2020版高考生物二輪復(fù)習(xí).基因工程和細(xì)胞工程講義

---第1講基因工程和細(xì)胞工程基礎(chǔ)自查 明晰考位提醒：特設(shè)長(zhǎng)句作答題,［縱引橫連訓(xùn)練文字表達(dá)能力建網(wǎng)絡(luò)］1DNA在港品ttttf-目的病用的現(xiàn)期

4漢媒因總運(yùn)縱后的梅北將目的基因降人受體址隨rH的圣閑的W3鱉富特基因植物-鋅奉同動(dòng)物提醒：特設(shè)長(zhǎng)句作答題,［縱引橫連訓(xùn)練文字表達(dá)能力建網(wǎng)絡(luò)］1DNA在港品ttttf-目的病用的現(xiàn)期

4漢媒因總運(yùn)縱后的梅北將目的基因降人受體址隨rH的圣閑的W3鱉富特基因植物-鋅奉同動(dòng)物地兇1.程新物.雄因治療攙叩上口WWr出州:四M期吧可生產(chǎn)總?cè)唤缰袥](méi)行帕果「I盛;,'-也rl冊(cè)_Lh4加俎的全到匕曜肛g胞荒曲t片/r 粗物細(xì)5師描———梢構(gòu)像維地鼎交E植翔對(duì)ft的新途徑培月柞憫騎W種埴她產(chǎn)捌的JJ化生產(chǎn)二’的加眥婿x向物圳脆班音單；嘯扎俳刊制爵娘? ￥物有塔璃老里一if第酊1MK,不用成個(gè)體山崢細(xì)布核的金能性：.x動(dòng)物偉珀電來(lái)得恬陵動(dòng)物個(gè)體剜麗的濕苗性千段 掬界法，化學(xué)沫，生物法.要“苗皓小■/te射就原忱工皿期嶼的

描流已免揖的R譚巴加刊即皆箭崎玷的及產(chǎn)生及“定中L恤的胡交嘲場(chǎng)?。圻吔菕呙枞媲澹萏嵝眩号袛嗾`并找到課本原話.基因工程的相關(guān)判斷TOC\o"1-5"\h\z(1)攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過(guò)分子檢測(cè) (X)(2)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定必須通過(guò)分子檢測(cè) (X)一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核甘酸序列 (V)(4)用限制性核酸內(nèi)切酶可以切割煙草花葉病毒的核酸 (X)(5)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含有一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn) (V)(6)自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其 DNA整合到細(xì)菌DNAk,屬于基因工程((7)轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物，不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加 (X)(8)重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)?DNA分子中脫氧核糖和磷酸交替連接(X)(9)應(yīng)用DN琳針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表達(dá)((10)動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)(X)2.細(xì)胞工程的相關(guān)判斷(1)產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選必須通過(guò)分子檢測(cè)(V)(2)21三體綜合征的診斷必須通過(guò)分子檢測(cè)(X)(3)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)(V)TOC\o"1-5"\h\z(4)去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理 (V)(5)乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)(X)(6)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 (X)(7)動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性 (X)(8)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體 (X)(9)單克隆抗體技術(shù)可用于治療老年癡呆癥(V)(10)細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行 (X)

考點(diǎn)梳理整合突破整合考點(diǎn)20基因工程和細(xì)胞工程［考點(diǎn)突破 固考基］.理清基因工程3種操作工具的作用與特點(diǎn)限制酶DNAI接酶| 載體作用切割目的基因和載體拼接DNA片段形成重組DNg子攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞作用部位兩核甘酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵作用特點(diǎn)(條件)(1)識(shí)別特定的核甘酸序列；(2)在特定位點(diǎn)上切割DNA^子(1)E-coliDNA1接酶只能連接黏性末端；(2)T4DNA1接酶能連接黏性末端和平末端(1)能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；(2)有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；(3)具有特殊的標(biāo)記基因2.掌握基因工程的操作步驟(1)目的基因的獲取途徑：方法具體操作直接分離從自然界已用的物種中分離，如從基因文庫(kù)中獲取人工合成化學(xué)合成已知核甘酸序列的較小基因，直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板反轉(zhuǎn)錄法以RN,模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成PCR年擴(kuò)增目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在熱穩(wěn)定性DNAm合酶作用下延伸(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建一一重組質(zhì)粒的構(gòu)建：①表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因+復(fù)制原點(diǎn)。②啟動(dòng)子和終止子：?jiǎn)?dòng)子是 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn),啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；終止子是終止轉(zhuǎn)錄的位③基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程住體(題時(shí)) DNA分子(含目的靜因)|一同種限制器切割 —兩個(gè)切口隔個(gè)鉆件末蠲 獲得目的基因DMA連接第重組DNA(環(huán)狀里班質(zhì)粒)(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca"處理)受體細(xì)胞廠受精卵、體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞

色 1]步驟1檢測(cè)內(nèi)容. 方法結(jié)果顯示分子檢測(cè)第一步目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞DN冊(cè)子雜交技術(shù)（DNA和DNA^間）是否成功顯示出雜交帶目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA分子雜交技術(shù)（DNA和mRN叱間）是否成功顯示出雜交帶第二步第三步口目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)[抗原一抗體雜交是否成功顯示出雜交帶個(gè)體水平鑒定做抗蟲(chóng)或抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定功能是否相同基因，程產(chǎn)品蛋自質(zhì)1:程*+t3.圖解記憶蛋白質(zhì)工程（填圖）（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定:伯斯擊臼航的功能設(shè)計(jì)閱wQ成白腦站內(nèi)4推瑞應(yīng)有的靶基底序列找到川弱應(yīng)的脫粗糧杼酸序列OMU）伯斯擊臼航的功能設(shè)計(jì)閱wQ成白腦站內(nèi)4推瑞應(yīng)有的靶基底序列找到川弱應(yīng)的脫粗糧杼酸序列OMU）—————————————————I—1—————也造祖仃蛋白質(zhì),或制近出更邂喳植物染尉的①仝能性③

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—或__植物組飄增制植物細(xì)胞-1程過(guò)?理植物體瓶照布芻業(yè)②牌的流通性和

再.柚物維馳個(gè)能性個(gè)體

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AV/B細(xì)胞工

程技術(shù)細(xì)胞工

程技術(shù).比較并把握細(xì)胞工程的幾個(gè)流程圖技術(shù)過(guò)程圖示而訴.分高植物組織培養(yǎng)外植體—分化J去分化舊體根、莖,葉等培養(yǎng)茶（營(yíng)札激素『呻）動(dòng)物細(xì)

胞培養(yǎng)細(xì)胞懸細(xì)胞貼壁分瓶

浮液一壯品疝扇’培養(yǎng)a10?50代細(xì)胞—*■細(xì)胞系--原代培養(yǎng)一＞ 傳代培養(yǎng)植物體

細(xì)胞雜動(dòng)物細(xì)

胞的融

合川滅活病毒溢導(dǎo)前物班脆融合過(guò)程的不意圖骨制痛福脆培養(yǎng)骨置解切胞免段小鼠注射特定的抗蚣蛋白在具用情選作用的耳界地上培養(yǎng)冬種雜交細(xì)胞單克隆抗體的制備@@ 雜交蜘胞克隆上述柴交手I胸專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)件旃不到*雜交施■分開(kāi).川克隆與抗倬，檢收閽性窗跑體外露養(yǎng)上里克砥抗體單克降抗體注射到1小以體內(nèi)核移植n哥個(gè)體一..般性杯胎早期f與日迪傳物睢鼠本相同) 油物“移植胚胎6.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特殊條件歸納(1)胰蛋白酶或膠原蛋白酶的使用：首先用胰蛋白酶處理動(dòng)物的器官或組織，以制備單細(xì)胞懸液；培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生接觸抑制時(shí)，同樣需要用胰蛋白酶再次使細(xì)胞分散開(kāi)。(2)避免雜菌污染的措施：培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理；加入一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液。(3)特殊的營(yíng)養(yǎng)條件：①液體培養(yǎng)基；②加入動(dòng)物血清、血漿等；③通入氧氣以滿足代謝的需要；④通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的pH。7.澄清容易混淆的三種細(xì)胞一一雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合，融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。(2)重組細(xì)胞：體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。(3)雜交細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。［題組集訓(xùn)提考能］題組一高考分類(lèi)練 明考向C類(lèi)型1翻閱教材，原味品高考［2019?全國(guó)卷n］植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有(答出2點(diǎn)即可)。(2)通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過(guò)人工種皮 (人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長(zhǎng)。人工種皮具備透氣性的作用是。人工胚乳能夠?yàn)榕郀铙w生長(zhǎng)提供所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有植物激素、 和 等幾類(lèi)物質(zhì)。人，神段肝狀體人工肺乳(3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的進(jìn)行組織培養(yǎng)。(4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整植株的基本程序是 (用流程圖表小)。解析：本題借助植物細(xì)胞工程實(shí)際應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)，考查綜合運(yùn)用能力。試題通過(guò)對(duì)比獲得植物新個(gè)體的不同途徑，體現(xiàn)了對(duì)科學(xué)探究素養(yǎng)中的結(jié)果分析要素的考查。 (1)植物微型繁殖可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性， 還可以高效、快速、大量繁殖。(2)人工種皮具備透氣性，可以保證胚狀體進(jìn)行有氧呼吸時(shí)對(duì)氧的需求；人工胚乳應(yīng)該含有植物激素、礦質(zhì)元素和糖等物質(zhì)，保證胚狀體的正常生長(zhǎng)。 (3)植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，可以切取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株，首先要通過(guò)細(xì)胞的脫分化過(guò)程，培養(yǎng)出愈傷組

織，再對(duì)愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，誘導(dǎo)分化形成小植株。答案：(1)能保持植物原有的遺傳特性，繁殖速度快(2)有利于胚狀體進(jìn)行呼吸作用 礦質(zhì)元素糖(3)莖尖人 培養(yǎng)小 誘導(dǎo)分化 一,(4)含目的基因的細(xì)胞一色愈傷組織力衛(wèi)，小植株［高考VS,教材］［人教選修3］P38［人教選修3］P40植物如職培養(yǎng)技術(shù)不僅町以保持優(yōu)艮品特的遺傳sa還可一一?快—地實(shí)現(xiàn)彈曲的大量集圃植物如職培養(yǎng)技術(shù)不僅町以保持優(yōu)艮品特的遺傳sa還可一一?快—地實(shí)現(xiàn)彈曲的大量集圃.因此人n形象地杷用于快速繁司的麗涌物組黑培養(yǎng)技術(shù).叫鎖植物的微型繁殖技術(shù).也可快速繁殖技術(shù)-R>,在人工林干中，人工抻虎走保洋包裹把鼻中的疑聚件?利生代龍小植株的是幢養(yǎng)金立請(qǐng)?zhí)綍r(shí)*人工耕度中瓜博具有的液量圍分是什冬？|為T(mén)怩遺在媒體的生美就有,送可區(qū)向△千種龍中如人哪名物麻？作密產(chǎn)量降低,*埴變基“早在20世這鈿年代，科學(xué)家位就發(fā)現(xiàn)植料先生區(qū)附近I捌莖0j］的病毒報(bào)少.甚至丈病毒.因此.切Jfc一定大小的莖尖進(jìn)行機(jī)稅培養(yǎng)，再生的侑株就有M值不帶病毒?從而糠用脫毒苗.用脫毒苗迸行X博直制相關(guān)文獻(xiàn)，設(shè)計(jì)出一種透因植物花菊幽軼圈養(yǎng)中成正常植株的實(shí)整施鉀.回答下列問(wèn)題。(1)X博直制相關(guān)文獻(xiàn)，設(shè)計(jì)出一種透因植物花菊幽軼圈養(yǎng)中成正常植株的實(shí)整施鉀.回答下列問(wèn)題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是 O(3)從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過(guò)細(xì)胞的過(guò)程，最終可形成試管苗。步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的,這種繁殖方式屬于 繁殖。解析：本題借助胡蘿卜根組織塊的組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，考查考生理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決生物學(xué)問(wèn)題的能力；試題通過(guò)對(duì)組織培養(yǎng)流程的分析考查了科學(xué)思維素養(yǎng)。(1)植物細(xì)胞具有全能性，利用已分化的植物細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)成完整植株。 (2)形成層細(xì)胞分化程度低，全能性較高，更容易誘導(dǎo)形成愈傷組織，進(jìn)而獲得完整植株。 (3)愈傷組織的形成和試管苗的分化需要不同的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例，因此誘導(dǎo)愈傷組織的形成階段到分化階段需要不同的培養(yǎng)基。愈傷組織通過(guò)再分化過(guò)程，最終可形成試管苗。 （4）葉綠素的形成需要光，試管苗的發(fā)育也需要光，因此試管苗的誘導(dǎo)階段需要光照。 （5）通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得植株，屬于無(wú)性繁殖的一種，可以保持原品種的遺傳特性。答案：（1）全能性（或答：形成完整植株所需的全部基因 ）（2）形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織（3）誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同分化（或答：再分化）（4）誘導(dǎo)葉綠素的形成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用（5）遺傳特性無(wú)性［高考VS,教材］［人教選修3］P33為什么柚物的二黑花廨就噠培育部完整的柩株呢？我們知迺.具有某種生沏全部選傳信息的任何個(gè)輒胞.都具市發(fā)育成完整生嗣體的潛能，也就庭說(shuō),域個(gè)生物細(xì)胞都具有全能科的鞫點(diǎn)。因此,在現(xiàn)選上，生物的任何一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整植株的潛力.但是，在生物的生［人教選修3］P352.在本實(shí)驗(yàn)中.切取胡孽卜夠時(shí)強(qiáng)朝暴切取凝囑］弟展部學(xué).席因是這寺胡容易波導(dǎo)拶風(fēng)意格姐媽“譜思考一下1書(shū)［人教選修3］P38聚必整夜植―培一技―可以廊特優(yōu)我苗種的遺傳特性.還可以高效怏速地巍殲而的大量繁殖.因蛇人們形象地肥用于快速繁里優(yōu)良品種的植物期綱埼養(yǎng)技術(shù)，叫做植物的旗型富航技術(shù),也叫快速衰荒技術(shù)（ffi2-Sh［2018?全國(guó)卷I, 38］［生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題］回答下列問(wèn)題：（1）博耶（H.Boyer）和科恩（S.Cohen）將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)?？梢宰鳛檩d體外，還證明了 （答出兩點(diǎn)即可）。（2）體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^(guò) CaT參與的方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；而體外重組的噬菌體DNA!常需與組裝成完整噬菌體后，才能通過(guò)侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞。在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中，可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是（3）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過(guò)程中應(yīng)添加的抑制劑。解析：（1）將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)，該過(guò)程證明了體外重組的質(zhì)粒可以進(jìn)入受體細(xì)胞，真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)等。 （2）體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^(guò)Ca"參與的轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；體外重組的噬菌體 DNA通常需與蛋白質(zhì)外殼組裝成完整的噬菌體后，才能通過(guò)侵染的方法將重組噬菌體 DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；噬菌體侵染的是細(xì)菌，而不能寄生在其它細(xì)胞中，因此可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是細(xì)菌。（3）若要使蛋白質(zhì)不被降解，則大腸桿菌體內(nèi)不能存在蛋白酶，因此，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。同理，在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，也不能使蛋白質(zhì)降解，因此，應(yīng)添加蛋白酶抑制劑。答案：（1）體外重組的質(zhì)粒可以進(jìn)入體細(xì)胞；真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)（2）轉(zhuǎn)化外殼蛋白（或噬菌體蛋白）細(xì)菌（3）蛋白酶缺陷型蛋白酶［高考VS,教材］［人教選修3］P3?董蛆UNA嘉達(dá)宓齡的成球1力3年，博耶和科電（SCMicn）選用但作單一EmRl畤切位點(diǎn)的低倬頊tipSClOl,使之與非洲爪境?第冷菱白鼠因的DMA片很重蛆a重蛆的DXA薛人大麻桿匐口、4中*轉(zhuǎn)錄出相宜的niRNA,這個(gè)實(shí)片證明了廟粒不僅可由蚱為基國(guó)工方的我|—還可以短入?忤“電*|聞可以點(diǎn)而||飆馳中就勸表達(dá).園主理物料之間的或因史嗎堇此『＞網(wǎng)工程正凡同世中［人教選修3］P13中以大腦杵笛應(yīng)川里過(guò)匚巧用麟桿菌笫胞最值用的轉(zhuǎn)化方陽(yáng)是：首龍川C”處理踴胞.使里腮處于一種防吸收周陽(yáng)環(huán)［2017?全國(guó)卷I, 38］真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒(méi)有，原核生物沒(méi)有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的 RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因 A（有內(nèi)含子）可以表達(dá)出某種特定蛋白（簡(jiǎn)稱蛋白A）?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）某同學(xué)從人的基因組文庫(kù)中獲得了基因 A,以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白 A,其原因是。（2）若用家蠶作為表達(dá)基因 A的受體，在噬菌體和昆蟲(chóng)病毒兩種載體中，不選用作為載體，其原因是。（3）若要高效地獲得蛋白 A,可選用大腸桿菌作為受體。因?yàn)榕c家蠶相比，大腸桿菌具有（答出兩點(diǎn)即可）等優(yōu)點(diǎn)。（4）若要檢測(cè)基因A是否翻譯出蛋白A,可用的檢測(cè)物質(zhì)是（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。（5）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明 DNA^遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，也可以說(shuō)是基因工程的先導(dǎo)，如果說(shuō)他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示解析：（1）基因A的編碼區(qū)中有內(nèi)含子，在真核生物細(xì)胞內(nèi)把內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄形成的 RNA切除,而原核生物細(xì)胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄后不切除，轉(zhuǎn)錄后直接參與表達(dá)，所以翻譯形成的蛋白質(zhì)不是蛋白Ao（2）由于噬菌體是專性寄生在細(xì)菌體內(nèi)的病毒，無(wú)法侵染到真核生物家蠶細(xì)胞內(nèi)，所以不能用噬菌體作為運(yùn)載體。而家蠶屬于昆蟲(chóng)，故可用昆蟲(chóng)病毒作為運(yùn)載體。 （3）大腸桿菌作為受體菌是因?yàn)槠渚哂蟹敝持芷诙獭⒁着囵B(yǎng)等特點(diǎn)。 （4）檢測(cè)目的基因是否表達(dá)通常用抗原-抗體雜交技術(shù)。（5）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明 DNA^遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，證明了生物的遺傳物質(zhì)是DNA還為基因工程理論的建立提供了啟示， 這一啟示是DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體。答案：（1）基因A有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其初始車(chē)t錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的 RNA序列不能被切除，無(wú)法表達(dá)出蛋白 A（2）噬菌體噬菌體的宿主是細(xì)菌，而不是家蠶（3）繁殖快、容易培養(yǎng) （4）蛋白A的抗體（5）DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體［高考VS,教材］［人教選修3］P13林口的臬國(guó)等A股生勒加把由于廖鐵生物具有T其他生物沒(méi)有的特點(diǎn)；［繁瘙叁J多為單細(xì)感，遨傳費(fèi)質(zhì)相對(duì)較少等.因此r早期的基因工程操作都用螳售生物作為受體細(xì)胞.其中鼠大腦桿殖鹿用最為廣迂,大髓桿菌地胞最常用的活化方祐是！首先用仁之［人教選修3］P2

?DNAJt遭苦就房的證陰1944年，箋鼻里不￡口）等人通過(guò)事同妻型肺衣冢造菌的韓化%吩1不愧證明了生驗(yàn)的遣禱物質(zhì)是DNR.還記明了市區(qū)可以從二種文揚(yáng)軍］蚱忖端到另一抻生物個(gè)體「丈弗里等人的工作可以就走港因工福的無(wú)呼，「［2017?全國(guó)卷出，38,節(jié)選］編碼蛋白甲的DNA^列（序列甲）由A、B、GD＞E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示。甲［A1RimD1EIBICI□I五］瑞麟時(shí)間五］瑞麟時(shí)間回答下列問(wèn)題：（3）現(xiàn)通過(guò)基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激 T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含 T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對(duì)照，培養(yǎng)并定期檢測(cè) T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。①由圖2可知：當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO濃度，CO的作用是。②僅根據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少（填“A，，"b”"c'"D’或"E”）片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激 T淋巴細(xì)胞增殖的效果。解析：（3）①當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中 T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，可能是由于發(fā)生了接觸抑制，可用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液分瓶繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中， CO的作用是維持培養(yǎng)液的pH。②對(duì)照分析圖1和圖2可知，能刺激T淋巴細(xì)胞增殖的甲和乙中都含有 C片段，而對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖促進(jìn)作用很弱的丙中沒(méi)有 C片段，據(jù)此可知，若缺少C片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激 T淋巴細(xì)胞增殖的效果。答案：（3）①進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng) 維持培養(yǎng)液的pH②C［高考VS,教材］［人教選修3］P45貼滿胸壁的細(xì)胞需要重新用映饋白胸等處理,然后分瓶堆續(xù)培養(yǎng)川:細(xì)胞蜂錠用殖「.這樣的培養(yǎng)過(guò)程遛常被鞫為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的細(xì)胞般傳至代后就不易傳卜去［人教選修3］P46氣除環(huán)境削胞培養(yǎng)所需餐體主要有（＞2和口匕口是捌跑K希所必力的，立＞?的主要作用是維持培養(yǎng)液的國(guó)］進(jìn)行牛胞格養(yǎng)時(shí),通常梟用培養(yǎng)犯或松旗培養(yǎng)里.構(gòu)【借題發(fā)揮】理清教材，突破高考的瓶頸一一長(zhǎng)句描述類(lèi)題型問(wèn)題1:啟動(dòng)子與起始密碼、終止子與終止密碼有何區(qū)別？答案：?jiǎn)?dòng)子、終止子分別位于目的基因首端與尾端，它們均為 DN*段，而起始密碼、終止密碼均位于mRNAk,它們是由DNA專錄而來(lái)，為RNA^列。問(wèn)題2:切割目的基因和載體必須均使用同一種限制酶切割嗎？答案：不一定。目的基因和載體可以使用同一種限制酶，也可使用不同限制酶，只要切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠發(fā)生“互補(bǔ)配對(duì)”即可。問(wèn)題3:為何用未受精卵母細(xì)胞作細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞？答案：①營(yíng)養(yǎng)豐富。②體積大，易操作。③含有刺激已分化的細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì)。問(wèn)題4:細(xì)胞融合后，融合細(xì)胞中的染色體數(shù)、染色體組數(shù)應(yīng)如何計(jì)算？答案：體細(xì)胞雜交即兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，不管是染色體數(shù)、基因型還是染色體組數(shù)都采用直接相加的方法。C類(lèi)型2整體對(duì)比歷年同類(lèi)題，找共性和趨勢(shì)[2017?全國(guó)卷n]幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分， 幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：(1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的 mRNA常選用嫩葉而不選用老葉作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是(2)以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是(3)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w 細(xì) 胞， 原 因 是 (答出兩點(diǎn)即可)。(4)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中 )抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是解析：(1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從I1物體中提取幾丁質(zhì)酶的 mRNA常選用嫩葉而不選用老葉作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是嫩葉組織細(xì)胞易破碎。提取RNA時(shí)，提取液中需添加 RNA酶抑制劑，其目的是防止 RNA降解。(2)以mRN徼材料可以獲得cDNA其原理是在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRN朋模板按照堿基互補(bǔ)配又?的原則可以合成 cDNA(3)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無(wú)表達(dá)所需啟動(dòng)子。 (4)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)， DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。 (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常。答案：(1)嫩葉組織細(xì)胞易破碎 防止RNAW解(2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的彳用下，以 mRN網(wǎng)模板按照堿基互補(bǔ)配又?的原則可以合成 cDNA(3)目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無(wú)表達(dá)所需啟動(dòng)子(4)磷酸二酯鍵(5)目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常[2016?全國(guó)卷I,40]某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Amp^Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Amp表示氨茉青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BarHI酶切后，與用BarHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉?wèn)題：?jiǎn)?dòng)子BamH啟動(dòng)子BamHI質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有 （答出兩點(diǎn)即可），而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。（2）如果用含有氨茉青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是 ;并且 和的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落， 還需使用含有的固體培養(yǎng)基。（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其 DNA復(fù)制所需的原料來(lái)自 O解析：（1）作為運(yùn)載體必須具備如下特點(diǎn)：①能自主復(fù)制，從而在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存；②含標(biāo)記基因，以供重組DNA勺鑒定和選擇；③具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)以便外源 DN插入。（2）在含有氨茉青霉素的培養(yǎng)基上，只有具有 Amp的大腸桿菌才能夠生長(zhǎng)。而Amp位于質(zhì)粒上，故未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的大腸桿菌細(xì)胞中無(wú) Amp,故不能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，而僅含有質(zhì)粒載體的和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌均具有 AmP因而能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。目的基因的插入破壞了質(zhì)粒載體的 Tetr,故含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，從而與僅含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌得以區(qū)分。（3）噬菌體是病毒，無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無(wú)法自主合成 DNA需借助宿主細(xì)胞（受體細(xì)胞）才能完成DNA!（制。答案：（1）能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因（2）二者均不含有氨茉青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng) 含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因白^重組質(zhì)粒 （或答含有重組質(zhì)粒）二者均含有氨茉青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng) 四環(huán)素（3）受體細(xì)胞[2016?全國(guó)卷出]圖（a）中的三個(gè)DNM段上依次表示出了EcoRI、BanHI和Sau3Al三種限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)， 圖（b）為某種表達(dá)載體的示意圖（載體上的EcoRI、SaU3AI的切點(diǎn)是唯一的）。t. I.. IGAATrC GGAFCXT （jAIV^^ CTTAAG—— ——CCTAGG—— ——CTMG一根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題:（1）經(jīng)BanHii酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被酶切后的產(chǎn)物連接,理由是 （2）若某人利用圖（b）所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有,不能表達(dá)的原因是 能連接黏性末端又能連接平末端的是。解析：（1）由于限制酶Sau3Al與BariHI切割后形成的黏性末端相同， 所以經(jīng)BarHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被 SaiBAl酶切后的產(chǎn)物連接。（2）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目的基因的首端，終止子應(yīng)位于目的基因的尾端，這樣目的基因才能順利表達(dá)。圖中甲、丙均不符合，所以不能表達(dá)目的基因的產(chǎn)物。 （3）常見(jiàn)DNA連接酶的有E-coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 T4DNA連接酶。答案：（1）SaiBAl兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端（2）甲和丙甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，兩者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄（3）E-coliDNA連接酶T,DNAl接酶TQNA連接酶C類(lèi)型3-山之石一一亦可攻玉[2019?海南卷]人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價(jià)值的蛋白質(zhì) （Y）,該蛋白質(zhì)由一條多肽鏈組成。目前可以利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn) 丫。回答下列問(wèn)題。（1）若要獲得丫的基因，可從人的T細(xì)胞中提取作為模板，在催化下合成cDNA再利用技術(shù)在體外擴(kuò)增獲得大量Y的基因。（2）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。若將上述所得 Y的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的中，得到含目的基因的重組 Ti質(zhì)粒，則可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將該基因?qū)肽撤N植物的葉肉細(xì)胞中。若該葉肉細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)、篩選等得到了能穩(wěn)定表達(dá)Y的愈傷組織，則說(shuō)明Y的基因已經(jīng) O（3）天然的Y通常需要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱商岣咂錈岱€(wěn)定性，若要根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對(duì) Y進(jìn)行改造以提高其熱穩(wěn)定性，具體思路是解析：（1）由于人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生蛋白質(zhì)Y,要獲得丫的基因，可從人的T細(xì)胞中提取mRNA乍為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下，利用四種游離的脫氧核甘酸合成 cDNA再利用PC叱術(shù)（體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)）在體外擴(kuò)增獲得大量Y的基因。（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中，T-DNAM以攜帶目的基因轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體 DNA上，故需要Y的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T—DNA中得到含目的基因的重組Ti質(zhì)粒，把含目的基因的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入到農(nóng)桿菌中，再讓含目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物的葉肉細(xì)胞。若該葉肉細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)、篩選等得到了能穩(wěn)定表達(dá)Y的愈傷組織，則說(shuō)明Y的基因已經(jīng)整合到葉肉細(xì)胞染色體 DNA上。（3）蛋白質(zhì)工程需要從預(yù)期的蛋白質(zhì)的功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推出相應(yīng)的氨基酸序列，找到相應(yīng)的脫氧核甘酸序列，故對(duì) Y進(jìn)行改造以提高其熱穩(wěn)定性，需要找到第 6位氨基酸中的堿基所在的基因位置，參照密碼子表，將第 6位氨基酸甲的堿基替換為氨基酸乙的堿基。答案：（1）mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶PCR（2）T-DNA整合到葉肉細(xì)胞染色體DNA上（3）找到

第6位氨基酸中的堿基所在的基因位置，參照密碼子表，將第6位氨基酸甲的堿基替換為氨基酸乙的堿基[2019?天津卷]B基因存在于水稻基因組中，其僅在體細(xì)胞 (2n)和精子中正常表達(dá),但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究 B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。JMff修止r“對(duì)日神珅JMff修止r“對(duì)日神珅”玳T(mén)L'IJjK補(bǔ)LIST聊疆自的序列X富國(guó)后因子“端號(hào)?”曲理L,?寓等常rW札山據(jù)圖回答:(1)B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中(單選)。A.含B基因的染色體缺失DNAM合酶失活B基因發(fā)生基因突變B基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄(2)從水稻體細(xì)胞或中提取總RNA構(gòu)建文庫(kù)，進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與 Luc基因(表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光 )連接成融合基因(表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能 )，然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。(3)在過(guò)程①、②轉(zhuǎn)化篩選時(shí)，過(guò)程中T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，過(guò)程在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株過(guò)程中，以下鑒定篩選方式正確的是(多選)。A.將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DN肪子雜交B.以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行 DN冊(cè)子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的 mRN原交D.檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光(5)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個(gè)染色體組，判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的，而一般情況下水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不進(jìn)行發(fā)育，由此表明解析：本題借助基因工程相關(guān)知識(shí)，考查運(yùn)用所學(xué)知識(shí)對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行推理、解釋，并作出合理判斷或得出正確結(jié)論的能力；試題通過(guò) B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響體現(xiàn)了科學(xué)思維素養(yǎng)中的演繹與推理要素。 (1)B基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，會(huì)導(dǎo)致B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。(2)利用水稻體細(xì)胞或精子中提取的總 RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建的基因文庫(kù)為 cDNA文庫(kù)。(3)過(guò)程①需將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌，所以可在培養(yǎng)基中加入卡那霉素以篩選成功導(dǎo)入了基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。過(guò)程②農(nóng)桿菌感染水稻愈傷組織，農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的T-DNA可整合到受體細(xì)胞染色體DNA±。(4)水稻細(xì)胞中本來(lái)就有B基因，正常植株也會(huì)出現(xiàn)雜交帶，故A錯(cuò)誤；B、D選項(xiàng)是檢測(cè)Luc基因及其產(chǎn)物，BD正確；C選項(xiàng)檢測(cè)對(duì)象是卵細(xì)胞中 mRNA基因的表達(dá)具有選擇性，故正常水稻植株卵細(xì)胞中無(wú) B基因的mRNAC正確。(5)一般情況下，水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不能發(fā)育成胚，而轉(zhuǎn)基因植株未受精的卵細(xì)胞能發(fā)育成胚，說(shuō)明 B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。答案：(1)D (2)精子cDNA(3)② ①(4)BCD(5)B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚[2019?江蘇卷]圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖，載體質(zhì)粒 P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨茉青霉素抗性基因(amp)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：由I

…GAT，ATC?一⑴EcoRV酶切位點(diǎn)為…C1AfTAG…,EcoRV酶切出來(lái)的線性載體P1為 末端。（2）用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCRF增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺喋吟脫氧核甘酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為的脫氧核甘酸，形成P2;P2和目的基因片段在酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到 A、BC三類(lèi)菌落，其生長(zhǎng)情況如下表（“+”代表生長(zhǎng)，“―”代表不生長(zhǎng) ）。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是（填表中字母）類(lèi)，另外兩類(lèi)菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是菌落類(lèi)型平板類(lèi)型ABC無(wú)抗生素T+[+十氨節(jié)青霉素1++一四環(huán)素T+一一要出青霉素十四環(huán)素十一一（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行 PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置， PC蝶定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了 400bp片段 ，原 因 是圖2圖2解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)， 意在考查考生的理解能力和獲取信息能力。 （1）EcoRV酶切位點(diǎn)在酶所識(shí)別序列的中心軸線處，切割后產(chǎn)生的是平末端。 （2）DNA連接酶對(duì)平末端的連接效率較低，因此通常要將平末端改造成黏性末端后再進(jìn)行連接。由于目的基因片段的兩端各自帶一個(gè)腺喋吟脫氧核甘酸，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，處理后的質(zhì)粒兩端需要各添加一個(gè)堿基為胸腺喀咤的脫氧核甘酸；要將處理后的質(zhì)粒與目的基因連接起來(lái)，需要用 DNA連接酶。（3）由于四環(huán)素抗性基因中含有 EcoRV酶識(shí)別的序列及切割位點(diǎn)，所以形成的重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因已經(jīng)被破壞，而氨茉青霉素抗性基因正常。根據(jù)表中結(jié)果可知， A菌落抗氨茉青霉素和四環(huán)素，說(shuō)明 A菌落中導(dǎo)入的是P0質(zhì)粒；B菌落抗氨芳青霉素而不抗四環(huán)素，說(shuō)明B菌落中導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒； C菌落既不抗氨茉青霉素，也不抗四環(huán)素，說(shuō)明 C菌落中沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒。（4）由于處理后的P0質(zhì)粒的兩個(gè)末端都含一個(gè)胸腺喀咤的脫氧核甘酸，而目的基因片段的兩端各自帶一個(gè)腺喋吟脫氧核甘酸，所以目的基因在和 P0質(zhì)粒連接時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)兩種情況：正向連接和反向連接。分析圖2可知，理論上可以選擇的引物組合有甲和丙、乙和丙兩種情況。如果選擇甲和丙這對(duì)引物，則無(wú)論目的基因是否正確插入，擴(kuò)增的片段都是50bp+300bp+100bp=450bp,不符合要求；如果選擇乙和丙這對(duì)引物，正向連接和反向連接后所得結(jié)果不同，所以應(yīng)選擇乙和丙這對(duì)引物進(jìn)行 PC蝶定。如果目的基因和P0質(zhì)粒反向連接，則引物乙會(huì)出現(xiàn)在重組質(zhì)粒的外側(cè)，此時(shí)若加入引物甲和乙，則可以擴(kuò)增出 300bp+100bp=400bp的片段。答案：⑴平（2）胸腺喀咤（T）DNA連接（3）BA類(lèi)菌落含有P0C類(lèi)菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒（4）乙丙目的基因反向連接［命題寸|秘］從近五年高考統(tǒng)計(jì)看，課標(biāo)卷對(duì)基因工程考查明顯多于其他工程技術(shù)，考查角度側(cè)重于基因工程的工具及其特點(diǎn)，基因工程操作程序尤其是基因表達(dá)載體的構(gòu)建與目的基因檢測(cè)、鑒定。課標(biāo)卷對(duì)細(xì)胞工程的考查僅次于基因工程，考查內(nèi)容多涉及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與融合技術(shù)，體細(xì)胞核移植技術(shù)（常滲透考查胚胎工程技術(shù)）及植物組織培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交技術(shù)。［命題趨勢(shì)］對(duì)選修3的考查將集中在結(jié)合科技前沿考查基因工程的基礎(chǔ)知識(shí)，預(yù)計(jì)對(duì)考生分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力考查將在未來(lái)受到重視；細(xì)胞工程仍會(huì)以細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)，與基因工程等其他知識(shí)相結(jié)合命題的可能性比較大；答題關(guān)鍵語(yǔ)句均源自教材，故精準(zhǔn)記憶教材相關(guān)內(nèi)容是解題關(guān)鍵。題組二?？碱A(yù)測(cè)練強(qiáng)能力C預(yù)測(cè)一聚焦基因工程1.［2019?吉安市高三模擬］基因工程能夠賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出符合人們需要的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）“中心法則”是基因工程興起的基礎(chǔ)理論之一，克里克提出的“中心法則”闡明的遺傳信息的流動(dòng)方向是（用“一”連接）。（2）從基因文庫(kù)中提取的目的基因可通過(guò) PCR進(jìn)行擴(kuò)增，簡(jiǎn)要敘述擴(kuò)增目的基因的大致過(guò)程：。在PCRi程中，兩個(gè)引物是的結(jié)合位點(diǎn)，也是子鏈延伸的起點(diǎn)，dNTP在此過(guò)程中的作用是。與基因組文庫(kù)相比，cDNA文庫(kù)的基因數(shù)相對(duì)要少。其原因是（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插入到植物細(xì)胞染色體的 DNA上，這種方法的目的是。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞采用最多的方法是顯微注射法，采用顯微注射儀直接將注入到受精卵細(xì)胞中。解析：（1）克里克提出的中心法則內(nèi)容包括：遺傳信息可以從 DNA流向DNA即DNA的自我復(fù)制，也可以由DNA流向RNA進(jìn)而流向蛋白質(zhì)，故克里克提出的“中心法則”闡明的遺傳信息的流動(dòng)方向是般門(mén)師。（2）擴(kuò)增目的基因的大致過(guò)程為：目的基因（DNA）受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在熱穩(wěn)定性 DNA聚合酶作用下延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次。在 PCR過(guò)程中，兩個(gè)引物是Taq酶的結(jié)合位點(diǎn)，也是子鏈延伸的起點(diǎn)，dNTP在此過(guò)程中的作用是提供合成 DNA的原料和能量?；蚪M文庫(kù)包含了生物的所有基因，cDNA文庫(kù)是用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的 mRNAE轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DN*段，所以與基因組文庫(kù)相比，cDNA文庫(kù)的基因數(shù)相對(duì)要少。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化，所以轉(zhuǎn)化的目的是使目的基因的遺傳特性在受體細(xì)胞中維持穩(wěn)定和表達(dá)。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前需要先將目的基因和運(yùn)載體結(jié)合形成基因表達(dá)載體，所以將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞采用最多的方法是顯微注射法，采用顯微注射儀直接將基因表達(dá)載體注入到受精卵細(xì)胞中。6答案：（1）響D（2）目的基因（DNA）受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在熱穩(wěn)定性DN咪合酶作用下延伸， 如此重復(fù)循環(huán)多次 Taq酶提供合成DNA的原料和能量 cDNA文庫(kù)只能收集到生物發(fā)育到某時(shí)期已發(fā)生轉(zhuǎn)錄的基因，而基因組文庫(kù)能收集到全部基因 （3）使目的基因的遺傳特性維持穩(wěn)定和表達(dá) 基因表達(dá)載體［2019?安慶二模］［生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題］我國(guó)科學(xué)家利用Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉花，培育出轉(zhuǎn)基因的抗蟲(chóng)棉，對(duì)棉鈴蟲(chóng)有較強(qiáng)抗性?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）從蘇云金芽抱桿菌中分離出 Bt毒蛋白基因，構(gòu)建導(dǎo)入棉花細(xì)胞。獲得的抗蟲(chóng)棉也能產(chǎn)生相同的Bt毒蛋白，從翻譯的角度分析，其原理是（2）從分子水平檢測(cè)抗蟲(chóng)棉是否培育成功，可以利用抗原-抗體雜交來(lái)檢測(cè)。若有出現(xiàn)，說(shuō)明已形成Bt毒蛋白。在該檢測(cè)方法中，Bt毒蛋白屬于（3）從個(gè)體水平鑒定抗蟲(chóng)棉是否培育成功，取一定量長(zhǎng)勢(shì)良好的轉(zhuǎn)基因棉花植株接種適量的棉鈴蟲(chóng)作為實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組應(yīng)如何設(shè)置在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察并統(tǒng)計(jì)兩組棉花葉片的受損程度。獲得的抗蟲(chóng)棉若要擴(kuò)大生產(chǎn)，可以通過(guò)技術(shù)進(jìn)行微型繁殖。（4）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，抗蟲(chóng)棉大面積種植的區(qū)域還需配套種植一定量的普通棉花，從進(jìn)化的角 度 分 析， 原 因 是解析：（1）目的基因需要與載體結(jié)合構(gòu)建成基因表達(dá)的載體，再導(dǎo)入受體細(xì)胞。抗蟲(chóng)棉也能產(chǎn)生相同的Bt毒蛋白，從翻譯的角度分析，其原理是所有生物共用一套遺傳密碼。 （2）抗原—抗體雜交中，Bt毒蛋白為抗原，若培育成功，產(chǎn)生的Bt毒蛋白可以與抗體結(jié)合形成雜交帶。（3）實(shí)驗(yàn)組接種棉鈴蟲(chóng)給轉(zhuǎn)基因植株，則對(duì)照組應(yīng)該接種棉鈴蟲(chóng)給普通植株?？瓜x(chóng)棉若要擴(kuò)大生產(chǎn)，通過(guò)植物組織培養(yǎng)可以在室內(nèi)生產(chǎn)大量的幼苗，且遺傳物質(zhì)不會(huì)改變。 （4）全部種植抗蟲(chóng)棉會(huì)導(dǎo)致具有抗性的棉鈴蟲(chóng)保留下來(lái)，通過(guò)多年的種植，抗性個(gè)體的比例逐年提高，抗性基因頻率也逐年提高，最終可能導(dǎo)致抗蟲(chóng)棉抗蟲(chóng)能力下降或失去抗蟲(chóng)特性。答案：（1）基因表達(dá)載體自然界中的生物共用一套遺傳密碼 （2）雜交帶抗原（3）取等量長(zhǎng)勢(shì)一致的普通棉花植株接種等量的棉鈴蟲(chóng) 植物組織培養(yǎng)（4）避免棉鈴蟲(chóng)的抗性（抗Bt毒蛋白）基因頻率增加過(guò)快［2019?安徽省A10聯(lián)盟高三一模］a-1抗胰蛋白酶（a-1—AT）是人類(lèi)血漿中最重要的蛋白酶抑制劑，其主要作用是保護(hù)機(jī)體正常細(xì)胞和器官不受蛋白酶的損傷，抑制感染和炎癥，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的平衡。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組 a-1抗胰蛋白酶（HumanA1AT兩兩種方法。回答下列問(wèn)題：⑴為獲取a-1—AT基因，可采集人的血液，提取合成總cDNA然后以cDNA為模板，采用PCR^術(shù)擴(kuò)增a-1—AT基因，該技術(shù)需要的酶（2）b過(guò)程中，可添加酚類(lèi)化合物，其作用是。將a-1—AT基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞時(shí)，可用處理細(xì)胞，使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞。（3）已知a-1抗胰蛋白酶需要經(jīng)過(guò)膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。據(jù)此推導(dǎo)，方法（填“I”或"n”）具有優(yōu)勢(shì)，其優(yōu)勢(shì)是

（4）若要檢測(cè)小麥胚乳細(xì)胞或大腸桿菌細(xì)胞中是否翻譯出 HumanAIAT可用的檢測(cè)物質(zhì)是HumanAIAT（填“基因”或“抗體”）。解析：（1）總cDNA是以mRN朋模板逆轉(zhuǎn)錄合成的，所以需要提取人的總RNA^mRNAPCR擴(kuò)增的原理是DNA復(fù)制，需要的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。（2）b過(guò)程表示農(nóng)桿菌感染小麥?zhǔn)荏w細(xì)胞，酚類(lèi)物質(zhì)可吸引農(nóng)桿菌移向小麥?zhǔn)荏w細(xì)胞，使農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化；將a-1—AT基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞時(shí)，可用 Ca"處理細(xì)胞，使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞。 （3）由于大腸桿菌為原核生物，無(wú)生物膜系統(tǒng)，而小麥為真核生物，具有生物膜系統(tǒng)，故要獲取 ”-1抗胰蛋白酶，選擇HumanA1A修肽進(jìn)行HumanA1AT可用抗原一方法I具有優(yōu)勢(shì)，其優(yōu)勢(shì)是小麥屬于真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始高效加工。（4）HumanA1A修肽進(jìn)行HumanA1AT可用抗原一答案：（1）總RNA俄mRNA）熱穩(wěn)定DNAm合酶（Taq酶）（2）吸引農(nóng)桿菌移向小麥?zhǔn)荏w細(xì)胞，有利于“-1—AT基因轉(zhuǎn)化成功Ca2+（3）I小麥屬于真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始HumanA1AT多肽進(jìn)行高效加工（4）抗體［易錯(cuò)警示］.使用限制酶的注意點(diǎn)）一般用同種限制酶切割載體和目的基因。（2）不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。DNA1接酶wDNA聚合酶DNA1接酶連接兩個(gè)DNM段，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核甘酸添加到脫氧核甘酸鏈上。限制酶wDNA酶w解旋酶限制酶是切割某種特定的脫氧核甘酸序列，并使兩條鏈在特定的位置斷開(kāi)； DNA酶是將DNA水解為脫氧核甘酸；解旋酶是將 DNA的兩條鏈間的氫鍵打開(kāi)形成兩條單鏈。啟動(dòng)子、終止子（1）啟動(dòng)子（DNA片段）w起始密碼子（RNA）。（2）終止子（DNA片段）w終止密碼子（RNA）。C預(yù)測(cè)二聚焦細(xì)胞工程4.［經(jīng)典高考］某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、丫和Z）,每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià) （能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。noon280002400020000L6WU12000snno40no第五次免糧次數(shù)noon280002400020000L6WU12000snno40no第五次免糧次數(shù)若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的 B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗 A抗體的雜交瘤細(xì)胞。回答下列問(wèn)題：（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到 16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的 X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是小鼠，理由是 O（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有,體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是（3）雜交瘤細(xì)胞中有個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是條。（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是解析：（1）據(jù)圖分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上,其中小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。 （2）融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和 B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞形成后，小鼠的免疫 B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)新的細(xì)胞核。小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條）和骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）融合后，染色體數(shù)目最多可達(dá)100條。（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)也是有限的。答案：（1）四YY小鼠的抗體效價(jià)最高（2）B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%（3）1 100（4）不能無(wú)限增殖［經(jīng)典高考］甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分 A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有 A和B的新型藥用植物。回答下列問(wèn)題：（1）為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用酶和酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成組織，然后經(jīng)過(guò)形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為（2）上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是（3）這種雜交植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。解析：（1）該新型藥用植物是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的，要獲得有活力的原生質(zhì)體PEG化學(xué)誘PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑（物理方法：離心、振動(dòng)等）誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，該過(guò)程利用了植物細(xì)胞的全能性。 （2）如果植物甲、乙是兩個(gè)物種，二者不能通過(guò)有性雜交產(chǎn)生可育后代，原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體聯(lián)會(huì)異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、乙通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的，因?yàn)樵跍p數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會(huì)，產(chǎn)生正常的配子。由于甲、乙都是二倍體，因此，植物體細(xì)胞雜交得到的后代是異源多倍體 （四倍體）。（3）人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域等因素限制，而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn)，因此，植物細(xì)胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子，用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后即可得到人工種子。答案：（1）纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化（分化）植物體細(xì)胞雜交技術(shù) （2）由受精卵發(fā)育而來(lái)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體 在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常 （3）胚狀芽、不定芽、頂芽、腋芽［2019?湖南省懷化市模擬］單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可以大量制備，已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和治療。用 H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如下圖所示：

HTN4俄毒RNA^DNA尢HTN4俄毒RNA^DNA尢限用電

網(wǎng)控基因②H7N9抗 一原物?一o..I③抗驚喜口:「小瓜受體姍袍Irtn小鼠慳麻細(xì)加胞IXL皆一體外一單克隆地胞1篩選中培養(yǎng)憂體用的方（2）向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞I是,細(xì)胞n應(yīng)具有的特點(diǎn)是（3）體外培養(yǎng)細(xì)胞n,首先應(yīng)保證其處于的環(huán)境中，其次需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度等。（4）對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞n還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和檢測(cè)。（5）若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的作為疫苗。解析：（1）過(guò)程③是將重組DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞，常用的方法是顯微注射技術(shù)。 （2）向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，其目的是使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，進(jìn)而使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生能分泌所需抗體的已免疫的B細(xì)胞（或漿細(xì)胞），而產(chǎn)生已免疫的B細(xì)胞（或漿細(xì)胞）的過(guò)程屬于體液免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞I能分泌抗體，因此是已免疫的 B細(xì)胞（或漿細(xì)胞）。細(xì)胞H是從細(xì)胞I中篩選出來(lái)的、能分泌所需抗體的已免疫的 B細(xì)胞（或漿細(xì)胞）；由于導(dǎo)入了無(wú)限增殖調(diào)控基因，所以細(xì)胞n既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 （3）體外培養(yǎng)細(xì)胞n需借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，應(yīng)保證其處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中。 （4）對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞n還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和（專一）抗體檢測(cè)，才能獲得足量所需要的細(xì)胞。 （5）疫苗為毒性弱的抗原，因此要預(yù)防 H7N9禽流感，可以用圖中的抗原蛋白作為疫苗。答案：（1）顯微注射技術(shù) （2）體液B淋巴細(xì)胞（或漿細(xì)胞）既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體（3）無(wú)菌、無(wú)毒（4）（專一性）抗體（5）抗原蛋白整合訓(xùn)練（十五）基因工程和細(xì)胞工程［全員必做題］1.［2019?河南省洛陽(yáng)市統(tǒng)考］草莓營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高且有保健功效， 但卻容易受到病毒的感染。科學(xué)家常采用兩種方法培育新品種：其一，培育無(wú)病毒組培苗；其二，將草莓輕型黃邊病毒的外殼蛋白基因（SMYELSCP）導(dǎo)入草莓基因組中培育出轉(zhuǎn)基因抗病毒草莓。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：（1）若培育無(wú)病毒組培苗，通常取植株的進(jìn)行組織培養(yǎng)。（2）利用PC破術(shù)擴(kuò)增目的基因SMYEL/CP,其前提是,以便根據(jù)這一序列合成引物。為維持 pH基本不變，需要在PCWE應(yīng)體系中加入。（3）重組載體上應(yīng)含有特定的（填“復(fù)制原點(diǎn)”、“啟動(dòng)子”或“標(biāo)記基因”），它能被受體細(xì)胞的所識(shí)別，以便于催化轉(zhuǎn)錄過(guò)程。為檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,常采用分子雜交技術(shù)，該技術(shù)的具體做法是（4）草莓根系分布淺蒸騰量大，對(duì)水分要求嚴(yán)格。我國(guó)西北一些地區(qū)曾大量種植草莓，但由于降雨量少，致使許多地方的草莓長(zhǎng)成半死不活狀，其失敗的原因主要是違背了 原理。解析：（1）植物的莖尖或根尖等分生區(qū)細(xì)胞幾乎不含病毒，因此培育無(wú)病毒組培苗通常采用植株莖尖或根尖等分生區(qū)進(jìn)行組織培養(yǎng)。 （2）利用PCRa術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。為維持 pH基本不變，需要在PCR反應(yīng)體系中加入緩沖液。（3）為保證目的基因的表達(dá)，重組載體上應(yīng)含有特定的啟動(dòng)子，它能被受體細(xì)胞的RNA聚合酶所識(shí)別，以便于催化轉(zhuǎn)錄過(guò)程。為檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA常采用分子雜交技術(shù)，該技術(shù)的具體做法是：從轉(zhuǎn)基因生物中提取 mRNA用標(biāo)記的目的基因作探針與mRN原交。如果顯示出雜交帶，則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA⑷我國(guó)西北一些地區(qū)曾大量種植草莓，但由于降雨量少，致使許多地方的草莓長(zhǎng)成半死不活狀，其失敗的原因主要是沒(méi)有考慮生物與環(huán)境相適應(yīng)，違背了生態(tài)工程遵循的協(xié)調(diào)與平衡原理。答案：（1）分生區(qū)附近（如莖尖）（2）要有一段已知目的基因的核甘酸序列 緩沖?夜（3）啟動(dòng)子RNA聚合酶從轉(zhuǎn)基因生物中提取mRNA用標(biāo)記的目的基因作探針與mRN原交。如果顯示出雜交帶，則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA（4）協(xié)調(diào)與平衡[2019?安徽滁州高三期末]蘋(píng)果等果實(shí)的果肉細(xì)胞液泡中有豐富的無(wú)色的多酚類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其他一些囊泡結(jié)構(gòu)中含有多酚氧化酶 （PPO）,催化多酚氧化成褐色物質(zhì)，此過(guò)程稱為果實(shí)褐變?？茖W(xué)家利用基因沉默技術(shù)培育了一種不褐變的轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是,該方法中需將目的基因插入到農(nóng)桿菌的上。（2）培育不褐變的蘋(píng)果采用的是第二代基因工程技術(shù)，導(dǎo)入的是蘋(píng)果細(xì)胞原本就有的多酚氧化酶基因（PPO基因），當(dāng)細(xì)胞內(nèi)有許多份PPO基因時(shí)，PPO基因形成的mRNA：間容易形成雙鏈區(qū)而失去機(jī)會(huì)，從而導(dǎo)致多酚氧化酶含量大大減少?；虺聊譃檗D(zhuǎn)錄水平的沉默 （TGS）和轉(zhuǎn)錄后水平的沉默（PTGS）,則培育不褐變蘋(píng)果的轉(zhuǎn)基因沉默屬于（填“TGS或"PTGS）。（3）可用酶從蘋(píng)果基因組中切取PPO基因，也可用PCR技術(shù)從蘋(píng)果基因組中克隆出PPO基因，則要實(shí)現(xiàn)PCR蘭點(diǎn)克隆DNA片段，最關(guān)鍵的是設(shè)計(jì)。解析：（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法， 此外還有基因槍法、花粉管通道法等；該方法中，應(yīng)該將目的基因插入到農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的T-DNA同轉(zhuǎn)移DNA比。（2）PPO基因通過(guò)轉(zhuǎn)錄形成mRNA若形成的mRNA±多，相互之間容易形成雙鏈區(qū)，導(dǎo)致不能正常翻譯形成蛋白質(zhì)（多酚氧化酶），導(dǎo)致多酚氧化酶含量大大降低；由于以上過(guò)程導(dǎo)致翻譯不能正常進(jìn)行，因此屬于轉(zhuǎn)錄后水平的沉默 （PTGS）。（3）PPO基因?yàn)槟康幕颍梢岳孟拗泼笇?duì)其進(jìn)行切割；實(shí)現(xiàn)PCRt點(diǎn)克隆DNA片段的技術(shù)是PCR該技術(shù)最關(guān)鍵是設(shè)計(jì)引物序列。答案：（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法Ti質(zhì)粒的T-DNA（2）轉(zhuǎn)錄翻譯PTGS⑶限制引物序列[2019?廣東省珠海市質(zhì)量監(jiān)測(cè)]a-抗胰蛋白酶可以治療肺氣腫等疾病。下圖是科學(xué)家培育含人口-抗胰蛋白酶因子基因（mAAT）的轉(zhuǎn)基因山羊的流程圖，請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：獲取mAA也因一構(gòu)建基因表達(dá)載體一顯微注射導(dǎo)入山羊受精卵一形成胚胎一將胚胎移入受體母羊一發(fā)育成轉(zhuǎn)基因山羊（1）利用PCRa術(shù)對(duì)mAA也因進(jìn)行擴(kuò)增，前提是要有一段以 mAA餌因的核甘酸序列為模板合成的。擴(kuò)增過(guò)程中，該物質(zhì)與 DNA莫板鏈的3'端結(jié)合，理由是（2）目的基因可以直接從生物體分離得到，也可以通過(guò)人工合成獲取。請(qǐng)推測(cè)由 mRNA<轉(zhuǎn)錄合成人口-抗胰蛋白酶因子基因（mAAT）的大致過(guò)程： （用文字和箭頭表述）。構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是。為了使mAATi因只在山羊乳腺中表達(dá)，需要在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)在mAA餌因前端加上在乳腺中特異性表達(dá)的,同時(shí)還需要有標(biāo)記基因，其作用是 O（4）胚胎移植中，應(yīng)選擇有 的個(gè)體作為受體母羊，并對(duì)受體母羊進(jìn)行同期發(fā)情處理。

解析：（1）利用PCR^術(shù)對(duì)mAA蝕因進(jìn)行擴(kuò)增，前提是要有一段以 mAA蝕因的核甘酸序列為模板合成的引物。由于DNA合成時(shí)只能從3'端延伸，因此擴(kuò)增過(guò)程中，該物質(zhì)應(yīng)與 DN模板鏈的3'端結(jié)合。（2）由mRN點(diǎn)轉(zhuǎn)錄合成人a-抗胰蛋白酶因子基因（mAAT）的大致過(guò)程：mRNA雪凈DNARNA雜交雙鏈一單鏈DNDNA^酶人a-抗胰蛋白酶因子基因（mAAT）。（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。啟動(dòng)子是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中 RNAM合酶的識(shí)別位點(diǎn)，為了使mAA餌因只在山羊乳腺中表達(dá)，需要在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)在 mAA也因前端加上在乳腺中特異性表達(dá)的啟動(dòng)子；標(biāo)記基因的作用是將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。 （4）胚胎移植中，應(yīng)選擇有健康體逆轉(zhuǎn)錄酶 （2）mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶 （2）mRNA——DNARNA雜交雙鏈一單鏈⑶使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可

啟動(dòng)子 將含有目的基因的細(xì)胞篩選答案：（1）引物DNA合成只能從3'端延伸DN/DN望與酶人”-抗胰蛋白酶因子基因（mAAT）遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用出來(lái)（4）健康體質(zhì)和正常繁殖能力[2019?廣東省六校高三聯(lián)考理綜試題]我國(guó)某些地區(qū)常年干旱少雨，將小麥耐旱基因TaLEA3導(dǎo)入到不耐旱的藥用植物丹參中，可提高后者的耐旱性?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）TaLEA3基因是種子成熟后期大量表達(dá)的一類(lèi)基因， 請(qǐng)推測(cè)該基因所表達(dá)蛋白的主要功能是 。（答出兩點(diǎn)即可）（2）為確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的,如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的是否得到提高。（3）假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交， 子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為 3:時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因的整合情況是 O（4）葉綠體內(nèi)大多數(shù)基因的排列方式、轉(zhuǎn)錄與翻譯系統(tǒng)均與 （填“麻生物”或“真核生物”）相似，將目的基因?qū)氲饺~綠體基因組內(nèi)能避免傳統(tǒng)基因工程所帶來(lái)的基因污染， 其 原 因 是解析：（1）TaLEA3基因?qū)儆谛←溎秃祷颍?其表達(dá)的蛋白質(zhì)可以保護(hù)細(xì)胞中的酶免受細(xì)胞脫水而損傷、保護(hù)細(xì)胞器如線粒體免受細(xì)胞脫水而損傷、保護(hù)細(xì)胞膜免受細(xì)胞脫水而損傷。（2）檢測(cè)耐旱基因是否正確表達(dá)，可利用抗原一抗體雜交實(shí)驗(yàn)，因此應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物。如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平鑒定，即需要在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的耐旱性是否真正得到提高。 （3）二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3:1時(shí)，說(shuō)明其親本為雜合體，則可推測(cè)一個(gè)耐旱基因整合到了不耐旱植株的一條染色體上，而另一條染色體上無(wú)耐旱基因。 （4）葉綠體內(nèi)的DNA^與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體，與原核生物相似。因此葉綠體大多數(shù)基因的排列方式、轉(zhuǎn)錄與翻譯系統(tǒng)均與原核生物相似。將目的基因?qū)氲饺~綠體基因組內(nèi)能避免傳統(tǒng)基因工程所帶來(lái)的基因污染，其原因是葉綠體基因組不會(huì)進(jìn)入花粉中，隨花粉傳遞，而可能造成的“基因逃逸”問(wèn)題。答案：（1）①保護(hù)細(xì)胞中的酶免受細(xì)胞脫水而損傷；②保護(hù)細(xì)胞器如線粒體免受細(xì)胞脫水而損傷；③保護(hù)細(xì)胞膜免受細(xì)胞脫水而損傷（2）表達(dá)產(chǎn)物耐旱性一個(gè)耐旱基因整合到了不耐旱植株的一條染色體上（4）原核生物 葉綠體基因組不會(huì)進(jìn)入花粉中，隨花粉傳遞，而可能造成的“基因逃逸”問(wèn)題[2019?四川省診考]由于“人一人雜交瘤技術(shù)”存在雜交瘤細(xì)胞體外傳代不穩(wěn)定、抗體親合力低等缺陷，目前單克隆抗體大多是鼠源性的，應(yīng)用于人體治療時(shí)存在諸多問(wèn)題?？茖W(xué)家通過(guò)基因工程技術(shù)，可以最大程度降低抗體的鼠源性，降低甚至消除人體對(duì)抗體的排斥反應(yīng)?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）從經(jīng)過(guò)抗原免疫個(gè)體的細(xì)胞中提取mRNA通過(guò)方法獲取目的基因。將目的基因在體外大量擴(kuò)增可以采用技術(shù)。（2）為防止目的基因與質(zhì)粒發(fā)生自身環(huán)化與隨意連接，在切割目的基因和質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)該注意。為了使重組質(zhì)粒更易導(dǎo)入受體菌完成轉(zhuǎn)化過(guò)程，可以采用處理受體菌。（3）檢測(cè)受體細(xì)胞是否合成抗體的方法是?；蚬こ讨苽涞膯慰古c雜交瘤技術(shù)制備的單抗相比，最突出的優(yōu)點(diǎn)是解析：（1）獲取制備單克隆抗體的目的基因，可以從經(jīng)過(guò)抗原免疫個(gè)體的漿細(xì)胞中提取mRNA然后通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得 DNA將目的基因在體外大量擴(kuò)增可以采用 PC叱術(shù)。（2）為防止目的基因與質(zhì)粒發(fā)生自身環(huán)化與隨意連接，在切割目的基因和質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)該注意使用不同限制酶切割目的基因與質(zhì)粒，以形成不同的黏性末端。為了使重組質(zhì)粒更易導(dǎo)入受體菌完成轉(zhuǎn)化過(guò)程，可以采用 CaCl2處理受體菌。（3）檢測(cè)受體細(xì)胞是否合成抗體的方法是抗原—抗體雜交?；蚬こ讨苽涞膯慰古c雜交瘤技術(shù)制備的單抗相比，最突出的優(yōu)點(diǎn)是不具有特異細(xì)胞的抗原性、能避免產(chǎn)生排斥反應(yīng)。答案：（1）漿逆轉(zhuǎn)錄 PCR（2）使用不同限制酶切割目的基因與質(zhì)粒 CaCl2（3）抗原-抗體雜交 不具有特異細(xì)胞的抗原性、能避免產(chǎn)生排斥反應(yīng)［2019?天津一中高三月考］Bt基因即蘇云金芽抱桿菌基因，因其表達(dá)產(chǎn)物 Bt毒蛋白具有殺蟲(chóng)效果好、安全、高效等優(yōu)點(diǎn)而成為應(yīng)用最為廣泛的轉(zhuǎn)殺蟲(chóng)基因。下圖為培育轉(zhuǎn) Bt基因抗蟲(chóng)棉幼苗的基本操作過(guò)程，請(qǐng)分析回答：（1）Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫(kù)中獲取，也可以從其cDNA文庫(kù)中獲取。從前者獲取的Bt基因（含有/不含有）啟動(dòng)子。（2）若利用PCR技術(shù)從cDNA文庫(kù)中獲取Bt基因（基因序列未知），需根據(jù)Bt蛋白中的氨基酸序列設(shè)計(jì)引物，引物的序列可以有多種，原因是。在PCR體系中需加入其中的（全部/任意1種/其中2種）引物。若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為種。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中， 為了方便篩選含有目的基因的細(xì)胞， 作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有,Ti質(zhì)粒中能幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上的序列稱為解析：（1）某種生物的基因組文庫(kù)包含了這種生物的所有基因。因此，從Bt基因組文庫(kù)中獲取的Bt基因含有啟動(dòng)子。（2）根據(jù)Bt蛋白中的氨基酸序列設(shè)計(jì)引物，首先要根據(jù)基因表達(dá)過(guò)程推知基因的堿基序列。由于一種氨基酸可能有多種密碼子，對(duì)應(yīng)生物 DNA堿基序列就會(huì)有多種。因此，根據(jù)Bt蛋白中的氨基酸序列設(shè)計(jì)的引物序列會(huì)有多種。多種引物中只有兩種引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，因此，若基因序列未知，在 PCR體系中需加入其中的全部引物；若基因序列已知，則通常每條單鏈對(duì)應(yīng)一種引物，引物的序列為 2種。（3）一個(gè)基因表達(dá)載體包含目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)。因此在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，為了方便篩選含有目的基因的細(xì)胞，作為運(yùn)載體的 Ti質(zhì)粒應(yīng)含有標(biāo)記基因。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNM段（可轉(zhuǎn)移的DNA）可幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上。答案：（1）含有（2）一種氨基酸可能有多種密碼子，對(duì)應(yīng)生物 DNA堿基序列就會(huì)有多種全部2（3）標(biāo)記基因T-DNA何轉(zhuǎn)移DNA）［重點(diǎn)選做題］.［2019?廣東湛江高三綜測(cè)］目前明星代言藥品廣告成了人們的熱議，某廣告聲稱其有效成分是一種基因工程生產(chǎn)的蛋白質(zhì)，服用后具有一定的抑癌功效，你認(rèn)為其不科學(xué)之處是。某生物興趣小組的同學(xué)從資料上獲知：二氯二乙胺能夠與 DNA分子發(fā)

生反應(yīng)，從而阻止參與DNA復(fù)制的酶與DNA相互作用。他們推測(cè)：二氯二乙胺能抑制癌細(xì)胞的增殖，并就此問(wèn)題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了探究。實(shí)驗(yàn)材料：肝部長(zhǎng)有腫瘤的小鼠、二氯二乙胺溶液、蒸儲(chǔ)水、生理鹽水、含有全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)液、顯微鏡、血球計(jì)數(shù)板、試管、吸管等。（1）其中某位同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作如下： （請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容補(bǔ)充完整）①在無(wú)菌培養(yǎng)皿中加入適量的培養(yǎng)液，切取腫瘤組織，剪碎并用胰蛋白酶處理，使其分散開(kāi)來(lái)，置于搖床上培養(yǎng)。②取無(wú)菌的試管5支，加入適量的培養(yǎng)液，編號(hào) 1、2、3、4、5,并在1—4號(hào)試管中加入適量的不同濃度的二氯二乙胺溶液，5號(hào)試管中加入③從培養(yǎng)皿中吸取等量的培養(yǎng)液置于 1—5號(hào)試管中，振蕩后，在冰箱中培養(yǎng)一段時(shí)間。④取出5支試管振蕩后，從中吸取等量的培養(yǎng)液置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，在顯微鏡下計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)。2）請(qǐng)你糾正該同學(xué)操作上的錯(cuò)誤^_ （3）另一位同學(xué)按照正確的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，得到的結(jié)果如下：實(shí)驗(yàn)組別12345二氯二乙胺濃度（mg/mL）0.10.20.30.40細(xì)胞數(shù)目（個(gè)/mL）[320275118696「560根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，你能得出的結(jié)論是解析：本題以實(shí)驗(yàn)為依托，考查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和處理能力。由題意準(zhǔn)確把握實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ㄌ骄慷榷野纺芤种瓢┘?xì)胞的增殖 ），據(jù)此找出實(shí)驗(yàn)變量（自變量、因變量、無(wú)關(guān)變量）；依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循的單一變量原則和對(duì)照原則等，分析實(shí)驗(yàn)步驟的合理性并將其加以修正和完善；依據(jù)從表中提取的有效信息，采取對(duì)比法認(rèn)真分析表中數(shù)據(jù)的變化規(guī)律，進(jìn)而對(duì)相應(yīng)問(wèn)題進(jìn)行解答。蛋白質(zhì)是大分子物質(zhì)，不能直接被人體吸收；服用后，在消化道中的蛋白酶的催化作用下，蛋白質(zhì)被水解為氨基酸后，才能被人體吸收利用。 （1）實(shí)驗(yàn)設(shè)置應(yīng)遵循等量原則、對(duì)照原則，所以在實(shí)驗(yàn)操作②中， 5號(hào)試管中應(yīng)加入等量的生理鹽水，和前 4只試管進(jìn)行對(duì)照。（2）分析實(shí)驗(yàn)步驟可知，在操作過(guò)程中有兩處錯(cuò)誤：①是步驟②中的“適量”不科學(xué)，應(yīng)改為“等量”；②是步驟③中“在冰箱中培養(yǎng)”不科學(xué)，應(yīng)改為在“適宜溫度下培養(yǎng)”或“在恒溫多T中培養(yǎng)。 （3）表中數(shù)據(jù)顯示：隨著二氯二乙胺濃度逐漸增大，每毫升培養(yǎng)液中細(xì)胞數(shù)目逐漸減小，說(shuō)明在一定濃度范圍 （實(shí)驗(yàn)濃度范圍）內(nèi)，二氯二乙胺具有抑癌作用，且作用效果隨濃度增加而增加。答案：蛋白質(zhì)需水解為氨基酸后，才能被人體吸收利用 （1）等量的生理鹽水（2）步驟②中的“適量”不科學(xué) 步驟③中“在冰箱中培養(yǎng)”不科學(xué)（3）在一定濃度范圍（實(shí)驗(yàn)濃度范圍），二氯二乙胺具有抑癌作用；且效果隨濃度增加而增加[2019?山東德州高三一模]雙特異性單克隆抗體是指可同時(shí)與癌細(xì)胞和藥物結(jié)合的特異性抗體。下圖是科研人員通過(guò)雜交一雜交瘤細(xì)胞技術(shù) （免疫的B細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿 （一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。分析回答：作b0中電受作b0中電受⑴ 過(guò) 程 ① 的 目 的 是,制備雙特異性單克隆抗體的過(guò)程中用到的技術(shù)有 （至少答出兩條）。（2）過(guò)程②誘導(dǎo)融合的方法是,過(guò)程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。（3）經(jīng)過(guò)程