1.2分鐘）。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.2希森美康G7,G86.3愛科來HA-8160測試方法：高壓陽離子液相層析法儀器特點：全自動快速處理，每個樣本僅需要90秒，批量處理臨床標本（一次性上樣100份），自動去除不穩(wěn)定性血紅蛋白，檢測準確度高、重復性好、易操作。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.3愛科來HA-81606.4普銳姆斯PrimusHPLC測試方法：高壓液相親和層析法（濕式）儀器特點：自動加樣器可配置多種型號的采血管，變異系數(shù)小于2%，檢測快速，每個測試需2分鐘，抗干擾性強，唯一采用高壓液相親和層析法測量HbA1c的全自動儀器。儀器缺點：儀器購置使用成本高，結(jié)構(gòu)復雜，維護困難。6.4普銳姆斯PrimusHPLC6.5英國DrewDS5測試方法：低壓離子交換液相層析法儀器特點：使用DS5分配器可排除不穩(wěn)定血紅蛋白成分，操作系統(tǒng)簡便，采用圖形化符號提示操作步驟。儀器缺點：柱效低，無恒溫控制，衛(wèi)生部質(zhì)評不佳。6.5英國DrewDS56.6挪威小旋風NycoCardReaderII測試方法：硼酸親和層析法（干式）儀器特點：多參數(shù)檢測儀器、易于使用、體積小，儀器成本較低。儀器缺點：準確性和重復性較差，操作繁瑣，試劑成本高。6.6挪威小旋風NycoCardReaderII6.7國賽特種蛋白Nephstar測試方法：散射免疫比濁法儀器特點：智能化設(shè)計，中英文界面，操作非常簡單，無需制作標準曲線，不用做空白對照，成本較低。儀器缺點：日間精密度和抗干擾能力較差。6.7國賽特種蛋白Nephstar6.8奧迪康A(chǔ)C6600測試方法：離子交換液相層析法儀器特點：獨創(chuàng)的HbA1C四梯度洗脫法，體積小，操作簡單。儀器缺點：儀器故障率較高。6.8奧迪康A(chǔ)C6600目前主要儀器分為三大類：高壓液相層析儀器，準確性好，購置價格高（終端價格30萬以上），使用成本高（終端價格30元以上），維護復雜，適用于高端實驗室。POCT即時檢測儀器，大多采用硼酸親和層析法和免疫比濁法，方法學及溯源性存在問題，而且大多不帶校準品和質(zhì)控品，準確性重復性低，結(jié)果不可靠，儀器購置價格低（終端價格1萬-數(shù)萬），使用成本高（終端價格30元上下），使用過程繁瑣，其檢測結(jié)果嚴格意義上不能用于臨床糖尿病診斷，僅可用于糖尿病篩查。低壓液相層析儀器，其方法學原理與高壓液相層析法完全一致，溯源性好，如采用高效層析柱和恒溫控制，配套校準品和質(zhì)控品，其準確性重復性接近高壓液相層析法，CV以小于3%，完全達到NGSP1級實驗室的要求，其購置價格低（終端價格幾萬元），使用成本低（終端價格30元以下），維護簡單，維護成本低（幾乎沒有易損件），完全適用于各級醫(yī)院實驗室，而且體積小使用簡單，可以適用于內(nèi)分泌門診即時檢測。目前主要儀器分為三大類：高壓液相(HPLC)與低壓液相(LPLC)的區(qū)別返回目錄高壓液相(HPLC)與低壓液相(LPLC)的區(qū)別返回目錄7.凱特KH—101糖化血紅蛋白分析儀簡介7.1儀器外觀

1-彩色觸摸顯示屏2-試劑包3-自動進樣機構(gòu)

4-打印機5-分離檢測機構(gòu)6-樣品恒溫處理裝置7.凱特KH—101糖化血紅蛋白分析儀簡介7.1儀器外觀7.2儀器結(jié)構(gòu)

由分析系統(tǒng)、操作系統(tǒng)、試劑系統(tǒng)組成。分析系統(tǒng)

KH-101分析儀分析系統(tǒng)由自動取樣機構(gòu)、樣品分離裝置（層析柱）和檢測單元組成。操作系統(tǒng)

Linux操作系統(tǒng)，全觸摸屏操作

顯示：7英寸彩色液晶顯示屏

打印功能：打印內(nèi)容可選，可打印完整的檢驗報告單、統(tǒng)計參數(shù)、質(zhì)量控制圖等

系統(tǒng)接口：RS-232標準接口，條形碼掃描設(shè)備輸入口，USB接口（軟件更新）試劑系統(tǒng)

試劑包：1個，每個試劑包內(nèi)含A標500ml、B標300ml和溶血劑300ml，并具有試劑余量記憶功能7.2儀器結(jié)構(gòu)7.3儀器工作原理儀器具有全自動采樣、溶血、溫育、進樣、分離、檢測、計算、打印和顯示輸出、數(shù)據(jù)儲存功能的一體化全自動分析系統(tǒng)。只需將血樣置于樣品盤的樣品杯內(nèi)，即可自動地完成全部分析過程。它是一套低壓液相色譜系統(tǒng)，采用離子交換法測定糖化血紅蛋白（HbA1c），與離子交換高效液相色譜法（HPLC）法的工作過程和原理一致，具有經(jīng)典準確的方法學原理。該色譜系統(tǒng)以能與陽離子進行高效可逆交換-洗脫的樹脂材料為固定相，以電解質(zhì)溶液為流動相，采用六通閥進樣和梯度洗脫技術(shù)提高分離效能，使具有陽離子特征的各類糖化血紅蛋白得到高效和重現(xiàn)的分離。7.3儀器工作原理糖化血紅蛋白并不是單一物質(zhì)。血紅蛋白有4個亞基，成人絕大多數(shù)為α2β2，這兩種亞基都可被糖基化。糖基化可發(fā)生在亞基N端的纈氨酸，也可發(fā)生在鏈內(nèi)的賴氨酸上。各種糖化血紅蛋白中，最重要的一種是HbA1c，即α2(β-纈-1-脫氧果糖)2。2010年美國糖尿病協(xié)會(ADA)的標準中，已經(jīng)將HbA1c≥6.5%作為診斷糖尿病的標準之一。各類糖化血紅蛋白具有不同程度的陽離子特性，在弱陽離子型色譜柱上具有不同程度的結(jié)合力，當電解質(zhì)溶液流過色譜柱時，各類糖化血紅蛋白將在不同的時間被洗脫下來，經(jīng)比色池進行光度檢測。KH-101型全自動糖化血紅蛋白分析儀可清晰地區(qū)分HbA1ab、HbA1c和HbA0，并準確地獲得HbA1c的水平。糖化血紅蛋白并不是單一物質(zhì)。血紅蛋白有4個亞基，成人絕大多數(shù)梯度洗脫原理：

血紅蛋白的糖化會導致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。在弱的陽離子交換劑中，伴有增加的離子濃度和（或）pH下降，在經(jīng)過陽離子交換層析柱時，可被經(jīng)偏酸的緩沖液平衡過的樹脂所吸附。由于糖化血紅蛋白各亞組分和非糖化血紅蛋白所帶正電荷各不相同，所以附著力不同。糖化血紅蛋白分子正電荷較少附著力較低，非糖化血紅蛋白分子正電荷較多附著力較高。用不同pH值的緩沖液就可以分次洗脫出3種含糖成分的血紅蛋白，即：HbA1a、HbA1b和HbA1c，最后將附著力最強的非糖化血紅蛋白也洗脫出來。梯度洗脫原理：7.4KH—101儀器操作安裝層析柱、泵管和試劑包，打開電源，儀器啟動，自檢。儀器界面由菜單欄、工作區(qū)、狀態(tài)/提示欄構(gòu)成。菜單欄

工作區(qū)

狀態(tài)/提示欄

7.4KH—101儀器操作菜單欄

由狀態(tài)、樣品輸入、結(jié)果、服務(wù)構(gòu)成。工作區(qū)

顯示菜單欄中各菜單項內(nèi)的功能鍵和相關(guān)信息。狀態(tài)/提示欄

由顯示日期和時間、系統(tǒng)的工作狀態(tài)、系統(tǒng)的警告、打印機狀態(tài)等組成。菜單欄樣品輸入

本儀器具有機內(nèi)自動溶血功能，用戶只需將15ul~20ul全血樣品加入到樣品杯（因Hba1c是一個相對值，加樣量無太嚴格要求），即可進行測試。如果是預先溶血標本，用戶可選擇菜單上的預溶血選項。注意同一盤樣品不能同時出現(xiàn)兩種不同的溶血模式。

在樣品輸入菜單，用戶可以編輯輸入樣品杯的位置，ID號，測試開始后儀器可以通過不同的顏色提示樣品是否測試完成。綠色表示待測樣品，藍色表示測試完成。樣品輸入樣品盤共20個樣品位，2個急診位（E1和E2）、2個質(zhì)控位（QC1和QC2）。用戶在輸入完樣品信息，檢查無誤后，點擊運行按鈕，儀器則將自動完成測試。在測試過程中，如有急診樣品，可放在E1、E2位置，儀器將優(yōu)先進行測試。如有特殊情況需要終止測試，可點擊停止按鈕，儀器將在完成當前樣品檢測后停止測量。點擊校準按鈕，儀器可以輸入2個待測校準品，測試完成后結(jié)果將儲存并在校準菜單中顯示。用戶需認真核對實際樣品的位置與輸入相符，否則儀器的樣品杯傳感器將終止測量，防止溶血劑溢出。樣品盤共20個樣品位，2個急診位（E1和E2）、2個質(zhì)控位（狀態(tài)欄

能夠觀察實時的測試曲線和了解測試進度，如發(fā)現(xiàn)曲線明顯異常，可點擊放棄測試鍵，儀器將在20秒內(nèi)退出本次測量，同時樣品盤上的待測樣品也將暫停測量，方便用戶處置。狀態(tài)欄結(jié)果欄

可顯示當天所有測試的結(jié)果。如需想得到更詳細的情況，可通過輸入NO.號或ID號進行查詢，查詢成功后將顯示含有圖形在內(nèi)的詳細測試結(jié)果信息。其中zero表示基線吸光度，max1表示HbA1c峰的最大吸光度，max2表示血紅蛋白主峰的最大吸光度。如需查詢本月的歷史記錄，直接輸入需查詢的日期即可。查詢后的結(jié)果可通過點擊打印鍵由打印機打印。結(jié)果欄結(jié)果打印格式

Date：樣品測量時間

Number：樣品序號

Well：樣品位置號

ID：樣品編號，可以由1-18位數(shù)字或字母組成

NGSP：美國糖化血紅蛋白標準化計劃

IFCC：國際臨床化學和實驗室樣品管理委員會

Area：HbA1a+b，HbA1c，Hb的實際面積

%:HbA1a+b，HbA1c所占比例

圖形為可選擇打印項目，建議用戶開啟，以方便發(fā)現(xiàn)異常的曲線。正確的色譜圖要求：

1）1分鐘左右開始出現(xiàn)HbA1a+b曲線；

2）曲線光滑、無毛刺；

3）HbAo曲線的結(jié)束峰下降結(jié)束點與基線基本一致。結(jié)果打印格式服務(wù)欄

服務(wù)欄：

時間、試劑、質(zhì)控、保養(yǎng)、走紙、工程菜單、數(shù)據(jù)發(fā)送以及設(shè)置。服務(wù)欄時間

更改系統(tǒng)時間，如有更改需要重新啟動儀器。試劑

更換試劑時，點擊“試劑鍵”，按儀器界面的提示逐一完成更換工作，每完成一項工作請點擊相應(yīng)的按鈕，最后，“試劑灌注”按鈕被點亮，點擊后自動進行試劑灌注。時間質(zhì)控

質(zhì)控菜單用于質(zhì)控結(jié)果的統(tǒng)計、保存和顯示，可以自動生成標準的質(zhì)控圖。

注意，進行QC測試后，無論是QC1還是QC2儀器只保存當天最后一個測試結(jié)果。質(zhì)控維護與校準去蛋白：在樣品杯中加入1.5ml的去蛋白液，放到樣品盤的清洗孔位，點擊去蛋白按鈕即可。每更換試劑包后立刻進行一次去蛋白。液路灌注當液路系統(tǒng)中有氣泡時，可以通過液路灌注排除。校準如果在樣品輸入菜單中申請校準品，并測試并完成后，儀器將自動顯示校準品的測試結(jié)果；或者將校準品當作普通樣品測試多次，取得平均值后手工輸入到儀器中（這種方法需在測試前將因子的斜率和截距分別設(shè)為1和0）。點擊校準按鈕，儀器可以自動計算出斜率和截距。如果需要，也可以手工點擊修改因子。注意：建議用戶在更換試劑包和層析柱后都要進行校準，以確保測量的準確性。維護與校準走紙

點擊按鍵后，打印機將走紙，方便用戶安裝打印紙。工程菜單

工程師專用的維修菜單，用戶如需要可在公司的指導下進行操作。此操作有一定的危險性，需防止機械損壞等意外情況的發(fā)生。進入密碼為“123”。走紙數(shù)據(jù)發(fā)送點擊后，可以將儀器當天的測量結(jié)果，通過RS232接口發(fā)送到計算機。設(shè)置通過此菜單，設(shè)置打印機的狀態(tài)、轉(zhuǎn)換語言文字、修改參考值范圍。其中語言和參考值范圍需點擊解鎖按鈕，然后輸入密碼“123”后才能修改。設(shè)置完成后需點擊保存/退出。修改語言后，需重新開機才能生效。數(shù)據(jù)發(fā)送7.5

儀器維護與保養(yǎng)每日維護

開機后，確認儀器自檢通過；

當操作樣本和廢棄材料時，應(yīng)該戴手套；

檢查打印機并確認打印紙足夠，不足時請安裝打印紙；

檢查試劑包余量，廢液是否溢出；

試劑包中提供