免疫細(xì)胞標(biāo)志與功能檢測技術(shù)_第1頁
免疫細(xì)胞標(biāo)志與功能檢測技術(shù)_第2頁
免疫細(xì)胞標(biāo)志與功能檢測技術(shù)_第3頁
免疫細(xì)胞標(biāo)志與功能檢測技術(shù)_第4頁
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文檔簡介

掌握:免疫細(xì)胞的分離;淋巴細(xì)胞功能檢測熟悉:免疫細(xì)胞表面標(biāo)志和功能檢測的臨床

應(yīng)用;淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志及亞群分類;了解:其他免疫細(xì)胞功能檢測技術(shù);檢測的

臨床應(yīng)用。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第一頁,共八十二頁。一、免疫細(xì)胞的分離二、淋巴細(xì)胞標(biāo)志及亞群分類三、抗原提呈細(xì)胞的表面標(biāo)志四、淋巴細(xì)胞的功能檢測五、其他免疫細(xì)胞功能檢測技術(shù)六、免疫細(xì)胞表面標(biāo)志和功能檢測的臨床應(yīng)用齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二頁,共八十二頁。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三頁,共八十二頁。一、外周血單個(gè)核細(xì)胞分離二、淋巴細(xì)胞的分離三、T、B細(xì)胞和T細(xì)胞亞群的分離四、不同分離方法的評價(jià)第一節(jié)免疫細(xì)胞的分離掌握齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四頁,共八十二頁。外周血單個(gè)核細(xì)胞(perpheralbloodmononuclearcells,PBMC):包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。一、外周血單個(gè)核細(xì)胞分離掌握齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五頁,共八十二頁。1.不同細(xì)胞密度不同2.不同細(xì)胞表面生物學(xué)特性不同3.不同細(xì)胞表面分化抗原不同細(xì)胞分離基本原理了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六頁,共八十二頁。紅細(xì)胞和粒細(xì)胞密度為1.092-1.093單個(gè)核細(xì)胞密度為

選擇比重為1.075-1.090介質(zhì)分離PBMC不同細(xì)胞密度不同熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七頁,共八十二頁。對分離介質(zhì)的要求1.對細(xì)胞無毒2.基本等滲3.不溶于血漿等分離物質(zhì)4.有要求的比重2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液+1份34%泛影葡胺比重為1.077±0.002熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第八頁,共八十二頁。聚蔗糖泛影葡胺--Ficoll分離液原理:單次差速密度梯度離心的分離法組成:2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液+1份34%泛影葡胺生理鹽水溶液。比重:1.077±0.001(最佳)

掌握齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第九頁,共八十二頁。

1.077±0.001的分層液可將細(xì)胞分離紅細(xì)胞:1.093粒細(xì)胞:1.092單個(gè)核細(xì)胞1.076—1.090

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十頁,共八十二頁。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十一頁,共八十二頁。

密度梯度離心(Ficoll)離心

細(xì)胞純度95%;細(xì)胞收率80%;淋巴細(xì)胞90%--95%

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十二頁,共八十二頁。1.貼壁粘附法

2.吸附柱過濾法:

將PBMC加入葡聚糖凝膠SephadexG-10中,從柱上洗脫下來的主要是淋巴細(xì)胞。3.Percoll分離液法:經(jīng)聚乙烯吡咯烷酮(PVP)處理的硅膠顆粒。目的--去除單核細(xì)胞二、淋巴細(xì)胞分離掌握齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十三頁,共八十二頁。

死細(xì)胞、血小板

單核細(xì)胞

淋巴細(xì)胞

粒細(xì)胞紅細(xì)胞

Percoll:經(jīng)聚乙烯吡咯烷酮(PVP)處理的硅膠顆粒。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十四頁,共八十二頁。(一)磁性微球分離法(二)熒光激活細(xì)胞分離儀分離法

三、T、B細(xì)胞和T細(xì)胞亞群的分離熟悉磁珠高分子材料齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十五頁,共八十二頁。磁珠大小可以選擇齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十六頁,共八十二頁。磁性微球分離法細(xì)胞分選過程齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十七頁,共八十二頁。

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十八頁,共八十二頁。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第十九頁,共八十二頁。大小免疫磁珠分離細(xì)胞的特點(diǎn)比較

比較項(xiàng)目大磁珠小磁珠對細(xì)胞的影響對細(xì)胞造成機(jī)械壓力,影響其生物學(xué)活性,不利于分離后培養(yǎng)。對細(xì)胞溫和,不影響分離細(xì)胞的后續(xù)培養(yǎng)。對流式細(xì)胞儀的影響阻塞流式細(xì)胞儀的噴嘴,影響散射光??芍苯由狭魇郊?xì)胞儀檢測,不影響散射光。分離條件要求技術(shù)簡單,分離可在試管中完成。需要很強(qiáng)的磁場來分離細(xì)胞。收率得率高。得率不高。純度純度低。純度高。分離時(shí)間分離速度快。分離速度慢。分離成本成本低。需要很強(qiáng)的磁場來分離,需要一次性分離柱,不能在普通試管齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十頁,共八十二頁。免疫磁珠細(xì)胞分選裝置齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十一頁,共八十二頁。全自動(dòng)細(xì)胞分選系統(tǒng)

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十二頁,共八十二頁。

熒光激活細(xì)胞分離儀分離法

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十三頁,共八十二頁。流式細(xì)胞分析儀齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十四頁,共八十二頁。四、不同細(xì)胞分離方法的綜合評價(jià)早期:根據(jù)不同免疫細(xì)胞的物理屬性和生物學(xué)屬性進(jìn)行分離近期:利用細(xì)胞表面標(biāo)志進(jìn)行分離了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十五頁,共八十二頁。1.分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,單次差速密度梯度離心法常用分層液是()A明膠B右旋糖酐CFicoll分層液DPercoll分層液E葡聚糖2.Ficoll液單次密度梯度離心后外周血細(xì)胞分布由上至下依次為()A單個(gè)核細(xì)胞、血小板和血漿、粒細(xì)胞、紅細(xì)胞B血小板和血漿、粒細(xì)胞、單個(gè)核細(xì)胞、紅細(xì)胞C血小板和血漿、單個(gè)核細(xì)胞、粒細(xì)胞、紅細(xì)胞D血小板和血漿、單個(gè)核細(xì)胞、紅細(xì)胞、粒細(xì)胞E血小板和血漿、紅細(xì)胞、單個(gè)核細(xì)胞、粒細(xì)胞用玻璃纖3.維或葡聚糖凝膠Sephadex-G10柱分離細(xì)胞時(shí),從柱上洗脫下的細(xì)胞主要是()A.粒細(xì)胞B.淋巴細(xì)胞C.單核細(xì)胞D.T細(xì)胞E.B細(xì)胞

CCB齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十六頁,共八十二頁。4.采用Ficoll密度梯度分離法分離得到的細(xì)胞主要為()A單核細(xì)胞和粒細(xì)胞B單核細(xì)胞C淋巴細(xì)胞D淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞E淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞

5.Percoll分離液的主要成分是()A.聚蔗糖

B.泛影葡胺

C.聚乙二醇D.聚乙烯吡咯烷酮E.經(jīng)聚乙烯吡咯烷酮處理的硅膠顆粒6.分離人外周血淋巴細(xì)胞分層液的最佳密度為()A.1.030B.1.035C.1.092D.1.020E.1.0777.Ficoll淋巴細(xì)胞分離液的主要成分是()A.聚蔗糖

B.泛影葡胺

C.聚乙二醇D.聚蔗糖+泛影葡胺

E.聚蔗糖+聚乙二醇DEED齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十七頁,共八十二頁。第二節(jié)

淋巴細(xì)胞標(biāo)志及亞群分類齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十八頁,共八十二頁。細(xì)胞表面分化抗原(ClusterofdifferentiationCD)CD1a------CD350齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第二十九頁,共八十二頁。(一)CD3+CD4+CD8-輔助性T細(xì)胞(Th)

CD3+CD4+CD30-Th1CD3+CD4+CD30+Th2(二)CD3+CD4-CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)(三)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+

Tr1–IL-10Th3–TFG-β一、T細(xì)胞表面標(biāo)志及亞群熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十頁,共八十二頁。CD4+Th細(xì)胞亞群分化的調(diào)節(jié)作用第三十一頁,共八十二頁。CD抗原CD2CD3CD4CD8CD25CD28CD40L特異性全部T細(xì)胞和部分NK細(xì)胞(E受體)

成熟T細(xì)胞(特征性標(biāo)志)輔助性T細(xì)胞(HIV受體)細(xì)胞毒性T細(xì)胞活化T細(xì)胞(IL-2R)T細(xì)胞活化T細(xì)胞

T細(xì)胞表面主要CD抗原及其特性齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十二頁,共八十二頁。mIg(鑒定B細(xì)胞的指標(biāo))Fc受體補(bǔ)體受體EB病毒受體CD分子:CD19小鼠紅細(xì)胞受體二、B細(xì)胞表面標(biāo)志熟悉分類:B1(CD19+CD5+)B2(CD19+CD5-)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十三頁,共八十二頁。B-1細(xì)胞和B-2細(xì)胞的異同第三十四頁,共八十二頁。CD抗原CD21CD35CD40CD80/86CD19/CD5

特異性

EB病毒受體活化B細(xì)胞與CD40L結(jié)合活化B細(xì)胞與T細(xì)胞CD28結(jié)合,活化T細(xì)胞

B1雙陽;B2僅為CD19+

B細(xì)胞表面主要CD抗原及其特性齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十五頁,共八十二頁。CD3-CD56+CD16+三、NK細(xì)胞表面標(biāo)志(naturekillercell,NK)熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十六頁,共八十二頁。復(fù)習(xí)1.對細(xì)胞液分離的要求?2.從PBMC中得到淋巴細(xì)胞的方法?3.成熟T細(xì)胞表面主要標(biāo)志?4.B細(xì)胞根據(jù)什么主要標(biāo)志分為何種亞群?第三十七頁,共八十二頁??乖岢暑惣?xì)胞表面標(biāo)志第三節(jié)抗原提呈細(xì)胞的表面標(biāo)志CD1a,CD11c,CD83齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十八頁,共八十二頁。一、單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)組織部位細(xì)胞名稱骨髓干細(xì)胞—單核母細(xì)胞—前單核細(xì)胞骨髓和血液單核細(xì)胞各種組織組織細(xì)胞(結(jié)締組織),枯否細(xì)胞(肝)(巨噬細(xì)胞)破骨細(xì)胞(骨)、小膠質(zhì)細(xì)胞(神經(jīng)組織)、表面標(biāo)志:CD14熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第三十九頁,共八十二頁。二、樹突狀細(xì)胞(dendriticcell)抗原提呈能力最強(qiáng)DC的共同特征包括:①形態(tài)上呈樹突狀,胞質(zhì)內(nèi)存在特異性Birbeck顆粒狀結(jié)構(gòu)②表達(dá)CD1a、高水平MHC-Ⅱ類抗原和多種輔助分子③吞噬功能較低④可有效誘導(dǎo)巢居的靜息性幼稚T細(xì)胞發(fā)生增殖熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十頁,共八十二頁。1.用抗人CD3單克隆抗體檢測T淋巴細(xì)胞,其結(jié)果代表()AT淋巴細(xì)胞總數(shù)BTh細(xì)胞數(shù)CTs細(xì)胞數(shù)DCD4T細(xì)胞數(shù)ECD8T細(xì)胞數(shù)2.下列指標(biāo)可以評價(jià)AIDS病人的細(xì)胞免疫功能的是()ACD2/CD3細(xì)胞比值BCD3/CD4細(xì)胞比值CCD3/CD8細(xì)胞比值DCD4/CD8細(xì)胞比值ECD2/CD4細(xì)胞比值3.能與SRBC結(jié)合形成E花環(huán)的細(xì)胞主要是()A.T細(xì)胞B.B細(xì)胞C.單核細(xì)胞D.粒細(xì)胞E.血小板

ADA齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十一頁,共八十二頁。4.B細(xì)胞重要表面標(biāo)志不包括()A膜免疫球蛋白(SmIg)BEB病毒受體CE受體D補(bǔ)體受體D小鼠紅細(xì)胞受體5.

NK細(xì)胞特有的表面抗原是()A.CD2B.CD16C.無特異的表面抗原D.CD23E.CD566.單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞的表面標(biāo)志()A.CD2B.CD16C.CD14

D.CD16E.CD197.外周成熟的休止B細(xì)胞分如下亞群()A.CD4+細(xì)胞

B.CD4-細(xì)胞C.CD8+細(xì)胞D.CD8-細(xì)胞E.B1細(xì)胞和B2細(xì)胞CCCE齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十二頁,共八十二頁。第四節(jié)

淋巴細(xì)胞功能檢測T細(xì)胞(負(fù)責(zé)細(xì)胞免疫功能)B細(xì)胞(執(zhí)行體液免疫功能)NK細(xì)胞(非特異性免疫作用)

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十三頁,共八十二頁。一、T細(xì)胞功能檢測(一)T細(xì)胞增殖試驗(yàn)(二)抗原特異性T細(xì)胞增值試驗(yàn)(三)MHC-肽四聚體技術(shù)(四)T細(xì)胞分泌功能測定(五)T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)(六)體內(nèi)試驗(yàn)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十四頁,共八十二頁。1.原理淋巴細(xì)胞DNA合成分化母細(xì)胞刺激物細(xì)胞變大細(xì)胞漿擴(kuò)大空泡核仁明顯核染色質(zhì)疏松(一)T淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)

---T細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)掌握齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十五頁,共八十二頁。T細(xì)胞外來物質(zhì)細(xì)胞內(nèi)大分子物質(zhì)的合成增加T細(xì)胞形態(tài)變化絲裂原:非抗原性刺激物

PHA、ConA、PWM抗原性刺激物:PPD(purifiedproteinderivative)同位素法形態(tài)法齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十六頁,共八十二頁。標(biāo)本:外周血單個(gè)核細(xì)胞37℃72h+取培養(yǎng)細(xì)胞涂片染色鏡檢觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變PHA無PHA刺激物:常用PHA(1)形態(tài)學(xué)檢查法齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十七頁,共八十二頁。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十八頁,共八十二頁。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第四十九頁,共八十二頁。淋巴細(xì)胞標(biāo)志及功能檢測龔道科2002.4齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十頁,共八十二頁。正常轉(zhuǎn)化率:60%-80%;

小于50%為降低齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十一頁,共八十二頁。優(yōu)點(diǎn):形態(tài)學(xué)方法簡便易行,適于基層實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。缺點(diǎn):判斷結(jié)果易受主觀因素影響,重復(fù)性和準(zhǔn)確性差。

方法學(xué)評價(jià):齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十二頁,共八十二頁。外周血單個(gè)核細(xì)胞37℃56h

+收集培養(yǎng)細(xì)胞液體閃爍器計(jì)數(shù)cpm加入3H-TdRPHA無PHA37℃16h(2)3H-TdR摻入法齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十三頁,共八十二頁。優(yōu)點(diǎn):3H-TdR摻入法敏感性高,客觀強(qiáng),重復(fù)性好。缺點(diǎn):但需一定設(shè)備條件,同時(shí)還存在放射性核素污染問題。SI=刺激指數(shù)PHA刺激管cpm均值

對照管cpm均值齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十四頁,共八十二頁。(3)MTT比色法

MTT(噻唑鹽)在活細(xì)胞內(nèi)被線粒體琥珀酸脫氫酶還原成藍(lán)黑色(甲臢)物質(zhì),與細(xì)胞增殖呈正相關(guān)。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十五頁,共八十二頁。方法學(xué)評價(jià):優(yōu)點(diǎn):操作簡便,無放射性污染缺點(diǎn):敏感性不及放射性核素法

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十六頁,共八十二頁。

感染性疾病,T細(xì)胞會(huì)形成對病原微生物的免疫記憶,在體外分離到T細(xì)胞后,培養(yǎng)增殖T細(xì)胞的同時(shí)加入相應(yīng)病原的特異抗原進(jìn)行刺激,激活該細(xì)胞的記憶,有記憶的細(xì)胞會(huì)分泌γ-干擾素,通過檢測γ-干擾素的量可以反映T細(xì)胞情況。(二)抗原特異性T細(xì)胞增值試驗(yàn)了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十七頁,共八十二頁。

通過TCR與MHC-肽的特異性相互作用,來檢測抗原特異的T細(xì)胞,了解機(jī)體的免疫狀況。(三)MHC-肽四聚體技術(shù)了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十八頁,共八十二頁。

免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)分別檢測細(xì)胞因子含量、生物學(xué)活性或基因表達(dá)水平。(四)T細(xì)胞分泌功能測定了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第五十九頁,共八十二頁。1.原理靶細(xì)胞抗原T細(xì)胞

觀察殺傷活力致敏CTL靶細(xì)胞(五)T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十頁,共八十二頁。形態(tài)學(xué)方法:淋巴細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)殘留腫瘤細(xì)胞同位素法:淋巴細(xì)胞(CTL)+含51Cr的腫瘤細(xì)胞腫瘤細(xì)胞破壞51Cr釋放γ計(jì)數(shù)儀測定51Cr放射活性意義:判斷腫瘤患者CTL殺傷腫瘤細(xì)胞的能力

2.方法齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十一頁,共八十二頁。(一)特異性抗原皮膚試驗(yàn)(OT)(二)PHA皮膚試驗(yàn)(六)體內(nèi)試驗(yàn)了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十二頁,共八十二頁。溶血空斑試驗(yàn)酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)二、B細(xì)胞功能檢測了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十三頁,共八十二頁。SRBC取出脾細(xì)胞,加入SRBC及補(bǔ)體4天37℃0.7%瓊脂溶液37℃

溶血溶血空斑試驗(yàn)1.原理齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十四頁,共八十二頁。一個(gè)溶血空斑表示一個(gè)抗體形成細(xì)胞。溶血空斑的大小表示抗體形成的量。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十五頁,共八十二頁。測定藥物或手術(shù)對體液免疫功能的影響評價(jià)免疫治療或免疫重建后機(jī)體體液免疫狀態(tài)

臨床應(yīng)用與評價(jià)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十六頁,共八十二頁。染色計(jì)數(shù)離心取上清測LDH形態(tài)學(xué)法酶釋放法放射性核素釋放法溶解靶胞細(xì)常用靶細(xì)胞:人K562細(xì)胞株鼠YAC-1

三、NK細(xì)胞活性測定熟悉

測放射活性齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十七頁,共八十二頁。方法及原理:靶細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞

靶細(xì)胞死亡可被臺盼蘭染色形態(tài)法釋放胞內(nèi)酶酶釋法乳酸脫氫酶堿性磷酸酶簡便易于操作

受主觀因素響大無法計(jì)數(shù)輕微損傷的細(xì)胞經(jīng)濟(jì)、快速、簡便敏感度低本底較高齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十八頁,共八十二頁。

一、中性粒細(xì)胞功能檢測技術(shù)

二、巨噬細(xì)胞功能檢測技術(shù)第五節(jié)其他免疫細(xì)胞功能檢測技術(shù)了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第六十九頁,共八十二頁。

趨化

吞噬

胞內(nèi)殺滅作用

吞噬細(xì)胞的功能熟悉齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十頁,共八十二頁。

趨化功能檢測吞噬和殺菌功能測定一、中性粒細(xì)胞功能的檢測了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十一頁,共八十二頁。1.原理中性粒細(xì)胞趨化因子:微生物細(xì)胞成分及其代謝產(chǎn)物補(bǔ)體活性片段C5a、C3a(一)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)功能—趨化功能檢測齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十二頁,共八十二頁。瓊脂糖平板法

濾膜滲透法(Boyden小室法)2.方法學(xué)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十三頁,共八十二頁。1.顯微鏡檢查法(二)吞噬和殺菌功能測定齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十四頁,共八十二頁。3.NBT還原試驗(yàn)6-磷酸葡萄糖

戊糖

NAD-+H+NADHNBT(硝基藍(lán)四氮唑)甲臜顆粒2.溶菌法6-磷酸葡萄糖脫氫酶齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十五頁,共八十二頁。(一)炭粒廓清試驗(yàn)(二)吞噬功能檢測(三)巨噬細(xì)胞溶酶體酶的測定(四)細(xì)胞毒作用測定(五)巨噬細(xì)胞促凝血活性測定二、巨噬細(xì)胞功能檢測了解齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十六頁,共八十二頁。反映機(jī)體免疫功能狀態(tài)。腫瘤、免疫缺陷病等疾病的診斷和疾

病預(yù)后監(jiān)測。組織器官移植后對受者細(xì)胞免疫學(xué)功

能監(jiān)測則有利于排斥反應(yīng)早期發(fā)現(xiàn)。第六節(jié)免疫細(xì)胞表面標(biāo)志和功能檢測的臨床應(yīng)用齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十七頁,共八十二頁。1.T細(xì)胞增殖試驗(yàn)的原理、刺激物及方法?2.將細(xì)胞分離的方法有哪些?思考題?齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十八頁,共八十二頁。1.評價(jià)人T細(xì)胞功能的試驗(yàn)()

A.血清Ig的測定B.溶血空斑

C.膜表面免疫球蛋白測定

D.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化E.E花環(huán)試驗(yàn)2.吞噬細(xì)胞吞噬的三個(gè)階段是()A.趨化/吸附/胞內(nèi)殺滅B.趨化/識別/吞噬C.趨化/識別/吸附D.趨化/識別/胞內(nèi)殺滅

E.趨化/吞噬/胞內(nèi)殺滅DE齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫第七十九頁,共八十二頁。3.將PBMC懸液加入尼龍毛柱內(nèi),充分反應(yīng)后進(jìn)行灌洗,先洗脫下來

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