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文檔簡介
實驗三觀察植物細(xì)胞的有絲分裂一、實驗?zāi)康?、觀察植物細(xì)胞有絲分裂過程,識別有絲分裂的不同時期。2、學(xué)習(xí)制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技術(shù)。3、學(xué)習(xí)使用高倍顯微鏡和生物繪圖的方法。二、實驗原理
植物的有絲分裂常見于根尖,莖尖的分生區(qū)細(xì)胞,由于各分裂獨立進(jìn)行,能看到各個細(xì)胞的分裂進(jìn)行,細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色;根據(jù)染色體的行為變化判斷各個時期。成熟區(qū)沒有細(xì)胞分裂。伸長區(qū)有少量細(xì)胞分裂。分生區(qū)有大量細(xì)胞分裂。三、實驗材料
光學(xué)顯微鏡、洋蔥、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、鑷子、剪刀、滴管、蒸餾水、15%的鹽酸溶液、燒杯(培養(yǎng)皿)、改良苯酚品紅染色液。四、實驗步驟(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)
在實驗前3---4天,將洋蔥放在裝滿水的燒杯上,底部始終接觸水,待根長到1---5cm時就可以用來做實驗。注意:放置溫暖處,經(jīng)常換水。(二)洋蔥根尖臨時裝片的制作步驟
操作目的固定卡諾氏固定液(甲醇∶冰醋酸=3∶1)用來固定細(xì)胞染色體當(dāng)下分裂形態(tài)。解離取材:取根尖2-3㎜解
離
液:盛有10%的HCl中解離時間:10-15分鐘
1、分生組織細(xì)胞間的果膠質(zhì)分解,細(xì)胞壁軟化,使細(xì)胞和染色體容易分散壓平。2、殺死細(xì)胞把細(xì)胞固定在不同的分裂時期。漂洗漂洗溶液:普通清水漂洗時間:大約10分鐘1、除去多余鹽酸,防止破壞細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)2、防止鹽酸影響下面的染色效果。染色染色劑:改良苯酚品紅染色液染色時間:3-5分鐘染色部位:染色體染色原理:改良苯酚品紅染色液是堿性染料,而染色體是呈酸性使染色體和周圍的結(jié)構(gòu)形成顏色上的反差,便于觀察。制片在載玻片上放一滴清水,把染色后的根尖放在清水中,用鑷子尖把根尖夾碎,蓋上蓋玻片,其上再加一片載玻片,用大拇指把其輕輕壓開(拇指壓片法)。注意:不能研轉(zhuǎn)使細(xì)胞分開便于觀察細(xì)胞核中的染色體。剪根
解離
漂洗染色制片(三)鏡檢1、低倍鏡觀察:
在低倍鏡下找到生長點,生長點的特點是:細(xì)胞排列緊密,呈正方形,有的正在分裂。2、高倍鏡觀察:
找到生長點后,移走低倍物鏡,換上高倍物鏡,用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)節(jié)清晰,直到看清物像為止。
觀察根尖內(nèi)處于各個時期的細(xì)胞,尤其注意其中的染色體的變化情況。鏡檢結(jié)果分析進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞分裂相間期:完成DNA分子的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成。鏡檢結(jié)果分析間期分裂相圖前期:核仁和核膜逐漸消失。核內(nèi)染色質(zhì)逐漸濃縮為細(xì)長而卷曲的染色體,每一染色體含有兩染色單體,它們具有一個共同的著絲點;兩級發(fā)出紡錘絲形成紡錘體。鏡檢結(jié)果分析前期分裂相圖中期:染色體形態(tài)、數(shù)目清晰,便于觀察。各染色體的著絲點排列在赤道板上,紡錘絲與染色體的著絲點相連。鏡檢結(jié)果分析中期分裂相圖后期:各染色體著絲點分裂為二,其每條染色單體也相應(yīng)地分開,并各自隨著紡錘絲的收縮而平均移向兩極,每極有一組染色體,數(shù)目和原來的相同。
鏡檢結(jié)果分析后期分裂相圖末期:核膜、核仁重新出現(xiàn),分開在兩極的染色體各自組成新的細(xì)胞核,在細(xì)胞中央出現(xiàn)細(xì)胞板形成新的細(xì)胞壁,使細(xì)胞分裂為二,形成二個子細(xì)胞。這時細(xì)胞又進(jìn)入分裂間期。末期分裂相圖五、
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