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第16章動(dòng)物源性細(xì)菌主講人:中華醫(yī)學(xué)會(huì)臨床微生物學(xué)組(1~4屆)全國委員《中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全書》主編北華大學(xué)臨床微生物學(xué)教授海南醫(yī)學(xué)院客座教授
李影林
2011年4月一、掌握1.炭疽芽胞桿菌的主要生物學(xué)性狀和致病性。2.布魯菌屬的主要生物學(xué)性狀和致病性。3.鼠疫耶爾森菌主要生物學(xué)性狀和致病性。二、熟悉1.布魯菌屬的免疫性和微生物學(xué)檢查法。2.炭疽芽胞桿菌的免疫性與微生物學(xué)檢查法和防治原則。3.鼠疫耶爾森菌的微生物學(xué)檢查法防治原則。三、了解1.布魯菌屬的防治原則。2.炭疽芽胞桿菌與其他需氧芽胞桿菌的區(qū)別。3.放線菌屬和諾卡菌屬的生物學(xué)性狀及致病性;放線菌屬的微生物學(xué)檢查和防治原則。目的和要求第一節(jié)布魯菌屬形態(tài)與染色1.初次分離G-兩端鈍圓的小球桿菌,偶見兩極濃染。多次傳代牛布魯菌和豬布魯菌可變成桿狀。2.無芽胞、無鞭毛,光滑型有微莢膜。3.柯茲洛夫斯基(Козρовскиǔ)染色法布魯菌染成紅色,其他雜菌染成綠色。
羊布魯菌鏡下形態(tài)(革蘭染色)羊布魯菌鏡下形態(tài)(革蘭染色)
培養(yǎng)特點(diǎn)1.需氧菌最適生長溫度35~37℃最適pH6.6~7.42.培養(yǎng)較難:需加血清或肝浸液,初次分離需5%~10%CO2
3.經(jīng)37℃48h培養(yǎng)形成S型菌落,人工傳代可轉(zhuǎn)變?yōu)镽型菌落.4.在血平板(BAP)上不溶血.羊布魯菌菌落特征(BAP)菌種
觸酶
氧化酶糖
分
解
精氨酸脫羧
硝酸鹽還原
脲酶H2S產(chǎn)生
染料的耐受
葡萄糖
半乳糖
阿拉伯糖硫廑
復(fù)紅
(40μg)
(20μg)
羊布魯菌
+++---+V-++牛布魯菌
+++++-+++-+豬布魯菌
++++++++(-)+-森林鼠布魯菌
+-+++-+++--綿羊布魯菌
+--------+(-)犬布魯菌
+++--+++-+-生化反應(yīng)
布魯菌的生化特性
分解尿素,產(chǎn)硫化氫。根據(jù)H2S多少和堿性染料(復(fù)紅1/5萬、硫堇1/2萬)培養(yǎng)基中生長情況,羊++、牛+-、豬-+(+生長,-不生長)用以鑒別三種布魯菌。Ag構(gòu)造——十分復(fù)雜(1)A和M抗原
臨床上用于診斷的主要有A-Ag和M-Ag兩種。
羊布魯菌——以M為主。A:M約為1:20牛布魯菌——以A為主。A:M約為20:1豬布魯菌——介于二者之間。A:M約為2:1粗糙型菌株不含A、M抗原。(2)G-Ag(血Ag)、vi-Ag、L、Y、Z-Ag
羊布魯菌A:M=1:20(凝集試驗(yàn):+抗A-、+抗M+)
牛布魯菌A:M=20:1(凝集試驗(yàn):+抗A+
、+抗M-)
豬布魯菌A:M=2:1(凝集試驗(yàn):+抗A+
、+抗M+)
抵抗力1.本菌對(duì)外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)。在干燥的胎膜中可生存5~160d。羊毛中1.5~4個(gè)月。冷藏的乳制品中6~40d。牛糞中生存120d,水中5~150d;土壤中24~40d。2.對(duì)熱較敏感。煮沸立即死亡。濕熱60℃15min即死。3.對(duì)直射日光敏感20min即死。4.對(duì)一般消毒劑敏感。2%末蘇兒,30g/L碳酸,0.05%升汞15min即死。5.對(duì)抗生素敏感。
致病物質(zhì)
(1)內(nèi)毒素(2)侵襲力—莢膜(3)侵襲性酶類—如透明質(zhì)酸酶、過氧化氫酶。侵襲力強(qiáng),可通過完整的皮膚、黏膜(呼吸道、消化道、眼結(jié)膜等多途徑)進(jìn)入人體。(4)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)
所致疾病
布魯菌感染家畜引起母畜流產(chǎn);感染人體,反復(fù)引起菌血癥,患者熱型呈波浪式,臨床稱為波浪熱。人類感染不引起流產(chǎn),因?yàn)槿祟愄ケP不含赤鮮醇。
布魯菌感染后,可獲得免疫力,并在菌種和生物型之間有交叉免疫。布魯菌為細(xì)胞內(nèi)寄生菌,其免疫以細(xì)胞免疫為主。免疫性人患病為什么會(huì)出現(xiàn)波狀熱呢?流行特點(diǎn)
1.一年四季均可發(fā)生,但有較明顯的季節(jié)性。南方
→氣溫較暖,當(dāng)年11月~次年1月產(chǎn)的冬自季發(fā)病多→人在次年3~4月相繼發(fā)病。北方→氣候寒冷2~4月產(chǎn)的春季發(fā)病為主→人多在5~7月發(fā)病。2.任何年齡均可發(fā)生
3.成人發(fā)病與職業(yè)有關(guān)與病獸接觸機(jī)會(huì)多的人
4.病獸是主要傳染源分布:布病幾乎遍布全世界
微生物學(xué)檢查法
1.標(biāo)本的采集:臨床標(biāo)本中最易獲得陽性培養(yǎng)的是發(fā)熱期的血液,其次是骨髓、尿液、腦脊液、關(guān)節(jié)液、乳汁、流產(chǎn)胎兒的淋巴結(jié)、肝、脾、肺組織和流產(chǎn)病獸的子宮分泌物等。2.檢驗(yàn)方法
①凝集反應(yīng)
(1)標(biāo)本的直接檢查
②PCR檢測(cè)(2)分離培養(yǎng)標(biāo)本血平板表面光滑濕潤、圓形、凸起、灰色、邊緣整齊、直徑2~3mm的小菌落。不溶血。有時(shí)可出現(xiàn)粘液樣或干燥的硬皮樣菌落。(3)生化反應(yīng)及染料抑制試驗(yàn)
35~37℃5~7d(4)抗體檢測(cè)①不完全抗體檢測(cè)(Coomb’S試驗(yàn))。原理:人感染后2周可出現(xiàn)抗體,其中有不完全抗體(又稱為封閉性抗體)。它雖能與相應(yīng)Ag結(jié)合,但不出肉眼可見反應(yīng)。由于不完全抗體本身是球蛋白,故可用人血清球蛋白來免疫動(dòng)物,制備抗球蛋白(即抗抗體)。如將此種抗球蛋白加于抗原與不完全抗體的復(fù)合物中,此復(fù)合物即可與抗球蛋白結(jié)合并凝集成大塊,出現(xiàn)可見反應(yīng)即抗球蛋試驗(yàn)陽性。不凝集為陰性。即:抗球蛋白+抗原-不完全抗體復(fù)合物
電解質(zhì)
凝集現(xiàn)象。
②補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):患者發(fā)病3周后,可出現(xiàn)IgG抗體。此時(shí)可采用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)IgG抗體。此法特異性較高。③熒光免疫法檢測(cè)IgG抗體。④ELISA法檢測(cè)IgG抗體。
防治原則1.消滅傳染源:控制和消滅家畜布病2.切斷傳播途徑3.免疫接種:以畜群為主,疫區(qū)人群也應(yīng)接種減毒活疫苗4.急性病人用抗生素治療形態(tài)染色(Yersiniapestis)1.G-菌端鈍圓小桿菌。2.美藍(lán)染色,兩端濃染。3.無芽胞,無鞭毛,有莢膜(早期)4.在慢性病灶、陳舊培養(yǎng)基及含30g/L的NaCl培養(yǎng)基上呈多形性:如球狀、啞鈴形、棒狀、絲狀、酵母菌樣“菌影”。第二節(jié)耶爾森菌屬一、鼠疫耶爾森菌
培養(yǎng)特點(diǎn)1.需O2及兼性厭O2、0~450C均生長,pH5.8~8.0均可發(fā)育。2.對(duì)營養(yǎng)要求不高,普通平板即生長。加入血液生長更佳。(1)普通平板無色透明,稍凸起,中央呈灰黃色顆粒狀邊緣呈花邊樣菌落。菌膜(2)液體培養(yǎng)基—呈鐘乳石樣發(fā)育(3)血平板—灰白,中間凸,不透明無明顯花邊條樣,不溶血。48h
能力弱。7~14d才分解葡萄糖、麥芽糖和甘露醇。蔗糖-、乳糖-;不能分解蛋白質(zhì),賴氨酸和鳥氨酸脫羧酶、苯丙氨酸脫氨酶、脲酶、H2S等均陰性。IMVC-+--,
H2S(-)。
生化反應(yīng)
復(fù)雜。至少有18種Ag,其中比較重要的有3種Ag—即FI、T、V/W。(1)FI-Ag:是本菌的封套Ag,其化學(xué)成分為蛋白多糖的復(fù)合物。
FIA—蛋白多糖的復(fù)合物由3個(gè)部分組成FIB—可溶性多糖
FIC—不溶性多糖Ag構(gòu)造(1)①菌體表面Ag,其中V抗原是蛋白質(zhì),W抗原為類指蛋白②有抗吞噬作用,與本菌的毒力和侵襲力有關(guān)。(3)T-Ag①為可溶性蛋白,毒性強(qiáng),稱為鼠毒素②有良好的抗原性和免疫原性(2)V/WAgAg構(gòu)造(2)
1.在自然環(huán)境的生存能力較強(qiáng)。痰液中存活36d,鼠蚤糞和土壤中存活1年。
2.對(duì)濕熱敏感:70~80℃10min。
3.5%來蘇和50g/L石炭酸20min可殺死痰中細(xì)菌。
抵抗力
鼠疫耶菌通過突變、轉(zhuǎn)座子移位、基因轉(zhuǎn)移發(fā)生變異。其生化特性、毒力、耐藥性和抗原性均可發(fā)生變異。死亡率高。病后可獲得牢固免疫力。變異性鼠疫耶爾森是具有高度毒力和侵襲力的病原微生物。⑴鼠毒素
⑵內(nèi)毒素
致病物質(zhì)所致疾病鼠疫死亡率高。病后可獲得牢固免疫力。包括微生物學(xué)檢查法
1.標(biāo)本的采集:疾病的種類不同,采取的標(biāo)本也不同(1)患者有腺鼠疫—淋巴穿刺液 敗血性鼠疫—血液 肺鼠疫—痰液 皮膚鼠疫—膿泡及滲出液(2)尸體:肝、脾、腫大的淋巴結(jié)、肺、心血、骨髓及腦組織。(3)動(dòng)物:以家鼠、黃鼠、砂鼠及其他嚙齒類動(dòng)物為主,其他動(dòng)物也可感染,不能忽視。(4)主要為蛋類。此外蜱、螨、虱和臭蟲等。
(1)直接涂片檢查標(biāo)本涂片染色 Gram's
美藍(lán)注意:病灶及陳舊培養(yǎng)物呈多形性
(2)分離培養(yǎng)一在細(xì)菌鑒定上有決定性意義。 ①未污染標(biāo)本一血平板 赫金格爾瓊脂②污染標(biāo)本一選擇性培養(yǎng)基——
膽紫亞硫酸鈉瓊脂膽紫溶血瓊脂
③肉湯培養(yǎng)基鐘乳石狀發(fā)育。
48h28~30℃
2.檢驗(yàn)方法
(3)生化反應(yīng)
(4)血清學(xué)試驗(yàn)①在不能檢出鼠疫耶爾森菌的情況下,可檢測(cè)病人或動(dòng)物血清中的鼠疫抗體.
②檢測(cè)鼠疫耶爾森菌抗原:反向間接血凝ELISA(5)檢測(cè)核酸:PCR防治原則1.加強(qiáng)疫區(qū)的監(jiān)測(cè)工作,防止人間鼠疫的發(fā)生.2.滅鼠滅蚤是切斷鼠疫傳播環(huán)節(jié).3.應(yīng)用EV無毒株活菌疫苗.4.對(duì)病人要及時(shí)治療.鏈霉素,慶大霉素,磺胺類等藥物均有效.直接涂片染色鏡檢:G-
兩極濃染的卵圓形。分離培養(yǎng)與鑒定:菌膜呈“鐘乳石”狀下沉,此特征有鑒別意義。血清凝集試驗(yàn)鑒定。
防治原則
滅鼠滅蚤、接種無毒活疫苗;治療用抗生素;加強(qiáng)國境、海關(guān)檢疫。微生物學(xué)檢查二、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌小腸結(jié)腸炎亞種(Y.enterocolitica)
(一)生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色⑴G-短小桿菌美藍(lán)染色可顯示兩極濃染⑵25℃時(shí)有周鞭毛,呈翻滾運(yùn)動(dòng);37℃無動(dòng)力,新分離菌株需傳幾代后才能運(yùn)動(dòng),無芽胞和莢膜。2.培養(yǎng)特性⑴需O2或兼性厭O2⑵耐低溫,4~40℃均能生長,但在20~28℃才能表現(xiàn)其特性。pH7.2~7.4。⑶生長速度較慢,每一代最短時(shí)間長44min⑷普通瓊脂24h形成0.3~0.6mm小菌落
48h形成0.8~1.0mm小菌落血平板1~2mm圓,光滑,凸起,易乳化某些菌株在22℃時(shí),菌落周圍有溶血環(huán)。⑸在麥康凱瓊脂上,生長慢,菌落小。為不發(fā)酵乳糖菌落。
在其他腸道選擇培養(yǎng)基上生長較差,在NYE上可生長(新耶爾森菌選擇培養(yǎng)基)⑹液體培養(yǎng)基中呈混濁生長,表面有白色菌膜,管底有沉淀。3.生化反應(yīng)不太穩(wěn)定糖發(fā)酵能力較差4.Ag構(gòu)造
O-Ag近60種—血清分群(型)。
較復(fù)雜
H-Ag
20種
K-Ag
1種
(二)致病性
本菌在自然界中分布很廣,主要存在于飲水、污水中。在動(dòng)物中存在于家畜、家禽、鼠、鴿、蛙、蝸牛和蝦蟹排泄物中。在食品(乳、乳制品、蛋、肉、冰琪淋等)常檢出。豬是帶菌者。經(jīng)蒼蠅、蚤、蟑螂、蜚蠊帶菌等媒介傳播,為人獸共患病原菌之一。
發(fā)燒、腸炎、腸系膜L結(jié)炎型多(三)微生物學(xué)檢查法
1.標(biāo)本的采集因疾病種類而異。常采集血、便、尿、臟器、組織等。
注:PBS:磷酸鹽緩沖液;MCA:麥康凱瓊脂;NyE,新小腸結(jié)腸炎耶爾森菌分離瓊脂;CIN:耶爾森菌專用選擇培養(yǎng)基;TSIA:三糖鐵瓊脂;KIA/MIU:克氏雙糖/動(dòng)力、吲哚、脈酶試驗(yàn)。
2.檢驗(yàn)程序
4℃~5℃2~3W(TSIA.KIA/MIU)3.檢驗(yàn)方法
⑴分離培養(yǎng)
MIU37℃(3)最終鑒定
全面生化反應(yīng)和血清分型.若被檢菌凝集效價(jià)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)菌凝集效價(jià)1/2以上,可確定菌型。
三、假結(jié)核耶爾森菌假結(jié)核亞種
本菌引起的疾病與小腸結(jié)腸炎耶爾森菌相似,但主要是5~15歲兒童多見。多數(shù)人類病例為腸道感染,有時(shí)引起腸系膜淋巴結(jié)炎,其癥狀類似急性或亞急性闌尾炎。本菌常從血液標(biāo)本分離到。四、其他耶爾森菌(略)
第三節(jié)芽胞桿菌屬
炭疽芽胞桿菌
引起炭疽病
蠟樣芽胞桿菌
引起食物中毒
枯草芽胞桿菌
偶引起結(jié)膜炎、虹膜炎、及全眼炎
形態(tài)與染色1.G+大桿菌、菌兩端如刀切。2.機(jī)體內(nèi)常散在或呈短鏈,菌體周圍能形成粘液樣肥厚的莢膜。(含血清培養(yǎng)基也可)。3.培養(yǎng)基中則呈竹節(jié)狀長鏈。4.無鞭毛,不能運(yùn)動(dòng),一定條件下(溫度25~30℃,充足O2)。
炭疽芽胞桿菌(革蘭染色)5.芽胞橢圓形,位于菌體中央,寬度小于菌體的寬度。一、炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌莢膜炭疽芽胞桿菌串珠試驗(yàn)炭疽芽胞桿菌的芽胞培養(yǎng)特點(diǎn)
1.普通平板:典型強(qiáng)毒菌,均為粗糙型。37℃、18~24h后,發(fā)育成扁平、灰白色、干燥邊緣呈卷發(fā)狀。2.普通肉湯:37℃、24H、形成絮狀沉淀物。振蕩試管,可見沉淀物呈小辨卷繞成團(tuán)向上升起。3.明膠穿刺,可從表面徐徐液化明膠,并沿穿刺線向四周擴(kuò)散生長,如倒置杉樹樣。炭疽芽孢桿菌卷發(fā)狀菌落(復(fù)紅染色)炭疽芽胞桿菌在BAP上菌落生化特性較活潑
抗原構(gòu)造
1.細(xì)菌性抗原:
什么叫Ascoli反應(yīng)?(1)菌體多糖Ag:有3種由D-葡糖胺、D-半乳糖及醋酸組成。其決定簇為多糖。耐熱、耐腐敗。病獸腐敗臟器、皮毛等,雖經(jīng)長時(shí)間煮沸,仍可與相應(yīng)的免疫血清發(fā)生沉淀反應(yīng)(Ascoli熱沉淀反應(yīng))。這種Ag特異性不高可與其他需氧芽胞桿菌甚至與14型肺炎鏈球菌的多糖Ag及人類A血型Ag發(fā)生交叉反應(yīng)。(2)莢膜多糖Ag(3)芽胞Ag2.炭疽毒素
保護(hù)性Ag由
致死因子
三種Pr組成的外毒素復(fù)合物
水腫因子(1)特點(diǎn)①(致死因子和水腫因子)單獨(dú)均不能發(fā)揮生物活性作用,都必須與保護(hù)性Ag組合才能引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物水腫、致死。
②具有抗吞噬作用和免疫原性。(2)本質(zhì):由毒素質(zhì)粒pXO1(176kb)編碼而成,為溫敏質(zhì)粒。分子量為110MD。有三個(gè)組分:水腫因子(EF)、保護(hù)性Ag(PA)和致死因子(LF)
抵抗力
1.繁殖體——同一般細(xì)菌。2.芽胞——抵抗力甚強(qiáng)。3.對(duì)熱抵抗力較差。
4.對(duì)碘及氧化劑敏感。
致病物質(zhì)1.莢膜多肽:抗吞噬,使細(xì)菌易于擴(kuò)散、繁殖
2.炭疽毒素
這種毒素的主要作用是增強(qiáng)毛細(xì)血管的通透性,使大量細(xì)菌侵入,并堵塞毛細(xì)血管,改變了血液循環(huán)的動(dòng)力學(xué),使組織中的營養(yǎng)及氧耗盡,損害腎臟及干擾糖代謝。
所致疾病
1.對(duì)動(dòng)物多呈敗血癥經(jīng)過而死亡。2.人可經(jīng)過各種徐徑感染。二、蠟樣芽胞桿菌(一)生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色(1)G+大桿菌1.0~1.2μm×3~5μm。菌體兩端鈍圓多呈鏈狀排列。(2)生長6h后即有中央或近端芽胞,芽胞形成后,菌體迅速崩解,芽胞游離出。有鞭毛(引起食物中毒者多周鞭毛)無莢膜。蠟樣桿菌的革蘭染色(二)培養(yǎng)特點(diǎn)
1.需氧/兼性厭氧
溫度高或低(10~45℃)、酸或堿性環(huán)境(pH4.9~9.3)均可生長。
2.營養(yǎng)要求不高,普通瓊脂平板上生長良好。
3.培養(yǎng)基上生長特點(diǎn)。(1)普通瓊脂平板:菌落較大,灰白、粗糙似毛玻璃狀或白蠟狀
.(2)血平板——β溶血環(huán)。(3)普通肉湯:均勻混濁,有菌膜。(4)馬鈴薯葡萄糖瓊脂——菌落中央隆起呈象牙樣(5)卵黃瓊脂——生長迅速,3h呈不見菌落但可見卵磷脂酶分解卵磷脂后形成的白色混濁環(huán)——乳光反應(yīng)
蠟樣桿菌在血平板β溶血(三)生化反應(yīng)
葡萄糖
+,麥芽糖
+,蔗糖
+,水楊酸
+,果糖
+。胨化牛乳、液化明膠、V-P陽性,卵磷脂酸
+,多次傳代后則有變化。
(四)抵抗力
芽胞耐受100℃30min,干熱120℃60min才能殺死。三、致病性1.腹瀉型:由不耐熱腸毒素引起。
2.嘔吐型:由耐熱腸毒素引起。
第四節(jié)柯克斯體屬貝納柯克斯體(Coxiellaburetii)
又稱為Q熱貝納柯克斯體。是Q熱的病原體。軍團(tuán)菌目柯克斯體科
柯克斯體屬(Coxiella)貝納柯克斯體(Coxiellaburetii)(Coxiella)一、生物學(xué)性狀(一)形態(tài)與染色G-短桿或球狀,有時(shí)可呈G+。常用Gimennez法染色呈鮮紅色。Giemsa染色呈紫色或藍(lán)色。(二)培養(yǎng)特點(diǎn)專性細(xì)胞內(nèi)寄生,雞胚卵黃囊中生長旺盛。多種原代或傳代細(xì)胞內(nèi)繁殖。(三)變異貝納柯克斯體抗原相間存在著可逆性變異。變異的主要成分是脂多糖。新分離者為Ⅰ相含大量的脂多糖毒性強(qiáng)
經(jīng)傳代后變異為Ⅱ相脂多糖毒性弱(四)抵抗力比立克次體和無芽胞細(xì)菌強(qiáng)耐熱100℃10min才能殺死。10g/L石炭酸/甲醛溶液需24h才被滅活。在干燥的蜱糞中可存活一年半。(一)傳播媒介蜱,可經(jīng)卵傳代。(二)傳染源及儲(chǔ)存宿主牛、綿羊等家畜是主要傳染源和儲(chǔ)存宿主。動(dòng)物感染后,多無癥狀,但排泄中可長期帶有病原體。二、致病性(三)感染過程
感染動(dòng)物尿糞污染環(huán)境人直接接觸呼吸道消化道(飲感染乳牛之牛乳)局部單核細(xì)胞生長繁殖入血貝納柯克斯體血癥臨床癥狀:除立克次體病共有癥狀(發(fā)熱、頭痛、肌肉痛)外以出現(xiàn)肺炎和肝炎為其臨床特征。慢性Q熱主要表現(xiàn)為Q熱心內(nèi)膜炎
三、微生物學(xué)檢查法(一)標(biāo)本的采集外周血/血清標(biāo)本。要求:1.一定要在發(fā)熱期采集。
2.用抗生素之前。(二)檢驗(yàn)方法
1.外周血/血清標(biāo)本豚鼠腹腔接種發(fā)熱時(shí)解剖取肝和脾涂片檢查Giemsa染色
2.直接免疫熒光法鑒定
3.貝納柯克斯體DNA可用PCR或基因探針檢測(cè)。
4.目前早期診斷用間接免疫熒光試驗(yàn)和ELISA特異性和敏感性都很高。四、防治原則1.著重防止家畜感染,要定期檢疫,隔離傳染源。2.嚴(yán)控鮮乳和乳制品的衛(wèi)生指標(biāo)。3.對(duì)流行區(qū)的易感人群和家畜接種滅活疫苗或減毒活疫苗。4.急性Q熱患者可口服四環(huán)素或多西環(huán)素。慢性Q熱患者多聯(lián)合應(yīng)用多西環(huán)素和利福平治療。第五節(jié)巴通體屬(Bartonella)巴通體科共有21個(gè)種。主要致病者:漢塞巴通體(B.henselae)貓抓病。五日熱巴通體(B.quintana)五日熱。第六節(jié)弗朗西斯菌屬(
一、分類
包括2個(gè)種:土拉熱弗朗西斯菌(F.tularesis)和新兇手弗拉西斯菌(F.novicida)。代表菌:為土拉熱弗朗西斯菌。(Francisella)
二、生物學(xué)性狀
(一)形態(tài)與染色1.G-小球桿菌,美藍(lán)染色兩極濃染。2.無芽胞、無鞭毛、無莢膜(在動(dòng)物體內(nèi)可形成狹小的莢膜)。3.具有多形性。在固體培養(yǎng)基上經(jīng)18~24h培養(yǎng)的幼齡菌為小球桿菌,但在陳舊培養(yǎng)物中則表現(xiàn)為多形性球狀、桿狀、長絲狀均可見。
(二)培養(yǎng)特點(diǎn)1.專性需氧菌
2.對(duì)營養(yǎng)要求較為嚴(yán)格3.在液體培養(yǎng)基中生長不良(三)生化反應(yīng)較弱。只有在pH值極恒定的固體培養(yǎng)基中才能觀察到葡萄糖+,甘露糖、麥芽糖+/-,乳糖-,蔗-,甘露醇-,鼠李糖-,木膠糖-,半乳糖-,阿拉伯膠糖-,山梨醇-H2S+、I-,尿素酶+。(四)抵抗力在自然界的生存能力強(qiáng)。但對(duì)消毒劑敏感,對(duì)氯的作用比其他腸道菌敏感
.(五)
Ag構(gòu)造1.Vi抗原:類脂和蛋白的復(fù)合物2.O抗原;含有核蛋白。該菌與布魯菌、耶樂森菌有共同Ag成分可產(chǎn)生血清學(xué)交叉反應(yīng)。
三、致病性
(一)致病因素1.內(nèi)毒素2.莢膜—侵襲力(二)所致疾病本菌能透過沒有損傷的皮膚和粘膜侵入機(jī)體。沿淋巴管至所屬淋巴結(jié)繁殖→入血→菌血癥→全身各器官。肝、脾腫大
1.腺型:典型癥狀為淋巴結(jié)炎性腫大與鼠疫類似。
2.胃腸型:由污染的食物水經(jīng)小腸粘膜進(jìn)入人體。表現(xiàn)腹部陣發(fā)性劇烈疼痛、惡心、嘔吐,深部腸系膜淋巴結(jié)腫大。3.肺型:吸入本菌氣溶膠后3~5d出現(xiàn)明顯癥狀。
4.全身型(傷寒型或敗血型):沒有明顯局部反應(yīng)而有典型的全身癥狀。
四、微生物學(xué)檢查法
(一)標(biāo)本的采集:根據(jù)疾病的種類不同可采集患者血液、淋巴結(jié)、穿刺液和痰等。一般應(yīng)做免疫熒光染色或立即直接培養(yǎng)。如不能立即培養(yǎng)可保存在10℃以下的環(huán)境。
對(duì)野生動(dòng)物、吸血昆蟲、家畜或尸體、瀉染的食品或水均可作為檢查材料。
(二)檢驗(yàn)方法1.標(biāo)本直接檢查(1)直接鏡檢:標(biāo)本經(jīng)3%鹽酸酒精固定,用石炭酸龍膽紫或Giemsa染色。(2)從固體培養(yǎng)基和動(dòng)物臟器制備的涂片→Gram染色
.(3)熒光抗體染色:標(biāo)本→熒光抗體染色→本菌一般呈橢圓形,外周輪廓增強(qiáng),中心微暗似莢膜染色。
2.分離培養(yǎng)標(biāo)本→卵黃培養(yǎng)基
光滑,濕潤、邊整、透明露滴狀菌落。用此培養(yǎng)基保存菌種,不發(fā)生變異。
3.生化鑒定本菌發(fā)酵碳水化含物及醇的能力很弱。
4.抗體檢測(cè):一般用血清凝集試驗(yàn)。
31℃24~48h(Pasteurella)
一、分類
多殺巴斯德菌(P.multocida)—臨床多見嗜肺巴斯德菌
(P.pneumotropica)—臨床多見溶血巴斯德菌(P.hemolytica)產(chǎn)氣巴斯德菌(genes)雞巴斯德菌(P.qallinarum)犬巴斯德菌(P.canis)—臨床多見貝氏巴斯德菌(P.beffgae)達(dá)可馬巴斯德菌(P.dagmatis)明立巴斯德菌(P.tomat
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