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課程目錄實(shí)驗(yàn)一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定實(shí)驗(yàn)二植物染色體制片及有絲分裂的觀察實(shí)驗(yàn)三減數(shù)分裂制片技術(shù)及蝗蟲(chóng)精巢細(xì)胞顯微觀察實(shí)驗(yàn)四果蠅培養(yǎng)、麻醉及雌雄鑒別實(shí)驗(yàn)五果蠅唾腺染色體制備實(shí)驗(yàn)六果蠅單因子雜交/伴性遺傳實(shí)驗(yàn)七染色體組型分析實(shí)驗(yàn)八果蠅基因組DNA提取實(shí)驗(yàn)九人類(lèi)巴氏小體的觀察實(shí)驗(yàn)十果蠅單因子雜交/伴性遺傳數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)十一Hardy-Weinberg遺傳平衡定律的檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十二人類(lèi)性狀特征的遺傳分析課程目錄實(shí)驗(yàn)一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定1
實(shí)驗(yàn)九人類(lèi)巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,又叫巴爾體(Barrbody),指雌性哺乳動(dòng)物體細(xì)胞間期,一塊染色很深的染色質(zhì)。巴氏小體實(shí)際上是濃縮了的X染色體,其上的基因基本不轉(zhuǎn)錄。
實(shí)驗(yàn)九人類(lèi)巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,2巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)形狀:半圓形、三角形、卵形、短棒形及雙球形大?。褐睆郊s為1微米巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近3巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)。1955年Barr在女性口腔細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Barrbody。1959年人們把性染色體異常造成的畸形與巴氏小體的研究聯(lián)系起來(lái)。1971年Barrbody被命名為x染色質(zhì)。食管癌病人巴氏小體出現(xiàn)率低于10%;正常人細(xì)胞出現(xiàn)率為20-45%。最新研究進(jìn)展巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原4主要內(nèi)容一實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理(掌握)三實(shí)驗(yàn)材料四實(shí)驗(yàn)儀器及用具五藥品和試劑六實(shí)驗(yàn)步驟(理解)七作業(yè)主要內(nèi)容一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1通過(guò)實(shí)驗(yàn)學(xué)會(huì)巴氏小體檢查方法,掌握觀察與鑒別X染色質(zhì)的簡(jiǎn)易方法;2了解人類(lèi)男女性別性染色體的功能差異;并為了解人體染色體的畸變與疾病提供參考條件.
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1通過(guò)實(shí)驗(yàn)學(xué)會(huì)巴氏小體檢查方法,掌握觀6性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部髓質(zhì)發(fā)育為雄性生殖腺(睪丸)XY染色體發(fā)育為雌性生殖腺(卵巢)XX染色體XXY型染色體,皮質(zhì)、髓質(zhì)同時(shí)發(fā)育。二、實(shí)驗(yàn)原理性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部7哺乳動(dòng)物的雌性細(xì)胞有兩條X染色體,其中一條來(lái)自母方,另一條來(lái)自父方,在胚胎發(fā)育的早期(16天),這兩條X染色體中的一條隨機(jī)濃縮形成巴氏小體,(袋鼠例外:總是來(lái)自父方的x染色體失活)。雌性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞雄性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞一個(gè)巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的Y染色體雌性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞雄性哺乳動(dòng)一個(gè)巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色8雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染色體自身的特點(diǎn)來(lái)考慮……雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染9基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點(diǎn)】雌性xx兩條染色體上基因劑量有2份,失活1份,使x連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個(gè)體間無(wú)差異。在失活的x染色體上x(chóng)染色質(zhì)并不缺失,其上的某些基因如xg血型基因、類(lèi)固醇硫酸酯基因并不失活。理論解釋基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點(diǎn)】理論解釋10Lyon假說(shuō)【重點(diǎn)】
雌性動(dòng)物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性個(gè)的,那么雌雄個(gè)體X染色體上的基因效果相當(dāng)X染色體的失活是隨機(jī)的,即雌性動(dòng)物的染色體角度看是嵌合體失活發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期,已失活細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞群遺傳結(jié)構(gòu)相同。雌性動(dòng)物伴性基因的作用產(chǎn)生嵌合體Lyon假說(shuō)【重點(diǎn)】
雌性動(dòng)物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性11性染色體模式【了解】性染色體模式【了解】12體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查13臨床意義在于:1胎兒性別鑒定:從胎兒羊水中取得脫落的細(xì)胞檢查,如有巴氏小體,胎兒為女性,如果細(xì)胞中無(wú)巴氏小體,胎兒為男性。2成人性別鑒定:變性男運(yùn)動(dòng)員參加女子項(xiàng)目,可通過(guò)檢查其白細(xì)胞中有無(wú)巴氏小體而確定其性別。3性別畸形的判斷:是否缺失或者多出巴氏小體。
巴氏小體的臨床意義有哪些?臨床意義在于:巴氏小體的臨床意義有哪些?14三、實(shí)驗(yàn)材料男、女性口腔頰部粘膜細(xì)胞。四、實(shí)驗(yàn)儀器及用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、牙簽,離心管五、藥品和試劑
Giemsa染液,固定液,5mol/LHCl,低滲液三、實(shí)驗(yàn)材料15(一)直接涂片法:(每組2-3張女生口腔細(xì)胞涂片,1張男生口腔細(xì)胞涂片。)1涂片:受檢者用自來(lái)水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞(腮幫子處),將刮取物均勻涂布于載玻片上,晾干。2固定:將涂片放入95%的乙醇中固定30min,取出晾干。3水解:將涂片放入5molHCl中室溫下水解10min,自來(lái)水緩緩沖洗。4染色:用Gimsa染液染色8-10分鐘,勿干燥,用水沖洗后晾干鏡檢。5鏡檢:從低倍鏡到高倍鏡依次觀察。
六、實(shí)驗(yàn)步驟
紅色字體為注意事項(xiàng)?。?!紅色字體為注意事項(xiàng)?。。。ㄒ唬┲苯油科ǎ毫?、實(shí)驗(yàn)步驟
紅色字體為注意事項(xiàng)?。?!紅色16漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟17(二)滴片法:1取材:受檢者用自來(lái)水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞,將刮取物涮于裝有1ml生理鹽水的離心管中。2離心:離心10分鐘(5000轉(zhuǎn)/分),棄上清液。3低滲:加1ml低滲液混勻,37度低滲6分鐘,離心10分鐘,棄上清液。4固定:加固定液95%的乙醇1ml,室溫固定10分鐘,離心,棄上清。5滴片:加200ul固定液與沉淀物混成細(xì)胞懸液,用滴管吸取細(xì)胞懸液,滴于潔凈載玻片上,晾干。6水解:5molHCl水解10分鐘。自來(lái)水沖洗。7染色:Giemsa染色8分鐘,沖去染液,干后鏡檢。(二)滴片法:18直接涂片法操作簡(jiǎn)單,但口腔上皮細(xì)胞不易分散,細(xì)胞常重疊,而且標(biāo)本上涂大量細(xì)胞才能滿(mǎn)足計(jì)數(shù)的需要。滴片法稍繁瑣,離心收集細(xì)胞較難,但細(xì)胞分散均勻,細(xì)胞經(jīng)低滲后核膜膨脹,巴氏小體增大,利于辨認(rèn)。兩種方法的比較直接涂片法操作簡(jiǎn)單,但口腔上皮細(xì)胞不易分散,細(xì)胞常重疊,而且19細(xì)胞的理想狀態(tài):⑴核質(zhì)是網(wǎng)狀或細(xì)顆粒狀分布。⑵核膜清晰,核無(wú)缺損。⑶染色適度。⑷周?chē)鸁o(wú)雜菌。巴氏小體的辨認(rèn)標(biāo)準(zhǔn):
選定的細(xì)胞,在高倍鏡或油鏡下進(jìn)一步觀察。巴氏小體的形態(tài)表現(xiàn)為一結(jié)構(gòu)致密濃染小體,輪廓清楚,常附著于核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)。細(xì)胞的理想狀態(tài):20試驗(yàn)八巴氏小體課件21試驗(yàn)八巴氏小體課件22七、作業(yè):1.分別觀察50個(gè)男、女性可數(shù)的細(xì)胞,計(jì)算各自的巴氏小體細(xì)胞所占的百分比。2.在觀察中畫(huà)出2~3個(gè)典型細(xì)胞,標(biāo)明巴氏小體的部位。七、作業(yè):23思考題:1男性沒(méi)有巴氏小體的理論基礎(chǔ)。2男變女的變性手術(shù)后,該女性有無(wú)巴氏小體?3性別畸形的染色體模式可能有幾種??思考題:?24課程目錄實(shí)驗(yàn)一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定實(shí)驗(yàn)二植物染色體制片及有絲分裂的觀察實(shí)驗(yàn)三減數(shù)分裂制片技術(shù)及蝗蟲(chóng)精巢細(xì)胞顯微觀察實(shí)驗(yàn)四果蠅培養(yǎng)、麻醉及雌雄鑒別實(shí)驗(yàn)五果蠅唾腺染色體制備實(shí)驗(yàn)六果蠅單因子雜交/伴性遺傳實(shí)驗(yàn)七染色體組型分析實(shí)驗(yàn)八果蠅基因組DNA提取實(shí)驗(yàn)九人類(lèi)巴氏小體的觀察實(shí)驗(yàn)十果蠅單因子雜交/伴性遺傳數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)十一Hardy-Weinberg遺傳平衡定律的檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十二人類(lèi)性狀特征的遺傳分析課程目錄實(shí)驗(yàn)一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定25
實(shí)驗(yàn)九人類(lèi)巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,又叫巴爾體(Barrbody),指雌性哺乳動(dòng)物體細(xì)胞間期,一塊染色很深的染色質(zhì)。巴氏小體實(shí)際上是濃縮了的X染色體,其上的基因基本不轉(zhuǎn)錄。
實(shí)驗(yàn)九人類(lèi)巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,26巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)形狀:半圓形、三角形、卵形、短棒形及雙球形大?。褐睆郊s為1微米巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近27巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)。1955年Barr在女性口腔細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Barrbody。1959年人們把性染色體異常造成的畸形與巴氏小體的研究聯(lián)系起來(lái)。1971年Barrbody被命名為x染色質(zhì)。食管癌病人巴氏小體出現(xiàn)率低于10%;正常人細(xì)胞出現(xiàn)率為20-45%。最新研究進(jìn)展巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原28主要內(nèi)容一實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理(掌握)三實(shí)驗(yàn)材料四實(shí)驗(yàn)儀器及用具五藥品和試劑六實(shí)驗(yàn)步驟(理解)七作業(yè)主要內(nèi)容一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?9一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1通過(guò)實(shí)驗(yàn)學(xué)會(huì)巴氏小體檢查方法,掌握觀察與鑒別X染色質(zhì)的簡(jiǎn)易方法;2了解人類(lèi)男女性別性染色體的功能差異;并為了解人體染色體的畸變與疾病提供參考條件.
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1通過(guò)實(shí)驗(yàn)學(xué)會(huì)巴氏小體檢查方法,掌握觀30性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部髓質(zhì)發(fā)育為雄性生殖腺(睪丸)XY染色體發(fā)育為雌性生殖腺(卵巢)XX染色體XXY型染色體,皮質(zhì)、髓質(zhì)同時(shí)發(fā)育。二、實(shí)驗(yàn)原理性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部31哺乳動(dòng)物的雌性細(xì)胞有兩條X染色體,其中一條來(lái)自母方,另一條來(lái)自父方,在胚胎發(fā)育的早期(16天),這兩條X染色體中的一條隨機(jī)濃縮形成巴氏小體,(袋鼠例外:總是來(lái)自父方的x染色體失活)。雌性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞雄性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞一個(gè)巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的Y染色體雌性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞雄性哺乳動(dòng)一個(gè)巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色32雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染色體自身的特點(diǎn)來(lái)考慮……雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染33基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點(diǎn)】雌性xx兩條染色體上基因劑量有2份,失活1份,使x連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個(gè)體間無(wú)差異。在失活的x染色體上x(chóng)染色質(zhì)并不缺失,其上的某些基因如xg血型基因、類(lèi)固醇硫酸酯基因并不失活。理論解釋基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點(diǎn)】理論解釋34Lyon假說(shuō)【重點(diǎn)】
雌性動(dòng)物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性個(gè)的,那么雌雄個(gè)體X染色體上的基因效果相當(dāng)X染色體的失活是隨機(jī)的,即雌性動(dòng)物的染色體角度看是嵌合體失活發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期,已失活細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞群遺傳結(jié)構(gòu)相同。雌性動(dòng)物伴性基因的作用產(chǎn)生嵌合體Lyon假說(shuō)【重點(diǎn)】
雌性動(dòng)物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性35性染色體模式【了解】性染色體模式【了解】36體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查37臨床意義在于:1胎兒性別鑒定:從胎兒羊水中取得脫落的細(xì)胞檢查,如有巴氏小體,胎兒為女性,如果細(xì)胞中無(wú)巴氏小體,胎兒為男性。2成人性別鑒定:變性男運(yùn)動(dòng)員參加女子項(xiàng)目,可通過(guò)檢查其白細(xì)胞中有無(wú)巴氏小體而確定其性別。3性別畸形的判斷:是否缺失或者多出巴氏小體。
巴氏小體的臨床意義有哪些?臨床意義在于:巴氏小體的臨床意義有哪些?38三、實(shí)驗(yàn)材料男、女性口腔頰部粘膜細(xì)胞。四、實(shí)驗(yàn)儀器及用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、牙簽,離心管五、藥品和試劑
Giemsa染液,固定液,5mol/LHCl,低滲液三、實(shí)驗(yàn)材料39(一)直接涂片法:(每組2-3張女生口腔細(xì)胞涂片,1張男生口腔細(xì)胞涂片。)1涂片:受檢者用自來(lái)水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞(腮幫子處),將刮取物均勻涂布于載玻片上,晾干。2固定:將涂片放入95%的乙醇中固定30min,取出晾干。3水解:將涂片放入5molHCl中室溫下水解10min,自來(lái)水緩緩沖洗。4染色:用Gimsa染液染色8-10分鐘,勿干燥,用水沖洗后晾干鏡檢。5鏡檢:從低倍鏡到高倍鏡依次觀察。
六、實(shí)驗(yàn)步驟
紅色字體為注意事項(xiàng)?。?!紅色字體為注意事項(xiàng)?。。。ㄒ唬┲苯油科ǎ毫?shí)驗(yàn)步驟
紅色字體為注意事項(xiàng)?。?!紅色40漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟41(二)滴片法:1取材:受檢者用自來(lái)水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞,將刮取物涮于裝有1ml生理鹽水的離心管中。2離心:離心10分鐘(5000轉(zhuǎn)/分),棄上清液。3低滲:加1ml低滲液混勻,37度低滲6分鐘,離心10分
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