基因工程的原理及技術(shù)終稿

策劃：漢水丑生組織：漢水丑生、飛鴻翼、掌上的沙、暖風(fēng)、handsome、足教、一哲2007-2012六年高考題知識點分類匯編漢水丑生群大型活動之三【新】漢水丑生（侯偉新疆烏魯木齊新世紀外國語學(xué)校）組織者：【川】飛鴻翼（洪翼四川省瀘州市納溪中學(xué)）【魯】暖風(fēng)（王文芳山東省陽谷第三中學(xué)）

【魯】掌上的沙（袁慶軍山東鄆城高級中學(xué)）【渝】足教（王永洪重慶市大足中學(xué)）

【粵】handsome（賀海生廣東汕尾陸豐龍山中學(xué)）【陜】一哲（楊明輝陜西寶雞市天王高中）基因工程的原理及技術(shù)魯【夢】（孟祥偉山東昌樂及第中學(xué)）（2012山東）35、（8分）【生物—現(xiàn)代生物科技專題】毛角蛋白II型中間絲（KIFII）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFII基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖（1）過程①中最常用的運載工具是________，所需要的酶是限制酶和_____________。（2）在過程②中，用________________________

處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是________________。質(zhì)粒DNA連接酶胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）維持培養(yǎng)基（液）的PH“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（3）在過程③中，用______________________處理以獲得更多的卵（母）細胞。成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行_______處理。（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是______________。在胚胎移植前，通過____________技術(shù)可獲得較多胚胎。促性腺激素（或促濾泡素，孕馬血清）；

去核(早期)胚胎培養(yǎng)胚胎分割“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥渴炀氄莆栈蚬こ毯团咛スこ痰幕局R就能解答本題.（1）運載工具（體）包括質(zhì)粒、噬菌體衍生物及動植物病毒,其中質(zhì)粒是主要運載體;所需工具酶是限制酶和DNA連接酶。（2）分散皮膚組織塊成單個細胞使用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）。在動物細胞培養(yǎng)過程中，CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH的相對穩(wěn)定。（3）要得到更多的卵（母）細胞需用促性腺激素進行超數(shù)排卵處理；成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要了來自供體核。（4）把重組細胞培養(yǎng)到早期胚胎叫早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎。（2012天津）7.（13分）生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得DNA片段信息的過程圖。據(jù)圖回答：（1）過程①酶作用的部位是_____________鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA，過程②酶作用的部位是___________鍵。（2）①、②兩過程利用了酶的__________特性?！窘馕觥浚?）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。（2）①②過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性，即專一性。肽鍵磷酸二酯鍵專一“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（3）若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程③的測序結(jié)果與__________________酶的識別序列進行對比，以確定選用何種酶。（4）如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識別、結(jié)合DNA序列位基因的_________________________?！窘馕觥浚?）DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。（4）RNA聚合酶識別和結(jié)合在基因的啟動子上，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。啟動子（或轉(zhuǎn)錄起始區(qū)）限制性核酸內(nèi)切酶“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選ACD。（5）以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有（多選）A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提取rRNAB.用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C．通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進行染色體定位D．將抑制成熟基因?qū)敕眩鋗RNA與催化成熟酶基因的mRNA互補結(jié)合，終止后者翻譯，延遲果實成熟。ACD（2012天津）8.（20分）黃曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進入動物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。(1)AFB1屬于________類致癌因子。(2)AFB1能結(jié)合在DNA的G上．使該位點受損傷變?yōu)镚'，在DNA復(fù)制中，G'會與A配對?，F(xiàn)有受損傷部位的序列為，經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)開_____________?；瘜W(xué)

【解析】】黃曲霉霉毒素B1（AFB1）存在于于被黃曲曲霉菌污污染的飼飼料中，，它可以以通過食食物鏈進進入動物物體內(nèi)并并蓄積，，引起瘤瘤變。某某些微生生物能表表達AFB1解毒酶．．將該酶酶添加在在飼料中中可以降降解AFB1，清除其其毒性。。(1)黃曲霉毒毒素B1（AFB1）是化學(xué)學(xué)物質(zhì)，，AFB1屬于化學(xué)學(xué)類致癌癌因子。。(2)AFB1能結(jié)合在在DNA的G上．使該該位點受受損傷變變?yōu)镚‘，在DNA復(fù)制中，，G’會與A配對?，F(xiàn)現(xiàn)有受損損傷部位位的序列列為經(jīng)兩次復(fù)復(fù)制后，，該序列列突變?yōu)闉?3）下圖為為采用基基因工程程技術(shù)生生產(chǎn)AFB1解毒酶的的流程圖圖據(jù)圖回答答問題：：①在甲甲、乙條條件下培培養(yǎng)含AFB1解毒酶基基因的菌菌株．經(jīng)經(jīng)測定．．甲菌液液細胞密密度小、、細胞含含解毒酶酶：乙菌菌液細胞胞密度大大、細胞胞不含解解毒酶．．過程l應(yīng)選擇____________菌液的細細胞提取取總RNA，理由是是___________________________________________________________________________________________________________________②過程程Ⅱ中，根據(jù)據(jù)圖示，，可以看看出與引引物結(jié)合合的模版版是________________________________________③檢測測酵母菌菌工程菌菌是否合合成了AFB1解毒酶，，應(yīng)采用用_____________________方法。甲甲菌液細細胞的AFB1基因的表表達已轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄形成成mRNA，而在已已菌夜細細胞中該該基因未未轉(zhuǎn)錄AFB1解毒酶基基因的cDNA抗原-抗體雜交交“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。【解析】（3）①在在甲、乙乙條件下下培養(yǎng)含含AFB1解毒酶基基因的菌菌株．經(jīng)經(jīng)測定．．甲菌液液細胞密密度小、、細胞含含解毒酶酶：乙菌菌液細胞胞密度大大、細胞胞不含解解毒酶．．過程l應(yīng)選擇擇甲菌菌液的的細胞胞提取取總RNA，理由由是因因為甲甲菌液液細胞胞含解解毒酶酶，意意味著著完成成了基基因的的表達達，所所以應(yīng)應(yīng)選擇擇甲菌菌液的的細胞胞提取取總RNA②過程Ⅱ中，根根據(jù)圖圖示，，可以以看出出與引引物結(jié)結(jié)合的的模版版是cDNA.③檢測酵酵母菌菌工程程菌是是否合合成了了AFB1解毒酶酶，檢檢測對對象為為蛋白白質(zhì)，，應(yīng)采采用抗抗原-抗體雜雜交方方法。。(4）選取取不含含AFB1的飼料料和某某種實實驗動動物為為材料料，探探究該該AFB1解毒酶酶在飼飼料中中的解解毒效效果。。實驗驗設(shè)計計及測測定結(jié)結(jié)果見見下表表：[來源:中國教教育出出版網(wǎng)網(wǎng)]據(jù)表回回答問問題：：①本本實驗驗的兩兩個自自變量量，分分別為為________________________。②本本實驗驗中．．反映映AFB1解毒酶酶的解解毒效效果的的對照照組是_________________。③經(jīng)經(jīng)測定定，某某污染染飼料料中AFB1含量為為100μg/kg，則每每千克克飼料料應(yīng)添添加______克AFB1解毒酶酶．解解毒效效果最最好．．同時時節(jié)的的了成成本。。AFB1的添加加量和和AFB1解毒酶酶的添添加量量B組（或或B組+A組）5“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）①本本實實驗的的兩個個自變變量，，分別別為AFB1的有無無和AFB1解毒酶酶的含含量。。②本本實驗驗中．．反映映AFB1解毒酶酶的解解毒效效果的的對照照組是是B組。③經(jīng)經(jīng)測定定，某某污染染飼料料中AFB1含量為為100μg/kg，則每每千克克飼料料應(yīng)添添加5克AFB1解毒酶酶．AFB1的殘留留量最最少，，解毒毒效果果最好好．繼繼續(xù)添添加AFB1解毒酶酶解解解毒效效果不不變，，因此此節(jié)約約了成成本。。（5）采用用蛋白白質(zhì)工工程進進一步步改造造該酶酶的基基本途途徑是是：從從提高高每的的活性性出發(fā)發(fā)，設(shè)設(shè)計預(yù)預(yù)期的的蛋白白質(zhì)結(jié)結(jié)構(gòu)，，推測測應(yīng)有有的氨氨基酸酸序列列，找找到相相對應(yīng)應(yīng)的___________________?！窘馕觥浚?）采用用蛋白白質(zhì)工工程進進一步步改造造該酶酶的基基本途途徑是是：從從提高高酶的的活性性出發(fā)發(fā)，設(shè)設(shè)計預(yù)預(yù)期的的蛋白白質(zhì)結(jié)結(jié)構(gòu)，，推測測應(yīng)有有的氨氨基酸酸序列列，找找到相相對應(yīng)應(yīng)的脫脫氧核核苷酸酸序列列。脫氧核核苷酸酸序列列（2012浙江））6.天然的的玫瑰瑰沒有有藍色色花，，這是是由于于缺少少控制制藍色色色素素合成成的基基因B，而開藍色色花的矮牽牽牛中存在在序列已知知的基因B?，F(xiàn)用基因因工程技術(shù)術(shù)培育藍玫玫瑰，下列列操作正確確的是()A.提取矮牽牛牛藍色花的的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄錄獲得互補補的DNA，再擴增基基因BB.利用限制性性核酸內(nèi)切切酶從開藍藍色花矮牽牽牛的基因因文庫中獲獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基基因B與質(zhì)粒連接接后導(dǎo)入玫玫瑰細胞D.將基因B直接導(dǎo)入大大腸桿菌，，然后感染染并轉(zhuǎn)入玫玫瑰細胞A【解析】提提取矮牽牛牛藍色花的的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得得到DNA，然后擴增增，可獲得得大量的基基因B，A正確；從基基因文庫中中獲取目的的基因，只只要根據(jù)目目的基因的的相關(guān)信息息和基因文文庫中的信信息進行篩篩選對比即即可，不需需要用限制制酶進行切切割，B錯誤；目的的基因與質(zhì)質(zhì)粒的連接接需要用DNA連接酶，而而不是DNA聚合酶，C錯誤；目的的基因需要要和運載體體連接后形形成重組質(zhì)質(zhì)粒再導(dǎo)入入，而且應(yīng)應(yīng)該用農(nóng)桿桿菌進行感感染，而不不是大腸桿桿菌，D錯誤。（2012新課標(biāo)卷））40、[生物—選修3現(xiàn)代生物科科技專題]（15分）根據(jù)基因工工程的有關(guān)關(guān)知識，回回答下列問問題：（1）限制性內(nèi)內(nèi)切酶切割割ＤＮＡ分分子后產(chǎn)生生的片段，，其末端類類型有和。黏性末端平末端（2）質(zhì)粒運載載體用EcoRⅠⅠ切割后產(chǎn)生生的片段如如下：為使運載體體與目的基基因相連，，含有目的的基因的DNA除可用EcoRⅠⅠ切割外，還還可用另一一種限制性性內(nèi)切酶切切割，該酶酶必須具有有的特點是是。切割產(chǎn)生的的DNA片段末端與與EcoRⅠⅠ切割產(chǎn)生的的相同（3）按其來源源不同，基基因工程中中所使用的的DNA連接酶有兩兩類，即DNA連接酶和DNA連接酶。大腸桿菌T4（5）基因工程程中除質(zhì)粒粒外，和也可作為運運載體。（4）反轉(zhuǎn)錄作作用的模板板是，產(chǎn)物是。若要在體外外獲得大量量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)產(chǎn)物，常采采用技術(shù)。（6）若用重組組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化化大腸桿菌菌，一般情情況下，不不能直接用用未處理的的大腸桿菌菌作為受體體細胞，原原因是mRNA（或RNA）cDNA（或DNA）噬菌體未處理的大大腸桿菌吸吸收質(zhì)粒（（外源DNA）的能力極極弱PCR動植物病毒毒等(六)回答答下列有關(guān)關(guān)遺傳信息息傳遞和表表達的問題題。(10分)（2012上海）55．如圖圖18所示示，若用兩兩種識別切切割序列完完全不同的的限制酶E和F從基基因組DNA上切下下目的基因因，并將之之取代質(zhì)粒粒pZHZ1(3.7kb，，1kb=1000對堿基)上相應(yīng)的的E-F區(qū)區(qū)域(0.2kb)，那么么所形成的的重組質(zhì)粒粒pZHZ2_______。

A．．既能被E也能被F切開B．．能被E但但不能被F切開C．既不能能被E也不不能被F切切開D．能能被F但不不能被E切切開A“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。【解析】用限制酶從從基因組DNA上切切下目的基基因，并取取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對對堿基)上上相應(yīng)的E-F區(qū)域域(0.2kb)，用DNA連接酶酶連接后形形成重組質(zhì)質(zhì)粒，則在在重組質(zhì)粒粒中仍然含含有限制酶酶E和限制制酶F的切切割位點，，形成的重重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故故本題選A?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012上海）56．已知知在質(zhì)粒pZHZl中，限制制酶G切割割位點距限限制酶E切切割位點0．8kb，限制酶酶H切割位位點距限制制酶F切割割位點O．．5kb。。若分別用用限制酶G和H酶切切兩份重組組質(zhì)粒pZHZ2樣樣品，據(jù)據(jù)表4所列列酶切結(jié)果果判斷目的的基因的大大小為kb；并將將目的基因因內(nèi)部的限限制酶G和和H切割位位點標(biāo)注在在圖19中中。1.2【解析】根據(jù)題中信信息，原來來質(zhì)粒長度度為3.7kb切去去EF之間間的還有3.5kb，插入目目的基因后后構(gòu)成重組組質(zhì)粒，重重組質(zhì)粒長長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，，可推導(dǎo)出出目的基因因長度為1.2kb。重組質(zhì)質(zhì)粒中G的的切割位點點距E的切切割位點0.8kb，單獨用用限制酶G切割后產(chǎn)產(chǎn)生1.6kb和3.1kb的兩種片片段，說明明在重組質(zhì)質(zhì)粒中除了了圖中標(biāo)示示出來的G酶識別位位點外，還還有一個G酶識別位位點；H的的酶切位點點距F0.5kb，，用H單獨獨酶切產(chǎn)生生1.2kb和3.5kb兩兩種片段，，說明在重重組質(zhì)粒中中含有另外外一個H的的酶切位點點，根據(jù)題題中信息提提示“將目目的基因內(nèi)內(nèi)部的限制制酶G和H的識別位位點標(biāo)注在在圖19中中”，可確確定在EF之間分別別含有G和和H的一個個識別位點點?？蓴喽ǘ℅的識別別位點，在在舉例E點點右側(cè)0.8kb處處，H的識識別位點在在距F左側(cè)側(cè)0.7kb處。（2012上海）57．若想想在山羊的的乳汁中收收獲上述目目的基因的的表達產(chǎn)物物，則需將將重組質(zhì)粒粒pZHZ2導(dǎo)入至至山羊的______細胞中。若若pZHZ2進入細細胞后插入入在一條染染色體DNA上，那那么獲得轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因純合合子山羊的的方式是。受精卵【解析】將目的基因因?qū)雱游镂锛毎?，，通常以受受精卵作為為受體細胞胞，當(dāng)受精精卵發(fā)育成成山羊后，，在雌性山山羊的乳汁汁中可以提提取到目的的基因的表表達產(chǎn)物。。重組質(zhì)粒粒插入在一一條染色體體DNA上上，可通過過雌雄轉(zhuǎn)基基因山羊雜雜交的方法法來獲取轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因純合合子山羊。。轉(zhuǎn)基因山羊羊間交配“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012廣東）28．（16分）子葉葉黃色（Y，野生型型）和綠色色（y，突突變型）是是孟德爾研研究的豌豆豆相對性狀狀之一。野野生型豌豆豆成熟后，，子葉由綠綠色變?yōu)辄S黃色。(1)在黑黑暗條件下下，野生型型和突變型型豌豆的葉葉片總?cè)~綠綠素含量的的變化見圖圖10。其其中，反映映突變型豌豌豆葉片總總?cè)~綠素含含量變化的的曲線是______。A（2）Y基因和y基因的翻譯產(chǎn)物分別別是SGRY蛋白和SGRy蛋白，其部部分氨基酸序列見見圖11。據(jù)圖11推測，Y基因突變?yōu)闉閥基因的原因因是發(fā)生了了堿基對的的_____和_______。進一步研研究發(fā)現(xiàn)，，SGRY蛋白和SGRy蛋白都能進進入葉綠體體?？赏茰y測，位點_______的突變導(dǎo)致了了該蛋白的功功能異常，從從而使該蛋白白調(diào)控葉綠素素降解的能力力減弱，最終終使突變型豌豌豆子葉和葉葉片維持“常常綠”。（2012廣東）28．．（16分））子葉黃色（（Y，野生型型）和綠色（（y，突變型型）是孟德爾爾研究的豌豆豆相對性狀之之一。野生型型豌豆成熟后后，子葉由綠綠色變?yōu)辄S色色。替換增加③“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（3）水稻Y基因發(fā)生突變變，也出現(xiàn)了了類似的“常常綠”突變植植株y2，其葉片衰老老后仍為綠色色。為驗證水水稻Y基因的功能，，設(shè)計了以下下實驗，請完完善。（一）培育轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因植株：：Ⅰ．植株甲：用用含有空載體體的農(nóng)桿菌感感染__________的細胞，培育育并獲得純合合植株。Ⅱ．植株乙：______________________________，培育并獲得得含有目的基基因的純合植植株。（2012廣東）28．（16分）子葉黃黃色（Y，野野生型）和綠綠色（y，突突變型）是孟孟德爾研究的的豌豆相對性性狀之一。野野生型豌豆成成熟后，子葉葉由綠色變?yōu)闉辄S色。突變植株y2用含有Y基因因的農(nóng)桿菌感感染純合突變變植株y2（3）水稻Y基因發(fā)生突變變，也出現(xiàn)了了類似的“常常綠”突變植植株y2，其葉片衰老老后仍為綠色色。為驗證水水稻Y基因的功能，，設(shè)計了以下下實驗，請完完善。（二）預(yù)測轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因植株的的表現(xiàn)型：植株甲：________維持“常綠””；植株乙：________________。（三）推測結(jié)結(jié)論：__________________________。（2012廣東）28．．（16分））子葉黃色（（Y，野生型型）和綠色（（y，突變型型）是孟德爾爾研究的豌豆豆相對性狀之之一。野生型型豌豆成熟后后，子葉由綠綠色變?yōu)辄S色色。能不能維持“常常綠”Y基因能使子子葉由綠色變變?yōu)辄S色【解析】（1）根據(jù)題題干所給信息息“野生型豌豌豆成熟后，，子葉由綠色色變?yōu)辄S色””，可推測出出野生型豌豆豆成熟后，子子葉發(fā)育成的的葉片中葉綠綠素含量降低低。分析圖10，B從第第六天開始總總?cè)~綠素含量量明顯下降，，因此B代表表野生型豌豆豆，A為突變變型豌豆。（2）根據(jù)圖圖11可以看看出，突變型型的SGRy蛋白和野生生型的SGRY有3處變變異，①處氨氨基酸由T變變成S，②處處氨基酸由N變成K，可可以確定是基基因相應(yīng)的堿堿基對發(fā)生了了替換，③處處多了一個氨氨基酸，所以以可以確定是是發(fā)生了堿基基對的增添；；從圖11中中可以看出SGRY蛋白白的第12和和38個氨基基酸所在的區(qū)區(qū)域的功能是是引導(dǎo)該蛋白白進入葉綠體體，根據(jù)題意意，SGRy和SGRY都能進入葉葉綠體，說明明①、②處的的變異沒有改改變其功能；；所以突變型型的SGRy蛋白功能的的改變就是由由③處變異引引起的?！窘馕觥浚?）本實驗驗通過具體情情境考查對照照實驗設(shè)計能能力。欲通過過轉(zhuǎn)基因?qū)嶒烌烌炞CY基因因“能使子葉葉由綠色變?yōu)闉辄S色”的功功能，首先應(yīng)應(yīng)培育純合的的常綠突變植植株y2，然然后用含有Y基因的農(nóng)桿桿菌感染純合合的常綠突變變植株y2，，培育出含有有目的基因的的純合植株觀觀察其葉片顏顏色變化。為為了排除農(nóng)桿桿菌感染對植植株的影響，，應(yīng)用含有空空載體的農(nóng)桿桿菌感染常綠綠突變植株y2作為對照照。（2012江蘇）32.（9分）圖1表示含有目的的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和和部分堿基序序列，圖2表示一種質(zhì)粒粒的結(jié)構(gòu)和部部分堿基序列列?，F(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸酸內(nèi)切酶，它它們識別的堿堿基序列和酶酶切位點分別別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列列問題(1)圖1的一條脫氧核核苷酸鏈中相相鄰兩個堿基基之間依次由由連接。(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的的末端是末端，其產(chǎn)物物長度為。脫氧核糖、磷磷酸、脫氧核核糖平537bp、790bp、661bp“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012江蘇）32.（9分）圖1表示含有目的的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和和部分堿基序序列，圖2表示一種質(zhì)粒粒的結(jié)構(gòu)和部部分堿基序列列。現(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸酸內(nèi)切酶，它它們識別的堿堿基序列和酶酶切位點分別別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列列問題(3)若圖1中虛線方框內(nèi)內(nèi)的堿基對被被T-A堿基對替換，，那么基因D就突變?yōu)榛蛞騞。從雜合子中中分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制制酶SmaI完全切割，產(chǎn)產(chǎn)物中共有種不同長度的的DNA片段。4“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的的基因D通過同種限制制酶處理后進進行連接，形形成重組質(zhì)粒粒，那么應(yīng)選選用的限制酶酶是。在導(dǎo)入重組組質(zhì)粒后，為為了篩選出含含重組質(zhì)粒的的大腸桿菌，，一般需要用用添加的培養(yǎng)基進行行培養(yǎng)。經(jīng)檢檢測，部分含含有重組質(zhì)粒粒的大腸桿菌菌菌株中目的的基因D不能正確表達達，其最可能能的原因是。BamHI抗生素B同種限制酶切切割形成的末末端相同，部部分目的基因因D與質(zhì)粒反向鏈鏈接【解析】（1）DNA單鏈中相鄰兩兩個堿基之間間通過“脫氧氧核糖—磷酸—脫氧核糖”連連接。（2）SmaI識別的序列為為GGGCCC，切割后會產(chǎn)產(chǎn)生平末端；；圖1所示的DNA分子中含有兩兩個SmaI的識別位點，，第一個識別別位點在左端端534bp序列向右三個個堿基對的位位置；第二個個識別位點在在右端658bp序列向左三個個堿基對的位位置，從這兩兩個位點切割割后產(chǎn)生的DNA片段長度分別別為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長度分別別為537bp、790bp和661bp。（3）在雜合子體體內(nèi)含有基因因D和基因d，基因D的序列中含有有兩個識別位位點，經(jīng)過SmaI完全切割會產(chǎn)產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長度度的片段，基基因d的序列中含有有一個識別位位點，經(jīng)過切切割后會產(chǎn)生生1327bp和661bp兩種長度的片片段，綜上，，雜合子中分分離到該基因因的DNA片段經(jīng)過切割割后會產(chǎn)生4種不同長度的的片段。（4）能夠獲取目目的基因并切切開質(zhì)粒的限限制酶有識別別序列為GGATCC的BamHI和識別序列為為GATC的MboI，若使用MboI會同時破壞質(zhì)質(zhì)粒中的抗生生素A抗性基因和抗抗生素B抗性性基基因因，，所所以以要要用用BamHI來切切割割目目的的基基因因和和質(zhì)質(zhì)粒粒，，切切割割后后保保留留了了完完整整的的抗抗生生素素B抗性性基基因因，，便便于于篩篩選選出出含含有有重重組組質(zhì)質(zhì)粒粒的的大大腸腸桿桿菌菌。。因因為為目目的的基基因因和和運運載載體體是是用用同同種種限限制制酶酶切切割割的的，，目目的的基基因因兩兩端端的的末末端端和和質(zhì)質(zhì)粒粒切切割割后后的的兩兩個個末末端端都都能能進進行行互互補補，，可可能能出出現(xiàn)現(xiàn)目目的的基基因因反反向向連連接接在在運運載載體體上上的的情情況況，，導(dǎo)導(dǎo)致致基基因因D不能能正正確確表表達達。。（2012福建建））32．現(xiàn)現(xiàn)代代生生物物科科技技專專題題肺細細胞胞中中的的let-7基因因表表達達減減弱弱，，癌癌基基因因RAS表達達增增強強，，會會引引發(fā)發(fā)肺肺癌癌。。研研究究人人員員利利用用基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)將將let-7基因因?qū)?dǎo)入入肺肺癌癌細細胞胞實實現(xiàn)現(xiàn)表表達達，，發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)肺肺癌癌細細胞胞的的增增殖殖受受到到抑抑制制。。該該基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)基基本本流流程程如如圖圖１１。。（１１））進進行行過過程程①①時時，，需需用用__________酶切切開開載載體體以以插插入入let-7基因因。。載載體體應(yīng)應(yīng)有有RNA聚合合酶酶識識別別和和結(jié)結(jié)合合的的部部位位，，以以驅(qū)驅(qū)動動let-7基因因轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄，，該該部部位位稱稱為為。限制制性性核核酸酸內(nèi)內(nèi)切切酶酶（（或或限限制制））_啟動動子子“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012福建建））32．現(xiàn)現(xiàn)代代生生物物科科技技專專題題肺細細胞胞中中的的let-7基因因表表達達減減弱弱，，癌癌基基因因RAS表達達增增強強，，會會引引發(fā)發(fā)肺肺癌癌。。研研究究人人員員利利用用基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)將將let-7基因因?qū)?dǎo)入入肺肺癌癌細細胞胞實實驗驗表表達達，，發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)肺肺癌癌細細胞胞的的增增殖殖受受到到抑抑制制。。該該基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)基基本本流流程程如如圖圖１１。。（２２））進進行行過過程程②②時時，，需需用用酶處處理理貼貼附附在在培培養(yǎng)養(yǎng)皿皿壁壁上上的的細細胞胞，，以以利利于于傳傳代代培培養(yǎng)養(yǎng)。。胰蛋蛋白白“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（３３））研研究究發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)，，let-7基因因能能影影響響癌癌基基因因RAS的表達，，其影響響機理如如圖２。。據(jù)圖分分析，可可從細胞胞中提取取進行分子子雜交，，以直接接檢測let-7基因是否否轉(zhuǎn)錄。。肺癌細細胞增殖殖受到抑抑制，可可能是由由于細胞胞（RASmRNA/RAS蛋白）含含量減少少引起的的。RNARAS蛋白“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）過程①①表示基基因表達達載體的的構(gòu)建，，在該過過程中需需要用限限制酶對對載體進進行切割割以便于于目的基基因的插插入（限限制性核核酸內(nèi)切切酶，簡簡稱限制制酶，寫寫其他的的不得分分）；啟啟動子是是一段特特殊的DNA序列，是是RNA聚合酶結(jié)結(jié)合和識識別的位位點，RNA聚合酶結(jié)結(jié)合到該該位點，，可驅(qū)動動轉(zhuǎn)錄過過程。（2）過程②②表示動動物細胞胞培養(yǎng)，，培養(yǎng)過過程中出出現(xiàn)接觸觸抑制后后可以用用胰蛋白白酶處理理，使之之分散成成單個的的細胞，，之后分分裝到其其他培養(yǎng)養(yǎng)瓶里面面進行傳傳代培養(yǎng)養(yǎng)。（3）判斷目目的基因因是否在在受體細細胞中轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄，可可用分子子雜交技技術(shù)來進進行，從從細胞中中提取mRNA和用放射射性同位位素或者者熒光標(biāo)標(biāo)記的目目的基因因單鏈DNA片段進行行雜交。。根據(jù)題題中信息息“肺組組織細胞胞中的let-7基因表達達減弱，，癌基因因RAS表達就增增強，引引發(fā)肺癌癌”導(dǎo)入入let7基因后，，肺癌細細胞受到到抑制，，說明RAS基因表達達減弱，，導(dǎo)致細細胞中的的RAS蛋白質(zhì)含含量減少少進而導(dǎo)導(dǎo)致癌細細胞受抑抑制。（2012安徽）31．（24分）甲型血友病是由X染色體上的隱性基因?qū)е碌倪z傳?。℉對h為顯性）。圖1中兩個家系都有血友病發(fā)病史，Ⅲ2和Ⅲ3婚后生下一個性染色體組成是XXY的非血友病兒子（IV2），家系中的其他成員性染色體組成均正常?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（1）根據(jù)圖圖1，（填“能能”或““不能””）確定定IV2兩條X染色體的的來源；；III4與正常女女子結(jié)婚婚，推斷斷其女兒兒患血友友病的概概率是。0不能“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2）兩個家家系的甲甲型血友友病均由由凝血因因子Ⅷ（簡稱F8，即抗血血友病球球蛋白））基因堿堿基對缺缺失所致致。為探探明IV2的病因，，對家系系的第Ⅲ、IV代成員F8基因的特特異片段段進行了了PCR擴增，其其產(chǎn)物電電泳結(jié)果果如圖2所示，結(jié)結(jié)合圖1，推斷Ⅲ3的基因型型是。請用圖圖解和必必要的文文字說明明IV2非血友病病XXY的形成原原因。XHXh“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。圖解如下下：在Ⅲ3形成卵細細胞過程程中的減減數(shù)第二二次分裂裂后期，，帶有基基因H的姐妹染染色單體體移向細細胞同一一極，形形成XHXH的細胞，，XHXH卵細胞與與正常精精子結(jié)合合形成XHXHY受精卵（3）現(xiàn)III3再次懷孕，產(chǎn)前診斷顯示胎兒（IV3）細胞的染色體為46，XY；F8基因的PCR檢測結(jié)果如圖2所示。由此建議III3

?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（4）補給F8可治療甲甲型血友友病。采采用凝膠膠色譜法法從血液液中分離離純化F8時，在凝凝膠裝填填色譜柱柱后，需需要用緩緩沖液處處理較長長時間，，其目的的是；若F8比某些雜雜蛋白先先收集到到，說明明F8的相對分分子質(zhì)量量較這些些雜蛋白白。洗滌平衡衡凝膠，，并使凝凝膠裝填填緊密終止妊娠娠大“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（6）為獲得得更多的的轉(zhuǎn)基因因母豬，，可以采采用體細細胞克隆隆技術(shù)，，將純合合轉(zhuǎn)基因因母豬的的體細胞胞核注入入，構(gòu)成重重組胚胎胎進行繁繁殖。（5）利用轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因豬豬乳腺生生物反應(yīng)應(yīng)器可生生產(chǎn)F8。要使乳乳腺細胞胞合成F8，構(gòu)建表表達載體體時，必必須將F8基因cDNA與豬乳腺腺蛋白基基因的等調(diào)控組組件重組組在一起起。F8基因cDNA可通過克克隆篩選選獲得，，該cDNA比染色體體上的F8基因短，，原因是是該cDNA沒有。內(nèi)含子啟動子去核的卵卵母細胞胞“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）因為Ⅳ2的染色體組成可能是XHXH，也可能是XHXhY，所以不能確定，Ⅲ4的基因型為XHY，所以后代女性中沒有患病個體。（2）由圖可知第一條帶是顯性，第二條帶是隱性，所以Ⅲ3基因型為XHXh，圖解如下：在III3形成卵細胞過程中的減數(shù)第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細胞的同一極，形成XHXH卵細胞，XHXH卵細胞與正常精子結(jié)合形成XHXHY受精卵?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。說明：Ⅲ2產(chǎn)生正常常的Y精子和Ⅲ3產(chǎn)生異常常的卵細細胞XHXh結(jié)合而成成XHXhY“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。說明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細細胞XH結(jié)合而成成XHXhY或或說明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細細胞XH結(jié)合而成成XHXhY或或說明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細細胞XH結(jié)合而成成XHXhY或或說明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細細胞XH結(jié)合而成成XHXhY或說明：Ⅲ2產(chǎn)生正常常的Y精子和Ⅲ3產(chǎn)生異常常的卵細細胞XHXh結(jié)合而成XHXhY說明：Ⅲ2產(chǎn)生正常常的Y精子和Ⅲ3產(chǎn)生異常常的卵細細胞XHXh結(jié)合而成XHXhY“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）由題可知，IV3是血友病患者，所以建議III3終止妊娠。（4）采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長時間，其目的是洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密；若F8比某些雜蛋白先收集到，說明F8的相對分子質(zhì)量較這些雜蛋白較大。（5）要使乳腺細胞合成F8，構(gòu)建表達載體時，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的啟動子和終止子等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒有內(nèi)含子。（6）為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬，可以采用體細胞克隆技術(shù)，將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細胞核注入去核卵細胞，構(gòu)成重組胚胎進行繁殖?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012北京）5．高中中生物學(xué)學(xué)實驗中中，在接接種時不不進行嚴嚴格無菌菌操作對對實驗結(jié)結(jié)果影響響最大的的一項是是（））A．將少少許干酵酵母加入入到新鮮鮮的葡萄萄汁中B．將毛毛霉菌液液接種在在切成小小塊的鮮鮮豆腐上上C．將轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因植植物葉片片接種到到無菌培培養(yǎng)基上上D．將土土壤浸出出液涂布布在無菌菌的選擇擇培養(yǎng)基基上【解析】植物組織織培養(yǎng)中中的外植植體必須須在嚴格格的無菌菌環(huán)境中中進行培培養(yǎng)，而而且操作作的各環(huán)環(huán)節(jié)都要要注意嚴嚴格滅菌菌，必須須無菌操操作，C對；葡萄萄酒的制制作原理理是利用用酵母菌菌無氧發(fā)發(fā)酵時產(chǎn)產(chǎn)生酒精精，在無無氧條件件下，大大部分微微生物都都不能生生存，隨隨著發(fā)酵酵的進行行，酒精精度增大大，也有有殺菌的的作用；；而制作作腐乳時時，主要要是將毛毛霉等微微生物接接種在豆豆腐上，，此過程程的加鹽鹽、加鹵鹵湯等操操作均有有一定的的殺菌作作用；選選擇培養(yǎng)養(yǎng)基只能能允許目目的菌生生長，會會抑制其其他雜菌菌生長，，因此不不是嚴格格無菌操操作時A、B、D選項的情情況下比比C選項的受受影響要要小。C（2012海南）31.【【生物——選修3：現(xiàn)代代生物科科技專題題】（15分））已知甲種種農(nóng)作物物因受到到乙種昆昆蟲危害害而減產(chǎn)產(chǎn)，乙種種昆蟲食食用某種種原核生生物分泌泌的丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)后死亡亡。因此此，可將將丙種蛋蛋白質(zhì)基基因轉(zhuǎn)入入到甲種種農(nóng)作物物體內(nèi)，，使甲種種農(nóng)作物物獲得抗抗乙種昆昆蟲危害害的能力力?；卮鹣铝辛袉栴}：：（1）為為了獲得得丙種蛋白質(zhì)質(zhì)的基因因，在已已知丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)氨基酸酸序列的的基礎(chǔ)上上，推測測出丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)的_______序列，，據(jù)此可可利用________方法法合成目目的基因因。獲得得丙種蛋白質(zhì)質(zhì)的基因因還可用用_______、____________方法法。（2）在在利用上上述丙中中蛋白質(zhì)質(zhì)基因和和質(zhì)粒載載體構(gòu)建建重組質(zhì)質(zhì)粒的過過程中，，常需使使用__________酶酶和__________。。PCR化學(xué)基因基因文庫庫DNA連接酶限制（2012海南）31.【【生物——選修3：現(xiàn)代代生物科科技專題題】（15分））已知甲種種農(nóng)作物物因受到到乙種昆昆蟲危害害而減產(chǎn)產(chǎn)，乙種種昆蟲食食用某種種原核生生物分泌泌的丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)后死亡亡。因此此，可將將丙種蛋蛋白質(zhì)基基因轉(zhuǎn)入入到甲種種農(nóng)作物物體內(nèi)，，使甲種種農(nóng)作物物獲得抗抗乙種昆昆蟲危害害的能力力?；卮鹣铝辛袉栴}：：（3）將將含有重重組質(zhì)粒粒的農(nóng)桿桿菌與甲甲種農(nóng)作作物的愈愈傷組織織共培養(yǎng)養(yǎng)，篩選選出含有有丙種蛋蛋白質(zhì)的的愈傷組組織，由由該愈傷傷組織培培養(yǎng)成的的再生植植株可抵抵抗_____________的的危害。。（4）若若用含有有重組質(zhì)質(zhì)粒的農(nóng)農(nóng)桿菌直直接感染染甲種農(nóng)農(nóng)作物植植株葉片片傷口，，則該植植株的種種子_________（填填“含有有”或““不含””）丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)基因。。乙種昆蟲蟲不含【解析】（1）在已知知蛋白質(zhì)質(zhì)的氨基基酸序列列的情況況下，可可根據(jù)氨氨基酸和和堿基的的對應(yīng)關(guān)關(guān)系，推推出合成成該蛋白白質(zhì)的基基因序列列，然后后用DNA合成儀通通過化學(xué)學(xué)方法來來合成目目的基因因。此外外也可以以從基因因文庫中中獲取目目的基因因，也可可通過PCR方法獲獲取目目的基基因。。（2）構(gòu)建建重組組質(zhì)粒粒時，，需要要用限限制酶酶將運運載體體切開開，并并用DNA連接酶酶將目目的基基因連連接到到運載載體上上，從從而構(gòu)構(gòu)建基基因表表達載載體。。（3）愈傷傷組織織中含含有丙丙蛋白白，說說明丙丙蛋白白的基基因得得到了了表達達，在在培養(yǎng)養(yǎng)成的的植株株體內(nèi)內(nèi)也含含有丙丙蛋白白，乙乙昆蟲蟲食用用丙蛋蛋白后后會死死亡，，則該該植株株可抵抵抗乙乙昆蟲蟲的危危害。。（4）直接接用含含有重重組質(zhì)質(zhì)粒的的農(nóng)桿桿菌直直接感感染甲甲種農(nóng)農(nóng)作物物植株株葉片片傷口口，僅僅僅在在該葉葉片內(nèi)內(nèi)部分分細胞胞中能能合成成丙蛋蛋白，，該植植株的的種子子和其其他的的營養(yǎng)養(yǎng)器官官均不不含有有重組組質(zhì)粒粒，也也就不不含有有丙中中蛋白白質(zhì)的的基因因。（2011重慶））31.（16分）擬擬南芥芥是遺遺傳學(xué)學(xué)研究究的模模式植植物，，某突突變體體可用用于驗驗證相相關(guān)的的基因因的功功能。。野生生型擬擬南芥芥的種種皮為為深褐褐色（（TT），某某突變變體的的種皮皮為黃黃色（（tt）,下圖是是利用用該突突變體體驗證證油菜菜種皮皮顏色色基因因(Tn)功能的的流程程示意意圖。?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（1）與擬擬南芥芥t基因的的mRNA相比，，若油油菜Tn基因的的mRNA中UGA變?yōu)椋粒粒牵粒?，其其末端端序列列成為為“－－ＡＧＧＣＧＧＣＧＧＡＣＣＣＡＡＧＡＡＣＵＵＣＵＵＡＡＡ”，，則Tn比ｔ多多編碼碼個氨基基酸（（起始始密碼碼子位位置相相同，，ＵＧＧＡ、、ＵＡＡＡ為為終止止密碼碼子））。（2）圖中中①應(yīng)應(yīng)為。若②②不能能在含含抗生生素Kan的培養(yǎng)養(yǎng)基上上生長長，則則原因因是。若③③的種種皮顏顏色為為，則說說明油油菜Tn基因與與擬南南芥T基因的的功能能相同同。2重組質(zhì)質(zhì)粒重組質(zhì)質(zhì)粒未未導(dǎo)入入深褐色色（3））假設(shè)設(shè)該油油菜Tn基因連連接到到擬南南芥染染色體體并替替換其其中一一個t基因因，則則③中中進行行減數(shù)數(shù)分裂裂的細細胞在在聯(lián)會會時的的基因因型為_____；同時時，③③的葉葉片卷卷曲（（葉片片正常常對葉葉片卷卷曲為為顯性性，且且與種種皮性性狀獨獨立遺遺傳）），用用它與與種皮皮深褐褐色、、葉片片正常常的雙雙雜合合體擬擬南芥芥雜交交，其其后代代中所所占比比列最最小的的個體體表現(xiàn)現(xiàn)______________取③的的莖尖尖培養(yǎng)養(yǎng)成16顆顆植珠珠，其其性狀狀通常常________（填填“不變”或“改變”）。（4））所得得的轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因因擬南南芥與與野生生型擬擬南芥芥______（填填“是”或者“不是”）同一一個物物種。。TnTntt黃色正正常、、黃黃色卷卷曲不變是“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥客ㄟ^對對基因因工程程和遺遺傳知知識的的相結(jié)結(jié)合來來考察察學(xué)生生對該該部分分知識識的掌掌握，，屬中中檔題題，較較難。。油菜菜Tn基因的的mRNA中UGA變?yōu)锳GA，而末末端序序列為為“—AGCGCGACCAGACUCUAA—””，在擬擬南芥芥中的的UGA本是終終止密密碼子子不編編碼氨氨基酸酸，而而在油油菜中中變?yōu)闉锳GA可編碼碼一個個氨基基酸，，而CUC還可編編碼一一個氨氨基酸酸，直直到UAA終止密密碼子子不編編碼氨氨基酸酸。假設(shè)油油菜Tn基因連連接到到擬南南芥染染色體體并替替換其其是一一個t基因，，注意意擬南南芥是是指實實驗有有的突突變體體tt，所以以③轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因因擬南南芥基基因型型為Tnt，減數(shù)數(shù)分裂裂聯(lián)會會時形形成四四分體體是由由于染染色體體進行行了復(fù)復(fù)制，，基因因也進進行了了復(fù)制制，因因而基基因型型為TnTntt。設(shè)③③轉(zhuǎn)基基因擬擬南芥芥的葉葉片卷卷曲與與正常常葉是是由B、b基因控控制，，正常常葉為為顯性性，而而對該該性狀狀與種種皮性性狀為為獨立立遺傳傳，則則這兩兩對性性狀遵遵循基基因的的分離離與自自由組組合定定律。。則：：③轉(zhuǎn)基基因擬擬南芥芥（Tntbb）雙雙雜雜合擬擬南芥芥（TtBb）進行逐逐對分分析：：TntTt→1/4TnT、1/4Tnt、1/4Tt、1/4tt由于Tn和T的功能能相同同，所所以表表示為為：3/4T_（深褐褐色））、1/4tt（黃色色）BbBb→1/2Bb（正常常葉））、1/2bb（卷曲曲葉））所以后后代中中有四四種表表現(xiàn)型型：3/8種皮深深褐色色正常常葉；；3/8種皮深深褐色色卷曲曲葉；；1/8種皮黃黃色正正常葉葉；1/8種皮黃黃色卷卷曲葉葉。?、坜D(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因因擬南南芥的的莖尖尖培養(yǎng)養(yǎng)為植植物組組織為為無性性繁殖殖，所所以后后代性性狀一一般不不變。。（排排除基基因突突變））由上可可知所所得③③轉(zhuǎn)基基因擬擬南芥芥Tnt和野生生型擬擬南芥芥TT兩個品品種相相當(dāng)于于發(fā)生生基因因突變變，沒沒有隔隔離，，能雜雜交產(chǎn)產(chǎn)生可可育后后代，，因此此是同同一個個種。。（2011江蘇））14．．關(guān)于于現(xiàn)代代生物物技術(shù)術(shù)應(yīng)用用的敘敘述,錯誤的是（（）A．蛋白質(zhì)質(zhì)工程可合合成自然界界中不存在在的蛋白質(zhì)質(zhì)B．體細胞胞雜交技術(shù)術(shù)可用于克克隆動物和和制備單克克隆抗體C．植物組組織培養(yǎng)技技術(shù)可用于于植物莖尖尖脫毒D．動物細細胞培養(yǎng)技技術(shù)可用于于轉(zhuǎn)基因動動物的培養(yǎng)養(yǎng)B（2011福建）32.[現(xiàn)代生物科科技專題]一對表現(xiàn)型型正常的夫夫婦，生了了一個鐮刀刀型細胞貧貧血癥（常常染色體隱隱性遺傳病?。┗純?。。在他們欲欲生育第二二胎時，發(fā)發(fā)現(xiàn)妻子的的雙側(cè)輸卵卵管完全堵堵塞，不能能完成體內(nèi)內(nèi)受精。醫(yī)醫(yī)生為該夫夫婦實施了了體外受精精和產(chǎn)前基基因診斷，，過程如右右圖。②受精卵早期胚胎子宮羊水中的胎兒細胞妻子卵子丈夫精子③擴增產(chǎn)物酶切產(chǎn)物抽取、分離PCRMstⅡ父、母、患兒酶切產(chǎn)物父母患兒胎兒④電泳條帶加樣孔基因分析電泳帶譜“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。請回答：（1）過程程①是指在在體外進行行__________的處處理，從而而使精子與與卵細胞結(jié)合形成受受精卵；過過程②稱為為_________。（2）在對對胎兒進行行鐮刀型細胞貧血癥癥的產(chǎn)前基基因診斷時時，要先從從羊水中的的胎兒細胞胞提取物質(zhì)質(zhì)③_______進行PCR擴增。。然后用MstⅡ?qū)U增產(chǎn)產(chǎn)物進行切切割，產(chǎn)生生多個片段段的酶切產(chǎn)產(chǎn)物。據(jù)此此判斷，MstⅡ是一種________酶。。（3）不同同長度的酶酶切產(chǎn)物在在電泳時移移動的速率率不同，形形成不同的的電泳條帶帶。該家庭庭成員的鐮鐮刀型細胞胞貧血癥基基因分析的的電泳帶譜譜如④，據(jù)據(jù)此判斷胎胎兒為______（正常/患者/攜攜帶者）。。限制酶DNA精子獲能胚胎移植正常（2011北京）31.T-DNA可隨機插入植物基因因組內(nèi)，導(dǎo)導(dǎo)致被插入基因因發(fā)生突變變。用此方法誘誘導(dǎo)擬南芥芥產(chǎn)生突變體的的過程如下下：種植野生型型擬南芥，，待植株形成花蕾時時，將地上部分浸入入農(nóng)桿菌（（其中的T-DNA上帶有抗除除草劑基因））懸浮液中中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。。在適宜條條件下培養(yǎng)，收收獲種子（（稱為T1代）。T-DNA被插入的基因片段環(huán)狀DNA示意圖A、B、C、D表示能與T-DNA鏈互補、長度相等的單鏈DNA片段；箭頭指示DNA合成方向（2011北京）31.T-DNA可隨機插入植物基因因組內(nèi)，導(dǎo)導(dǎo)致被插入基因因發(fā)生突變變。用此方法誘誘導(dǎo)擬南芥芥產(chǎn)生突變體的的過程如下下：種植野生型型擬南芥，，待植株形成花蕾時時，將地上部分浸入入農(nóng)桿菌（（其中的T-DNA上帶帶有抗除草劑基因））懸浮液中中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。。在適宜條條件下培養(yǎng)，收收獲種子（（稱為T1代）?！皾h水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（1）為促促進植株側(cè)側(cè)枝發(fā)育以以形成更多多的花蕾，，需要去除除_____，因為后后者產(chǎn)生的的_______會會抑制側(cè)芽芽的生長。。（2）為篩篩選出已轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化的個體體，需將T1代播種在含含_______的的培養(yǎng)基上上生長，成成熟后自交交，收獲種種子（稱為為T2代）。（3）為篩篩選出具有有抗鹽性狀狀的突變體體，需將T2代播種在含含____的的培養(yǎng)基上上，獲得所所需個體。。（4）經(jīng)過過多代種植植獲得能穩(wěn)穩(wěn)定遺傳的的抗鹽突變變體。為確確定抗鹽性性狀是否由由單基因突突變引起，，需將該突突變體與________植株進行雜雜交，再自自交_____代后后統(tǒng)計性狀狀分離比。。（5）若上上述T-DNA的插插入造成了了基因功能能喪失，從從該突變體體的表現(xiàn)型型可以推測測野生型基基因的存在在導(dǎo)致植物物的抗鹽性性_______。。生長素除草劑頂芽鹽野生型1降低（6）根據(jù)據(jù)T-DNA的已知知序列，利利用PCR技術(shù)可以以擴增出被被插入的基基因片段。。其過程是是：提取__植株的DNA，用限限制酶處理理后，再用用_________將獲得的DNA片段段連接成環(huán)環(huán)（如右圖圖）以此為為模板，從從圖中A、、B、C、、D四種單單鏈DNA片斷中選選取______作作為引物進進行擴增，，得到的片片斷將用于于獲取該基基因的全序序列信息。。DNA連接酶突變體B、C（2011廣東）27.登革熱病毒毒感染蚊子子后，可在在蚊子唾液液腺中大量量繁殖，蚊蚊子在叮咬咬人時將病病毒傳染給給人，可引引起病人發(fā)發(fā)熱、出