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文檔簡介
第四節(jié)酶的活力測定第四節(jié)酶的定量酶的定量并非對其蛋白質(zhì)進行定量,而是對它的催化能力進行定量。第四節(jié)酶的定量指酶催化一定化學反應的能力,通常用最適條件下酶所催化的化學反應的速度來衡量。
酶促反應的速度越快,表示酶的活力越高;反之,則低。所以,酶的定量就是測定酶的活力,也即測定酶促反應的速度。
一.酶活力第四節(jié)酶的定量不同的酶在不同的條件下反應速度曲線都不一樣,但大致相似二.酶促反應速度的測定以產(chǎn)物濃度對反應時間作圖,可得到酶促反應速度曲線產(chǎn)物時間0第四節(jié)酶的定量二.酶促反應速度的測定可見,反應速度只在最初一段時間內(nèi)保持恒定,隨著時間的延長,反應速度逐漸下降產(chǎn)物時間0原因底物濃度的降低、產(chǎn)物的增加造成的逆反應的加快產(chǎn)物的抑制作用酶本身逐漸失活第四節(jié)酶的定量二.酶促反應速度的測定斜率=濃度/時間=V產(chǎn)物時間0正確的酶促反應速度應該是在反應初期短時間內(nèi)的反應速度,即反應初速度第四節(jié)酶的定量二.酶促反應速度的測定測定酶的活力,就是測定酶促反應的初速度所以第四節(jié)酶的定量常用的酶活力單位有三種:三.酶活力的單位1.國際單位(IU)
這種單位是由國際酶學委員會規(guī)定的。在標準條件(25℃、最適pH、最適底物濃度)下,酶每分鐘催化1mmol
底物轉化,這樣的速度所代表的酶的活力即酶的量定義為1個國際單位(IU)。
第四節(jié)酶的定量常用的酶活力單位有三種:三.酶活力的單位2.Kat是由國際酶學委員會于1972年規(guī)定的一種新單位。在最適條件下,酶每秒鐘催化1mol底物轉化,這樣的速度所代表的酶的活力即酶的量定義為1個Kat
。
1Kat=60×106IU第四節(jié)酶的定量常用的酶活力單位有三種:三.酶活力的單位3.自定義的活力單位這種單位簡單方便,省去了許多計算;但只能進行酶活力的相對比較。酶習慣上或測定時使用的反應速度的單位定義為酶的活力單位。有的甚至直接用測得的物理量,如單位時間內(nèi)消光值的變化(DA/t)表示酶活力單位。第四節(jié)酶的定量四.比活力指每毫克蛋白所含的酶活力單位數(shù)比活力是酶制劑
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