T9紫外可見分光光度計應(yīng)用案例普析

紫外可見分光光度計應(yīng)用案例案例1.肉制品中亞硝酸鹽的測定前處置方式：稱取5g（精準至O.OIg）制成勻漿的試樣，置于50mL燒杯中，加12.5mL飽和硼砂溶液，攪拌均勻，以70工左右的水約300mL將試樣洗入500mL容量瓶中，于滾水浴中加熱15min掏出置冷水浴中冷卻，并放置至室溫。在振蕩上述提取液時加入5mL亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5mL乙酸鋅溶液，以沉淀蛋白質(zhì)。加水至刻度，搖勻，放置30min,除去上層脂肪，上清液用濾紙過濾，棄去初濾液30mL,濾液備用。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表1）：表1測量參數(shù)測量波長（nm）538比色皿光程（cm）2檢測界面（見圖1）：定里81室H2Q15036鬲詢氓屋毎＜jud関豪炮:怨[R-el533.00jui1標進蒂豪炮:怨[R-el533.00jui1標進蒂ft0.00o.aoKi0.OLOD22.000.031A0.03443標準梓品■i.0DaQ6Z4Q.DB24丁宗Kh:標準觀6.00e.oDa0954a.1256CL0E540.1ESBh溉萍昂：標淮萍品10.00Q.15B3|J.]ES3_T_標準牡品標準觀15.OD20.0025.00a23Z3a.30750.38150.23230.3DT50.3B1E標準洋品-炮:怨[R-rf533.00Mi]L.4B0.02520.OESE2L.E?0.02660.03S6未右芒懇能LHdA.i=[:H：：）4ID茨iL力辻KD0DQ2T4KL001522R0.9939圖1肉制品中亞硝酸鹽的檢測界面上圖標準曲線中亞硝酸鈉標準系列的質(zhì)量依次為0.0pg、2.0pg、4.0pg、6.0pg、8.0pg、10.0pg、15.0pg、20.0pg、25.0pg（100mL容量瓶中）。方式檢出限：該方式檢出限為1mg/kg，能夠知足《GB5009.33-2020食物平安國家標準食物中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定第二法分光光度法》的檢測要求。參考標準：《GB5009.33-2020食物平安國家標準食物中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定第二法分光光度法》案例2.啤酒中甲醛的測定前處置方式：吸取已除去二氧化碳的樣品25.00mL移入500mL蒸餾瓶中，加200g/L磷酸溶液20.00mL于蒸餾瓶，接水蒸氣蒸餾裝置中蒸餾，搜集餾出液于lOOmL容量瓶中（約lOOmL），冷卻后加水稀釋至刻度。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表2）：表2測量參數(shù)測量波長（nm）415比色皿光程（cm）1檢測界面（見圖2）：A-<fftil'll.Ah.0.'■ 'J[■Ofi]qi5.oom/1Ci.COJDa.koD.000/22-=TioCi.5KI0a.tn?a.ccnD.]QE/.33]moo0.035LI0L5/q電zroou0.0330033/55斬準樣品3.OKIDa.(M2D.0420075/G6標淮樣品■i.onoHOWD.W0/77標超曲amoo0L23LILt3□.□AB/*□/J.未知畔品DOZL-/二旦.Ab.[■Og]JtDSqi5.oom/J未抑1徉品1未知樣品Ci.￡03Da.tnaD.003-D.aiB<2未耐品Ci.54啦a.tnrD.COTTp■1.L.43.1 4.9&E8.4帝陰[ur]Als=EL*C)4呦*校E方法勰法ElD-o.DDL-3T11ElD.0IKH*□kH□.■as?圖2啤酒中甲醛的檢測界面上圖標準曲線中，甲醛標準系列的質(zhì)量依次為：0.0口g、0.5口g、1.0口g、2.0口g、3.0口g、4.0口g、8.0口g（25mL比色管中）。方式檢出限：該方式檢出限為0.8口g，能夠知足《GB/T5009.49-2020發(fā)酵酒及其配制酒衛(wèi)生標準的分析方式（4.4甲醛）》的檢測要求。參考標準：GB/T5009.49-2020發(fā)酵酒及其配制酒衛(wèi)生標準的分析方式（4.4甲醛）》案例3.食用植物油中過氧化值的測定前處置方式：周密稱取約0.01g~1.0g試樣（準確至刻度0.OOOlg）于10mL容量瓶內(nèi)，加三氯甲烷+甲醇（7+3）混合溶劑溶解并稀釋至刻度，混勻。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表3）：表3測量參數(shù)測量波長（nm）500比色皿光程（cm）1檢測界面（見圖3）：圖3食用植物油中過氧化值的檢測界面上圖標準曲線中，鐵標準系列的質(zhì)量依次為：0.0口g、2.0口g、5.0口g、10.0口g、20.0口g、30.0口g、40.0口g（10mL比色管中）。方式檢出限：該方式檢出限為0.4口g,能夠知足《GB/T5009.37-2003食用植物油衛(wèi)生標準的分析方式（4.2過氧化值第二法比色法）》的檢測要求。參考標準：《GB/T5009.37-2003食用植物油衛(wèi)生標準的分析方式（4.2過氧化值第二法比色法）》

案例4.棉籽油中游離棉酚的測定前處置方式：稱取l.OOOg（精準至O.OOlg）精制棉油，置于1OOmL具塞錐形瓶中，加入20.0mL丙酮（70%）,并加入玻璃珠3粒~5粒，在電動振蕩器上振蕩30min，然后在冰箱中冷藏，放置留宿。取此提取液之上清液過濾，濾液供測定用。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表4）：7-汕1[y3?000rn■標準樣品||II7-汕1[y3?000rn■標準樣品||II0.0?0D.CODO2訐堆艇5.00a.0339D.E33B3訐難晦標準樣昌ID.nga.aejsD.L6354按t鮮品4標準樣品￡0.OD0.1L53D.US5標準樣品■W.ODa.2LgoD.El506標準樣品EO.ODD.42&47標苣樣品120ODQS424D.B4Z4隹里誼H2W4nazs.qiid[Oj￡]瓦甫it品-*口未知徉品:沖[d.. 冷亍378.ODm12三總定討- 9-：三總片茫： 三卻忤詁 S班0.0518 0.D54Sa.asis D.D5S3f性-d二我XLe=M*ljC)+HDJt.t7iizr=機法KO0.(MKT1丄Edo.ros]Fi0.9999T-表4測量參數(shù)測量波長（nm）378比色皿光程（cm）1（石英）檢測界面（見圖4）：圖4棉籽油中游離棉酚的檢測界面上圖標準曲線中，棉酚標準系列的質(zhì)量依次為：0.0口g、5.0口g、10.0口g、20.0口g、40.0口g、80.0口g、120.0口g（10mL具塞比色管中）。方式檢出限：該方式檢出限為0.3口g（當(dāng)測定試樣1.000g時，最低檢出濃度為0.06mg/100g），能夠知足《GB/T5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》的檢測要求。參考標準：《GB/T5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》案例5.油脂中沒食子酸丙酯的測定前處置方式：稱取10.00g（精準至0.001g）試樣，用100mL石油醚溶解，移入250mL分液漏斗中，加入20mL乙酸銨溶液（16.7g/L）,振搖2min，靜置分層，將水層放入125mL分液漏斗中（如乳化，連同乳化層一路放下），石油醚層再用20mL乙酸銨溶液重復(fù)提取兩次，歸并水層。石油醚層再用水振搖洗滌兩次，每次15mL，歸并水層，振搖，靜置。將水層通過干燥濾紙濾入100mL容量瓶中，用少量水洗滌濾紙，加入2.5mL乙酸銨溶液（100g/L）,加水至刻度，搖勻。將此溶液用濾紙過濾，棄去20mL初濾液，搜集濾液供測定。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表5）：表5測量參數(shù)測量波長（nm）540比色皿光程（cm）1檢測界面（見圖5）：AMOD1LQ55-i<1:■ [-d定HZfflA0308<md㈡謨〕未知萍品按正方法 采屋法丘難樣品-f餐用中）未知梓品】未知樣品未知粕應(yīng)未知樣品-25.(KB5.LG135.KI3J5.milS.KIEE5.[叮液盧[RdXLe= +HD-0J3ffi33o.moss54000rn0OffiOAMOD1LQ55-i<1:■ [-d定HZfflA0308<md㈡謨〕未知萍品按正方法 采屋法丘難樣品-f餐用中）未知梓品】未知樣品未知粕應(yīng)未知樣品-25.(KB5.LG135.KI3J5.milS.KIEE5.[叮液盧[RdXLe= +HD-0J3ffi33o.moss54000rn0OffiOO.OffiL0.00600.OJB]標準樣品2C0000標準樣品標準樣品021%licea.2931Q.2ZS3a.atTOP.CIL爺校正曲妹540DDro標準樣品aodaamod2 標淮樣品3 標準樣品imOD a0545 D標準樣品 51000 0.2762 0a.inri圖5油脂中沒食子酸丙酯的檢測界面上圖標準曲線中，沒食子酸丙酯標準系列的質(zhì)量依次為：O^g、50口g、100口g、200口g、300口g、400口g、500ug（25mL具塞比色管中）。方式檢出限：該方式檢出限為18.1ugPGo（測定試樣相當(dāng)于2g時，最低檢出濃度為9.1mg/kg。），能夠知足《GB/T5009.32-2003油脂中沒食子酸丙酯（PG）的測定》的檢測要求。參考標準：《GB/T5009.32-2003油脂中沒食子酸丙酯（PG）的測定》案例6.果汁飲料中總磷的測定前處置方式：稱取必然量經(jīng)混合均勻的果汁樣品5.00g?10.00g于500mL凱氏燒瓶中，加入2粒?3粒玻璃珠、10mL?15mL硝酸（分析純）、5mL硫酸（分析純），浸泡約2h。先用微火加熱，待猛烈反映停止后，加大火力。溶液開始變成棕色時，當(dāng)即滴加硝酸（分析純），直至溶液透明，顏色再也不變深為止。繼續(xù)加熱數(shù)分鐘至濃白煙逸出，冷卻，警惕加入20mL水，再加熱至白煙逸出，冷卻至室溫。將溶液轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，備用。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表6）：表6測量參數(shù)ID5圖6果汁飲料中總磷的檢測界面上圖標準曲線中，磷標準系列的質(zhì)量依次為:0.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、ID5圖6果汁飲料中總磷的檢測界面上圖標準曲線中，磷標準系列的質(zhì)量依次為:0.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L（50mL容量瓶中）。方式檢出限:校正曲結(jié)0.T3T0.5420.3TT0.151□HKIEiL0C63B7二二II'.*Iif、T，主A.I5波長y4JW.Won1L230.?KID2COOCi電COODO.OTD0]Tfin.361a.cooaLieasi23446.?KIDo.ssqa.ssq565E邛f6匸8.HMDLQOJQD0.TJ20a.7J2n刪轉(zhuǎn)Qf未知樣品頂目宮稱沫Jghg/ljA.Ie:卄■MB.COar.LZ制疇品L7；*：=：“]1.5TTD0⑷n.]*]□.L49ill町-（便Bl中｝測量波長（nm）400比色皿光程（cm）1檢測界面（見圖6）:該方式檢出限為0.1mg/L。能夠知足《GB/T12143-2020飲料通用分析方式（9.5.3總磷）》的檢測要求。參考標準：《GB/T12143-2020飲料通用分析方式（9.5.3總磷）》案例7.茶飲料中茶多酚的測定前處置方式：稱取均勻透明的樣液1g~5g（精準至O.OOlg）于25mL容量瓶中，加水4mL、酒石酸亞鐵溶液5mL，充分搖勻，用pH7.5磷酸緩沖溶液定容至刻度。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表7）：圖7圖7茶飲料中茶多酚的檢測界面表7測量參數(shù)測量波長（nm）540比色皿光程（cm）1檢測界面（見圖7）：上圖中，A=0.9598,A=0.0092。12結(jié)果計算：x1000(A-A)x1.957x2xx10001 2式中：X——樣品中茶多酚的含量（mg/kg）；A1——試液顯色后的吸光度；A2——試液底色的吸光度；1.957——用10mm比色皿，當(dāng)吸光度=0.50時，ImL茶湯中茶多酚的含量相當(dāng)于1.957mg；K——稀釋倍數(shù)；m——測按時稱取試液的質(zhì)量（g）。參考標準：《GB/T21733-2020茶飲料（6.2.1茶多酚）》案例8.白砂糖色值的測定前處置方式：稱取樣品lOO.Og于200mL燒杯中，加入pH7.00的三乙醇胺-鹽酸緩沖溶液135mL,攪拌至完全溶解。倒入已預(yù)先鋪好0.45Mm孔徑微孔膜的過濾器中，在真空下抽濾，棄去最初50mL左右的濾液，搜集濾液應(yīng)很多于50mL。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表8）：表8測量參數(shù)測量波長（nm）420比色皿光程（cm）5檢測界面（見圖8）：圖8白砂糖色值的檢測界面上圖中，A=0.1755。結(jié)果計算：AC=x1000bxc式中：C――色值，單位為國際糖色值單位（IU）；A――在420nm波長測得樣液的吸光度；b 比色皿光程，單位為厘米（cm）；c 樣液濃度［由20°C的折光錘度乘上一系數(shù)（白砂糖0.9862，綿白糖0.9854）,然后查表求得］,單位為克每毫升（g/mL）。參考標準：《GB317-2006白砂糖（4.7色值的測定）》案例9.雞精調(diào)味料中呈味核苷酸二鈉的測定前處置方式：準確稱取均勻的樣品2g~4g（精準至O.OOOlg）,用少量0.01mol/L的鹽酸溶液溶解并定容于100mL容量瓶中，混勻。將此溶液用濾紙過濾，棄去初濾液20mL。吸取濾液5.00mL于100mL容量瓶中，用0.01mol/L的鹽酸溶液定容，混勻，此溶液即為測試液。檢測儀器：T9型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）儀器條件（見表9）：表9測量參數(shù)測量波長（nm）250比色皿光程（cm）1（石英）檢測界面（見圖9）：圖9雞精調(diào)味料中呈味核苷酸二鈉的檢測界面上圖中，A=0.6021。結(jié)果計算：Ax530x2000 “X= x100mx11950x1000式中：X——樣品中呈味核苷酸二鈉的含量（含7.25分子結(jié)晶水）（g/100g）；A——樣

品在波長250nm處的吸光度；m——樣品質(zhì)量（g）； 530——含7.25分子結(jié)晶水呈味核苷酸二鈉的平均分子量；2000——樣品的稀釋倍數(shù)；11950——呈味核苷酸二鈉的平均摩爾吸光系數(shù)。參考標準：SB/T10371-2003雞精調(diào)味料（5.2.4呈味核苷酸二鈉）》

案例10.食物中二氧化硫的測定前處置方式:稱取適量（5~10g）粉碎混勻后的樣品，浸泡提取生成穩(wěn)固絡(luò)合物后過濾，取適量濾液與甲醛及鹽酸副玫瑰苯胺作用生成紫色絡(luò)合物，利用T9通過與標準系列比較定量。檢測儀器：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司T9型紫外可見分光光度計。儀器條件:具體參數(shù)見表1。表1儀器參數(shù)紫外參數(shù)測量方法單波長法光度模式吸光度（Abs）吸收波長550nm比色皿光程10mm檢測譜圖（見圖1）:標序號匚=flAb"1-□DL79B2B.B5253□33333未知樣品未抑樣品1二 標序號匚=flAb"1-□DL79B2B.B5253□33333未知樣品未抑樣品1二 i標堆樣品o.aaao uuuliliD.DDDD2標準樣品0.5000 H0LL9D.01193二氧仁陸口標淮萍品i.aaaa ojnoreD.D3794一氧㈱毘標宜樣品s.aaaa 0.0707D.D7D75二氧伽5標難樣品衍準韓品□L4D4Q.aaaa□.14D4D.2152&T二氧仁陸口標準樣品e.aaaa 0.2767D.27B70二氫愀運標塞樣品lo.aaao u337905379g二M化硫伯標準祥品20.0000 11703?0.703710二化解斬難韓品^a.aaaa l.38331.3B335TT.00m上面譜圖顯示R=0.9999。樣品檢出限：該方式檢出限為0.001g/kg,能夠知足GB5009.34-2003的檢測要求。參考標準：GB5009.34-2003案例11.食物中的氰化物的檢測前處置方式:迅速稱取10g樣品，加入乙酸鋅溶液，酒石酸溶液進行水蒸氣蒸餾，以氫氧化鈉溶液作為吸收液。取適量蒸餾液遇酸產(chǎn)生氫氰酸,氫氰酸與苦味酸鈉作用生成異氰紫酸鈉,顯紅色,利用T9通過與標準系列比較定量。檢測儀器：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司T9型紫外可見分光光度計。儀器條件:具體參數(shù)見表1。表1儀器參數(shù)紫外參數(shù)測量方法單波長法光度模式吸光度（Abs）吸收波長638nm比色皿光程10mm檢測譜圖（見圖1）:序號矣型濃度Ab5【宅］638.00mi1標準萍品序號矣型濃度Ab5【宅］638.00mi1標準萍品LILIOLIOLi.OiTHU.OULil2標準祥品LL50000.1246u.12-te.-￡標.隹存呂標蛙樣帛1UUUL150000.2716n0.27L6n護㈣5標準樣品E00000.STLi'dU.5709序號類型濃匿Abs遍辰[y]630.00iui1未知萍品0.0419LI.00180.00182未和萍品0.04150.00170.00173未知萍品ir.D-LI.0015-0.00154豐知樣品0D3S1□0CO70.00075CLD3TT□.0CO6n.onosE未即樣帛005710.0C620.0062* 匚圖1標準曲線譜圖上面譜圖顯示R=0.9994。樣品檢出限：該方式知足GB5009.48-2003的檢測要求。參考標準：GB5009.48-2003，GB5009.36-2003案例12.食物中的雜醇油的檢測前處置方式:酒中雜醇油比較復(fù)雜，以異戊醇和異丁醇為代表，異戊醇和異丁醇在濃硫酸作用下脫水生成異戊烯和異丁烯，再與對二甲氨基苯甲醛作用顯橙紅色，與標準比較定量。檢測儀器：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司T9型紫外可見分光光度計。儀器條件:具體參數(shù)見表1。

表1儀器參數(shù)紫外參數(shù)測量方法單波長法光度模式吸光度（Abs）吸收波長520nm比色皿光程20mm檢測譜圖（見圖1）:■5=AALsJ±>5■5=AALsJ±>5滅長[nifij530.LOm宗百紺標L0.QOM-0.00D27aOEQ7Q0D2標莊樣品HOLM0.064511QB4SHQ04S常e樣品0OEDO01BE3fl1BES0標程年品110303LL25400.254011254fl杯堆樣品0EDOu3237u323703237標莊樣品iiosm0.412A0.4L2Ao.q]￡qAAtsJLb=:狀單[ng]53J.C0rmL幸知樣品11rmitT詁000?fl00￡57fl025700257加=f(c)未抑樣品1-E未^樣品O.DO^I0.0Z5B0.QZMo.azsa方程魁—次町、-r-kri+tbK-.-ni越法NO0.0ZG5K]S.Lt?F；0.999&上面普圖顯示R=0.9996，說明標曲線性良好，能夠進一步進行定量測定。樣品檢出限：該方式檢出限為lmg/kg，能夠知足GB/T5009.48-2003的檢測要求。參考標準：GB/T5009.48-2003案例13.食物中的組胺的檢測前處置方式:稱取適量（5~10g）粉碎混勻后的樣品，用三氯乙酸浸泡后正戊醇提取，遇偶氮試劑顯橙色，利用T9通過與標準系列比較定量。檢測儀器：北京普析通用儀器有