病理學技術士專業(yè)知識

病理學技術士專業(yè)知識一、病理解剖技術【了解】解剖室的設計要求【掌握】病理解剖的意義解剖臺的設計【熟練掌握】

常用解剖的器械解剖室的清潔和消毒解剖器械的清潔和消毒個人防護【了解】解剖室的設計要求：1、病理解剖室最好建在與醫(yī)院太平間相鄰的地方，以利于尸體的存放和保管2、病理解剖室應至少設計兩個門，其中設計一個寬一點的門與太平間想通，窗戶略高一些，以便于尸體的搬運和自然光線的利用，解剖臺的上方最好安裝無影手術燈。避免帶色光源照明，以免改變臟器和病變的自然色彩；3、解剖室最好用水磨石地面，解剖臺四周應鋪設排水溝或地漏，墻壁鋪設瓷磚，應安裝方便的清洗設備，以便于解剖后的洗刷和清潔一、病理解剖技術【了解】解剖室的設計要求：4、室內應有良好的通風設備，除此之外還應安裝紗門和紗窗，以便于室內的空氣流通；5、醫(yī)學院校的病理解剖室還應設計取材邊臺和示教臺，其中示教臺最好設計為外科手術觀摩式樓頂看臺，有條件的可安裝攝像系統(tǒng)與電視或計算機相連；6、在通往解剖室的入口兩側設計消毒室、男女更衣室、浴室。一、病理解剖技術【掌握】病理解剖的意義通過病理解剖可以驗證臨床診斷的正確性及治療效果、發(fā)現(xiàn)臨床診斷和治療上存在的問題，最后通過臨床病理討論會的形式，實現(xiàn)病理和臨床的交流與統(tǒng)一。一、病理解剖技術【掌握】解剖臺的設計1、解剖臺的設計高低和大小要合適，避免由于解剖臺過高或過低造成操作不便，臺面的大小除了能容納尸體外，還需要留出放置病理解剖器械和檢查臟器的地方；2、解剖臺面要光滑，可用水磨石或不銹鋼板臺面，臺面的四周應加一個10cm寬5cm高的臺邊、解剖臺的兩頭略高，應有一定的坡度、中間低，在中間的兩側設有較粗的下水漏，臺邊內鑲嵌有多孔水管，靠近解剖臺的腳部還應設有清洗用的水池，解剖臺和清洗池的水龍頭開關均應采用腳踏式；一、病理解剖技術【掌握】解剖臺的設計3、有條件的單位可購買不銹鋼解剖臺或瓷解剖臺，比較好的解剖臺能夠升降，帶有抽氣功能，可防止解剖時出現(xiàn)的腥臭味，不銹鋼和瓷解剖臺也容易清潔消毒；4、為了避免污染環(huán)境還應設計與病理解剖臺配套的污水消毒池。解剖時排放的污水，應先排入污水消毒池進行消毒處理。每次解剖后，根據(jù)污水排放量多少，加入一定比例的漂白粉或次氯酸鈉消毒，再排入城市的下水管道。一、病理解剖技術【熟練掌握】常用解剖的器械1、刀：解剖刀、剖驗刀、截肢刀、肋骨刀和腦刀。用于切割皮膚、肋骨和腦，剖驗臟器用；2、剪：鈍頭、尖頭解剖剪、彎頭剪、靜脈剪，分離組織和臟器用。另外還有剖驗腸用的腸剪和肋骨用的肋骨剪。3、鑷和鉗：有齒鑷、無齒鑷、彎血管鉗、直血管鉗和有齒血管鉗；4、頭顱固定器、鋸（板鋸、弓鋸、電動鋸）鐵錘和骨鑿，為開顱和取脊髓用；5、大小探針：檢查膽道、輸尿管、尿道用；6、金屬藥膏刀：無菌取材用；一、病理解剖技術【熟練掌握】常用解剖的器械7、刻度量杯：稱量體腔積液和胃腸道內容物用；8、注射器、針頭：抽取血液和滲出液用；9、量尺：測量尸體身長和臟器大小用；10、縫合針和線；11、天平（電子天平）：稱量臟器和新生兒體重用，稱量范圍0.1g~2000g和1~5000g；12、木枕；13、臟器解剖臺：寬40cm，長60cm，高15~20cm；14、瓷盆和塑料桶：盛裝臟器用；15、其他：醫(yī)用乳膠手套、線手套、紗布、海綿等。一、病理解剖技術【熟練掌握】解剖室的清潔和消毒每次解剖后，解剖室的地面及靠近地面的墻壁部分需用水沖洗干凈。打開紫外線燈進行空氣消毒，照射劑量不應低于90000μWs/cm2。室內溫度不低于20℃，相對濕度不超過50%，一般照射20~30min。必要時可噴霧2%過氧乙酸8ml/m3（相當于0.16g/m3）密閉消毒30min。一、病理解剖技術【熟練掌握】解剖器械的清潔和消毒病理解剖器械使用后用清水沖洗干凈，浸泡在1:1000苯扎溴銨（新潔爾滅）內含0.5%亞硝酸鈉溶液中4~6h?；蚪菰?0%甲醛水溶液內消毒2~4h，在甲醛液中浸泡時間不宜過長，以免損壞器械，消毒后用流水將器械沖洗干凈，再用紗布擦干涂上液體石蠟防銹。一、病理解剖技術【熟練掌握】個人防護解剖時應帶醫(yī)用乳膠手套，外面再套上薄質紗手套，解剖前應將紗手套浸濕，以利于清洗。解剖時應戴上口罩帽子穿著手術衣，其外面帶上塑料圍裙。所用物品必須經(jīng)過嚴格消毒處理后再使用。一、病理解剖技術病理解剖的意義下面描述錯誤的是：（

）A.病理解剖技術是病理學的基礎之一B.發(fā)現(xiàn)臨床診斷和治療上存在的問題C.大量病理資料的積累促進了醫(yī)學的發(fā)展和進步D.分子生物學技術的迅猛發(fā)展可替代傳統(tǒng)的病理解剖技術E.可以通過臨床病理討論會的形式，實現(xiàn)病理和臨床的交流和統(tǒng)一【答案】D高頻考題病理解剖室的設計，下面不合適的是：（

）A.解剖臺上方最好安裝無影手術燈，避免帶色光源照明影響對病變器官染色的觀察B.病理解剖室應至少設計兩個門，其中一個寬一點以便尸體的抬運C.解剖室窗戶略低一些，以便于尸體的搬運和自然光線的利用D.解剖室窗戶略高一些，以便于自然光線的利用E.解剖室入口兩側設計消毒室、更衣室和浴室【答案】C高頻考題高頻考題常用的病理解剖器械很多，如果條件不允許常規(guī)備用的解剖器械可以不包括：（

）A.天平用于稱量臟器和新生兒體重B.能稱量成人尸體的大秤（50~100kg）C.開顱和取骨髓需用頭顱固定器、鋸、鐵錘和骨鑿等D.刀類有解剖刀、截肢刀、肋骨刀和腦刀，用于切割皮膚、肋骨和腦等E.刻度量杯稱量體腔液體【答案】B高頻考題關于解剖臺的設計，下面哪項不適宜？：（

）A.應該有與病理解剖臺配套的污水消毒池，避免污染環(huán)境B.解剖臺面要光滑，兩側設有較粗的下水漏C.解剖臺面大小能容納成人尸體即可D.解剖臺能夠升降，帶有抽氣功能E.解剖臺面高低要合適，避免造成操作不便【答案】C【解析】解剖臺面大小除了能容納尸體外，還要留出放置病理解剖器械和檢查臟器的地方。高頻考題常用的病理解剖器械應有：（

）A.刀類有解剖刀、截肢刀、肋骨刀和腦刀，用于切割皮膚、肋骨和腦等B.剪類有鈍頭與尖頭解剖剪、彎頭剪和靜脈剪等C.鑷和鉗：有齒鑷與無齒鑷、血管鉗等D.天平、刻度量杯和大小探針等E.以上內容均包括【答案】E高頻考題關于病理解剖室和器械的清潔、消毒，下面錯誤的是：（

）A.器械用后清水沖洗干凈，浸泡在1:1000苯扎溴銨（新潔爾滅）內含0.5%亞硝酸鈉溶液中4~6小時B.病理解剖室只需定期用水沖洗地面和靠近地面的墻壁C.打開紫外線燈進行空氣消毒，室溫不低于20℃，相對濕度不超過50%，一般照射20~30分鐘D.打開紫外線燈進行空氣消毒，劑量不應低于9000μw·s/cm2E.器械用后清水沖洗干凈，也可以浸泡在10%的甲醛水溶液中消毒2~4小時【答案】B高頻考題做病理解剖時的個人必要防護不包括：（

）A.解剖人員穿戴完畢，解剖前必須經(jīng)過無菌室在無菌風下吹20~30分鐘B.所用物品必須經(jīng)過嚴格消毒處理后再使用C.解剖時戴口罩、帽子，穿上手術衣D.手術衣外面戴上塑料圍裙E.解剖時戴醫(yī)用乳膠手套【答案】A高頻考題用于病理解剖室空氣消毒的過氧乙酸的濃度是：（

）A.2%B.20%C.60%D.80%E.100%【答案】A【掌握】固定劑的選擇：細胞內物質成分與固定劑的關系【熟練掌握】固定的定義和意義固定的作用：保持細胞形態(tài)、保存細胞內成分、便于染色、有利于切片、固定劑的不良影響固定劑的選擇：固定液的量和容器、固定液的穿透性、固定時間、固定強度、特殊固定二、固定方法【掌握】固定劑的選擇：細胞內物質成分與固定劑的關系組成細胞的主要成分為蛋白質、脂類和糖類，根據(jù)研究目的不同分別選用不同的固定劑和固定方法，如：進行Masson染色，最好用甲醛升汞、Zenker液或Bouin液固定；檢查嗜鉻細胞宜用含鉻的固定液（如Zenker液等）；要保存細胞內糖原則用Carnoy液固定；用于免疫組織化學染色時，應根據(jù)不同的抗原特性選擇不同的固定液，如T淋巴細胞表面抗原為不穩(wěn)定抗原，極易被固定液破壞，因此常用冰凍切片進行染色，而HbsAg，CEA，S-100等抗原一般很穩(wěn)定，其抗原性幾乎不受固定液類型的影響。二、固定方法【熟練掌握】固定的定義：將組織浸入某些化學試劑，使細胞內的物質盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結構和位置，這一過程稱為“固定”。二、固定方法【熟練掌握】固定的意義：機體死亡后，如不及時處理，細胞在自身溶酶體酶的作用下會溶解破壞，組織細胞的結構將難以保持。若有細菌繁殖則極易引起組織腐?。蝗粲糜诿庖呓M織化學染色，固定的重要意義是保存組織細胞的抗原性，是抗原物質不發(fā)生彌散和抗原性喪失。若組織固定不良，在以后的標本制備過程中則無法加以糾正；對于電鏡標本，即使延遲幾分鐘，對其超微結構也有嚴重影響。二、固定方法【熟練掌握】固定的作用：1、保持細胞形態(tài)與生活時的形態(tài)相似，防止自溶與腐敗。2、保存細胞內特殊的成分與生活狀態(tài)時相仿：經(jīng)過固定，使其定位在細胞內的原有部位，有利于其后物質的確切定位。對于不同的物質應選用不同的固定劑和固定方法。3、便于染色。便于區(qū)別不同組織成分：組織細胞內的不同物質經(jīng)固定后產(chǎn)生不同的折光率，對染料產(chǎn)生不同的親和力，經(jīng)染色后容易區(qū)別。4、有利于切片。固化劑有硬化作用，使組織硬度增加，便于制片。二、固定方法【熟練掌握】固定劑的不良影響：1、影響常規(guī)染色：如用福爾馬林固定時，常有福爾馬林色素的異常沉積，福爾馬林也影響水溶性猩紅S的染色。2、固定造成物質損失：不同的固定劑和固定方法會引起不同程度的細胞內蛋白質、粘多糖、脂類、核酸和低分子量物質的損失，因此應根據(jù)研究目的的不同選擇合適的固定劑和固定方法，以使所研究的物質損失達到最小。3、組織皺縮：甲醛、四氧化鋨和福爾馬林固定的組織均有不同程度的皺縮。單用戊二醛也會引起組織皺縮。二、固定方法【熟練掌握】固定劑的選擇：固定液的量和容器量要足，一般為組織塊總體積的4~5倍，也可達15~20倍。組織應于取下后立即或盡快放入適當固定液中。容器宜相對大些，防止組織與容器粘連產(chǎn)生固定不良。瓶底常墊以棉花，使固定劑能均勻滲入組織塊。并在固定期間輕輕攪動或搖動容器有利于固定液的滲入，用自動石蠟脫水包埋機有同樣效果。二、固定方法【熟練掌握】固定劑的選擇：固定液的穿透性一般固定液在24h內不能穿透厚度大于2~3mm的實體組織或0.5cm的多孔疏松組織。固定劑的選擇：固定時間大多數(shù)組織應固定24h，然后保存于70%酒精中。固定時間與使用固定液的種類、組織塊大小、溫度等有關，不同的固定液有不同的固定時間。一般固定時間為3~24h。二、固定方法【熟練掌握】固定劑的選擇：固定溫度和加熱、組織塊大小大多數(shù)可在室溫（25℃）固定，在低溫（如4℃）固定時，固定時間應相應延長。加熱可使蛋白質凝固，但一般不要求加熱，因為加熱可加速組織的自溶。厚度可根據(jù)組織類型而不同，但組織要得到良好的固定，原則上不應超過4mm，3mm更為合適。二、固定方法【熟練掌握】固定劑的選擇：固定強度可取已固定完畢的組織標本用刀從正中切開，如固定良好，其切面呈灰白色，質感較硬而具有彈性；若固定不好，切面可見血色，含液體較多，組織仍保留柔軟狀態(tài)。二、固定方法【熟練掌握】固定劑的選擇：特殊固定用于確診病變，保證在診斷時特殊結構得以保存。如尿酸鹽結晶則需要特殊固定。另外，要制備1μm厚的半薄切片，可先用戊二醛固定組織塊，而后再用鋨酸進行二次固定（后固定），或用多聚甲醛單獨固定。二、固定方法高頻考題對于固定液的穿透性下面描述正確的是：（

）A.一般固定液在24小時內對實體組織穿透厚度不大于2~3mmB.一般固定液在24小時內對實體組織穿透厚度在4~5mm之間C.一般固定液在24小時內對實體組織穿透厚度大于1.5cmD.一般固定液在24小時內對實體組織穿透厚度大于5mmE.一般固定液在24小時內對多孔疏松組織穿透厚度不大于1.0cm【答案】A高頻考題對組織的固定過程，下面的描述錯誤的是：（

）A.組織取下后盡快沖洗干凈放入適當?shù)墓潭ㄒ褐蠦.組織取下后盡快放入適當?shù)墓潭ㄒ褐蠧.固定時應注意組織塊的大小，組織塊切取適當D.需要做酶組織化學的組織固定應置于冰箱低溫固定E.大多數(shù)組織固定可在室溫，在低溫固定時，固定時間應相應延長【答案】A高頻考題對組織固定的定義，下面的描述正確的是：（

）A.將組織浸入某些化學試劑，使細胞內的物質盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結構和位置，這一過程稱為“固定”B.將組織浸入某些化學試劑，使生活的細胞迅速死亡，這一過程稱為“固定”C.將組織浸入某些化學試劑，使已經(jīng)停止代謝的細胞快速分解，這一過程稱為“固定”D.將組織浸入某些化學試劑，使生活的細胞迅速死亡并分解，這一過程稱為“固定”E.將組織浸入某些化學試劑，使生活細胞的代謝迅速停止并分解，這一過程稱為“固定”【答案】A高頻考題下面有關組織固定的描述，錯誤的是：（

）A.若用于免疫組化，固定的意義是保存組織細胞的抗原性B.組織的固定不良，在以后的標本制備過程中無法加以糾正C.機體死亡后，如不及時處理或固定，細胞在自身溶酶體酶的作用下會溶解破壞D.組織的固定不良，在以后的標本制備過程中可以加以適當?shù)募m正E.對于電鏡標本，適當而及時的固定非常重要高頻考題【解析】凡需病理檢查的各種組織都需要經(jīng)過固定，組織的正確固定具有重要的意義：因為機體死亡后，如不及時處理或固定，細胞在自身溶酶體酶的作用下會溶解破壞，組織細胞的結構難以保持。若用于免疫組化，固定的意義是保存組織細胞的抗原性。良好組織學切片的基礎取決于適當而完整的固定，若組織的固定不良，在以后的標本制備過程中無法加以適當?shù)募m正?！敬鸢浮緿高頻考題對于組織固定所起的作用錯誤的是：（

）A.經(jīng)過固定使細胞內的一些蛋白等凝固，使其定位于細胞內的原有部位B.保持細胞與生活時的形態(tài)相似，防止自溶與腐敗C.組織細胞內的物質經(jīng)固定后對染料產(chǎn)生不同的親和力，經(jīng)染色后容易區(qū)別D.組織細胞內的物質經(jīng)固定后對染料產(chǎn)生相同的親和力，經(jīng)染色后容易區(qū)別E.組織固定后可產(chǎn)生不同的折光率【答案】D高頻考題有關組織固定的情況，下面的描述錯誤的是：（

）A.固定使細胞內的一些蛋白等凝位于細胞內的原有部位，有利于其后的確切定位B.及時充分固定，可防止組織自溶C.對于不同的組織均可選用甲醛常溫固定方法，不影響其以后的標本制作和染色D.及時充分固定，可防止組織腐敗E.固定可保持細胞內特殊的成分與生活狀態(tài)相似【答案】C【解析】如檢查嗜鉻細胞瘤要用含鉻的固定液（如Zenker液），檢查細胞內糖原應選Carnoy液或無水乙醇高頻考題固定的作用下列哪項不正確：（

）A.凝固細胞內蛋白質B.防止細胞自溶C.封閉非特異成分D.使抗原不彌散E.保留細胞和組織結構成分【答案】C高頻考題有關組織固定劑的不良影響，下面的描述錯誤的是：（

）A.常規(guī)應用的甲醛固定劑不會引起組織皺縮B.甲醛固定時，常有甲醛色素的異常沉積C.固定后可引起不同程度的組織皺縮D.不同固定劑會引起不同程度的細胞內物質損失E.甲醛影響水溶性猩紅S的染色【答案】A高頻考題做下面哪項免疫組織化學染色時，最好用冰凍切片？（

）A.S-100B.T淋巴細胞表面抗原C.CEAD.HBsAgE.CK【答案】B【解析】冷凍切片的優(yōu)點是能夠比較完好地保存各種抗原活性及酶類，特別是對于那些對有機溶劑或熱的溫度耐受能力較差的細胞膜表面抗原和水解酶保存較好。高頻考題關于固定組織容器的選擇，下面哪項正確？（

）A.固定的容器宜相對大些，防止組織與容器粘連產(chǎn)生固定不良B.容器以能容下需要固定的組織即可C.固定的容器不宜大，以免浪費固定液D.組織放入固定器后，固定期間不宜攪動E.容器底部不能墊棉花等柔軟物質【答案】A【解析】固定的容器宜相對大些，防止組織與容器粘連導致固定不良。容器底部常墊棉花使固定劑能均勻滲入組織塊。在固定期間輕輕攪動或搖動容器有利于固定液的滲入。高頻考題固定液的量一般應該為：（

）A.組織塊總體積的3倍B.組織塊總體積的4~5倍，也可以達15~20倍C.組織塊總體積的2倍D.組織塊總體積的1倍E.至少是組織塊總體積的30倍【答案】B高頻考題為了對組織充分固定，切取組織塊的厚度原則上應為:()A.15mm最為合適B.不超過4mm，3mm更為合適C.不超過10mm，6mm更為合適D.10mm最為合適E.6~9mm最為合適【答案】B高頻考題有關組織的固定時間，下面哪項描述較適宜？（

）A.組織固定時間不取決于溫度，主要取決于組織塊B.大多數(shù)組織應固定24小時，然后保存于70%的乙醇中C.組織固定不能時間太長，一般10分鐘即可D.組織在固定液中浸泡的時間越長，對組織的固定和染色越有利E.固定時加熱比較好【答案】B高頻考題要制備電鏡的半薄切片，可用哪種組織固定方法？（

）A.乙醇固定B.中性甲醛液體C.可先用戊二醛固定，然后再用鋨酸進行二次固定D.丙酮E.先用甲醛固定，然后再用戊二醛進行二次固定【答案】C高頻考題【解析】組織從生物活體取下以后，會由于細胞內部各種酶的作用自溶、微生物污染破壞細胞微細結構。因此，為最好是在動物血流未斷之前進行，取材時必須要做到快、小、準、冷等四大要點；固定的方法有物理的和化學的兩大類。物理的方法系采用冰凍、干燥、微波等手段來保持細胞結構；化學的方法是用一定的化學試劑來固定細胞結構。現(xiàn)通常使用化學方法進行固定，有時用物理-化學雙固定。組織塊固定常規(guī)采用戊二醛-鋨酸雙重固定、四氧化鋨固定。高頻考題哪一項不是影響組織固定結果的因素（

）A.固定液與組織塊體積的比例B.固定液的比重C.固定液的濃度D.固定的時間與溫度E.固定劑的穿透力【答案】B三、固定劑種類【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液【掌握】單純固定液：升汞、醋酸混合固定液：甲醛-鈣液【熟練掌握】

單純固定液：甲醛和福爾馬林色素、重鉻酸鉀、苦味酸、鉻酸、鋨酸、丙酮、三氯醋酸、乙醇混合固定液：B-5固定液、Bouin氏固定液、Carnoy氏液、Miiller氏液、PLP液和PLPD液、Zenker液、4%多聚甲醛-0.1mol/LPB、4%多聚甲醛-磷酸二鈉/氫氯化鈉液、乙醇-甲醛液、乙醚-酒精液、中性緩沖甲醛液、中性甲醛液三、固定劑種類【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液

Orth氏液：常用的常規(guī)固定液；對胚胎組織、神經(jīng)組織和脂肪組織固定均可。滲透力強，組織收縮小；臨時配制，暗處固定，固定24h左右。（固定液變黑時即不能再用）固定后流水沖洗12~24h，可存于70%酒精。配方：重鉻酸鉀2.5g、硫酸鈉1.0g、蒸餾水100ml、37%~40%甲醛10ml（用時加入）。三、固定劑種類【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液PFG液：適用于多種肽類抗原的固定，多用于免疫電鏡研究。對細胞抗原性和結構的保存較好。配方：對苯醌20g、多聚甲醛15g、25%戊二醛40ml、0.1mol/L二甲胂酸鈉緩沖液1000ml。三、固定劑種類【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液Rossman液：對糖原固定好固定12~24h后，用95%酒精洗配方：無水乙醇、苦味酸飽和液90ml、甲醛10ml三、固定劑種類【掌握】單純固定液：升汞、醋酸升汞：5%~7%飽和水溶液作為固定劑。單獨應用組織收縮顯著——常與醋酸和鉻鹽配成混合固定液使用。穿透能力低——固定薄片組織對蛋白質有沉淀作用——固定蛋白質對類脂、糖類無固定作用三、固定劑種類三、固定劑種類用法：臨用時加5%冰醋酸。固定2~3mm的組織需6~18h，流水沖洗24h后，保存于80%酒精。易產(chǎn)生汞鹽沉淀——切片脫蠟后，浸入0.5%碘酒（用70%酒精配制）脫汞，再用0.5%硫代硫酸鈉水溶液脫碘，流水徹底沖洗，再用蒸餾水洗后，進行染色?！菊莆铡繂渭児潭ㄒ海荷?、醋酸醋酸：低于15℃時為冰醋酸常用0.3%~5%的水溶液作為固定液。5%的醋酸pH為2-8可抑制細菌和酶的活性，可防治自溶。不能沉淀白蛋白、球蛋白，能沉淀核蛋白，可較好的保存染色體的結構。穿透力強，不能保存糖，不能固定脂肪和類脂固定線粒體和高爾基復合體時不要用高濃度的醋酸三、固定劑種類【掌握】混合固定液：甲醛-鈣液甲醛-鈣液：適用于固定脂肪組織和組織化學染色配方：甲醛10ml、無水氯化鈣1g、蒸餾水90ml三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：甲醛：甲醛：40%的甲醛水溶液此液久存自行分解，形成白色沉淀為副醛（三聚甲醛或多聚甲醛），可過濾后使用濾液儲存較長時間的甲醛，加入少量碳酸鎂或碳酸鈉，或用大理石中和溶液中的甲酸（甲酸影響細胞核的染色），40%甲醛溶液中加入甲醇可阻止聚合作用三、固定劑種類【熟練掌握】滲透力強、固定均勻、組織收縮小，但經(jīng)乙醇脫水后收縮較大。不能使白蛋白和核蛋白沉淀。甲醛通過使蛋白質分子發(fā)生交聯(lián)而產(chǎn)生固定作用?？杀４嬷惡皖愔w，但必須用冰凍切片法。可固定高爾基體、線粒體，是糖的保護劑三、固定劑種類【熟練掌握】福爾馬林色素：甲醛氧化產(chǎn)生蟻酸在組織中與血紅蛋白結合形成棕色的福爾馬林色素?？捎绊懭旧Ч?，故在制片前充分流水沖洗，亦可用下法去除：1、Schridde法：用75%酒精200ml，加濃氨水1ml。石蠟切片脫蠟后在該溶液中處理30min，用流水沖洗后染色。此法對組織無損害。2、Verocay法：用80%酒精100ml和1%氫氧化鉀1ml配成溶液，切片脫蠟后在其中處理10min，再用流水沖洗兩次，每次5min，而后用80%酒精浸洗后，即可染色。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：重鉻酸鉀：有毒，1%~3%水溶液作為固定劑穿透速度快、組織幾乎不收縮，但經(jīng)乙醇脫水后明顯收縮。固定后酸性染料著色良好，但堿性染料的著色較差不能與還原劑如乙醇等混合與甲醛混合時也不能長久穩(wěn)定固定的組織需經(jīng)流水沖洗12~24h，或用亞硫酸鹽進行洗滌。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：重鉻酸鉀：未酸化：不能沉淀蛋白質，但可以使蛋白質變?yōu)椴蝗苄?，保持其生活時的狀態(tài)，對于細胞質的固定較好，并且可固定類脂類物質使其不溶于脂溶劑。用于固定高爾基體、線粒體有良好效果，但有溶解染色質的缺點，染色質保存相對較差，可與核固定劑聯(lián)合應用。醋酸化：產(chǎn)生鉻酸，可使蛋白質沉淀，染色體可保存，但線粒體破壞。重鉻酸鉀常用語混合固定液：Zenker液、Helly液、Maximov液、Müler液、Regaud液等。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：苦味酸：黃色結晶體，強酸，易燃易爆。配飽和水溶液儲藏能沉淀一切蛋白質對脂肪和類脂無固定作用用乙醇溶解可固定糖類穿透慢，組織收縮明顯，但組織無明顯硬化固定后的組織經(jīng)酒精脫水即可，也可用50%或70%的酒精浸洗。三、固定劑種類【熟練掌握】可使皮膚組織軟化，使其易制作完整的切片可軟化火棉膠，因此含苦味酸的固定液固定的組織不宜用火棉膠包埋。固定時間不宜超過24h，固定后應盡快放入70%酒精，并在酒精中滴加少量飽和碳酸鋰水溶液或濃氨水，有助于除去苦味酸固定產(chǎn)生的黃色。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：鉻酸：三氧化鉻的水溶液。濃度是0.5%~1%。為強氧化劑，不能與酒精甲醛等混合能沉淀蛋白質，核蛋白固定良好。對脂肪無固定作用對線粒體和高爾基復合體有固定作用穿透能力弱，一般組織需固定12~24h。有收縮作用，且宜避光保存，以防止蛋白質溶解。沉淀作用強固定后必須徹底流水沖洗（≥24h），否則影響染色效果。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：鋨酸即四氧化鋨，淡黃色結晶，劇毒強氧化劑，不能與酒精、甲醛等混合。1%~2%的水溶液作為固定液。脂類（脂肪和類脂）固定劑，也可使蛋白質固定均勻，不產(chǎn)生沉淀。不溶于酒精與苯等有機溶劑，但微溶于二甲苯，用苯代替二甲苯可獲得更佳效果。特別適用于線粒體和內質網(wǎng)的固定電鏡研究的必須固定劑，常用于后固定。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：鋨酸配制：先將洗凈的裝有鋨酸的安瓿加熱，然后迅速投入盛有溶劑的棕色瓶中，使其受冷破裂。應在臨用前幾天配制以保證充分溶解。純鋨酸水溶液不穩(wěn)定，常在其水溶液中加入其他化學物質（將0.5g鋨酸溶解于25ml的2%鉻酸中；或25ml鋨酸加入1~2滴升汞）三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：鋨酸免疫組化中常用配方：1、1%鋨酸-PB液：①2.26%NaH2PO4·2H2O41.5ml；②2.25%NaOH8.5%ml；③5.4%葡萄糖5ml；④鋨酸0.5g。①和②混合后，調節(jié)pH至7.3~7.4，而后用該混合液45ml與③混合，再加入④即可。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：鋨酸免疫組化中常用配方：2、1%鋨酸-0.1mol/L二甲胂酸鈉液（pH7.2~7.4）：用2%鋨酸水溶液與0.2mol/L的二甲胂酸鈉緩沖液（pH7.2~7.4）等量混合即可。三、固定劑種類【熟練掌握】

單純固定液：鋨酸滲透力極弱，易使組織變硬——固定組織塊應小，否則內部固定效果不好；——延長固定時間，組織脆性增加，對染色不利鋨酸固定的標本有時要進行脫色處理：切片脫蠟入水后，先用新鮮配制的0.25%的高錳酸鉀水溶液浸泡5min，此時切片呈深褐色，經(jīng)自來水洗后立即浸入草酸-亞硫酸鉀水溶液（1%草酸和1%亞硫酸鉀水溶液分別存放，用時等量混合）5min，流水沖洗20min。也可再用2%過氧化氫處理30min，流水沖洗后染色效果更好。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：鋨酸電鏡標本常用1%高錳酸鉀脫碘。鋨酸固定的組織對堿性染料的親和力強，細胞核的染色效果好，但是減弱細胞質的染色效果——常配成混合固定液。有含鋨酸的固定液固定的組織，固定后應用流水沖洗12~24h，否則會影響染色效果三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：丙酮：易揮發(fā)易燃無色，可與水、醇、氯仿和醚等混合。可使蛋白質沉淀，滲透力強，對核的固定差。廣泛用于酶組織化學方法中各種酶的固定（如磷酸酶，脂酶和氧化酶等）作用基本與酒精相同，但對糖原無固定作用。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：三氯醋酸：無色易潮解的結晶體，水溶液為強酸性，易溶于醇和醚。密封于冷處保存。作用與醋酸相似，常在混合固定液應用，可使蛋白質沉淀。Susa液的主要成分一種良好的脫鈣劑。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：乙醇：固定濃度80%~95%無色，可與水無限相溶；固定兼脫水作用，固定速度較慢，易使組織變脆；一種還原劑，易氧化為乙醛和醋酸，不能與強氧化劑如鉻酸、重鉻酸鉀和鋨酸等混合用于糖原固定，如肝組織、阿米巴原蟲和尤文瘤的糖原染色。對纖維蛋白和彈性纖維等固定效果好。滲透力弱，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白。但核蛋白經(jīng)沉淀后，能溶于水，不利于染色體的固定。三、固定劑種類【熟練掌握】單純固定液：無水乙醇：穿透速度快，可固定糖原，但取材易薄。滲透能力差，使組織收縮，易揮發(fā)和吸收空氣中的水分，在使用時應蓋好容器?？杉尤胍恍o水硫酸銅粉末吸取其中水分。高濃度乙醇固定的組織硬化顯著，時間過長組織變脆，收縮明顯。70%乙醇可較長時間保存組織。50%以上乙醇可溶解脂肪和類脂體，并可溶解血色素，對其它色素也有破壞，因此有上述物質需要確定時，不能用乙醇固定。酒精一般不作常規(guī)固定劑，用酒精固定時，常先用80%酒精固定數(shù)小時，再換95%酒精繼續(xù)固定。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：B-5固定液即醋酸鈉-升汞-甲醛固定液多用于固定淋巴組織染色前應進行脫汞處理配方：無水醋酸鈉1.25g、升汞6g、甲醛10ml（用時加入），蒸餾水90ml。如不用甲醛則稱為B-4固定液三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：Bouin氏固定液常規(guī)用于外科活檢標本固定的良好固定液。用于固定大多數(shù)器官和組織，適用于結締組織染色，尤其是三色染色時更為理想。固定效果好，組織細胞結構完整。細胞核著色鮮明，但細胞質著色較差。對脂肪的固定效果好，尤其適用于含脂肪的淋巴結，乳腺組織和脂肪瘤標本的固定。固定液偏酸，pH3~3.5，對抗原有一定損害，使組織收縮，不適宜于標本的長期保存。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：

Bouin氏固定液有毒，避免吸入或與皮膚接觸。固定時間12~24h。固定后組織被染成黃色，需用70%~80%酒精洗滌。在酒精中加入飽和碳酸鋰水溶液有助于清除組織塊的黃色。配方：1、飽和苦味酸水溶液：甲醛水溶液：冰醋酸=15:5:1；2、用前配制：80%酒精150ml、甲醛水溶液60ml、冰醋酸15ml、結晶苦味酸1g?！獫B透力強，固定時間約24h，固定后可直接轉入95%酒精。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：Carnoy氏液固定胞漿和細胞核，對于染色體固定佳，顯示DNA和RNA效果好。常用于糖原和尼氏體的固定。不能保存脂類。有防止酒精的硬化和收縮作用，增加滲透力，外膜致密不易滲透的組織可用其固定。固定速度快，3mm厚的組織塊1h即可固定，大塊材料最好不超過4h配方：冰醋酸10ml、氯仿30ml、無水酒精60ml。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：Müller氏液作用緩慢，固定均勻，組織收縮小多用于媒染和硬化神經(jīng)組織，固定時間可很長（數(shù)天到數(shù)周）。固定過程中，需常更換新鮮液體。固定后流水沖洗，酒精脫水。配方：重鉻酸鉀2~2.5g、硫酸鈉1.0g、蒸餾水100ml。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：PLP液和PLPD液PLP液即過碘酸鹽-賴氨酸-多聚甲醛固定液適用于富含糖類組織的固定對細胞結構和抗原性保存好固定時間6~18h三、固定劑種類【熟練掌握】PLP液配方：儲存液ApH7.4的0.1mol/L賴氨酸-0.5mol/LNa2HPO4液：賴氨酸鹽酸鹽1.827g，溶于50ml蒸餾水中，而后加入Na2HPO4至0.1mol/L，將pH調至7.4，用0.1mol/L的PB補足100ml，使賴氨酸濃度也為0.1mol/L，4℃冰箱保存。儲存液B8%多聚甲醛液：8g多聚甲醛、100ml蒸餾水。過濾后4℃冰箱保存。臨用時，取3份A液和1份B液混合后，加入結晶過碘酸鈉，使過碘酸鈉終濃度為2%，此時pH為6.2。據(jù)認為較好的配比為：0.01mol/L的過碘酸鹽、0.075mol/L的賴氨酸、2%的多聚甲醛和0.037mol/L的磷酸緩沖液。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：

PLP液和PLPD液PLPD液配方：PLP液25ml、2.5%的重鉻酸鉀25ml。4℃冰箱固定36~54h。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：Zenker液常用固定液固定多種組織，使細胞核和細胞質染色較清晰，常用于三色染色。對免疫球蛋白染色最好用于一些腫瘤標本（如橫紋肌肉瘤和惡性畸胎瘤）的固定效果好對于病毒包涵體（如Negri小體）的固定效果也好對于含血量較多的標本不適合固定時間12~36h，加熱可加快固定作用三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：Zenker液固定后流水沖洗12h，在70%酒精脫水時加入碘（配成0.5%碘酒）脫汞。配方：儲存液：重鉻酸鉀2.5g、升汞5g、蒸餾水100ml。用時加入冰醋酸5ml。配制方法：將重鉻酸鉀和升汞一起加入蒸餾水中，加溫40~50℃溶解，冷卻過濾后存于棕色瓶內。用時取此液95ml，加入冰醋酸5ml即可。（此液在醋酸加入后可與重鉻酸鉀作用產(chǎn)生鉻酸。鉻酸、醋酸和升汞均為染色質的沉淀劑，且鉻酸可防止升汞對組織的過度硬化，醋酸可減少鉻酸對組織的收縮作用，并可增加固定液的穿透速度。）三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：

Zenker液此固定液不能用金屬容器盛放，組織固定后，也不能用金屬鑷夾取。進行磷鎢酸-蘇木精染色的組織應用該固定液固定。此液中的冰醋酸用甲醛代替——Helly液在Zenker儲存液中加入10ml甲醛水溶液——Maximow液。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：4%多聚甲醛-0.1mol/LPB適用于光鏡免疫組織化學方法動物先用此液進行灌注固定，取材后再用該液浸泡固定2~24h也可用于組織標本的較長時間的保存。配方：40g多聚甲醛，溶于1000ml，0.1mol/L的PB液，加熱60℃邊攪拌邊加溫至透明即可（一般滴加少量1mol/L的NaOH）。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：4%多聚甲醛-磷酸二鈉/氫氯化鈉液適用于光鏡和電鏡免疫組織化學方法。用于免疫電鏡標本時，應加入新鮮配置的戊二醛，使其終濃度為0.5~1%。——可長期保存組織。配方：甲液-多聚甲醛40g、蒸餾水400ml；乙液-Na2HPO4·2H2O16.88g、蒸餾水300ml；丙液-NaOH3.86g、蒸餾水200ml。先將甲液中多聚甲醛完全溶解，乙液倒入丙液混合后倒入甲液，用1mol/LNaOH或1mol/LHCl將pH調至7.2~7.4.補充蒸餾水至1000ml，充分混合后4℃冰箱保存。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：乙醇-甲醛液有脫水作用，固定后可直接入95%乙醇脫水對皮下組織中肥大細胞的固定好。配方：95%乙醇或無水乙醇90ml、40%甲醛10ml?；旌瞎潭ㄒ海阂颐?酒精液滲透性強，固定效果好，用于細胞涂片等固定配方：95%酒精49.5ml、乙醚49.5ml、冰醋酸1ml。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：中性緩沖甲醛液免疫組織化學最常用的固定液，對大多數(shù)抗原物質保存較好，對細胞膜的通透性有影響，可能使某些大分子抗原失去活性。對組織穿透性好，組織收縮小固定時間：24h以內為宜配方：40%甲醛10ml、0.01mol/LpH7.4的PBS90ml。三、固定劑種類【熟練掌握】混合固定液：中性甲醛液最常用的固定液之一，固定效果好。配方：40%甲醛120ml、蒸餾水880ml、磷酸二氫鈉4g、磷酸氫二鈉13g、pH7.0.10%的甲醛中含飽和碳酸鈣也稱為中性甲醛。三、固定劑種類甲醛液固定組織的原理主要是：（）A.使蛋白質分子發(fā)生交聯(lián)B.DNA降解C.沉淀蛋白質

D.沉淀核酸

E.凝固脂肪【答案】A92高頻考題滲透力強，固定均勻，對組織收縮較小的固定劑是：（）A.10%福爾馬林B.多聚甲醛C.苦味酸

D.丙酮

E.乙醇【答案】A93高頻考題甲醛溶液保存病理大體標本時，不能保留標本的原有顏色可能的原因是：（）A．甲醛使組織收縮B．甲醛使組織硬化C．甲醛破壞血紅蛋白D．甲醛破壞白細胞E．甲醛破壞血小板【答案】C高頻考題94使用甲醛固定液最好的pH是（）A.6.0B.7.0～7.2C.7.8～8.0D.8.2E.9.0【答案】B【解析】40%的甲醛主要由聚合形式的甲醛構成，嚴重影響固定效果。10%的甲醛主要由單體形式構成，因此不應使用新鮮非緩沖福爾馬林作為固定液，應先用pH7.2的磷酸鹽緩沖液配制，或在溶液中加入醋酸鈣，使溶液呈中性或弱堿性。高頻考題95高頻考題要保持細胞內糖原，原則上應選用下列哪種固定劑？（

）A.醋酸B.中性甲醛C.Carnoy固定液D.Bouin固定液E.丙酮【答案】C【解析】Carnoy固定液固定胞質和細胞核，對于染色體固定效果好，顯示DNA和RNA效果好。也常用于糖原和尼氏體的固定。糖原貯積癥的標本可用此固定，但不能保持脂類。導致福爾馬林色素形成的原因是：（）A.與核酸結合

B.交聯(lián)作用

C.與黏液蛋白結合

D.氧化作用產(chǎn)生蟻酸與血紅蛋白結合

E.還原作用【答案】D高頻考題97高頻考題甲醛屬于常用的單純組織固定液，對其描述下面不正確的是（）。A.長時間固定的標本，形成甲醛色素沉積可用乙醇配氨水去除B.相對而言，甲醛水溶液滲透能力強組織固定均勻C.長時間固定的標本，形成的甲醛色素沉積無法去除，故而組織固定不能時間過長D.甲醛價格較低，可用于固定和保存大體標本E.甲醛固定能保持脂類和類脂類高頻考題【解析】甲醛1、滲透強2、價格低，固定大體標本3、長時間固定形成甲醛色素，制片前應充分流水沖洗，也可用乙醇配氨水去除4、可保存脂類（冷凍切片）5、不沉淀白蛋白、核蛋白6、可固定高爾基體、線粒體，是糖的保護劑7、能與蛋白質中許多氨基酸反應【答案】C高頻考題關于甲醛固定液的描述不正確的是（）。A.冷凍切片法能保存脂類和類脂體B.甲醛固定液是水溶液滲透能力強C.能與蛋白質中許多氨基酸反應D.能使白蛋白和核蛋白沉淀E.可固定高爾基體、線粒體，是糖的保護劑【答案】D高頻考題中性甲醛液不含下列哪種物質？（）A.磷酸氫二鈉B.40％甲醛C.磷酸二氫鈉D.無水乙醇E.蒸餾水【答案】D高頻考題對于重鉻酸鉀固定劑，對其描述下面不正確的是（）。A.重鉻酸鉀固定的組織明顯收縮B.重鉻酸鉀為橙紅色晶體，有毒C.組織穿透速度快D.用于固定高爾基體和線粒體效果較好E.重鉻酸鉀固定的組織，酸性染料著色良好高頻考題【解析】重鉻酸鉀固定劑1、有毒。強氧化劑，不能與酒精、甲醛液等事先儲藏2、固定高爾基體、線粒體3、能固定脂肪及類脂物，為髓鞘及嗜鉻細胞優(yōu)良的媒染劑4、穿透速度快5、組織幾乎不收縮，但經(jīng)乙醇脫水后明顯收縮6、用后，酸性染料著色好7、酸化后可沉淀蛋白質8、配制Zenker、Helly、Maximov、Regaud液【答案】A高頻考題關于重鉻酸鉀固定液的描述哪項正確？（）A.經(jīng)其固定的組織酸性染料著色較差B.無毒性C.固定高爾基體和線粒體效果良好D.未酸化的重鉻酸鉀能使蛋白質沉淀E.能與乙醇還原劑混合【答案】C高頻考題下列混合固定液不含有重鉻酸鉀的是（）。A.Bouin液B.Zenker液C.Maximov液D.Helly液E.Regaud液高頻考題【解析】A.Bouin液：苦味酸飽和水溶液

75ml

+冰醋酸

5ml+福爾馬林

25mlB.Zenker液：重鉻酸鉀25g+升汞50g+蒸餾水1000ml+冰醋酸50mlC.Maximov液：Zenker貯存液100ml+甲醛（中性）10mlD.Helly液：重鉻酸鉀25g+升汞50g+蒸餾水1000ml+甲醛50mlE.Regaud液：3%重鉻酸鉀

80ml+福爾馬林

20ml【答案】A高頻考題單純組織固定液易燃易爆，一般應配成飽和溶液儲藏的是（）。A.苦味酸B.甲醛C.鋨酸D.重鉻酸鉀E.鉻酸高頻考題【解析】苦味酸1、配成飽和溶液儲藏（易燃易爆）2、沉淀一切蛋白質3、穿透慢4、收縮明顯5、不固定脂類6、可軟化火棉膠7、不宜超過24h【答案】A高頻考題下列哪種固定液易燃易爆，保存要注意？（）A.醋酸B.三氯醋酸C.鉻酸D.鋨酸E.苦味酸【答案】E高頻考題關于苦味酸固定液的描述不正確的是（）。A.不能軟化火棉膠B.能沉淀一切蛋白質C.對脂肪和類脂無固定作用D.穿透慢，組織收縮明顯E.固定組織時間不宜超過24小時【答案】A高頻考題常用于電鏡研究的固定劑是：（

）A.80%～90%乙醇

B.10%甲醛

C.1%～2%鋨酸

D.0.3%～5%醋酸

E.甲醇

【答案】C【解析】常用于電鏡研究的固定劑是1%～2%鋨酸。白色或淺黃色單斜結晶。有似氯的辛辣氣味。易升華揮發(fā)。溶于乙醇、乙醚、苯、氨水和氧氯化磷。劇毒，其蒸氣有刺激性。有腐蝕性。高頻考題對于升汞固定劑，對其描述下面不正確的是（）。A.升汞穿透力低，只宜固定薄片組織B.單獨應用組織收縮明顯C.可固定蛋白質D.固定后應進行脫汞和流水徹底清洗E.也可固定類脂和糖類高頻考題【解析】升汞1、單獨應用收縮顯著2、脫汞、流水徹底沖洗3、固定蛋白質4、不固定類脂、糖類5、穿透力低，薄片組織固定6、用其5%~7%飽和水溶液【答案】E高頻考題關于升汞固定液的描述不正確的是（）。A.對蛋白質有沉淀作用B.一般用其5％～7％飽和水溶液作為固定劑C.穿透力低，只宜固定薄片組織D.單獨使用組織收縮明顯E.對類脂和糖類有固定作用【答案】E染色體的固定液多含醋酸，醋酸可清楚地顯示細胞核，但醋酸固定的缺點是（）。A.組織膨脹明顯，尤其對于膠原纖維和纖維蛋白B.單獨應用組織收縮明顯C.醋酸穿透力太弱D.不能有效地防止自溶E.不能有效地抑制細菌生長【答案】A【解析】5％醋酸可抑制細菌和酶活性可防自溶，穿透力強，但缺點是組織膨脹明顯，尤其對于膠原纖維和纖維蛋白，所以一般很少單獨使用。高頻考題高頻考題用下述哪種單純固定液固定的組織宜避光保存，以防止蛋白質溶解？（）A.醋酸B.重鉻酸鉀C.苦味酸D.鉻酸E.升汞高頻考題【解析】鉻酸1、避光保存，防止蛋白質溶解2、強氧化劑，不能與甲醛、酒精混合3、固定蛋白質、核蛋白4、不固定脂類5、穿透力弱（12~24h）6、徹底流水沖洗＞24h【答案】D高頻考題對于鉻酸固定液的描述不正確的是（）。A.對組織穿透能力弱，一般組織需固定12～24小時B.屬于強氧化劑，不能與乙醇、甲醛等混合C.對脂肪有良好的固定作用D.能沉淀蛋白質，核蛋白固定良好E.經(jīng)其固定的組織必須徹底流水沖洗24小時以上的時間【答案】C高頻考題單純固定液屬于劇毒品，是電鏡研究的必需固定劑的是（）。A.醋酸B.鋨酸C.苦味酸D.三氯醋酸E.升汞高頻考題【解析】鋨酸1、劇毒2、電鏡研究必須3、強氧化劑，不能與甲醛、乙醇混合4、使用前提前幾天配制好5、濃度配方依目的而定6、滲透力極弱，組織塊應小7、固定線粒體、內質網(wǎng)，脂類最好的固定劑8、溶于有機溶劑9、延長固定時間，組織脆性增加【答案】B高頻考題對于鋨酸固定液的描述不正確的是（）。A.應用時現(xiàn)用現(xiàn)配B.屬于強氧化劑，不能與乙醇、甲醛等混合C.劇毒品，使用時注意防護D.電鏡研究的必需固定劑E.固定液濃度和配方依固定目的而不同【答案】A高頻考題鋨酸固定液的特點描述中，不正確的是（）。A.不溶于乙醇與苯等有機溶劑B.滲透力極弱C.主要為脂類固定劑D.固定的組織塊應小E.不能用于線粒體和內質網(wǎng)的固定【答案】E高頻考題用鋨酸固定液固定組織時，其特點包括（）。A.延長固定時間，組織的脆性減弱，對染色有利B.延長固定時間，組織的脆性增加，對染色有利C.延長固定時間，組織的脆性增加，對染色不利D.縮短固定時間，組織的脆性增加，對染色有利E.縮短固定時間，組織的脆性增加，對染色不利【答案】C高頻考題單純固定液即可使蛋白沉淀，同時也是一種良好的脫鈣劑的是（）。A.醋酸B.鋨酸C.苦味酸D.三氯醋酸E.乙醇【答案】D【解析】三氯醋酸：1、蛋白質沉淀；2、脫鈣劑高頻考題下列哪種單純固定液有固定兼脫水作用？（）A.醋酸B.甲醛C.苦味酸D.三氯醋酸E.乙醇【答案】E高頻考題單純固定液廣泛用于酶組織化學方法中的各種酶固定的是（）。A.鋨酸B.冷丙酮C.苦味酸D.乙醇E.醋酸高頻考題【解析】冷丙酮1、酶組織化學中各種酶固定2、易燃易揮發(fā)3、滲透強4、不固定細胞核、糖原5、與水、乙醇、氯仿、乙醚可混合6、作用基本與乙醇相同7、可使蛋白質沉淀8、組織收縮、硬化明顯【答案】B高頻考題對于丙酮固定液的描述錯誤的是（）。A.其作用基本與乙醇相同B.可與水、醇、氯仿和醚等混合C.廣泛用于酶組織化學中各種酶的固定D.可使蛋白質沉淀，滲透力強，對核的固定差E.對糖原有極好的固定作用【答案】E高頻考題欲顯示各種酶的組織切片，應選擇下列哪種固定液？（）A.95％乙醇B.AF液C.丙酮D.10％中性甲醛E.75％乙醇【答案】C【解析】丙酮的作用是沉淀蛋白質和糖，它對組織穿透性很強，保存抗原的免疫活性的效果較好。高頻考題用B-5固定的組織，在染色前應該進行下列哪項處理？（）A.酸化處理B.脫鈣處理C.水化處理D.脫汞處理E.脫脂處理高頻考題【解析】B-5固定液配制：儲備液：氯化汞12g+醋酸鈉2.5g+蒸餾水200ml。使用前加2ml甲醛到20ml儲備液中。常用于骨髓，淋巴結，脾和其他造血組織的固定?！敬鸢浮緿高頻考題下列哪項是用Bouin固定液固定組織的特點？（）A.細胞質著色鮮明，但細胞核著色較差B.該固定方法適用于標本的長期保存C.細胞核著色鮮明，但細胞質著色較差D.細胞核與細胞質均著色鮮明E.固定后組織被染成黑色高頻考題【解析】Bouin固定液1、不適宜長期存放2、核著色鮮明，質著色差3、組織固定后為黃色4、配制：飽和苦味酸:甲醛:冰醋酸=15:5:15、結締組織染色，特別是三色染色6、滲透迅速、收縮少【答案】C高頻考題對于Bouin混合固定液的描述錯誤的是（）。A.適宜于標本的長期保存B.適用于結締組織染色C.細胞質著色較差D.細胞核著色鮮明E.對于脂肪的固定效果好【答案】A高頻考題Carnoy液除了常用于糖原和尼氏體的固定外，還有下面哪項特點？（）A.該固定液固定速度慢而溫和B.該固定方法適用于標本的長期保存C.用于保存脂類D.對于染色體固定佳，顯示DNA和RNA效果好E.該固定液滲透力差高頻考題【解析】Carnoy固定液1、固定染色體，DNA及RNA2、不固定脂類3、速度快，滲透強（3mm厚組織1小時即可）4、常固定糖原、尼氏體（保留糖原）5、防止乙醇的硬化和收縮作用【答案】D高頻考題下面的固定方法滲透力強，3mm的組織1小時即可固定的是（）。A.B-5固定液B.Rossman液C.Orth液D.Müller液E.Carnoy液【答案】E高頻考題關于Carnoy固定液的描述不正確的是（）。A.有防止乙醇的硬化和收縮作用B.對于染色體固定好C.能保存脂類D.常用于糖原和尼氏體的固定E.固定速度快【答案】C高頻考題要保存細胞內糖原宜用（）。A.Carnoy液B.Bouin液C.Orth液D.Zenker液E.Rossman液【答案】A高頻考題下面哪種固定液作用緩慢，需要常更換新鮮液體，固定后流水沖洗？（）A.B-5固定液B.Rossman液C.Carnoy液D.Müller液E.Orth液高頻考題【解析】Müller固定液配方：重鉻酸鉀2.5g+硫酸鈉1.0g+蒸餾水100ml特點：作用緩慢，約需數(shù)星期，并要多次更換對神經(jīng)組織有加強染媒作用對一般組織染色無特別好處【答案】D高頻考題下面哪種固定液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，并且需在暗處固定？（）A.甲醛-鈣液B.PLP液和PLPD液C.Orth液D.Müller液E.Zenker液高頻考題【解析】Orth固定液1、現(xiàn)配2、暗處固定，24小時3、固定胚胎、神經(jīng)、脂肪組織4、固定液黑色不能再用5、配方：重鉻酸鉀20g+蒸餾水1000ml+甲醛100ml，甲醛用時再加【答案】C高頻考題可用于胚胎組織、神經(jīng)組織和脂肪組織的固定液是（）。A.Müller液B.Bouin液C.Orth液D.Carnoy液E.Rossman液【答案】C高頻考題PFG固定液多用于（）。A.多用于含血量較多的標本B.脂肪染色研究C.用于病毒包涵體的研究D.免疫電鏡研究，因適用于多種肽類抗原的固定E.對尼氏體的研究高頻考題【解析】PFG固定液1、配制：對苯醌20g+多聚甲醛15g+25%戊二醛40ml+0.1mol/L二甲酸鈉緩沖液至1000ml2、保護抗原、超微結構3、固定多肽類抗原4、免疫電鏡的研究【答案】D高頻考題PLP液和PLPD液適合于（）。A.膠原纖維和彈性纖維的固定B.富含糖類組織的固定C.富含脂肪組織的固定D.富含鈣類組織的固定E.軟骨組織的固定高頻考題【解析】PLP液和PLPD液1、PLP液（過碘酸鹽-賴氨酸-多聚甲醛固定液）2、較適于富含糖類的組織，對超微結構及許多抗原的抗原性保存較好3、含過碘酸鈉【答案】B高頻考題下面哪種固定液中含有過碘酸鈉？（）A.4％多聚甲醛-磷酸二鈉／氫氧化鈉液B.Zenker液C.PLP液和PLPD液D.PFG液E.Müller液【答案】C高頻考題下列哪種溶液適用于富含糖類組織的固定？（）A.PLP液和PLPD液B.B-5固定液C.PFG液D.Bouin液E.Orth液【答案】A高頻考題下面哪種混合固定液不適合用于固定含血量較多的標本？（）A.4％多聚甲醛-磷酸二鈉／氫氧化鈉液B.Zenker液C.PLP液和PLPD液D.PFG液E.乙醚-乙醇液高頻考題【解析】Zenker混合固定液1、不固定含血多的組織2、固定免疫球蛋白、嗜鉻細胞3、不能接觸金屬【答案】B【解析】Zenker混合固定液不適合用于固定含血量較多的標本，如充血的脾臟和梗死的肺組織等。高頻考題下列哪種溶液是對免疫球蛋白染色最好的固定液？（）A.Zenker液B.Bouin液C.Orth液D.Camoy液E.Rossman液【答案】A高頻考題下列哪種組織不適合用Zenker液固定？（）A.肺梗死的標本B.橫紋肌肉瘤C.病毒包涵體D.惡性畸胎瘤E.Negri小體【答案】A高頻考題不能用金屬容器盛放，且組織固定后也不要用金屬鑷夾取的固定液是（）。A.Carnoy液B.Bouin液C.Orth液D.Zenker液E.Rossman液【答案】D高頻考題檢查嗜鉻細胞宜用下列哪種溶液進行固定？（）A.Carnoy液固定B.Bouin液固定C.Orth液固定D.Zenker液固定【答案】D高頻考題通常動物進行灌注固定時，先用下面哪種混合固定液進行灌注，取材后再浸泡在固定液中？（）A.4％多聚甲醛-磷酸二鈉／氫氧化鈉液B.4％多聚甲醛-0.1mol／L磷酸緩沖液（pH7.3）C.中性甲醛液D.PFG液E.乙醚-乙醇液【答案】B高頻考題乙醇-甲醛液固定與脫水二者兼之，其配方是A.85%乙醇90ml+40%甲醛10mlB.90%乙醇90ml+40%甲醛10mlC.95%乙醇90ml+40%甲醛10mlD.80%乙醇90ml+40%甲醛10mlE.75%乙醇90ml+40%甲醛10ml【答案】C【解析】乙醇-甲醛液固定與脫水二者兼之，其配方是95%乙醇90ml+40%甲醛10ml。高頻考題對于4％多聚甲醛-磷酸二鈉／氫氧化鈉混合固定液，下面的描述錯誤的是（）。A.固定液毒性大，不適合于長期保存組織B.該固定液適用于光鏡免疫組織化學C.該固定液用于電鏡的免疫組織化學時，應加入新鮮配制的戊二醛D.固定液性質溫和，可長期保存組織E.該固定液配制后pH應調至7.2～7.4高頻考題【解析】4％多聚甲醛-磷酸二鈉／氫氧化鈉混合固定液1、適用于光鏡免疫組織化學2、用于電鏡的免疫組織化學時，加入新鮮配制的戊二醛3、固定液性質溫和，可長期保存組織4、pH應調至7.2～7.4高頻考題對于4％多聚甲醛-磷酸二鈉／氫氧化鈉混合固定液，下面的描述錯誤的是（）。A.固定液毒性大，不適合于長期保存組織B.該固定液適用于光鏡免疫組織化學C.該固定液用于電鏡的免疫組織化學時，應加入新鮮配制的戊二醛D.固定液性質溫和，可長期保存組織E.該固定液配制后pH應調至7.2～7.4【答案】A高頻考題用無水乙醇固定組織，更換一次無水乙醇脫水的標本適合（）。A.網(wǎng)狀纖維染色B.彈力纖維染色C.神經(jīng)鞘染色D.膠原纖維染色E.糖原和尿酸鹽結晶染色【答案】E【解析】因糖原和尿酸鹽結晶易溶于水高頻考題對于要進行糖原尿酸鹽結晶染色的標本其乙醇固定液濃度是（）。A.90％乙醇B.70％乙醇C.80％乙醇D.75％乙醇E.100％乙醇【答案】E高頻考題對于乙醇固定液的描述哪項正確？（）A.屬于氧化劑，易還原B.乙醇是一種氧化劑C.具有固定兼脫水作用D.固定速度快，不易使組織變脆E.可以與鉻酸、鋨酸等混合【答案】C高頻考題下列哪種組織不能用乙醇固定？（）A.纖維蛋白和彈力纖維B.肝組織C.尤因肉瘤D.阿米巴原蟲E.含血紅蛋白等色素的組織【答案】E高頻考題用下列固定液固定的組織一般不可沖洗的是（）。A.氯化汞B.重鉻酸鉀C.苦味酸D.鉻酸E.乙醇【答案】E高頻考題下列哪種混合固定液雖有氧化劑和還原劑，但可以臨用時配制，久置后則失效？（）A.Carnoy液B.Bouin液C.Helly液D.Zenker液E.Rossman液【答案】C【解析】Helly固定液要求現(xiàn)用現(xiàn)配高頻考題下列不屬于固定液的是（）A.中性甲醛B.丙酮C.正丁醇D.A-F液E.Zenker液【答案】C【解析】正丁醇不屬于固定液，可用于脫水兼透明高頻考題（共用備選答案）A.Müller液B.B-5固定液C.Rossman液D.Bouin固定液E.Orth液可用于胚胎組織、神經(jīng)組織和脂肪組織固定（E）對糖原固定好（C）多用于固定淋巴組織（B）多用于硬化神經(jīng)組織的固定（A）適用于結締組織染色，尤其是三色染色時更為理想（D）高頻考題【解析】Müller液：對神經(jīng)組織有加強染媒作用B-5固定液：常用于骨髓，淋巴結，脾和其他造血組織的固定Rossman液：糖原Bouin固定液：結締組織染色，特別是三色染色Orth液：胚胎、神經(jīng)、脂肪組織PFG液：適用于多種肽類抗原的固定，多用于免疫電鏡研究高頻考題（共用備選答案）A.甲醛-鈣液B.乙醚-乙醇液C.中性緩沖甲醛液D.乙醇-甲醛液E.丙酮特別適用于固定脂肪組織和組織化學染色（A）有固定和脫水作用（D）固定滲透性強，固定效果好，用于細胞涂片等固定（B）是免疫組織化學最常用的固定液，對組織穿透性好，組織收縮?。–）用于酶組織化學中各種酶的固定（E）高頻考題【解析】甲醛-鈣液：脂肪組織、組織化學染色乙醚-乙醇液：細胞涂片中性緩沖甲醛液：免疫組織化學最常用乙醇-甲醛液：固定+脫水，肥大細胞丙酮：酶組織化學中各種酶固定4％多聚甲醛-磷酸二鈉/氫氧化鈉：適用于光鏡和電鏡免疫組織化學方法【掌握】四氯呋喃、環(huán)已酮、松酯醇【熟練掌握】脫水、脫水劑、酒精、丙酮、異丙醇、正丁醇、環(huán)氧已烷四、組織的脫水和脫水劑【掌握】四氯呋喃易與水、乙醚、氯仿、丙酮和苯類混溶對組織滲透快，而收縮及硬化作用較小易揮發(fā)，無毒可用作封片溶劑，對染料不溶，常規(guī)制片時基本不用四、組織的脫水和脫水劑【掌握】環(huán)已酮無毒與苯、二甲苯、氯仿和石蠟混合可代替無水酒精脫水后直接浸蠟，組織塊不會變硬四、組織的脫水和脫水劑【掌握】松酯醇可取代無水酒精用作脫水劑和隨后的浸透與包埋四、組織的脫水和脫水劑【熟練掌握】脫水、脫水劑脫水：組織經(jīng)固定和水洗后含大量水分，水與石蠟不能混合，因此在浸蠟和包埋前，必須進行脫水。脫水是借某些溶酶置換組織內水分的過程。脫水劑必須能與水以任意比例混合，至于選用何種脫水劑，應根據(jù)固定劑的要求，不要任意選用。四、組織的脫水和脫水劑【熟練掌握】酒精最常用脫水能力較強，并可使組織硬化穿透速度很快，對組織有較明顯的收縮作用，故脫水時從低濃度開始：70%-80%-90%-95%-無水酒精。少數(shù)柔嫩組織從50%或30%開始。如進行糖原和尿酸鹽結晶染色的標本，應直接用無水酒精四、組織的脫水和脫水劑經(jīng)無水酒精固定的組織，更換一次無水酒精脫水即可。組織塊在純酒精中放置時間不宜過長，防止組織過度硬化造成切片困難。四、組織的脫水和脫水劑脫水時間與組織塊大小有關：對于1.5cm×1.5cm×0.2~0.3cm的組織塊：70%酒精數(shù)分鐘，80%、95%、95%、100%、100%酒精各2~4h，加溫可縮短脫水時間。小組織塊：80%~100%酒精30~45min即可，（結構緊密的組織或大塊組織不可用此法）脂肪組織和疏松結締組織應延長脫水時間，在95%酒精中水分必須洗凈，脂肪必須溶解掉，否則石蠟不能滲入脂肪細胞和纖維組織，無法切片及染色時易脫片。，且蠟塊干燥后出現(xiàn)凹陷。四、組織的脫水和脫水劑【熟練掌握】丙酮脫水作用與酒精相似，但對組織塊的收縮作用比酒精更嚴重，因此很少單獨應用。在快速脫水或固定兼脫水時有時應用。脫水時間：約1~3h丙酮可作為染色后的脫水劑，用于DNA和RNA染色。四、組織的脫水和脫水劑【熟練掌握】異丙醇酒精的良好代用品，不含水，可代替無水酒精使用。脫水后組織收縮小，對組織的硬化作用也較弱。對火棉膠和染料不溶，因此不能用于火棉膠包埋和染料配制。在常規(guī)制片中很少應用。四、組織的脫水和脫水劑【熟練掌握】正丁醇是無色液體，脫水能力較弱，可和水、酒精和石蠟混合，因此這種脫水的組織塊可直接浸蠟和包埋。叔丁醇無毒，可與水、酒精、二甲苯混合。可單獨使用，也可與酒精混合使用，是目前常用的一種脫水劑。與正丁醇相比，它不易使組織收縮或變硬，而且脫水后可不經(jīng)透明直接浸蠟，浸蠟前先經(jīng)過叔丁醇和石蠟1:1混合液。電鏡標本制作時常用作中間脫水劑。四、組織的脫水和脫水劑【熟練掌握】環(huán)氧已烷能與水和酒精混合，也能溶解石蠟，可代替酒精進行脫水，也可代替二甲苯進行透明，不引起組織收縮和硬化，用于制備植物標本較好。與正丁醇一樣，都均易揮發(fā)，而且價格較高，目前很少用于制作大量切片四、組織的脫水和脫水劑高頻考題組織固定、水洗后含大量水分，進行脫水處理是因為（）。A.水與石蠟不能混合，因此在浸蠟和包埋前必須進行脫水B.水可以影響組織細微結構，在浸蠟和包埋前必須先脫水C.含水的組織時間長可引起細胞膜破裂，在浸蠟和包埋前必須先脫水D.水含量多時，組織軟影響切片，在浸蠟和包埋前必須先脫水E.水可以影響細胞的著色，因此在浸蠟和包埋前必須進行脫水【答案】A高頻考題【解析】組織經(jīng)固定和水洗后含大量水分，而水和石蠟不能混合，因此在浸蠟和包埋前必須進行脫水。脫水是借某些溶媒置換組織內水分的過程，脫水劑必須能與水以任意比例混合，至于選用何種脫水劑，應根據(jù)固定劑的要求選擇，而不是根據(jù)被固定組織的要求選擇。乙醇是最常用的脫水劑。高頻考題組織脫水時通常乙醇的正確濃度順序是（）。A.70％—80％—85％—95％—100％B.70％—75％—80％—90％—100％C.70％—80％—85％—90％—100％D.70％—75％—85％—90％—100％E.70％—80％—90％—95％—100％【答案】E高頻考題組織固定后用乙醇脫水，下面的描述錯誤的是（）。A.用乙醇脫水應從低濃度開始B.脫水能力強，并且可硬化組織C.組織塊在純乙醇中放置時間越長脫水效果好，盡量在純乙醇中長時間放置D.穿透速度快，對組織有較明顯的收縮作用E.在溫箱加熱可縮短脫水時間【答案】C【解析】乙醇脫水1、為了減少組織材料的急劇收縮，應使用