第十章 生物堿類

第十章生物堿類主講陸震鳴江南大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院第一節(jié)生物堿概述

生物堿是人類對植物藥中有效成分研究得最早而較多的一類成分。從十九世紀(jì)德國學(xué)者F.W.Sertrner從鴉片中分離出嗎啡堿（morphine）以來，迄今已從自然界中分離得到約10000種生物堿類化合物。生物堿化學(xué)結(jié)構(gòu)的研究為合成藥物提供了線索:

植物古柯中的有效成分古柯堿（cocaine）雖有很強(qiáng)的局部麻醉作用，但是毒性較大，久用容易成癮。化學(xué)合成工作者對它進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，從中找到普魯卡因（procaine），不但結(jié)構(gòu)較古柯堿簡單，毒性也大大地被降低了，成為臨床廣泛使用的局部麻醉藥物一、生物堿的含義及結(jié)構(gòu)特點含義

生物堿指來源于生物界的一類含氮有機(jī)化合物。（氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸、及某些含氮維生素除外。）結(jié)構(gòu)特點

1、大多有較復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮原子結(jié)合在環(huán)內(nèi)

2、多呈堿性，可與酸成鹽

3、多具有顯著的生理活性。二、生物堿的分布特點1．在植物的各部位都有分布，但多集中在某一部位。2．植物體內(nèi)生物堿的含量差別很大，但一般都較低（1%以下，含量若在千分之一以上即為高含量），通常把含量在0.01%的植物稱為生物堿植物。3．同一植物體內(nèi)的生物堿，往往是多種生物堿共存，而且母核結(jié)構(gòu)相似。三、生物堿的存在形式1.游離堿：

由于部分生物堿的堿性極弱，不易或不能與酸生成穩(wěn)定的鹽，因而以游離堿的形式存在。2.成鹽：

除少數(shù)極弱堿性生物堿（如：秋水仙堿及吲哚類生物堿）外，大多生物堿，在植物細(xì)胞中都是與有機(jī)酸類結(jié)合成鹽的形式存在。常見的有機(jī)酸有：檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、草酸、琥珀酸等。3.苷類：一些生物堿以苷的形式存在于植物中4.酯類：多種吲哚類生物堿分子中的羧基，常以甲酯形式存在。5.N-氧化物：在植物體中已發(fā)現(xiàn)的氮氧化物約一百余種。四、生物堿的生物活性生物堿多具有顯著而特殊的生物活性。

嗎啡、延胡索乙素具有鎮(zhèn)痛作用阿托品具有解痙作用小檗堿、苦參生物堿、蝙蝠葛堿有抗菌消炎作用利血平有降血壓作用麻黃堿有止咳平喘作用奎寧有抗瘧作用苦參堿、氧化苦參堿等有抗心律失常作用喜樹堿、秋水仙堿、長春新堿、三尖杉堿、紫杉醇等有不同程度的抗癌作用等。

第二節(jié)生物堿的分類

一、有機(jī)胺類結(jié)構(gòu)特點：氮原子不結(jié)合在環(huán)內(nèi)的一類生物堿,沒有固定的母核結(jié)構(gòu)。如

麻黃堿和偽麻黃堿是屬于芳烴仲胺類生物堿，有些性質(zhì)和生物堿類的通性不完全一樣，例如：游離時可溶于水，能與酸生成穩(wěn)定的鹽，有揮發(fā)性，不易與大多數(shù)生物堿沉淀試劑反應(yīng)生成沉淀。秋水仙堿（colchicine）是環(huán)庚三烯酮醇的衍生物，分子中有兩個駢合七元碳環(huán)，氮在側(cè)鏈上成酰胺狀態(tài)。臨床上用以治療急性痛風(fēng)，并有抑制癌細(xì)胞生長的作用。二、吡咯烷衍生物由吡咯或四氫吡咯衍生的生物堿。該類生物堿種類不少，較重要的分為：簡單的吡咯衍生物、吡咯里西啶衍生物（又稱雙稠吡咯烷）和吲哚里西啶衍生物吲哚里西啶吡咯里西啶（雙稠吡咯烷）水蘇堿三、吡啶衍生物由吡啶或六氫吡啶（蒎啶）衍生的生物堿。該類型生物堿主要有：簡單吡啶衍生物和喹諾里西啶獼猴桃堿：屬簡單吡啶衍生物，該成分是一種油狀液體生物堿，蓖麻堿：是蓖麻種子中的一種生物堿，是吡啶酮的衍生物，分子中含有氰基，因之毒性較大。金雀花堿：屬喹諾里西啶衍生物。其具有興奮中樞神經(jīng)的作用，可從野決明種子中獲得?？鄥A和氧化苦參堿：來自于豆科植物苦參的干燥根中的主要成分是二者均有抗癌活性，能抑制肉瘤180的生成。四、莨菪烷衍生物（莨菪烷是由吡咯啶和哌啶駢合而成的雜環(huán),C5-C6）

本類生物堿多由莨菪烷環(huán)系的C3-醇羥基和有機(jī)酸縮合成酯。主要存在于茄科的顛茄屬、曼陀羅屬、莨菪屬和天仙子屬中，典型的化合物如莨菪堿（hyoscyamine）。莨菪堿五、喹啉衍生物（鄰氨基苯甲酸）喜樹堿：來自于我國南方特產(chǎn)植物珙桐科喜樹中，其木部、根皮和種子中都含有生物堿，并以喜樹堿為主要成分。具有抗癌活性，對白血病和直腸癌有一定臨床療效，但毒性很大，其安全范圍較小。六、異喹啉衍生物是一類很重要的生物堿，由于其數(shù)量多且結(jié)構(gòu)類型復(fù)雜，僅就其主要類型說明如下1、1-苯甲基異喹啉型生物堿（芐基異喹啉類）

異喹啉母核1位連有芐基的一類生物堿那可丁屬此類生物堿。其具有鎮(zhèn)咳作用與可待因相似，但無成癮性，可替代可待因。罌粟堿用于治療腦、心及外周血管痙攣所致的缺血，腎、膽或胃腸道等內(nèi)臟痙攣。

罌粟堿

2、雙苯甲基異喹啉類生物堿（雙芐基異喹啉）

為兩個芐基異喹啉通過1~3個醚鍵相連接的一類生物堿。

如粉防己堿，它有抗心肌、腎缺血、抗高血壓、抗肝纖維化、抗腫瘤多藥耐藥性、抗缺氧性肺動脈高壓等多種藥理作用。特別是作為一種天然的腫瘤細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑,在腫瘤防治方面有其良好的應(yīng)用前景。

蝙蝠葛堿

漢防己甲素R=CH3

漢防己乙素R=H

3、原小檗堿型生物堿小檗堿和藥根堿屬此類型生物堿，存在于黃連、黃柏及三顆針等植物中。小檗堿對溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、淋球菌和弗氏、志賀氏痢疾桿菌均有抗菌作用，并有增強(qiáng)白血球吞噬作用。小檗堿的鹽酸鹽（俗稱鹽酸黃連素）已廣泛用于治療胃腸炎、細(xì)菌性痢疾等，對肺結(jié)核、猩紅熱、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定療效

4、嗎啡烷型生物堿嗎啡堿——是鴉片中的成分，具有止痛的作用?？纱颉獙ρ幽X的咳嗽中樞有直接抑制作用，其鎮(zhèn)咳作用強(qiáng)而迅速，類似嗎啡，除鎮(zhèn)咳作用外，也有鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用。臨床主要用于鎮(zhèn)咳，無痰干咳及劇烈、頻繁的咳嗽。有少量痰液的患者，宜與祛痰藥合用。青藤堿——具有顯著的鎮(zhèn)痛和消炎作用。

可待因七、吲哚衍生物

該類型生物堿數(shù)量也較多且結(jié)構(gòu)也比較復(fù)雜。毒扁豆堿——來自于豆科植物毒扁豆種子中的一種生物堿，又稱依色林，是一種副交感神經(jīng)興奮藥，用于青光眼治療，還用于中藥麻醉的催醒藥。玫瑰樹堿——從玫瑰樹屬植物Ochrosia

elliptica

Labill.中獲得。其具有類似喜樹堿的抗癌作用，且毒性較低。八、嘌呤衍生物香菇嘌呤——是由香菇中分離得到的一種生物堿，具有顯著降低血液中膽甾醇、甘油三酯、磷酯的生物活性，用于動脈硬化，臨床作為防治冠心病的藥物。九、甾體生物堿類本類生物堿都具有甾體母核，但氮原子均不在甾體母核內(nèi)本類被認(rèn)為是天然甾體的含氮的簡單衍生物，又與萜類生物堿統(tǒng)稱為偽生物堿。環(huán)常綠黃楊堿D

十、萜類生物堿

此類生物堿包含：一萜生物堿、倍半萜生物堿、二萜生物堿、三萜生物堿等。單萜類生物堿：龍膽堿（龍膽科）

倍半萜類生物堿：石斛堿（石斛）

二萜類生物堿：紫杉醇、烏頭堿（烏頭、附子）

三萜類生物堿：少龍膽堿

石斛堿

實例：

烏頭堿毒性極大，產(chǎn)生毒性的根源是其結(jié)構(gòu)中含有二個酯鍵。若將烏頭堿與稀堿水溶液加熱，很容易除去二個酯鍵，生成烏頭原堿（aconine）?；?qū)躅^堿在中性水溶液中加熱，酯鍵也同樣被水解。經(jīng)水解后生成的烏頭原堿，其毒性極小。這就是中醫(yī)用烏頭、附子必經(jīng)炮制的原由。

十一、其他類型生物堿

中藥川芎中的生物堿——川芎嗪，其結(jié)構(gòu)為四甲基吡嗪，用于治療各種閉塞性血管疾病。第三節(jié)生物堿的理化性質(zhì)1、形態(tài)：大多為結(jié)晶形固體，只有少數(shù)是非結(jié)晶形的粉末，有一定的熔點。個別為液體，（多不含氧，或與氧結(jié)合為酯鍵等），如煙堿(nicotine)、檳榔堿等。2、顏色：生物堿一般是無色或白色的化合物，只有少數(shù)有顏色，如小檗堿、蛇根堿呈黃色等。有機(jī)化合物產(chǎn)生顏色一般要具備長鏈共軛結(jié)構(gòu)，并有助色團(tuán)，或同時為離子型。顏色與共軛系統(tǒng)有關(guān)，共軛系統(tǒng)越長，顏色越深；向共軛系統(tǒng)供電，顏色加深。3、味道：生物堿多具苦味，個別具甜味（甜菜堿）。4、旋光性：大多數(shù)生物堿分子有手性碳原子存在，有光學(xué)活性，且多數(shù)為左旋光性。生物堿的生理活性與其旋光性有關(guān)，通常左旋體的生理活性比右旋體強(qiáng)，而右旋體則無或很弱。

例外：右旋古柯堿局麻作用強(qiáng)。5、揮發(fā)性與升華性：少數(shù)液體狀態(tài)及個別小分子固體生物堿如麻黃堿、煙堿等具揮發(fā)性，可用水蒸汽蒸餾提取。咖啡因等個別生物堿具有升華性。

6、溶解度(重點掌握)

（1）、游離生物堿

A、親脂性生物堿——大多數(shù)叔胺堿和仲胺堿為親脂性，一般能溶于有機(jī)溶劑，尤其易溶于親脂性有機(jī)溶劑，如苯、乙醚、氯仿，特別易溶于氯仿。溶于酸水，不溶或難溶于水和堿水。

B、親水性生物堿——主要指季銨堿和某些含氮-氧化物的生物堿。這些生物堿可溶于水、甲醇、乙醇，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。

C、具特殊官能團(tuán)的生物堿——具酚羥基或羧基的生物堿稱為兩性生物堿（具酚羥基者常稱為酚性生物堿），這些生物堿既可溶于酸水，也可溶于堿水溶液，但在pH8-9時溶解性最差，易產(chǎn)生沉淀。

（2）、生物堿鹽一般易溶于水，可溶于醇類，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。通常生物堿的無機(jī)酸鹽水溶性大于有機(jī)酸鹽；無機(jī)酸鹽中含氧酸鹽的水溶性大于鹵代酸鹽；小分子有機(jī)酸鹽大于大分子有機(jī)酸鹽。

7、堿性

堿性的由來：因分子中氮原子上的孤電子對能接受質(zhì)子而顯堿性。

堿性強(qiáng)弱的表示方法：生物堿堿性大小可用堿的堿式離解常數(shù)pKb表示，也可用其共軛酸的酸式離解常數(shù)pKa表示。目前，生物堿堿性大小統(tǒng)一用pKa表示，堿性大則pKa大，堿性小則pKa小。生物堿堿性大小與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系（重點）

（1）、氮原子的雜化方式生物堿分子中氮原子的孤電子對在有機(jī)胺分子中為不等性雜化，其堿性強(qiáng)弱隨雜化程度的升高而增強(qiáng)，即sp3＞sp2＞sp。生物堿分子中堿性基團(tuán)的pKa值大小順序一般是：

季銨堿＞N-烷雜環(huán)＞脂肪胺＞芳香胺≈N-芳雜環(huán)＞酰胺≈吡咯。＞＞＞＞＞≈

（2）、誘導(dǎo)效應(yīng)

生物堿分子中的氮原子上電子云密度受到氮原子附近供電基（如烷基）和吸電基（如各類含氧基團(tuán)、芳環(huán)、雙鍵）誘導(dǎo)效應(yīng)的影響。供電誘導(dǎo)（烷基）使氮原子上電子云密度增加，堿性增強(qiáng)；吸電誘導(dǎo)（含氧基團(tuán)，雙鍵，苯環(huán)）使氮原子上電子云密度減小，堿性降低。

麻黃堿（pKa9.58）（甲基供電誘導(dǎo)效應(yīng)）

去甲基麻黃堿（pKa9.00）（羥基的吸電誘導(dǎo)效應(yīng)）

苯異丙胺（pKa9.80）（無羥基的吸電作用）

關(guān)于氮雜縮醛結(jié)構(gòu)：

具有氮雜縮醛結(jié)構(gòu)的生物堿常易于質(zhì)子化而顯強(qiáng)堿性。如氮原子的鄰位碳上具α、β雙鍵或α-羥基者，可異構(gòu)成季銨堿，使堿性增強(qiáng)。如醇胺型小檗堿亦為氮雜縮醛結(jié)構(gòu)，其氮原子上的孤電子對與α-羥基的C-O單鍵的б電子發(fā)生轉(zhuǎn)位，形成季銨型小檗堿氮雜縮醛

醇胺型小檗堿季胺型小檗堿

（3）、誘導(dǎo)—場效應(yīng)：使生物堿的堿性降低在生物堿分子中若同時含有二個氮原子時，即使其處境完全相同，其堿度總是有差異的。當(dāng)?shù)谝粋€氮原子質(zhì)子化后，就產(chǎn)生一個強(qiáng)的吸電基團(tuán)-+NHR2

，此時它對第二個氮原子產(chǎn)生兩種堿性降低的效應(yīng):誘導(dǎo)效應(yīng)和靜電場效應(yīng)。誘導(dǎo)效應(yīng)通過碳鏈傳遞，且隨碳鏈增長而漸降低。靜電場效應(yīng)通過空間直接作用，故又稱為直接效應(yīng)（場效應(yīng)）。若此時強(qiáng)的吸電基團(tuán)和第二個氮原子在空間上接近時，則直接效應(yīng)對其堿度的影響就更顯著。

（4）、共軛效應(yīng)

當(dāng)生物堿分子結(jié)構(gòu)中氮原子的孤電子對處于p-π

共軛狀態(tài)時，其堿性較未形成p-π

共軛的氮原子的堿性弱。常見的p-π

共軛效應(yīng)主要有三種類型：苯胺型、酰胺型和烯胺型。

A、苯胺型生物堿的堿性比相應(yīng)的環(huán)己胺弱的多

苯胺（pKa4.58）

環(huán)己胺（pKa10.64）

B、酰胺型生物堿的堿性極弱，其氮原子上所結(jié)合的氫，甚至可被苛性堿置換。通常苯胺型生物堿堿性大于酰胺型。胡椒堿（酰胺共軛pKa1.42）

苯胺（pKa4.58）

C、

烯胺型若為仲烯胺堿性較弱。若為叔烯胺，其氮原子的孤對電子與雙鍵的π電子可發(fā)生轉(zhuǎn)位生成季胺型共軛酸，則堿性較強(qiáng)。但若氮原子處于稠環(huán)的橋頭位置時，而應(yīng)受雙鍵的誘導(dǎo)效應(yīng)影響，堿性反而減弱。

（5）、空間效應(yīng)

氮原子由于附近取代基的空間立體障礙或分子構(gòu)象因素，而使質(zhì)子難于接近氮原子，堿性減弱。莨菪堿（pka9.65）

東莨菪堿（環(huán)氧位阻pka6.20）

（6）、分子內(nèi)氫鍵效應(yīng)：

當(dāng)生物堿成鹽后，氮原子附近如有羥基、羰基，并處于有利于形成穩(wěn)定的分子內(nèi)氫鍵時，氮上的質(zhì)子不易離去，堿性強(qiáng)。

麻黃堿共軛酸（穩(wěn)定性差）

pKa9.58（堿性弱）

偽麻黃堿共軛酸（穩(wěn)定）

pKa9.74（堿性強(qiáng)）

堿性強(qiáng)度不同的原因是偽麻黃堿能形成穩(wěn)定的分子內(nèi)氫鍵。從麻黃堿和偽麻黃堿的優(yōu)勢構(gòu)象來看，它們的羥基和甲氨基之間的距離似乎沒有什么差別，但在結(jié)構(gòu)中，處在鄰位交叉較大的基團(tuán)即甲基和苯基之間存在一定的排斥力。在偽麻黃堿的結(jié)構(gòu)中，由于這種排斥力的作用，使羥基與甲氨基的距離較為接近，故氮原子接受質(zhì)子成為－N+H后，氮上的氫與鄰近羥基上的氧所形成的氫鍵就比較穩(wěn)定，而呈較強(qiáng)的堿性。在麻黃堿的結(jié)構(gòu)中，當(dāng)?shù)咏邮苜|(zhì)子并與鄰近羥基上的氧形成氫鍵時，同樣由于甲基和苯基的排斥作用，使所形成的分子內(nèi)氫鍵的強(qiáng)度減小，而－N+H較易解離，故堿性較弱?？偨Y(jié)：常見生物堿堿性規(guī)律

對于具體生物堿來說，若影響堿性的因素不止一個，則需綜合考慮。一般來說，空間效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)共存，空間效應(yīng)居主導(dǎo)地位；共軛效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)共存，共軛效應(yīng)居主導(dǎo)地位。胍>季銨堿>烷胺類（仲胺，叔胺）>芳胺類（芳雜環(huán)）>酰胺類

胍（pKa13.6）小檗堿（11.5）四氫異喹啉（9.5）異喹啉（5.4）（pKa<2）共軛酸高度離子型SP3雜化SP2雜化P—π共軛共振穩(wěn)定性類似無機(jī)堿（無雙鍵）（有雙鍵）通常情況下堿性強(qiáng)弱與pKa大小的關(guān)系如下：pKa>11為強(qiáng)堿（胍、季胺堿）pKa7~11中強(qiáng)堿（脂肪胺類—仲胺、叔胺）pKa2~7弱堿（芳胺、芳氮雜環(huán)）pKa<2極弱堿（酰胺類）

8、生物堿沉淀反應(yīng)：專屬性差，作為通用顯色劑使用

生物堿在酸性水或稀醇中與某些試劑生成難溶于水的復(fù)鹽或絡(luò)合物的反應(yīng)稱為生物堿沉淀反應(yīng)。這些試劑稱為生物堿沉淀試劑。1）生物堿沉淀試劑①重金屬鹽碘化鉍鉀（Dragendorff）試劑：其組成為KBiI4，與生物堿反應(yīng)生成橘紅色至黃色無定形沉淀（B*HBiI4）碘化汞鉀(Mayer)試劑：其組成為K2HgI4；與生物堿反應(yīng)生成類白色沉淀[B*H·HgI2或（B*H）2HgI4]。②酸類硅鎢酸(Bertrad)試劑：其組成為SiO2·12WO3·nH2O，與生物堿反應(yīng)生成類白色或淡黃色沉淀。③酚酸類苦味酸或鞣酸：與生物堿反應(yīng)均生成黃色沉淀④復(fù)鹽——專屬沉淀季銨型生物堿雷氏銨鹽試劑：雷氏銨鹽即硫氰酸鉻銨，其組成為NH4[Cr（（NH3）2SCN）4]，其與季銨型生物堿反應(yīng)生成紅色沉淀或結(jié)晶。

2）沉淀反應(yīng)原理

沉淀試劑與生物堿的鹽生成更大分子的復(fù)鹽，進(jìn)而產(chǎn)生沉淀3）沉淀條件①反應(yīng)一定要在酸性條件下，生物堿成鹽溶于水方可反應(yīng)②試劑量不能多于樣品液4）沉淀反應(yīng)陽性結(jié)果的判斷

一般需選用三種以上的沉淀試劑進(jìn)行反應(yīng)，如均有沉淀反應(yīng)，可判斷為陽性結(jié)果。因為中藥中某些非生物堿物質(zhì)也能與沉淀試劑產(chǎn)生沉淀反應(yīng)，如蛋白質(zhì)、多肽、AA、鞣質(zhì)等，因此在制備共試品溶液時，須凈化處理除去這些物質(zhì)，避免其干擾而導(dǎo)致錯誤結(jié)論。5）生物堿沉淀反應(yīng)的實際應(yīng)用1、用于檢查生物堿的有無，在生物堿的定性鑒別時，這些試劑可用于試管定性反應(yīng)和作為平面色譜的顯色劑。2、作為生物堿分離提取過程中的追蹤指標(biāo)，指導(dǎo)生物堿的提取分離工作，判斷是否提取完全，指示提取、分離終點。3、分離純化如雷氏銨鹽常用于分離純化季銨型水溶性生物堿4、作為生物堿薄層層析和紙層析的顯色劑（碘化鉍鉀）第四節(jié)生物堿的提取與分離

1、生物堿的提?。ㄖ攸c掌握）除個別具有生物堿揮發(fā)性的生物堿（麻黃堿）可用水蒸汽蒸餾法提取外，一般情況下，總生物堿的提取均采用溶劑法提取。關(guān)鍵：依據(jù)生物堿的存在狀態(tài)（游離態(tài)、成鹽）及溶解性選擇最佳的提取溶劑。

水——提取生物堿鹽醇——提取生物堿鹽和游離態(tài)生物堿有機(jī)試劑——提取游離態(tài)生物堿

1)非極性有機(jī)溶劑提取法（原料藥須經(jīng)堿化過程）

注意點：由于生物堿在植物體中往往與酸(咖啡酸,草酸等)生成鹽,故一般在用有機(jī)溶劑提取前,先將生藥粉末與少量堿水(如10%氨水或碳酸鈉液或石灰水)攪勻放置(使生物堿轉(zhuǎn)為游離狀態(tài))再用有機(jī)溶劑進(jìn)行浸泡后用滲漉法等法進(jìn)行提取。提取溶劑：為氯仿,二氯甲烷,乙醚,苯等提取對象：提取游離態(tài)生物堿若生物堿為弱堿,多以游離堿存在,則處理方法稍有不同:

2)極性有機(jī)溶液提取提取溶劑：為甲醇、乙醇等提取對象：提取生物堿鹽和游離態(tài)生物堿注意點：

用此法時，若有水溶性生物堿存在于水液中，可用正丁醇或戊醇直接提取。

3)水或酸水提取后+強(qiáng)(弱)酸型陽離子樹脂法提取溶劑：為水、酸水等提取對象：提取水溶性生物堿、季胺堿、生物堿鹽酸性水如：0.1-1%H2SO4、HCl或HOAc等進(jìn)行提取。缺點：①其提取液的體積較大（造成濃縮困難）；②可將其中的水溶性雜質(zhì)提取出來（如皂苷、蛋白質(zhì)、糖類、鞣質(zhì)及水溶性色素等）。

4)酸水提取液+雷氏銨鹽等沉淀法溶劑：為水、酸水等提取對象：提取季銨型水溶性生物堿季銨類生物堿極易溶于水。生物堿的酸水提取液可加雷氏銨鹽等使之成沉淀析出,沉淀溶丙酮中,加入飽和的硫酸銀溶液分解,再以氯化鋇除去銀離子,過瀘,蒸干得殘渣,殘渣用乙醇提取,,提取液濃縮后放冷,過瀘去先析出的無機(jī)鹽,濾液再濃縮至小量后加丙酮,放置析出粗晶,粗晶以甲醇重結(jié)晶,得生物堿總堿。

5)其他提取生物堿的方法①大孔樹脂法:

多為苯乙烯型或2-甲丙烯酸酯型的大孔吸附樹脂，具網(wǎng)狀小孔結(jié)構(gòu)，可以吸附和篩選結(jié)合的方式對生物堿分子極性分離。 生物堿水溶液上柱，用水沖洗去無機(jī)鹽、糖等，再用適當(dāng)?shù)娜軇?含水醇,醇,丙酮等)洗脫，洗脫液經(jīng)分別后處理各為生物堿總堿。②水蒸氣蒸餾法：麻黃堿等揮發(fā)性的生物堿可用此法提取生物堿總堿。

2、生物堿的純化1)分部結(jié)晶法

利用總堿中不同生物堿可能在不同溶劑中析晶速度快慢來達(dá)到分離目的。溶劑：乙醇、丙酮、甲醇等。總堿溶解在少量適當(dāng)溶劑中，放置析晶，過瀘予以分離，母液濃縮后可以加少量不同溶劑再試行結(jié)晶...，不同生物堿可能由此分離純化。分離到的較純晶體可以重結(jié)晶進(jìn)一步分離純化。

2)衍生物制備法(成鹽，成酯等)

生物堿鹽類往往易于結(jié)晶，先使其成鹽后再用分步結(jié)晶法加以分離（酸可以是有機(jī)酸也可以無機(jī)酸）其中HI酸，過氯酸，苦味酸鹽最易結(jié)晶。例如——麻黃堿和偽麻黃堿的分離：利用它們的草酸鹽在水中溶解度的不同。溶解度(在H2O中)：草酸麻黃堿<草酸偽麻黃堿，因此草酸麻黃堿能夠先行結(jié)晶析出，草酸偽麻黃堿則留在母液中。

3)在不同的pH值下萃取法（利用生物堿性強(qiáng)弱的不同進(jìn)行分離）

堿性不同的生物堿混合物溶于酸水中后，先加弱堿，則弱堿游離可被非極性溶劑萃取出；逐步加大溶液堿性，則堿性從小到大的不同堿性的生物堿可先后用非極性有機(jī)溶劑萃取出。4)液體生物堿混合物的分餾分離法

液體生物堿混合物可進(jìn)行分餾分離。如毒芹(Coniummaculatum)中的毒芹堿(m.p.166-167℃)，羥基毒芹堿(m.p.116℃)等；石榴皮(Punica

granatumL.)中的石榴皮堿(m.p.195℃)，異石榴皮堿(m.p.86℃)，甲基異石榴皮堿（m.p.114-117℃)等可用此法分離。

5)層析法吸附色譜：生物堿（游離）為脂溶性成分，適合于采用吸附原理進(jìn)行分離。吸附劑多用硅膠、氧化鋁，流動相為中性的苯，氯仿，乙醚等有機(jī)溶劑或混合有機(jī)溶劑。分配色譜：對一些極性很近似或極性較大的生物堿的分離，可以利用分配原理進(jìn)行分離，效果可能更佳。（三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿的分離）高效液相色譜：三尖杉混合酯堿的分離氣相色譜：揮發(fā)性生物堿干柱色譜，制備性薄層色譜三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿混合物

支持劑

硅膠固定相

pH5.0緩沖液洗脫劑pH5.0緩沖液飽和的氯仿液

高三尖杉酯堿二者混合物三尖杉酯堿

流程說明：利用高三尖杉酯堿較三尖杉酯堿結(jié)構(gòu)中多一個—CH2—，極性較?。ㄔ诹鲃酉嘀幸子诜峙洌┒缺幌疵撓聛?，三尖杉酯堿則后被洗脫下來，中間為二者的混合物。

實例：（分配色譜）生物堿提取分離的示例1、延胡索[Corydalis