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第二章

蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能

StructureandFunctionofProtein商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院主要內(nèi)容蛋白質(zhì)的分子組成蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)蛋白質(zhì)的分類商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)習(xí)要點(diǎn)掌握蛋白質(zhì)的元素組成及特點(diǎn),氨基酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及連接方式。掌握蛋白質(zhì)各級(jí)結(jié)構(gòu)及維持各級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力。掌握蛋白質(zhì)的兩性解離和等電點(diǎn)、蛋白質(zhì)變性。熟悉蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)、沉淀、紫外吸收和呈色反應(yīng)。熟悉氨基酸的分類及理化性質(zhì)。熟悉蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。了解蛋白質(zhì)的分類。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院蛋白質(zhì)是生物體的重要組成成分蛋白質(zhì)的生物學(xué)重要性蛋白質(zhì)的種類多:大腸桿菌約含蛋白質(zhì)3000種,人體內(nèi)含蛋白質(zhì)10萬余種。分布廣:所有器官、組織都含有蛋白質(zhì);細(xì)胞的各個(gè)部分都含有蛋白質(zhì)。含量高:蛋白質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)最豐富的有機(jī)分子,占人體干重的45%,某些組織含量更高,例如脾、肺及橫紋肌等高達(dá)80%。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)(重要的生物學(xué)功能)1.催化功能2.調(diào)節(jié)功能3.支持功能4.運(yùn)輸功能5.營(yíng)養(yǎng)功能

6.運(yùn)動(dòng)功能7.防御功能8.識(shí)別功能9.信息傳遞功能10.凝血與抗凝血功能氧化供能蛋白質(zhì)的生物學(xué)重要性商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

第一節(jié)

蛋白質(zhì)的分子組成

TheMolecularComponentofProtein商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院組成蛋白質(zhì)的元素主要C、H、O、N和S

有些蛋白質(zhì)含少量P、Se、Fe、Cu、

Zn、Mn、Co、Mo,個(gè)別蛋白質(zhì)還含有I。

一、蛋白質(zhì)的元素組成商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

蛋白質(zhì)的元素組成的特點(diǎn)各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近,平均為16%,1g氮相當(dāng)于6.25g

蛋白質(zhì)。生物體內(nèi)的含氮物質(zhì)主要是蛋白質(zhì),因此只要測(cè)定生物樣品的含氮量就可按下式計(jì)算出其蛋白質(zhì)大致含量:100g樣品中蛋白質(zhì)的含量(g%)=每克樣品中含氮克數(shù)×6.25×100商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院二、蛋白質(zhì)的基本組成單位——氨基酸

蛋白質(zhì)受酸、堿或蛋白酶水解產(chǎn)生游離氨基酸。因此,組成蛋白質(zhì)的基本單位是——氨基酸(aminoacid)

。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(一)氨基酸的命名

1.系統(tǒng)命名法以羧基為母體,碳原子的位次以阿拉伯?dāng)?shù)字或希臘字母標(biāo)示。

2.俗稱商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

自然界存在的氨基酸有300多種,但組成人體蛋白質(zhì)氨基酸僅有20種,且都有特異的遺傳密碼,為編碼氨基酸。

(二)氨基酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

R代表氨基酸側(cè)鏈氨基酸的結(jié)構(gòu)通式可用下式表示:商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

1.組成蛋白質(zhì)的氨基酸都是α-氨基酸(脯氨酸為α-亞氨基酸)。

α-碳原子,即與-COOH相鄰碳原子。氨基均連在α-碳原子上,故為α-氨基酸。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

2.組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸都是

L

型,即L-α-氨基酸。不同的氨基酸其側(cè)鏈不同,除甘氨酸外,其余氨基酸的α-碳原子分別連接4個(gè)不同原子或基團(tuán),是手性碳原子,有兩種不同的構(gòu)型,即L型和D型。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(三)氨基酸的分類商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

(三)氨基酸的分類

基本氨基酸的分類方法一:

按側(cè)鏈結(jié)構(gòu)分類脂肪族氨基酸(15種)芳香族氨基酸(3種)雜環(huán)氨基酸(2種)

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

(三)氨基酸的分類

基本氨基酸的分類方法二:

按側(cè)鏈R基團(tuán)極性分類非極性(疏水)氨基酸(9種)極性不帶電荷氨基酸(6種)極性帶正電荷氨基酸(堿性氨基酸)(3種)極性帶負(fù)電荷氨基酸(酸性氨基酸)(2種)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

1.非極性疏水氨基酸側(cè)鏈為烴基、吲哚環(huán)、甲硫基等疏水性基團(tuán)。這類氨基酸在水中的溶解度小于極性中性氨基酸。

2.極性中性氨基酸側(cè)鏈為羥基、巰基、或酰氨基等極性基團(tuán),有親水性,但在中性水溶液中不電離的氨基酸。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院3.酸性氨基酸側(cè)鏈上有羧基,在水溶液中能釋放出H+

而帶負(fù)電荷的氨基酸。有谷氨酸、天冬氨酸。4.堿性氨基酸側(cè)鏈上有氨基、胍基或咪唑基,在水溶液中能結(jié)合H+

而帶正電荷的氨基酸。有賴氨酸、精氨酸和組氨酸等。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(三)氨基酸的分類

基本氨基酸的分類方法三:

按人體能否合成分類必需氨基酸:機(jī)體不能自身合成,必須由食物供給的氨基酸(八種)半必需氨基酸:人體可合成,但合成量不足,如精氨酸及組氨酸。非必需氨基酸:可自身合成且能滿足需要的氨基酸(10種)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院蛋白質(zhì)分子中幾種特殊的氨基酸

1.脯氨酸是亞氨基酸。2.不少半胱氨酸在蛋白質(zhì)中以胱氨酸形式存在。2個(gè)半胱氨酸脫氫以二硫鍵結(jié)合形成胱氨酸。3.被修飾的氨基酸羥脯氨酸、羥賴氨酸等。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院三、氨基酸在蛋白質(zhì)分子中的連接方式(一)肽鍵和肽

肽鍵(peptidebond)是由一個(gè)氨基酸分子的α-羧基與另一個(gè)氨基酸的α-氨基脫水縮合形成的化學(xué)鍵。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

氨基酸通過肽鍵連接形成的化合物稱為肽。由兩個(gè)氨基酸形成的肽稱為二肽,由三個(gè)氨基酸形成的肽稱三肽,以此類推。通常將10個(gè)以內(nèi)的氨基酸形成的肽稱為寡肽,十肽以上者稱為多肽。多肽分子中的氨基酸相互連接形成長(zhǎng)鏈,稱為多肽鏈。肽鏈中的氨基酸因脫水縮合已不是完整的氨基酸,故稱為氨基酸殘基。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

氨基酸由肽鍵連接成的長(zhǎng)鏈骨架,稱為主鏈,而各氨基酸殘基的R基團(tuán)統(tǒng)稱為側(cè)鏈。

多肽鏈有兩端有自由氨基的一端稱為氨基末端或N

端,通常寫在多肽鏈的左側(cè)。有自由羧基的一端稱為羧基末端或C端,通常寫在多肽鏈的右側(cè)。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

多肽鏈中氨基酸殘基的順序編號(hào)從N端開始。肽的命名也從N端開始,如由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的三肽稱為谷氨酰半胱氨酰甘氨酸,簡(jiǎn)稱為谷胱甘肽(GSH)。

-SH

為活性基團(tuán)為酸性肽商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(二)生物活性肽

生物體內(nèi)具有一定生物學(xué)活性的肽類物質(zhì)稱生物活性肽。

1.谷胱甘肽

有還原型(GSH)與氧化型(GSSG)兩種存在形式。GSH是體內(nèi)重要的還原劑,對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用。

GSH過氧化物酶NADPH+H+NADP+H2O22GSH

GSH還原酶2H2OGSSG商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

2.多肽類激素和神經(jīng)肽

肽類激素種類較多,生理功能各異。主要見于下丘腦及垂體分泌的激素。神經(jīng)肽在神經(jīng)傳導(dǎo)中發(fā)揮信號(hào)作用。

促甲狀腺素釋放激素(TRH):3肽3.其他

催產(chǎn)素、升壓素:9肽

腦肽:種類多,其中腦啡肽重要,為5肽

膽囊收縮素:33肽,與消化有關(guān)

胰高血糖素:29肽,促進(jìn)血糖濃度增大商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院第二節(jié)

蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

TheMolecularStructureofProtein商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院蛋白質(zhì)是由許多氨基酸單位通過肽鍵連接形成的具有特定分子結(jié)構(gòu)的高分子化合物。蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)可分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)。一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu),二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)稱為高級(jí)或空間構(gòu)象。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)

(primarystructure)概念

是指蛋白質(zhì)分子中氨基酸的排列順序。主要的化學(xué)鍵

肽鍵、有些蛋白質(zhì)還含有二硫鍵。

胰島素(Insulin)世界上第一個(gè)被確定一級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院人胰島素的一級(jí)結(jié)構(gòu)

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

一級(jí)結(jié)構(gòu)是決定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ),但不是決定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象唯一因素。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)的主要意義

一級(jí)結(jié)構(gòu)是研究高級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)??梢詮姆肿铀疥U明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系??梢詾槿斯ず铣傻鞍踪|(zhì)提供參考順序。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)空間結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)分子內(nèi)各原子圍繞某些共價(jià)鍵的旋轉(zhuǎn)而形成的各種空間排布及相互關(guān)系,稱為蛋白質(zhì)的構(gòu)象。蛋白質(zhì)的構(gòu)象分為主鏈構(gòu)象和側(cè)鏈構(gòu)象。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(一)蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)

(secondarystructure)

概念

是指蛋白質(zhì)多肽鏈主鏈原子局部的空間排列,不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象。維系蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵是氫鍵。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院1.形成二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)

肽鍵(C-N)鍵長(zhǎng)為0.132nmC-N單鍵長(zhǎng)為0.149nm

C=N雙鍵長(zhǎng)為0.127nm

肽鍵有一定程度雙鍵性能,不能自由旋轉(zhuǎn),有順反異構(gòu)現(xiàn)象。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院肽鍵平面(肽單元

peptideunit)

形成肽鍵的C-N鍵具有部分雙鍵的性質(zhì),使得形成的酰胺鍵的四個(gè)原子及相鄰的Cα處于同一平面上叫酰胺平面或肽鍵平面。它是蛋白質(zhì)構(gòu)象的基本結(jié)構(gòu)單位。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院肽鍵平面商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

2.蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要形式α-螺旋β-折疊β-轉(zhuǎn)角無規(guī)卷曲商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

(1)α-螺旋

(-helix)

——最常見商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院α-螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

①多肽鏈以肽鍵平面為單位,α-碳原子為轉(zhuǎn)折點(diǎn),有規(guī)律的盤繞成右手螺旋結(jié)構(gòu)。②每3.6個(gè)氨基酸殘基盤繞一圈,螺距為0.54nm。③相鄰螺旋的肽鍵之間形成氫鍵,方向與長(zhǎng)軸基本平行,維持螺旋的穩(wěn)定。④R基團(tuán)伸向螺旋外側(cè),其大小、形狀及電荷性質(zhì)均影響α-螺旋的形成。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(2)β-折疊(β-pleatedsheet)

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

β-折疊的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

①多肽鏈呈伸展?fàn)顟B(tài),肽鍵平面沿長(zhǎng)軸折疊呈鋸齒狀,兩平面間夾角為110°,R基交替地伸向鋸齒狀結(jié)構(gòu)的上下方。②若干肽段互相靠攏,平行排列,通過氫鍵連接。氫鍵的方向與長(zhǎng)軸垂直。③若兩條肽段走向一致(N端、C端方向相同),稱為順向平行;反之,稱之為逆向平行,逆向更穩(wěn)定。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(3)β-轉(zhuǎn)角(β-turn)

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

β-轉(zhuǎn)角的特點(diǎn)

①主鏈骨架本身以大約180°回折②回折部分通常由4個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成③構(gòu)象依靠第一殘基的-CO基與第四殘基的-NH基之間形成氫鍵來維系。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

(4)無規(guī)卷曲(nonregularcoil)

是指多肽鏈中除了以上幾種比較規(guī)則的構(gòu)象外,其余沒有確定規(guī)律性的那部分肽鏈構(gòu)象。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(二)蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)

(tertiarystructure)概念

是指整條肽鏈中所有原子的空間排布,它包括主鏈構(gòu)象和側(cè)鏈構(gòu)象。主要化學(xué)鍵

疏水鍵、氫鍵、鹽鍵等非共價(jià)鍵和二硫鍵。疏水鍵是維持三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的最主要作用力。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院超二級(jí)結(jié)構(gòu)(supersecondarystructure)

超二級(jí)結(jié)構(gòu)是指若干相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)中的構(gòu)象單元彼此相互作用,形成有規(guī)則的,在空間上能辨認(rèn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體。通常有βαβ,βββ,αα,ββ。βαβααββ商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院結(jié)構(gòu)域(domain)

是在超二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)一步卷曲折疊成緊密的近似球狀的結(jié)構(gòu),在空間上彼此分隔,各自具有部分生物功能的結(jié)構(gòu)。

由一條多肽鏈形成的蛋白質(zhì),其最高級(jí)結(jié)構(gòu)為三級(jí)結(jié)構(gòu)。只有具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)才具有生物學(xué)活性。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院結(jié)構(gòu)域(domain)

小的蛋白質(zhì)分子只有一個(gè)結(jié)構(gòu)域,大的蛋白質(zhì)分子有數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)域√結(jié)構(gòu)域=三級(jí)結(jié)構(gòu)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

概念蛋白質(zhì)分子中各亞基之間的空間排布和相互接觸關(guān)系。

體內(nèi)有許多蛋白質(zhì)分子是由兩條或兩條以上具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈通過非共價(jià)鍵聚合而成,其中每條具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈稱為亞基。

化學(xué)鍵氫鍵、鹽鍵、范氏引力、疏水鍵等非共價(jià)鍵。(三)蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)

(quaternarystructure)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中應(yīng)注意的幾個(gè)問題由一條多肽鏈形成的蛋白質(zhì)其最高級(jí)結(jié)構(gòu)為三級(jí),具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)才具有生物學(xué)活性。形成蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)至少要有兩條多肽鏈。兩條或兩條以上的多肽鏈靠共價(jià)鍵連接的蛋白質(zhì)沒有四級(jí)結(jié)構(gòu)。由一條多肽鏈形成的蛋白質(zhì)與亞基不同。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院維持蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的作用力一級(jí)結(jié)構(gòu):肽鍵、二硫鍵(都屬于共價(jià)鍵)二級(jí)結(jié)構(gòu):氫鍵(主鏈上—C=O—和N—H之間形成)三、四級(jí)結(jié)構(gòu):次級(jí)鍵(氫鍵、疏水鍵、離子鍵、范德華力、配位鍵)

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵氫鍵

常見于連接在一電負(fù)性很強(qiáng)的原子上的氫原子與另一電負(fù)性很強(qiáng)的原子之間。蛋白質(zhì)分子中氫鍵的形成

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院氫鍵商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院疏水鍵

非極性物質(zhì)在含水的極性環(huán)境中存在時(shí),會(huì)產(chǎn)生一種相互聚集的力,這種力稱為疏水鍵或疏水作用力。

蛋白質(zhì)分子中的許多氨基酸殘基側(cè)鏈也是非極性的,這些非極性的基團(tuán)在水中也可相互聚集,形成疏水鍵,如Leu,Ile,Val,Phe,Ala等的側(cè)鏈基團(tuán)。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院離子鍵(鹽鍵)

是由正、負(fù)離子間通過靜電引力相互吸引而形成的化學(xué)鍵。在近中性環(huán)境中,蛋白質(zhì)分子中的酸性氨基酸殘基側(cè)鏈電離后帶負(fù)電荷,而堿性氨基酸殘基側(cè)鏈電離后帶正電荷,二者之間可形成離子鍵。范德華氏(vanderWaals)引力

原子之間存在的相互作用力商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院血紅蛋白的四級(jí)結(jié)構(gòu)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院從一級(jí)結(jié)構(gòu)到四級(jí)結(jié)構(gòu)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院三、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能

蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

一級(jí)結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu);一級(jí)結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

蛋白質(zhì)構(gòu)象是其生物學(xué)功能的基礎(chǔ),構(gòu)象改變功能改變。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院同種蛋白質(zhì)中氨基酸順序的個(gè)體差異(分子?。?/p>

血紅蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)變化引起鐮刀型貧血病正常細(xì)胞鐮刀形細(xì)胞

血液中大量出現(xiàn)鐮刀型紅細(xì)胞,患者因此缺氧窒息;

它是最早認(rèn)識(shí)的一種分子病。流行于非洲,死亡率極高,大部分患者童年時(shí)就夭折,活過童年的壽命也不長(zhǎng),它是由于遺傳基因突變導(dǎo)致血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)的突變。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院第三節(jié)

蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)

ThePhysicalandChemicalCharactersofProtein

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院一、蛋白質(zhì)的兩性解離與等電點(diǎn)

1.蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)

蛋白質(zhì)分子中可解離的基團(tuán)

多肽兩端游離的α-氨基和α-羧基多肽側(cè)鏈R上解離的基團(tuán)

決定蛋白質(zhì)解離成正負(fù)離子的因素蛋白質(zhì)所含酸性和堿性基團(tuán)的數(shù)目蛋白質(zhì)所在溶液的PH值

利用蛋白質(zhì)兩性電離的性質(zhì),可通過電泳、離子交換層析、等電聚焦等技術(shù)分離蛋白質(zhì)。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院2.蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(

isoelectricpoint,pI)

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時(shí),蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等,即成為兼性離子,凈電荷為零,此時(shí)溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)在pH5.0左右,因而在生理?xiàng)l件下以陰離子形式存在。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

3.電泳(elctrophoresis)

帶電粒子在電場(chǎng)中向電性相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)在帶電場(chǎng)中泳動(dòng)的速度和方向與其所帶電荷的性質(zhì)、數(shù)量及分子的大小、形狀有關(guān)。帶電荷多,分子小的泳動(dòng)速度較快;反之則泳動(dòng)較慢,從而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的目的。血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳可將血清蛋白分為清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院A:染色后顯示的蛋白質(zhì)區(qū)帶B:光密度掃描定量分析商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院二、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)

1.蛋白質(zhì)有膠體性質(zhì)

蛋白質(zhì)是生物大分子,分子量在1萬~10萬之間,分子直徑在膠體顆粒的范圍(1~100nm),因此,蛋白質(zhì)具有膠體的性質(zhì)。

具有膠體溶液的特征如布朗運(yùn)動(dòng)、丁達(dá)爾現(xiàn)象、電泳現(xiàn)象,不能透過半透膜,并具有吸附能力。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

2.蛋白質(zhì)親水膠體穩(wěn)定的因素蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和同種電荷。去掉兩個(gè)穩(wěn)定因素,則蛋白質(zhì)從溶液中析出而產(chǎn)生沉淀。

3.蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)的應(yīng)用

透析用于分離純化蛋白質(zhì)

超速離心用于蛋白質(zhì)的分

離純化及分子量的測(cè)定。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院變性的概念

在某些物理或化學(xué)因素的作用下,蛋白質(zhì)特定的空間構(gòu)象被破壞,從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性喪失,稱為蛋白質(zhì)的變性。變性的實(shí)質(zhì)

次級(jí)鍵斷裂,空間結(jié)構(gòu)破壞,不改變蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。

三、蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固

(一)蛋白質(zhì)的變性

(denaturation)商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

引起變性的因素

物理因素高溫、高壓、紫外線、電離輻射、超聲波等。

化學(xué)因素

強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑、尿素、重金屬鹽等。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院變性蛋白質(zhì)的特點(diǎn)

A.生物學(xué)活性喪失B.溶解度降低,易于沉淀

C.粘度增加

D.結(jié)晶能力消失

E.易被蛋白酶水解商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

蛋白質(zhì)變性的應(yīng)用應(yīng)用變性的因素進(jìn)行消毒、滅菌。保存生物制劑則要防止蛋白質(zhì)變性。蛋白質(zhì)的復(fù)性(renaturation)大多數(shù)蛋白質(zhì)變性后,空間構(gòu)象嚴(yán)重破壞,不能恢復(fù)其天然狀態(tài),稱為不可逆性變性;若蛋白質(zhì)變性程度較輕,去除變性因素,有些可恢復(fù)其天然構(gòu)象和生物活性,稱為蛋白質(zhì)的復(fù)性。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院

天然狀態(tài),有催化活性尿素、β-巰基乙醇

去除尿素、β-巰基乙醇非折疊狀態(tài),無活性商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(二)蛋白質(zhì)沉淀概念蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象稱為沉淀。方法鹽析法、有機(jī)溶劑的沉淀、重金屬鹽沉淀、生物堿試劑沉淀。

商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院(三)蛋白質(zhì)的凝固(proteincoagulation)

加熱使蛋白質(zhì)變性并凝聚成塊狀稱為凝固。此凝塊不溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中。凝固實(shí)際上是蛋白質(zhì)變性后進(jìn)一步發(fā)展的不可逆的結(jié)果。(四)蛋白質(zhì)變性與沉淀之間的關(guān)系沉淀的蛋白質(zhì)易發(fā)生變性,但并不一定變性,如鹽析作用變性的蛋白質(zhì)易于沉淀,但也不一定沉淀,如牛奶加熱沸騰凡凝固的蛋白質(zhì)一定發(fā)生變性。商洛職業(yè)技術(shù)學(xué)院四、蛋白

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