第三章 培養(yǎng)基及其配制

第三章培養(yǎng)基本章的教學(xué)目標(biāo)

熟悉培養(yǎng)基的組成成分及其作用了解培養(yǎng)基的基本類型及其特點(diǎn)掌握培養(yǎng)基的配制、保存方法。本章的主要內(nèi)容培養(yǎng)基的成分培養(yǎng)基的類型及特點(diǎn)培養(yǎng)基的篩選、配制和保存培養(yǎng)基的概念培養(yǎng)基（medium）是外植體生長(zhǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它的組成對(duì)離體的植物器官和組織的生長(zhǎng)起著重要作用。沒(méi)有一種培養(yǎng)基能夠適合一切類型的植物組織或器官，在建立一項(xiàng)新的培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí)，首先必須找到一合適的培養(yǎng)基，培養(yǎng)才有可能成功。MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.6mg/L，MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.3mg/L。

MS+6-BA3.0mg/L+2,4-D0.2mg/L。MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.1mg/L。一、培養(yǎng)基的主要成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)附加物和天然的有機(jī)添加物質(zhì)瓊脂pH值無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)又叫礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)，指植物在生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)所需要的各種維持其正常生理活動(dòng)的化學(xué)元素。主要有：大量元素：微量元素：（一）無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分＞0.5mmol／L＜0.5mmol／LN：作用：是蛋白質(zhì)、酶、葉綠素、維生素、核酸、磷脂、生物堿等的組成成分形式：NO3—N和NH4—NP：作用：是磷脂的主要成分。形式：KH2P04或NaH2P04

K：作用：對(duì)碳水化合物合成、轉(zhuǎn)移、以及氮素代謝等有密切關(guān)系。形式：KCI、KN03等鹽類Mg、S

作用：Mg是葉綠素的組成成分，又是激酶的活化劑；S是含S氨基酸和蛋白質(zhì)的組成成分。形式：MgSO4·7H20Ca：作用：Ca是構(gòu)成細(xì)胞壁的一種成分，對(duì)細(xì)胞分裂、保護(hù)質(zhì)膜不受破壞有顯著作用形式：CaCl2·2H2O。1.大量元素：主要元素：Fe、B、Mn、Cu、Mo、Co等。Fe:

作用：是某些酶的組成成分：氧化酶、細(xì)胞色素氧化酶、過(guò)氧化氫酶是葉綠素形成的必要條件。培養(yǎng)基中的鐵對(duì)胚的形成、芽的分化和幼苗轉(zhuǎn)綠有促進(jìn)作用。形式：FeSO4·7H20和Na2—EDTA思考：為何不用Fe2（SO4）3，和FeCl3？B，Mn，Zn，Cu，Mo，Co等，也是植物組織培養(yǎng)中不可缺少的元素，缺少這些物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)、發(fā)育異?，F(xiàn)象。2.微量元素：（二）有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分碳源維生素肌醇（環(huán)己六醇）氨基酸種類：最常用：蔗糖葡萄糖和果糖也是較好的碳源，可支持許多組織很好的生長(zhǎng)。作用：糖作為碳源，為細(xì)胞提供合成新化合物的碳骨架為細(xì)胞的呼吸代謝提供底物與能源同時(shí)維持一定的滲透勢(shì)，并且能夠維持一定的滲透壓（一般在1.5～4.1×10５Pa）。濃度：在2%—3%，常用3%。高壓滅菌時(shí)，一部分糖會(huì)發(fā)生分解，制定配方時(shí)要給予考慮。在大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)，可用食用的綿白糖代替。1、碳源蔗糖（0%）蔗糖含量（

1%）蔗糖含量（5%）外植體完全被綠色的芽所包裹，根生長(zhǎng)在其下表面在外植體上既沒(méi)有芽發(fā)生，也沒(méi)有根和愈傷組織產(chǎn)生在外植體上表面邊緣產(chǎn)生芽，也有一些根發(fā)生芽從外植體的上表面發(fā)生而根從下表面發(fā)生tissuecultureintheAfricanViolet（非洲紫羅蘭）

主要作用：是以各種輔酶的形式參與多種代謝活動(dòng)，對(duì)生長(zhǎng)、分化等有很好的促進(jìn)作用。主要種類：VBl(鹽酸硫胺素)：愈傷組織的產(chǎn)生和生活力有重要作用VB6(鹽酸吡哆醇)：能促進(jìn)根的生長(zhǎng)Vpp(煙酸)：植物代謝和胚的發(fā)育有一定關(guān)系Vc（抗壞血酸）：有防止組織變褐的作用生物素、葉酸、VB12等。一般用量為0.1—1.0mg／L。2、維生素3、肌醇（環(huán)己六醇）作用：在糖類的相互轉(zhuǎn)化中起重要作用。適當(dāng)使用肌醇，能促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)以及胚狀體和芽的形成。對(duì)組織和細(xì)胞的繁殖、分化有促進(jìn)作用，對(duì)細(xì)胞壁的形成也有作用。使用濃度一般為l00mg／L作用：是很好的有機(jī)氮源，可直接被細(xì)胞吸收利用。絲氨酸和谷氨酰胺有利于花藥胚狀體或不定芽的分化。甘氨酸能促進(jìn)離體根的生長(zhǎng)，對(duì)植物組織培養(yǎng)物的生長(zhǎng)也有良好的促進(jìn)效果。種類：最常用：Gly其他：如Arg、Glu，Gln、Asp、Asn、Ala等也常用。用量為2～3mg/L4、氨基酸生長(zhǎng)素類(auxin)

（三）、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)細(xì)胞分裂素類赤霉素類生長(zhǎng)抑制劑類1、生長(zhǎng)素類(auxin)：作用：主要被用于誘導(dǎo)愈傷組織形成，誘導(dǎo)根的分化和促進(jìn)細(xì)胞分裂、伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。濃度：0.05－5mg／L。種類：IAA：天然存在的生長(zhǎng)素，其活力較低，是生長(zhǎng)素中活力最弱的激素，對(duì)器官形成的副作用小、，高溫高壓易被破壞，也易被細(xì)胞中的1AA分解酶降解，受光也易分解。NAA：耐高溫高壓，不易被分解破壞，所以應(yīng)用較普遍。IBA：促進(jìn)發(fā)根能力較強(qiáng)的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。NAA和IBA廣泛用于生根，并與細(xì)胞分裂素互作促進(jìn)芽的增殖和生長(zhǎng)。2，4—D：起動(dòng)能力比IAA高10倍，特別在促進(jìn)愈傷組織的形成上活力最高，但它強(qiáng)烈抑制芽的形成，影響器官的發(fā)育。強(qiáng)弱順順序?yàn)椋?,4-D＞NAA＞IBA＞IAA溶于95％酒精或0.1mol/L的NaOH種類：是腺嘌吟的衍生物6－BA：常用KT(kinetin）:激動(dòng)素ZT(zeatin

玉米素)：活性最強(qiáng)生理作用的強(qiáng)弱順序：ZT＞6-BA＞KT。濃度：0.05－10mg／L。

作用：誘導(dǎo)芽的分化促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)。促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大。抑制根的分化。2、細(xì)胞分裂素類生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比例兩種激素配比模式有利于根芽的分化有利于芽的形成有利于根的形成和愈傷組織的形成；高低適中NoBAP

（芐氨基嘌呤）BAPreducedto0.1mg.L-1

NoNAAPoorshootdevelopmentandnoroots.ExtensivecallusgenerationPoorshootdevelopmentandnorootsNAAreducedto0.1mg.L-1

Morebalanceddevelopmentofrootsandshoots.However,undifferentiatedcallusisdevelopingattheedgesoftheexplantProfusedevelopmentofrootsandareducednumberofshoots.UndifferentiatedcallusisdevelopingattheedgesoftheexplantNAAincreasedto5.0mg.l-1Profusedevelopmentofrootsovertheexplantupperandlowersurface,andfewshoots.SomecallusNosignofregenerationfromexplantatall.

Somerootgrowthbutreduceddevelopmentofshoots

Shootsdevelopedonuppersurfaceofexplant.Norootsorcallus.NoMSsaltsMSsaltsreducedto0.47g.l-1MSsaltsincreasedto9.52g.l-1作用：有20多種，生理活性及作用的種類、部位、效應(yīng)等各有不同。培養(yǎng)基中添加的是GA3，主要作用是促進(jìn)幼苗莖的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，促進(jìn)不定胚發(fā)育成小植株；赤霉素還用于打破休眠，促進(jìn)種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)。一般在器官形成后，添加赤霉素可促進(jìn)器官或胚狀體的生長(zhǎng)。赤霉素和生長(zhǎng)素協(xié)同作用：對(duì)形成層的分化有影響當(dāng)生長(zhǎng)素／赤霉素比值高時(shí)有利于木質(zhì)部分化比值低時(shí)有利于韌皮部分化；3、GA(赤霉素)：4、生長(zhǎng)抑制劑類作用：適當(dāng)種類和數(shù)量的生長(zhǎng)抑制劑能調(diào)節(jié)內(nèi)源和外源的植物激素，是他們所處的相互關(guān)系恰好能產(chǎn)生我們所希望的變化。種類：ABA三碘苯甲酸：可以促進(jìn)秋海棠葉片形成芽（Heide,1971）。矮壯素比久（B9）根皮苷：在培養(yǎng)基中加入適當(dāng)?shù)母ぼ湛商岣呱徣~秋海棠、雪松和月季的分化出苗效率（李洲，1983）用量為1~7mg/L。

間苯三酚（四）附加物和天然的有機(jī)添加物質(zhì)天然的有機(jī)添加物質(zhì)附加物活性炭、Vc等抗生物質(zhì)常用的有:椰乳：香蕉：水解酪蛋白：作用：對(duì)細(xì)胞和組織的增殖與分化有明顯的促進(jìn)作用，但對(duì)器官的分化作用不明顯。注意：其成分大多不清楚，所以一般應(yīng)盡量避免使用。1、天然的有機(jī)附加物：應(yīng)用：莖尖初代培養(yǎng)，可以吸附外植體產(chǎn)生的致死性褐化物，一般為0.1%—0.2%，不能超過(guò)0.2%?；钚蕴吭谏鶗r(shí)有明顯的促進(jìn)作用，可能是通過(guò)減弱光照保護(hù)IAA。降低玻璃苗的產(chǎn)生頻率，對(duì)防止產(chǎn)生玻璃苗有良好作用，一般濃度為0.3%?；钚蕴吭谂咛ヅ囵B(yǎng)中也有一定作用，如在葡萄胚珠培養(yǎng)時(shí)向培養(yǎng)基加入0.1%的活性炭，可減少組織變褐和培養(yǎng)基變色，產(chǎn)生較少的愈傷組織。作用：活性炭結(jié)構(gòu)疏松，孔隙大，吸水力強(qiáng)，有很強(qiáng)的吸附作用它可以吸附非極性物質(zhì)和色素等大分子物質(zhì)。濃度:0.5—l0g／L。2.活性炭注意：研究表示，每毫克的活性炭能吸附l00ng左右的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)大量的活性炭加入會(huì)削弱瓊脂的凝固能力，因此要多加一些瓊脂。很細(xì)的活性炭也易沉淀，通常在瓊脂凝固之前，要輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶。種類：青霉素、鏈霉素、慶大霉素等濃度：5—20mg/L作用：可防止菌類污染，減少培養(yǎng)中材料的損失。對(duì)于剛感染的組織材料，可向培養(yǎng)基中注入5%—10%的抗菌素。3.抗生物質(zhì)特性：瓊脂(agar)是固體培養(yǎng)基的必要成分瓊脂是一種由海藻中提取的高分子碳水化合物，本身并不提供任何營(yíng)養(yǎng)。瓊脂能溶解在熱水中，成為溶膠，冷卻至40℃即凝固為固體狀凝膠。用量：瓊脂條6—10g／L，瓊脂粉3—4g／L。（五）、瓊脂（六）pH培養(yǎng)的植物材料大多數(shù)要求弱酸性的環(huán)境一般應(yīng)將培養(yǎng)基的pH值用1mol/L的K0H或NaOH調(diào)整到pH5.6～5.8的范圍內(nèi)，有時(shí)調(diào)到pH6.0少數(shù)喜酸性的植物有用到pH5.4，甚至pH4.6的。二、培養(yǎng)基的類型及特點(diǎn)（一）培養(yǎng)基的類型基本培養(yǎng)基（根據(jù)培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽含量的不同）含鹽量高的培養(yǎng)基如:MS,LS,BL,BM,ER硝酸鉀含量高的培養(yǎng)基如:B5,N6,SH中等無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基如:H,Nitsch,Miller低無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基如:White,WS,HB應(yīng)用培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)基，又稱脫分化培養(yǎng)基。用作外植體誘導(dǎo)發(fā)生愈傷組織的培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)基：誘導(dǎo)出的愈傷組織需用一種培養(yǎng)基讓它繼續(xù)不斷地生長(zhǎng)下去。分化培養(yǎng)基：用于從愈傷組織誘導(dǎo)形成小苗（幼芽或胚狀體）的，稱為。生根培養(yǎng)基:為誘導(dǎo)再生小苗生根的培養(yǎng)基稱為。類型種類特點(diǎn)適應(yīng)范圍MS及其類似培養(yǎng)基MS(MurashigeandSkoog,1962)無(wú)機(jī)鹽成分含量較高，微量元素種類較全，濃度也較高應(yīng)用最廣，對(duì)許多植物均是適宜的LS(Linsmainer和Skoog,1965)由MS改進(jìn)，無(wú)機(jī)成分同MS，有機(jī)物僅保留鹽酸硫胺素0.4mg/L及肌醇100mg/L，蔗糖3%BL（Brown和Lawrene,1968）成分與MS類似BM(Button,1975)成分與MS類似，僅將鹽酸硫胺素除去，蔗糖為3%ER(Eriksson,1965)成分與MS類似硝酸鹽含量較高的培養(yǎng)基B5(Camborg等，1965)含有較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素，較低的銨態(tài)氮N6（朱至清等，1975）廣泛應(yīng)用于花藥培養(yǎng)SH(Scken和Hildebrandt,1972)礦質(zhì)鹽濃度較高，其中銨與磷酸是由NH4H2PO4提供的中等無(wú)機(jī)鹽含量的培養(yǎng)基H(Bourgin和Nitsch,1967)大量元素是MS的一半，微量元素種類減少而濃度較MS高，維生素種類較MS多Nitsch(1969)與H成分基本相同，僅生物素較H高10倍Miller(1963)和Blaydes(1966)二者成分完全相同，與MS比較，無(wú)機(jī)元素減少1/3~1/2，微量元素種類減少，無(wú)肌醇低無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基White(WH)無(wú)機(jī)鹽種類及用量均少于MS，約為MS的1/3WS(Wolter和Skoog,1966)適于生根培養(yǎng)HE(Heller,1953)鉀鹽和硝酸鹽是通過(guò)不同的化合物來(lái)提供的改良Nitsch(1951)常用于花藥和胚培養(yǎng)HB（Holley和Baker,1963）用于一些花卉（如康乃馨）的脫毒培養(yǎng)效果良好（二）幾種常用培養(yǎng)基的特點(diǎn)MS培養(yǎng)基:1962年穆拉希吉（Muyashioge，T.）和斯科克（Skoog，F(xiàn).）為培養(yǎng)煙草細(xì)胞而設(shè)計(jì)的。White培養(yǎng)基（1963）,又稱WH培養(yǎng)基：懷特（white）1941年為培養(yǎng)番茄根尖設(shè)計(jì)的，1963年又作了改良。

N6培養(yǎng)基（朱至清1974）：為水稻花藥培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的。

B5培養(yǎng)基(1968)：甘博格（Gamborg）等1968年為培養(yǎng)大豆根細(xì)胞而設(shè)計(jì)的。

MS大量元素NH4NO3

1650mg/L

KNO31900mg/LMgSO4.

7H2O370mg/L

CaC12.2H2O440mg/L

KH2PO4170mg/L

微量元素MnSO4.4H2O22.3mg/LKI0.83mg/LH3BO36.2mg/LZnSO4.7H2O8.6mg/LCuSO4.5H2O0.025mg/LNa2MoO4.2H2O0.25mg/LCoC12.6H2O0.025mg/LMS培養(yǎng)基的鐵鹽FeSO4.7H2O 27.8mg/LNa2EDTA

37.3mg/LMS培養(yǎng)基的有機(jī)物

煙酸

0.5mg/L

鹽酸吡哆醇（VB6）0.5mg/L

鹽酸硫胺素（VB1）0.1mg/L

甘氨酸

2mg/L

肌醇

100mg/L特點(diǎn)：無(wú)機(jī)鹽的濃度高，具有高含量的氮、鉀，尤其硝酸鹽的用量很大，同時(shí)還含有一定數(shù)量的銨鹽。營(yíng)養(yǎng)豐富，不需要添加更多的有機(jī)附加物，就能滿足植物組織對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的要求，有加速愈傷組織和培養(yǎng)物生長(zhǎng)的作用，當(dāng)培養(yǎng)物久不轉(zhuǎn)移時(shí)仍可維持其生存。White（單位：mg/L）無(wú)機(jī)物KNO380MgSO4·7H2O750Ca(NO3)2·4H2O300Na2SO4200NaH2PO4·H2O19KCL65KI0.752、White培養(yǎng)基（1963）

又稱WH培養(yǎng)基是1943年由White設(shè)計(jì)的，1963年做了改良。特點(diǎn)：無(wú)機(jī)鹽濃度較低。它的使用也很廣泛，無(wú)論是生根培養(yǎng)還是胚胎培養(yǎng)或一般組織培養(yǎng)都有很好的效果。H3BO31.5MnSO4·4H2O5ZnSO4·7H2O3M0O30.001CuSO4·5H2O0.01Fe2(SO4)32.5有機(jī)物煙酸0.05鹽酸吡哆醇0.01鹽酸硫胺素0.01甘氨酸3蔗糖2％特點(diǎn)：

KNO3和（NH4）2SO4含量高，不含鉬。應(yīng)用：目前在國(guó)內(nèi)已廣泛應(yīng)用于小麥、水稻及其他植物的花粉和花藥培養(yǎng)和組織培養(yǎng)。3．N6培養(yǎng)基（朱至清1974）無(wú)機(jī)物（單位：mg/L）KNO32830CaCl2·2H2O166MgSO4·7H2O185KH2PO4400(NH4)2SO4463KI0.8H3BO31.6MnSO4·4H2O4.4ZnSO4·7H2O1.5FeSO4.7H2O27.8Na2·EDTA·2H2O37.3有機(jī)物（單位：mg/L）煙酸0.5鹽酸吡哆醇0.5鹽酸硫胺素1甘氨酸2蔗糖5％4、B5培養(yǎng)基特點(diǎn)：含有較低的銨鹽；較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素銨鹽?？赡軐?duì)不少培養(yǎng)物的生長(zhǎng)有抑制作用。但它適合于有些植物如雙子葉植物特別是木本植物的生長(zhǎng)。B5（單位：mg/L）Gamborgetal(1968)無(wú)機(jī)物KNO32527.5CaCl2·2H2O150MgSO4·7H2O246.5(NH4)2SO4134NaH2PO4·H2O150KI0.75H3BO33MnSO4·H2O10ZnSO4·7H2O2Na2MoO4·2H2O0.25CuSO4·5H2O0.025CoCl2·6H2O0.025NaFe·FDTA28有機(jī)物肌醇100煙酸1鹽酸吡哆醇1鹽酸硫胺素10蔗糖2％三、培養(yǎng)基的篩選、配制和保存（一）培養(yǎng)基的篩選先從一種基本培養(yǎng)基（如MS或B5）開(kāi)始，通過(guò)一系列的試驗(yàn)，對(duì)這種基本培養(yǎng)基做某些定性和定量的變動(dòng)，從而篩選出一種能滿足實(shí)驗(yàn)需要的新培養(yǎng)基。在改動(dòng)一種培養(yǎng)基的時(shí)候，無(wú)機(jī)成分、有機(jī)成分和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)應(yīng)當(dāng)分別處理。培養(yǎng)基中最常改動(dòng)的因子是植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，尤其是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，包括其含量、比例以及不同的種類。BAP（μmol/L）

00.52.5510

NAA(μmol/L)0123450.56789102.5111213141551617191920102122232425成分濃度范圍(mmol/L)低中高無(wú)機(jī)物NH4NO3KNO3KH2PO4NaH2PO4KClCaCl2MgSO4H3BO3MnSO4ZnSO4CuSO4Na2MoO4CoCl2KIFeSO4Na2·EDTA5-0.1-1.910.50.010.010.0010.000010.000010.00010.00050.010.011010-1-21.50.050.050.020.00010.00010.00050.00250.050.052020-2-330.150.10.040.00150.0010.0010.0050.10.1植物激素生長(zhǎng)素0.00010.0010.01細(xì)胞分裂素0.00010.0010.01DeFossard

等（1974）介紹了一種“廣譜實(shí)驗(yàn)法”。特點(diǎn)：比較復(fù)雜，但由于各種因素考慮得較全面，常常會(huì)獲得令人滿意的效果。

有機(jī)物肌醇煙酸鹽酸吡哆醇鹽酸硫胺素生物素葉酸D-泛酸鈣核黃素抗壞血酸氯化膽堿L-鹽酸半胱氨酸甘氨酸蔗糖0.10.0040.00060.00010.000040.00050.00020.00010.00010.00010.010.000560.30.020.0030.0020.00020.0010.0010.0010.0010.0010.060.005600.60.040.0060.040.0010.0020.0050.010.010.010.120.051201、母液配制的目的

方便配置其他培養(yǎng)基；保證各物質(zhì)成分的準(zhǔn)確性及配制時(shí)的快速移取2、母液配制方法單配法：將培養(yǎng)基配方中的各種成分分別配成一定濃度的母液。一般用a:b表示，即每b毫升溶液中含有a毫克溶質(zhì)?；炫浞ǎ簩最悹I(yíng)養(yǎng)成分按配方中的用量擴(kuò)大一定倍數(shù)稱量，分別溶解后每一類混合在一起定容到一定體積配成混合母液，濃度可用amg/L表示，即配制一升培養(yǎng)基吸取該母液aml.（二）、培養(yǎng)基母液的配制（3）母液配制的藥品與器材藥品：配制MS培養(yǎng)基所需的藥品、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)、蒸餾水、0.1mol/L的NaOH，0.1mol/L的HCl器材：各類天平、燒杯、容量瓶、量筒、母液瓶、標(biāo)簽、冰箱等。（4）母液配制（以MS培養(yǎng)基為例）有機(jī)物母液鐵鹽母液無(wú)機(jī)大量母液無(wú)機(jī)微量母液激素母液配制MS培養(yǎng)基時(shí)母液的計(jì)算（1）無(wú)機(jī)大量母液(擴(kuò)大10倍配1L)成分硝酸鉀

硝酸銨硫酸鎂

磷酸二氫鉀氯化鈣稱量工具托盤(pán)天平注意：無(wú)機(jī)大量母液中的各種物質(zhì)在混合過(guò)程中有些離子易產(chǎn)生沉淀，應(yīng)使每種物質(zhì)先充分溶解，再進(jìn)行混合，而且鈣鹽最后緩慢加入進(jìn)去。硼酸，硫酸銅，硫酸錳，硫酸鋅，氯化鈷，鉬酸鈉，碘化鉀托盤(pán)天平和電子天平（2）無(wú)機(jī)微量母液（擴(kuò)大100倍配1000ml）稱量工具成分（3）鐵鹽（擴(kuò)大100倍1000ml）鐵鹽硫酸亞鐵，Na2-EDTA注意：鐵鹽采用托盤(pán)天平稱取。鐵鹽選用硫酸亞鐵而不用硫酸鐵，是因?yàn)樗芙夂笠桩a(chǎn)生紅色的氫氧化鐵沉淀。（4）有機(jī)物（擴(kuò)大50倍500ml）有機(jī)物甘氨酸VB1VB6煙酸肌醇注意：有機(jī)物中的物質(zhì)均采用托盤(pán)天平和電子天平稱取。（5）激素母液（常用的）生長(zhǎng)素NAA，IBA，2,4-D，IAA細(xì)胞分裂素6-BA，KT，ZT注意：這些激素配制時(shí)，一般配成1mg/ml;NAA、IBA、IAA一般可先用少量95%酒精助溶。2，4-D可用0.1mol／L的NaOH或KOH助溶細(xì)胞分裂素類一般先用少量1mol／L鹽酸溶解。赤霉素GA（6）母液的保存裝瓶:將配制好的母液分別倒入瓶中，貼好標(biāo)簽，在標(biāo)簽上注明母液名稱，配制倍數(shù)，與配制日期。儲(chǔ)藏：母液配好后放人冰箱內(nèi)4℃低溫保存，用時(shí)再按比例稀釋。（三）、培養(yǎng)基的配制用具器材：粗天平