人工采精授精

人工授精技術(shù)

方文化

2013.8

一.豬人工授精發(fā)展概況二.公豬方面三.精液方面四.人工授精實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)目錄一.豬人工授精發(fā)展概況豬人工授精在中國(guó)的歷史背景商業(yè)化人工授精在歐洲和美國(guó)的發(fā)展豬人工授精概述本交和人工授精的比較使用人工授精技術(shù)使母豬受孕的各種因素成功進(jìn)行人工授精的操作規(guī)程和8個(gè)步驟人工授精經(jīng)?？赡苡龅降膯?wèn)題豬人工授精在中國(guó)的歷史背景1.傳統(tǒng)上，運(yùn)用人工授精使母豬受孕在中國(guó)非常普及。1)群體非常小2)中國(guó)本地母豬發(fā)情特征明顯，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。3)中國(guó)本地母豬輸精一次就能受孕。4)即使母豬返情也比較小的經(jīng)濟(jì)壓力。5)公豬的遺傳基因不是顯得非常重要。豬人工授精在中國(guó)的歷史背景2.從二十世紀(jì)八十年代開(kāi)始，中國(guó)引進(jìn)了大量的西方品種，建立了大型的現(xiàn)代集約化豬場(chǎng)。1)有經(jīng)濟(jì)條件在1♂:20♀的比例下購(gòu)買(mǎi)公豬，甚至超過(guò)這一比例一到二頭。2)外來(lái)母豬通過(guò)公豬的存在而刺激發(fā)情。3)為確保受孕，外來(lái)母豬在一個(gè)情期內(nèi)最好進(jìn)行重復(fù)配種。4)使用早期斷奶技術(shù)使母豬體內(nèi)從泌乳到排卵的轉(zhuǎn)換過(guò)程中產(chǎn)生很多問(wèn)題。其最終結(jié)果是，在二十世紀(jì)八十和九十年代，自然交配成為大型集約化豬場(chǎng)中最受歡迎的配種方式。商業(yè)化人工授精在歐洲

和美國(guó)的發(fā)展在過(guò)去10年中，豬人工授精技術(shù)有了很大的發(fā)展和突破。1)精液稀釋劑的研制使采集后的精液稀釋后最多能保存5-7天，每一次采集的精液能分成10-20個(gè)單獨(dú)的頭份。2)通過(guò)先進(jìn)的授精器材，準(zhǔn)確的發(fā)情鑒定和授精技術(shù)，更好地掌握發(fā)情周期，取得和本交一致甚至更好的結(jié)果。商業(yè)化人工授精在歐洲

和美國(guó)的發(fā)展3)通過(guò)使用人工授精技術(shù)，可以購(gòu)買(mǎi)高質(zhì)量的公豬來(lái)生產(chǎn)生長(zhǎng)速度快、瘦肉率高的商品豬，因?yàn)槿斯な诰活^公豬可以至少用在100頭母豬身上，而本交一頭公豬只能用在20頭母豬身上。4)由于幾種嚴(yán)重疾病的迅速傳播，農(nóng)場(chǎng)主都不愿意從幾個(gè)不同的群體把活種豬引進(jìn)到自己的豬場(chǎng)。通過(guò)從場(chǎng)外公豬供精站獲得精液，生產(chǎn)自留的替換后備母豬可以把自己的豬場(chǎng)完全封閉起來(lái)，同時(shí)還是能得到高質(zhì)量的遺傳基因。人工授精技術(shù)概述豬生產(chǎn)中相互制約的5個(gè)環(huán)節(jié)品種改良健康飼料豬群管理生產(chǎn)系統(tǒng)影響人工授精效益的因素:1.豬群管理2.健康3.品種改良使用人工授精技術(shù)使母豬受孕的有關(guān)因素人工授精站1.公豬的管理和照料2.精液采集3.精液加工4.精液包裝1.刺激母豬發(fā)情2.發(fā)情鑒定3.站立發(fā)情4.排卵配種區(qū)域5.精液儲(chǔ)存6.使用前準(zhǔn)備7.輸精8.妊娠檢測(cè)人工授精成功與否的八個(gè)技術(shù)因素管理公豬精液采集實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作精液處理與質(zhì)量控制精液分裝、保存與運(yùn)輸發(fā)情鑒定輸精妊娠診斷成功應(yīng)用人工授精技術(shù)可讓母豬分娩率高于85%，每窩產(chǎn)仔數(shù)增加0-5頭二.公豬方面在公豬站里對(duì)公豬進(jìn)行良好的管理調(diào)教后備公豬精液采集馴化新種公豬1.大多數(shù)的種公豬都試著對(duì)任何物體躍起爬垮2.因品種的不同其配種的興趣也表現(xiàn)不同3.確認(rèn)假母臺(tái)上用帶有公、母豬氣味的分泌物涂抹好4.讓新種公豬觀看一頭有經(jīng)驗(yàn)的老公豬被采精的過(guò)程5.確認(rèn)年輕公豬不產(chǎn)生疑惑6.使新公豬集中注意力于假母臺(tái)的正確位置上7.保持足夠耐心。每天馴化公豬不要超過(guò)20—30分鐘8.不要生氣憤怒或去擊打公豬，如此會(huì)使公豬失去信心杜洛克大白長(zhǎng)白我確信她們看起來(lái)不是這樣！討厭！大小子馴化新種公豬1.一些公豬在開(kāi)始階段被操作時(shí)感非常敏感2.注意于樹(shù)立年輕公豬的信心3.開(kāi)始幾次射出精液的精子密度很低，因此收取精液并不重要4.優(yōu)先要馴化新公豬快速、正確地爬跨假母臺(tái)5.在一個(gè)場(chǎng)內(nèi)精液采集站，一頭發(fā)情母豬可以關(guān)在緊鄰假母臺(tái)的欄內(nèi)以刺激公豬的性欲6.每周采集年輕公豬精液不超過(guò)一次7.至少用12頭母豬進(jìn)行精液配種測(cè)試，以確認(rèn)其受孕率8.等到母豬產(chǎn)仔后進(jìn)一步檢測(cè)新公豬不帶有任何遺傳缺陷嘿！你介意嗎？我很高興于你溫暖的雙手好！只剩一天又該采的精液了唇裂畸型腿疝氣無(wú)肛門(mén)畸型尾畸型背精液采集前實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作1．實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作至少在計(jì)劃采精前1小時(shí)必須開(kāi)始2．實(shí)驗(yàn)室工作人員必須穿上工作服，擦凈所有工作臺(tái)、墻面和地面，保持室內(nèi)沒(méi)有灰塵，把實(shí)驗(yàn)室的溫度定在22-24度之間。3．打開(kāi)恒溫水槽，預(yù)熱到37度，準(zhǔn)備好足夠的稀釋液，放入恒溫水槽中4．把所有的采精器皿放在預(yù)熱箱中，預(yù)熱到37度5．準(zhǔn)備好采精杯，放入預(yù)熱箱中6．準(zhǔn)備好檢測(cè)設(shè)備：恒溫載物臺(tái)、顯微鏡、精蟲(chóng)計(jì)數(shù)器7．準(zhǔn)備好記錄本、識(shí)別用標(biāo)簽、筆等8．當(dāng)采精員要開(kāi)始采精時(shí)，把預(yù)熱好的采精杯放入保溫運(yùn)送箱中，通過(guò)傳遞窗口送到采精區(qū)域。開(kāi)始采精的時(shí)間開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備工作的時(shí)間橡皮圈過(guò)濾紙1升采精袋采精區(qū)域?qū)嶒?yàn)室精液采集區(qū)1.與公豬養(yǎng)殖區(qū)用墻壁和門(mén)分隔開(kāi)，可以維持本室為無(wú)灰塵環(huán)境。2.嚴(yán)格地控制溫度為18℃—24℃3.假母臺(tái)牢固地安置在地板上，位于一個(gè)角落處，面朝墻角。最好使用一塊配種墊放于假母臺(tái)下以使公豬可以牢固蹬踏。4.必須設(shè)計(jì)一個(gè)人員安全區(qū)以預(yù)防公豬突然攻擊。5.有一個(gè)通向?qū)嶒?yàn)室的唯一的傳遞窗，最好設(shè)計(jì)為雙側(cè)窗門(mén)。6.有污水出口的防滑水泥地板，以便于清洗。設(shè)計(jì)為“半清潔”工作區(qū)精液采集1.采精是第一個(gè)步驟，也是最容易受到污染的階段。2.準(zhǔn)備好采精杯，放上采精袋和過(guò)濾紙，預(yù)熱到37度。3.把預(yù)熱好的采精杯放入保溫的精液運(yùn)送箱中，然后拿到采精區(qū)域。4.把公豬趕到采精區(qū)域，然后誘導(dǎo)公豬爬上假母豬。5.把采精杯從精液運(yùn)送箱中取出，放在一個(gè)安全和容易拿到的地方。6.戴上雙層手套，用干凈的紙巾擦洗包皮囊。7..脫掉外層手套，用手握住陰莖，引誘公豬把陰莖全部伸出來(lái)。8.讓第一次射出的液體流在地上，然后用干紙巾擦干凈。精液受污染的危險(xiǎn)來(lái)自于：1．包皮尿液2．水3．包皮囊上掉下的塵土4．空氣中的塵埃5．汗液以上任何一個(gè)因素都可能破壞精液的質(zhì)量。保溫采精杯1升的采精保鮮袋過(guò)濾紙橡皮筋兩雙采精手套采精杯精液采集1．當(dāng)奶油狀白色的液體開(kāi)始流出來(lái)時(shí)，開(kāi)始用采精杯采集。2.繼續(xù)采集直到公豬完全停止。3.馬上把采好精液的采精杯放入保溫運(yùn)送箱中，不要拿掉過(guò)濾紙。4.把保溫運(yùn)送箱放在轉(zhuǎn)移窗口中，關(guān)上窗口的門(mén)。5.讓公豬自己從假母豬上下來(lái)，不要推它或催它。6.把公豬放回自己的欄中，準(zhǔn)備下一個(gè)采集。7..記?。汉芏嗑簭囊婚_(kāi)始采集時(shí)就污染了，破壞了精液的質(zhì)量。8.我們必須在采集時(shí)保護(hù)精液受外界物質(zhì)或溫差變化的影響。實(shí)驗(yàn)室傳送窗口采精區(qū)域空氣中的塵埃水和空氣包皮囊中的灰包皮液和尿液低溫在進(jìn)入采精杯前就污染了灰塵三.精液方面保存新鮮精液的關(guān)鍵因素保存和稀釋新鮮精液的步驟精液采集前實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作在實(shí)驗(yàn)里處理精液加工精液精子包裝和儲(chǔ)存精液保存新鮮精液的關(guān)鍵因素1溫度2滲透壓3PH值4污染5時(shí)間清洗設(shè)備的時(shí)候，不要使用肥皂液或洗滌液，只能使用熱水1．這些是能影響精液質(zhì)量的五個(gè)因素。2.采集、加工、儲(chǔ)存和使用精液時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)3.防止溫差變化應(yīng)注意的事項(xiàng)。4.使用的水必須純凈，不含任何雜質(zhì)，最好用雙蒸水配置精液稀釋液時(shí)必須用高質(zhì)量的稀釋粉和純凈水5.把1包稀釋粉（大約50克）倒入1升蒸溜水中，至少在使用前1小時(shí)準(zhǔn)備好。6.有三種不同類(lèi)型的稀釋粉，根據(jù)你的用途選澤正確的種類(lèi)。7蒸餾水可以當(dāng)?shù)刭?gòu)買(mǎi)，也可以用雙蒸水機(jī)自己制作。8.精液采集和使用之間的時(shí)間越長(zhǎng)，精液質(zhì)量變壞的危險(xiǎn)性就越大。1．防止溫差變化2．保持正確的滲透壓和PH值3．消除外界污染4．通過(guò)使用一次性器材來(lái)防止交叉感染和疾病傳播5．當(dāng)使用時(shí)確保是高質(zhì)量的精液1．溫度的變化必須緩慢，不能超過(guò)每5分鐘1度的速度2．在溫度下降到32度以前，混合精液和稀釋液3．當(dāng)混合時(shí)，精液和稀釋液必須等溫4．混合后，精液的溫度繼續(xù)慢慢下降，然后放在17度的冰箱中保存5．在人工授精實(shí)驗(yàn)時(shí)，室內(nèi)溫度控制在22-24度精液稀釋粉中包含：1．維持能量的純葡萄糖2．維持滲透壓和PH值平衡和穩(wěn)定的純鹽3．防止細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素1．短效：稀釋好精液后24小時(shí)內(nèi)用掉2．中效：稀釋好精液后4天內(nèi)用掉3．長(zhǎng)效：稀釋好精液后8天內(nèi)用掉短效中效長(zhǎng)效蒸餾水蒸餾水蒸餾水蒸餾水進(jìn)水雙蒸水出精液瓶總是在使用前檢查精液的質(zhì)量滴一滴在預(yù)熱的載玻片上稀釋粉稀釋和保存新鮮精液的步驟1）誘導(dǎo)公豬爬上假母臺(tái)2）擦凈包皮囊3）握住陰莖4）采集射出的精液濃稠部分5）把采好的精液運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室里精液的采集1）打開(kāi)恒溫水槽和預(yù)熱箱2）混合稀釋液3）準(zhǔn)備好采精杯4）打開(kāi)和檢查所有的電子設(shè)備5）準(zhǔn)備好輸精瓶、器皿、標(biāo)簽等6）確保稀釋溶液加熱到37度，混合好至少1個(gè)小時(shí)。步驟1采精開(kāi)始前實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作步驟21）識(shí)別公豬2）稱(chēng)重計(jì)算精液容量3）精液的顏色和味道4）穩(wěn)定采集5）精子濃度計(jì)算6）顯微鏡觀察精子的形狀和活力7）計(jì)算每次采集所能分裝的頭份數(shù)，每頭份至少含有30億活的精子8）加入稀釋液在實(shí)驗(yàn)室里對(duì)所采集的精液進(jìn)行加工和質(zhì)量檢測(cè)步驟3步驟4步驟5步驟6步驟7步驟81）準(zhǔn)備好分裝精液的輸精瓶和標(biāo)簽2）根據(jù)需要選擇輸精瓶/精液袋/精液管來(lái)分裝精液3）蓋上輸精瓶的蓋子或給精液袋/精液管封口分裝1）把分裝好的精液放在17度的恒溫冰箱中2）每隔24小時(shí)把輸精瓶轉(zhuǎn)動(dòng)一下以保持精子的旋浮狀態(tài)3）小心冰箱門(mén)打開(kāi)時(shí)溫度的上升儲(chǔ)存1）如果運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程超過(guò)30分鐘，最好用可移動(dòng)的恒溫冰箱2）如果運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程少于30分鐘，可以用保溫的運(yùn)送箱，但必須放入可升溫/降溫的冰袋3）在輸精前抽樣檢查每一次采集的精液樣品。運(yùn)送輸精1）發(fā)情鑒定2）組織好輸精區(qū)域3）規(guī)范操作程序4）使用一次性用具以防止尿道感染的傳播5）輸精完后對(duì)母豬的照顧在實(shí)驗(yàn)室里準(zhǔn)備精液有兩個(gè)目的1把采集的精液分裝成若干頭份，每頭份100毫升，含有40億個(gè)活的精子。2保存好稀釋好的精液，使之在3-5天后能夠很好地使用實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程必須使我們：1）不污染精液2）不使精液受溫差變化的影響在實(shí)驗(yàn)室里，才把采精杯從保溫運(yùn)送箱中取出，拿掉過(guò)濾紙，測(cè)量精液的溫度精液只能漫漫降溫，至34-37度，下降的速度不能超過(guò)每5分鐘1度的速度精液降溫的時(shí)間可能需要15-20分鐘，可以用這段時(shí)間來(lái)檢查精液的質(zhì)量，計(jì)算精子的密度。把計(jì)算好的稀釋液倒入另外一個(gè)燒杯，比較溫度當(dāng)精液和稀釋液的溫度完全一致時(shí)，把稀釋液漫漫倒入精液中精液稀釋液3-5天溫度的急劇變化將導(dǎo)致精子死亡38℃-39℃扔掉質(zhì)量控制射精時(shí)的正常精子頂體精子發(fā)育時(shí)，兩點(diǎn)發(fā)生改變?cè)|(zhì)滴由頸部向尾部緩慢移動(dòng)頂體脫落四.人工授精實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)人工授精實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)成隔離檢疫區(qū)種公豬養(yǎng)殖區(qū)精液采集區(qū)人工授精實(shí)驗(yàn)室人工授精設(shè)備與耗材場(chǎng)內(nèi)人工授精實(shí)驗(yàn)室與種公豬站的設(shè)計(jì)1.2.3.4.6.5.場(chǎng)內(nèi)人工授精設(shè)施的六個(gè)組成部分1.新公豬隔離檢疫區(qū)2.公豬養(yǎng)殖區(qū)、養(yǎng)殖欄與養(yǎng)殖圈舍3.精液采集區(qū)4.人工授精實(shí)驗(yàn)室、清潔室標(biāo)準(zhǔn)5.精液貯存與發(fā)送區(qū)6.實(shí)驗(yàn)室入口與更衣區(qū)1、2區(qū)是養(yǎng)殖區(qū)；3是過(guò)渡區(qū)；4、5、6是清潔區(qū)新公豬適應(yīng)馴化1.環(huán)境控制溫度在18—24℃，濕度為65%—75%之間。公豬室內(nèi)溫度達(dá)到或超過(guò)28℃，可能造成暫時(shí)性或永久性公豬不育。2.必須設(shè)計(jì)通風(fēng)系統(tǒng)，以降低疾病傳播風(fēng)險(xiǎn)。3.留出有效的養(yǎng)殖空間：公豬養(yǎng)在一個(gè)單獨(dú)的欄內(nèi)，長(zhǎng)度2.4米、寬0.75米、高1.1米。4.公豬欄下使用全漏縫水泥地板以維持其清潔干燥。飼料槽應(yīng)高于地板平面，而非沉入水泥地面下。5.保留一個(gè)運(yùn)動(dòng)圈,至少每8頭公豬使用5平方米，如有可能最好是4頭公豬共用一個(gè)運(yùn)動(dòng)圈。必須設(shè)計(jì)一個(gè)生物安全設(shè)施，稱(chēng)為一個(gè)“非清潔”工作區(qū)人工授精實(shí)驗(yàn)室1.相當(dāng)于GMP清潔室的標(biāo)準(zhǔn)1）地板、墻壁、天花板、臺(tái)面等必須是可清洗的瓷磚、玻璃、高密度塑料等材料。2）達(dá)到無(wú)塵環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)的空氣過(guò)濾系統(tǒng)。3）全控環(huán)境：溫度22℃—24℃；濕度為70%。2.用于冷、熱水的不銹鋼水池及排水口。3.足夠的供電插座便于設(shè)備使用。4.特殊設(shè)計(jì)的冷卻區(qū)用于精液緩慢冷卻至稀釋時(shí)。5.唯一雙側(cè)窗門(mén)的傳遞窗至更衣區(qū)，另有一雙側(cè)窗門(mén)的傳遞窗至精液采集區(qū)。設(shè)計(jì)為“清潔”工作區(qū)人工授精實(shí)驗(yàn)室設(shè)備人工授精基本應(yīng)用物品1.假母臺(tái)及配種墊2.雙蒸水機(jī)3.小水浴槽4.計(jì)量小于2千克的電子稱(chēng)5.泡沫預(yù)熱箱*6.顯微鏡(簡(jiǎn)易型)7.精蟲(chóng)密度計(jì)數(shù)器**8.17℃恒溫冰箱*泡沫預(yù)熱箱=泡沫箱+數(shù)字溫度計(jì)+加熱燈**精蟲(chóng)密度計(jì)數(shù)器=亞衛(wèi)精子密度測(cè)定器+10