生物：第二部分《實(shí)驗(yàn)六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)》(浙科版選修1)

實(shí)驗(yàn)六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)背景：酶在應(yīng)用過(guò)程中存在的問(wèn)題①天然酶對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫等敏感，易失活②難回收，提高了生產(chǎn)成本③反應(yīng)后酶混在產(chǎn)物中，影響產(chǎn)品質(zhì)量

將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。固定化酶基礎(chǔ)知識(shí)：酶的固定化技術(shù)酶固定化的方法：a、吸附法：將酶吸附到固體吸附劑表面的方法，如：活性碳、多孔玻璃、石英砂等固體吸附劑酶d、包埋法：將酶包裹在凝膠交聯(lián)后的格子中c、交聯(lián)法：b、共價(jià)偶聯(lián)法酶的某些基團(tuán)（如氨基末端、羧基末端）與載體共價(jià)結(jié)合。利用試劑與酶之間發(fā)生分子交聯(lián)來(lái)把酶固定化的方法。a、吸附法：實(shí)驗(yàn)六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?.掌握α-淀粉酶的固定化2.檢測(cè)固定化α-淀粉酶的效果實(shí)驗(yàn)設(shè)備和材料：38頁(yè)—39頁(yè)固定化酶柱氣門(mén)心夾子5ml注射器1.α-淀粉酶的固定化吸附5mgα-淀粉酶+4ml蒸餾水+5g石英砂，攪拌30min裝入下端接有氣門(mén)心并用夾子封住的注射器中

用10倍柱體積的蒸餾水洗滌除去游離淀粉酶（1mL/min)裝柱洗柱如何證明淀粉酶已全部被固定?蒸餾水洗柱流出的水+淀粉，保溫幾分鐘后+KI-I2變藍(lán)說(shuō)明水中無(wú)游離的淀粉酶，已全部固定固定化裝置—反應(yīng)柱淀粉α-淀粉酶糊精β-淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麥芽糖遇碘顯藍(lán)色紅色實(shí)驗(yàn)原理：2、淀粉水解的檢測(cè)一定濃度的淀粉流經(jīng)固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，流出物用KI-I2溶液測(cè)試呈紅色?？莶輻U菌的α-淀粉酶：最適溫度為50-75℃；最適PH為5.5-7.5溶解淀粉50mg淀粉溶于100ml熱水中，攪拌均勻過(guò)柱使淀粉溶液以0.3ml/min的流速過(guò)柱，在流出5ml淀粉后接收0.5ml流出液。檢測(cè)加入1-2滴KI-I2溶液，觀察顏色變化。用水稀釋1倍后再觀察顏色。保存及再次使用10倍柱體積蒸餾水洗滌此柱，放置4℃冰箱保存，幾天后取出重復(fù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：

讓淀粉和固定的α-淀粉酶充分反應(yīng)2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果12341、水+1~2滴KI-I2溶液、淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、流出液+1~2滴KI-I2溶液、稀釋1倍的流出液+1~2滴KI-I2溶液類型優(yōu)點(diǎn)不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等容易失活；很難回收，提高生產(chǎn)成本；酶會(huì)混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量固定化酶易與產(chǎn)物分離、反復(fù)利用一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)，而在生產(chǎn)實(shí)踐中，很多產(chǎn)物的形成都通過(guò)一系列的酶促反應(yīng)才能得到的直接使用酶和固定化酶的優(yōu)缺點(diǎn)有些生物無(wú)性別，如大部分植物（雌雄同株）；有性別的生物大部分由性染色體決定性別XY型（雌性為同型的XX，雄性為異型的XY)ZW型（雄性為同型的ZZ，雌性為異型的ZW)有些生物X比Y大，有些生物Y比X大果蠅9.1、將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來(lái)降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的（）A、溫度B、PHC、水分D、營(yíng)養(yǎng)D習(xí)題鞏固2.某一實(shí)驗(yàn)小組的同學(xué)，欲通過(guò)制備固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行葡萄糖溶液發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料及用具齊全。（2）該實(shí)驗(yàn)小組用如圖所示的裝置來(lái)進(jìn)行葡萄糖發(fā)酵①圖中a為固定化酵母；b是反應(yīng)柱。②從上端漏斗中加入反應(yīng)液的濃度不能過(guò)高的原因是：

。③為使該實(shí)驗(yàn)中所用到的固定化酵母細(xì)胞可反