GB/T 20396-2006三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定DNA分析方法

ICS65.020.20B22中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20396—2006三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定DNA分析方法ldentificationofgenuinenessandvarietalpurityofthree-linehybridriceanditsparents-DNAanalysismethod2006-05-25發(fā)布2006-11-01實(shí)施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T20396-2006三次前言引言1范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義4原理5儀器6試劑和溶液7實(shí)驗(yàn)程序89結(jié)果報告附錄A（規(guī)范性附錄)水稻基因組DNA的提取附錄B（規(guī)范性附錄）DNA的純化及定量·附錄C（規(guī)范性附錄)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳附錄D（規(guī)范性附錄）王瓊脂糖凝膠電泳附錄E（資料性附錄）用于雜交水稻鑒定的SSR標(biāo)記L附錄F（資料性附錄)）用于雜交水稻不育、保持和恢復(fù)特征基因檢測的分子標(biāo)記附錄G（資料性附錄）相關(guān)統(tǒng)計參數(shù)及計算………參考文獻(xiàn)

GB/T20396—2006前本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D是規(guī)范性附錄，附錄E、附錄F、附錄G是資料性附錄本標(biāo)準(zhǔn)由國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國農(nóng)作物種子標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所、安徽國家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化與監(jiān)測中心、安徽省種子管理總站、合肥豐樂種業(yè)股份有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：楊劍波、趙偉、陳萍、李莉、汪秀峰、宋豐順、宣云、張士勝、易成新、孔令傳、盛海平、王春生、向太和、本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。

GB/T20396—2006在雜交水稻品種審定、生產(chǎn)、制種和銷售等過程中，往往需要對品種的真實(shí)性和雜交稻種子純度進(jìn)行鑒定，常規(guī)的方法為種植鑒定、生化檢測等.本標(biāo)準(zhǔn)提供的DNA分析方法具有準(zhǔn)確度高、時間短、受環(huán)境影響小等優(yōu)點(diǎn)。本標(biāo)準(zhǔn)的制定和實(shí)施將對我國雜交水稻種子質(zhì)量控制起到積極作用隨著雜交水稻新品系、新組合、新類型的選育及DNA分析理論和技術(shù)的不斷進(jìn)步,本標(biāo)準(zhǔn)尚需不時進(jìn)行修訂。

GB/T20396—2006三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定DNA分析方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用DNA分析技術(shù)進(jìn)行三系雜交水稻及其親本真實(shí)性和品種純度鑒定的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于三系雜交水稻及其親本真實(shí)性和品種純度的驗(yàn)定。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T3543.1農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程總則GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程開樣GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)井試驗(yàn)GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程真實(shí)性和品種純度鑒定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法術(shù)語和定義GB/T3543.2、GB/T3543.5中確立的及下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreaction.PCR一種利用酶促反應(yīng)對特定DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的技術(shù).該技術(shù)以短核音酸序列作為引物.并使用一種耐高溫的DNA聚合酶,只需非常少量(通常在納克級范圍內(nèi))的DNA樣品,在短時間內(nèi)以樣品DNA為模板合成上億個烤貝。32引物primer一條互補(bǔ)結(jié)合在模板DNA鏈上的短的單鏈,提供30H末端作DNA合成的起點(diǎn)，延伸合成模板DNA的互補(bǔ)鏈3.3SSR標(biāo)記simplesequencercpeat,SSR由幾個核昔酸（一般為2個～6個)為重復(fù)單元的長達(dá)幾十至幾百個核苣酸的串聯(lián)重復(fù)序列：由于基本單元重復(fù)次數(shù)的不同，而形成SSR座位的多態(tài)性：根據(jù)SSR座位兩側(cè)保守的單拷貝序列設(shè)計一對特異引物來擴(kuò)增SSR序列.即可揭示其多態(tài)性。34三