第八章 化學(xué)藥物的分析

巴比妥類(lèi)藥物分析10-1一、巴比妥類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)剖析

InterpretationofChemicalStructure丙二酸脲素123456

三類(lèi)：

5,5-二取代巴比妥類(lèi)

1,5,5-三取代巴比妥類(lèi)代表物見(jiàn)表8-1205.)

硫代巴比妥類(lèi)巴比妥類(lèi)10-2123456巴比妥類(lèi)5,5-二取代巴比妥類(lèi)

R1R2

巴比妥C2H5-

C2H5-

苯巴比妥C2H5-

戊巴比妥

C2H5-

異戊巴比妥

C2H5-

司可巴比妥

-C2H5-1,5,5-三取代巴比妥類(lèi)

（少數(shù)）如：己瑣巴比妥硫代巴比妥類(lèi)

硫噴妥鈉

5-3電離，弱酸性與金屬離子反應(yīng)氫活潑，與香草醛反應(yīng)UV，隨電離級(jí)數(shù)變化IR，巴比妥類(lèi)結(jié)構(gòu)1.環(huán)狀母核部分（決定巴比妥類(lèi)藥物的特性）：丙二酰脲（1,3-二酰亞胺基團(tuán)）堿性條件水解2.取代基部分（區(qū)別各種巴比妥類(lèi)藥物）：苯環(huán)、不飽和鍵(烯丙基)、硫元素硫元素反應(yīng)碘、溴、高錳酸鉀反應(yīng)硝化、硫酸-亞硝酸鈉、甲醛-硫酸反應(yīng)5-4(一)性狀白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)?？諝庵蟹€(wěn)定，加熱多升華。游離巴比妥類(lèi)藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。二、性質(zhì)與鑒別 PropertiesandIdentification示例

ChP中苯巴比妥鈉的熔點(diǎn)鑒別法：取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過(guò)量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過(guò)，沉淀用水洗凈，在105℃干燥后，熔點(diǎn)應(yīng)為174~178℃。

特征熔點(diǎn)行為——鑒別、純度測(cè)定藥物本身、鈉鹽酸化析出產(chǎn)物、衍生物的熔點(diǎn)方法：鈉鹽+酸→游離巴比妥類(lèi)藥物↓

→過(guò)濾、洗滌、干燥→測(cè)熔點(diǎn)5-41.弱酸性2.水解反應(yīng)（在堿性條件下水解，放出NH3）3.絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Co,Cu,Ag,Hg反應(yīng)）4.香草醛反應(yīng)（Vanillin反應(yīng)）5.特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，S）6.鈉鹽反應(yīng)(二)化學(xué)性質(zhì)1.弱酸性1,3-二酰亞胺基團(tuán)，烯醇互變，水溶液中發(fā)生二級(jí)電離。

藥物具有弱酸性，可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水溶性的(鈉)鹽。成鹽后，水溶液呈堿性，加酸后析出結(jié)晶。2.水解反應(yīng)

酰亞胺結(jié)構(gòu)，堿性條件共沸，釋放氨氣，使紅色石蕊試紙變藍(lán)。

本類(lèi)藥物的鈉鹽，在吸濕情況下也能發(fā)生水解。pH11以上隨堿度的增加水解速度加快。

示例

JP15巴比妥的鑒別：取巴比妥0.2g，加氫氧化鈉試液10ml，加熱煮沸，則產(chǎn)生具氨臭的氣體，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。3.絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Ag,Cu,Co,Hg反應(yīng)）(1)與銀鹽的反應(yīng)

(2)與銅鹽的反應(yīng)(3)與鈷鹽的反應(yīng)(4)與汞鹽反應(yīng)（5,5-取代）

銀鹽反應(yīng)：鑒別

取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2分鐘，濾過(guò)，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過(guò)量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。SS紫色或紫色沉淀綠色（含硫巴比妥）5,5-取代基親脂性↑，紫色易進(jìn)入氯仿

銅鹽反應(yīng)鑒別

取供試品50mg，加吡啶溶液(1→10)5ml，溶解后加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。CoH2NCH(CH3)2H2NCH(CH3)2

汞鹽反應(yīng)

鈷鹽反應(yīng)異丙胺4.香草醛反應(yīng)（Vanillin反應(yīng)）棕紅色紫色變藍(lán)色加乙醇香草醛+濃硫酸活潑氫5.特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，S）

硝化反應(yīng)苯巴比妥與KNO3—H2SO4反應(yīng)生成黃色與NaNO2—H2SO4反應(yīng)苯巴比妥與NaNO2—H2SO4反應(yīng)生成橙黃色→橙紅色與甲醛—H2SO4反應(yīng)苯巴比妥與甲醛—H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán)(1)芳環(huán)取代基的反應(yīng)(2)不飽和鍵反應(yīng)與溴試液或碘試液的反應(yīng)

司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色與KMnO4的反應(yīng)

可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（3）硫元素的反應(yīng)示例

ChP中注射用硫噴妥鈉的鑒別：取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液5ml與醋酸鉛試液2ml，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹谏?。硫代巴比妥的紫外吸收光譜

A.HCl液(0.1mol/L)

B.NaOH液(0.1mol/L)巴比妥類(lèi)藥物的紫外吸收光譜A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)B.pH9.9緩沖液(一級(jí)電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級(jí)電離)λ(nm)2902702502300.51.01.5A3202802402000.80.50.2λ(nm)AABC238287304（三）巴比妥類(lèi)藥物紫外吸收光譜特征AB5-6三、含量測(cè)定Assay銀量法溴量法酸堿滴定法（醇-水中、膠束中、非水）紫外分光光度法（直接UV、提取后UV、差示UV）HPLC法1、銀量法——與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)基于巴比妥類(lèi)藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽。示例

ChP中異戊巴比妥的銀量測(cè)定法：取本品約0.2g，精密稱(chēng)定，加甲醇40ml使溶解，再加新鮮配制的3%無(wú)水碳酸鈉溶液15ml，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。含量＝TVf/w

×100%2、溴量法——司可巴比妥（不飽和取代基）凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類(lèi)藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測(cè)定其含量。*指示劑：淀粉指示劑

5-7示例

ChP中司可巴比妥鈉的溴量測(cè)定法：取本品約0.1g，精密稱(chēng)定，置250

ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加入溴滴定液(0.05mol/L)25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1分鐘，在暗處?kù)o置15分鐘后，注意微開(kāi)瓶塞，加入碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于13.01mgC12H17N2NaO3。3、酸堿滴定法非水酸量法——弱酸性巴比妥類(lèi)藥物在非水溶劑中酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)液滴定，終點(diǎn)明顯常用溶劑：二甲基甲酰胺非水酸量法----弱酸性

巴比妥類(lèi)藥物在非水溶劑中酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)液滴定，終點(diǎn)明顯常用溶劑：二甲基甲酰胺滴定液：甲醇鈉(鉀)指示劑：麝香草酚藍(lán)5-84、提取重量法5、UV法

酸性溶液無(wú)吸收，堿性介質(zhì)紫外特征吸收——定量6、HPLC法圖10-5空白血清和對(duì)照品血清HPLC圖A.空白血清;B.對(duì)照品血清1.苯巴比妥;2.苯妥英;3.卡馬西平;4.阿普唑侖（內(nèi)標(biāo)）芳酸及其酯類(lèi)藥物的分析本類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)特征（共性）①苯環(huán)本類(lèi)藥物的游離羧基酸性比較強(qiáng)，可成鹽或成酯。②羧基-COOH直接與苯環(huán)相連.如水楊酸類(lèi)、苯甲酸類(lèi)藥物;或羧基為磺酸基或通過(guò)烴氧基與苯環(huán)相連，如其他芳酸類(lèi)。③其他取代基：如酚羥基、氨基等

一、典型藥物分類(lèi)SA(Na)ASA3.（一）、水楊酸類(lèi)（二）、苯甲酸類(lèi)苯甲酸（鈉）羥苯乙酯丙磺舒甲芬那酸（三）、其他芳酸類(lèi)氯貝丁酯布洛芬二、主要化學(xué)性質(zhì)（一）、三氯化鐵反應(yīng)

1.水楊酸及其鹽

FeCl3試液

紫堇色鐵配位化合物

中性或弱酸性pH4-6H+

Fe

Fe+12HCl+4FeCl3SA6（）23

本反應(yīng)的適宜pH為4～6，在強(qiáng)酸性溶液中配位化合物分解。阿司匹林加熱后也可與三氯化鐵試液反應(yīng)呈紫堇色；對(duì)氨基水楊酸鈉加稀鹽酸呈酸性后，與三氯化鐵試液反應(yīng)呈紫堇色；貝諾酯加氫氧化鈉試液煮沸后，加鹽酸呈微酸性后，與三氯化鐵試液反應(yīng)呈紫堇色2.苯甲酸的堿性水液或苯甲酸的中性溶液，與三氯化鐵試液反應(yīng)生成堿式苯甲酸鐵鹽的紅色沉淀。3.丙磺舒加少量氫氧化鈉試液使生成鈉鹽后，在pH5～6水溶液中與三氯化鐵試液反應(yīng)，即生成米黃色沉淀。4.布洛芬也有類(lèi)似反應(yīng)（紫色）。

（二）、重氮化-偶合反應(yīng)（芳香第一胺反應(yīng)）

堿性β－萘酚偶氮染料1.對(duì)氨基水楊酸鈉

NaNO2試液

PAS-NaH+

重氮鹽（無(wú)色）橙紅色或猩紅色+NaNO2+HClPAS-NaN≡N+Cl-＋NaCl+2H2O（1）NaOH橙紅色COOHOHN=N--OH＋NaCl+H2OCOOHOHN≡N+Cl-+OH（2）2.

貝諾酯具潛在芳伯氨基，加酸水解后生成對(duì)氨基酚也有本反應(yīng)發(fā)生。（三）、氧化反應(yīng)

甲芬那酸與重鉻酸鉀試液反應(yīng)。

（四）、水解反應(yīng)1.阿司匹林等芳酸酯

Na2CO3試液

水楊酸鈉＋醋酸鈉

H+化SA↓（白色）＋HAc↑（臭味）ASASA-Na+Na2CO3⑴ASA+NaAc+CO2↑SA-Na

＋H2SO4⑶2NaAc+H2SO42HAc(臭)＋Na2SO42.雙水楊酸也有類(lèi)似反應(yīng)；3.氯貝丁酯加堿水解后，可與鹽酸羥胺及三氯化鐵生成紫堇色異羥肟酸鐵。4.羥苯乙酯的乙醇溶液煮沸后，可與硝酸汞試液反應(yīng)，放置后生成沉淀，上清液呈現(xiàn)紅色。⑵2SA-Na（白色）＋Na2SO42SA三含量測(cè)定（一）、酸堿滴定法（中和法）：

阿司匹林原料與其片劑在Ch.P2000中采用本法進(jìn)行，但具體操作方法有所不同。1、直接滴定法:用于阿司匹林原料測(cè)定原理：+NaOH中性乙醇酚酞+H2O

利用ASA中游離羧基的酸性，以中性乙醇為溶劑，直接以NaOH滴定液滴定。注意事項(xiàng)：（1）為便于溶解而又防止在滴定時(shí)水解發(fā)生，使測(cè)定結(jié)果偏高，需采用中性乙醇為溶劑。（2）滴定時(shí)應(yīng)不斷振搖，速度稍快，室溫下進(jìn)行，否則可使樣品發(fā)生水解而使結(jié)果偏高。（3）用氫氧化鈉滴定時(shí)，化學(xué)計(jì)量點(diǎn)偏堿性，選用在堿性區(qū)變色的酚酞為指示劑，粉紅色出現(xiàn)30秒不退即為終點(diǎn)。（4）計(jì)算公式：含量％＝Ｖ·Ｔ·ＦＷ×100％其中：V—終點(diǎn)消耗NaOH滴定液體積；F—滴定液校正因數(shù)＝實(shí)際濃度/規(guī)定濃度；W—樣品重量（mg)

T—滴定度；2、兩步滴定法:用于阿司匹林片及其腸溶片的測(cè)定。

因片劑中加入了穩(wěn)定劑酒石酸和枸櫞酸，故不能采用直接滴定法，而須采用先中和與供試品共有的酸（穩(wěn)定劑及水楊酸），再將阿司匹林在堿性條件下水解后進(jìn)行測(cè)定的方法。1、中和（第一步）：+NaOH+NaAc+SA-Na+酒石酸鈉

2、水解與測(cè)定（第二步）：（水解）加40.00ml(過(guò)量)NaOH液水浴加熱15分鐘+NaAc中性乙醇酚酞SA-Na(回滴)

2NaOH(剩余)+H2SO4酚酞Na2SO4+2H2O注意事項(xiàng):

(1)堿液在受熱時(shí)極易吸收空氣中CO2，用酸回滴時(shí)使測(cè)定結(jié)果偏低。故需在相同條件下作空白試驗(yàn)校正。

(2)第一步時(shí)以溶液出現(xiàn)粉紅色30秒不退即得，再精密加入40ml氫氧化鈉滴定液（可從滴定管上加入）。（3）水浴加熱應(yīng)在15分鐘以上并振搖，保證水解完全。

(V空-V樣)H2SO4.T.F.W片每片ASA含量占標(biāo)示量%=————————————————

100%W樣.標(biāo)示量

1000其中：V空、V樣—回滴時(shí)消耗硫酸滴定液的體積數(shù)（ml）。

W片—平均片重（g）。標(biāo)示量（g/片）。原理：

苯甲酸鈉為芳酸堿金屬鹽，易溶于水，其水溶液呈堿性，可用鹽酸滴定液滴定，但在滴定過(guò)程中析出的游離酸不溶于水，并使滴定終點(diǎn)的pH突躍不明顯，不利于終點(diǎn)的正確判斷。利用苯甲酸能溶于有機(jī)溶劑的性質(zhì)，在水相中加入與水不相溶的有機(jī)溶劑（如乙醚），并置分液漏斗中進(jìn)行滴定反應(yīng)，滴定過(guò)程中產(chǎn)生的苯甲酸不斷萃取入有機(jī)溶劑層中，使滴定反應(yīng)完全，終點(diǎn)清晰，同時(shí)可降低苯甲酸的離解。（二）、雙相滴定法

（三）、UV法1、直接UV法中國(guó)藥典采用此法測(cè)定丙磺舒含量，中國(guó)藥典多采用百分吸收系數(shù)（）法計(jì)算。注意這一方法的計(jì)算公式：含量相當(dāng)于標(biāo)示量％=A×D×V×W片（E1%

）1cm×100×W樣×S標(biāo)×100％2、離子交換－UV法氯貝丁酯含測(cè)3、柱分配色譜－UV法USP（24）用于ASA膠囊含測(cè)E1%1cm芳香胺類(lèi)藥物的分析

本章藥物的基本結(jié)構(gòu)是芳環(huán)、氨基、烴胺基。胺芳胺芳伯氨基本章主要涉及兩類(lèi)藥物（2）酰苯胺類(lèi)：代表藥物有鹽酸布比卡因、鹽酸羅哌卡因、鹽酸利多卡因等。（1）對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)：代表藥物有鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸丁卡因等。一、對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)藥物1、基本結(jié)構(gòu)：均具有對(duì)氨基苯甲酸酯的母核。苯佐卡因鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因胺（1）芳伯氨基特性：具有芳伯氨基，可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)；可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無(wú)此特性。（2）水解特性：具有酯鍵（或酰胺鍵），易水解，尤其受堿或光、熱的影響能促使水解。2、主要化學(xué)性質(zhì)（3）弱堿性：除苯佐卡因外，因其脂烴胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，故游離堿多為堿性，能與生物堿沉淀劑發(fā)生反應(yīng)。（4）其它特性：游離堿多為堿性油狀液體或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。

二、酰苯胺類(lèi)藥物1、基本結(jié)構(gòu)：為苯胺的?；苌?，均具有芳酰氨基。非那西?。▽?duì)乙酰氨基苯乙醚）對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）醋氨苯砜貝諾酯（撲炎痛）鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因（1）水解后顯芳伯氨基特性：本類(lèi)藥物均具有芳酰氨基結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中可水解為具芳伯氨基的化合物，并顯芳伯氨基特性反應(yīng)。水解反應(yīng)的速度與分子結(jié)構(gòu)有關(guān)：對(duì)乙酰氨基酚（對(duì)位取代）＞貝諾酯（對(duì)位取代）＞利多卡因、布多卡因（鄰位2個(gè)取代基）2、主要化學(xué)性質(zhì)（2）水解產(chǎn)物易酯化：如對(duì)乙酰氨基酚，其水解產(chǎn)物為醋酸，可與乙醇生成醋酸乙酯。（3）酚羥基的特性：具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基，與三氯化鐵作用呈色，如對(duì)乙酰氨基酚，可與利多卡因和醋氨苯砜區(qū)別。（4）弱堿性：如利多卡因和布比卡因具有脂烴胺側(cè)鏈，顯堿性，能與生物堿沉淀劑反應(yīng)，可與對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯砜區(qū)別。(5)與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)，鹽酸利多卡因可與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色的配位化合物沉淀。三、鑒別試驗(yàn)（一）重氮化—偶合反應(yīng)1、直接：鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺

鹽酸普魯卡因[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類(lèi)的鑒別反應(yīng)

取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

2、間接：（酰苯胺類(lèi)）對(duì)乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、貝諾酯對(duì)乙酰氨基酚

[鑒別]

（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。

3、鹽酸丁卡因：無(wú)重氮化反應(yīng)，分子中有芳香仲胺結(jié)構(gòu)可與亞硝酸鈉作用，生成N-亞硝基化合物。（二）三氯化鐵反應(yīng)

對(duì)乙酰氨基酚的結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與三氯化鐵試液作用，即顯藍(lán)紫色。紫堇色鐵配位化合物???+-

FeClOHAr3（三）與重金屬離子反應(yīng)1、與銅和鈷離子反應(yīng)（1）鹽酸利多卡因在碳酸鈉試液中，與硫酸銅（芳酰胺與脂肪胺）反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，溶于氯仿顯黃色，水層顯紫色。（P212）黃色藍(lán)紫色硫酸銅鹽酸利多卡因氯仿碳酸鈉?????????+2、與汞離子反應(yīng)：鹽酸利多卡因與對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)藥物相區(qū)別。黃色硝酸汞鹽酸利多卡因?????+H+Δ對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)紅或橙黃色1、鹽酸普魯卡因的鑒別試驗(yàn)（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)鹽酸普魯卡因[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于過(guò)量的鹽酸。（五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1、測(cè)三硝基苯酚衍生物的熔點(diǎn)鹽酸布比卡因與三硝基苯酚反應(yīng)生成的衍生物，熔點(diǎn)約為194℃。2、測(cè)硫氰酸鹽衍生物的熔點(diǎn)

鹽酸丁卡因溶于醋酸鈉溶液后，加硫氰酸銨溶液，即析出結(jié)晶性白色沉淀。干燥后熔點(diǎn)約為131℃。

鹽酸布比卡因

ChP（2010）[鑒別]（2）取本品，精密稱(chēng)定，按干燥品計(jì)算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48。（六）紫外特征

（七）紅外紅外吸收光譜

鹽酸普魯卡因及鹽酸普魯卡因胺ChP（2010）[鑒別]（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜一致。四、含量測(cè)定（一）亞硝酸鈉滴定法1、原理：具芳伯氨基的藥物。具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。2、測(cè)定方法

鹽酸普魯卡因

取本品約0.6g，精密稱(chēng)定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2O（1）加入適量KBr加快反應(yīng)速度

KBr為催化劑NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：3、主要測(cè)定條件（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2

加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度。OHNOBr

HBrHNO22++OHNOCl

HClHNO22++（2）溶液的酸度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3芳胺：鹽酸

（用量）1:2.5～6加入鹽酸的作用：Ⅰ重氮化反應(yīng)速度加快；Ⅱ重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；Ⅲ防止生成偶氮氨基化合物，影響測(cè)定結(jié)果NN+Cl-

+

H2NNN

NH

+

HCl（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3處，在攪拌下快速加入滴定液，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定。（3）室溫條件下滴定：10～30℃4、指示終點(diǎn)的方法（1）永停滴定法原理：用兩個(gè)相同的鉑電極，在兩個(gè)電極間加一低電壓（約50mv），并串聯(lián)一個(gè)微電流計(jì)，電極浸在被滴定液中，終點(diǎn)前，線路上無(wú)電流或僅有很小的電流流過(guò)微電流計(jì)，指針為零；到達(dá)終點(diǎn)，線路中有電流通過(guò)，電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)。（2）外指示劑法KI—淀粉糊劑或試紙終點(diǎn)變藍(lán)NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O（二）非水溶液滴定法

鹽酸利多卡因結(jié)構(gòu)中酰氨基鄰位有二個(gè)甲基，受空間位阻影響，水解較慢，不適宜用重氮化法測(cè)定；但其結(jié)構(gòu)中有脂肪胺基[-N（C2H5）2]，具有弱堿性，可采用非水溶液滴定法。(三）分光光度法對(duì)乙酰氨基酚在稀堿性（0.4％氫氧化鈉）溶液中，在257±1nm波長(zhǎng)處有最大吸收，可用于定量。雜環(huán)類(lèi)藥物的分析（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)異煙肼尼可剎米一、吡啶類(lèi)藥物硝苯地平（二）主要的化學(xué)性質(zhì)

1.弱堿性母核吡啶環(huán)上的氮原子顯弱堿性2.還原性酰肼基具有較強(qiáng)的還原性3.吡啶環(huán)的特性可發(fā)生開(kāi)環(huán)反應(yīng)1、吡啶環(huán)的開(kāi)環(huán)反應(yīng)

本反應(yīng)適用于吡啶環(huán)的α、α’位為無(wú)取代基的異煙肼和尼可剎米。（1）.戊烯二醛反應(yīng)尼可剎米與溴化氰、苯胺反應(yīng)生成黃色至黃棕色戊烯二醛衍生物。（三）、鑒別試驗(yàn)（2）.二硝基氯苯反應(yīng)異煙肼與2,4-二硝基氯苯反應(yīng)，在堿性溶液中顯紫紅色。還原反應(yīng)(銀鏡反應(yīng))異煙肼加水溶解后，加氨制硝酸銀試液，即有黑色渾濁出現(xiàn)，并生成氮和金屬銀，可在管壁上產(chǎn)生銀鏡。+AgNO3+H2O4Ag+N22、酰肼基團(tuán)的反應(yīng)（喹核堿）（喹啉環(huán)）H2SO4·2H2O

本類(lèi)藥物具吡啶與苯環(huán)稠合而成的喹啉雜環(huán)，本類(lèi)最常見(jiàn)的典型藥物有硫酸奎寧、硫酸奎尼丁、鹽酸環(huán)丙沙星、喜樹(shù)堿等。硫酸奎寧（quininesulfate)（一）典型藥物結(jié)構(gòu)二、喹啉類(lèi)藥物分析硫酸奎尼?。╭uinidinesulfate)H2SO4·2H2O鹽酸環(huán)丙沙星·HCl·H2O（二）主要理化性質(zhì)1、堿性：喹啉環(huán)上的N具有堿性。2、旋光性3、熒光特性（三）、鑒別試驗(yàn)（一）綠奎寧反應(yīng)

奎寧和奎尼丁互為異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)中均有6位含氧喹啉衍生物，可以發(fā)生綠奎寧反應(yīng)，即奎寧鹽經(jīng)氯水（或溴水）的氯（溴）化反應(yīng)，再加氨水處理，生成翠綠色的二醌基吲胺的胺鹽。（二）光譜特征1.紫外吸收光譜特征2.熒光光譜特征（P216）3.紅外光譜特征（三）無(wú)機(jī)酸鹽（P216）（一）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與典型藥物

吩噻嗪藥物為苯并噻嗪的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)中均具有共同的硫氮雜蒽母核，基本結(jié)構(gòu)為：三、吩噻嗪類(lèi)藥物的分析

本類(lèi)藥物結(jié)構(gòu)上的差異，主要表現(xiàn)在母核2位上的R2取代基和N10位上的R1取代基的不同。R2基團(tuán)通常為—H、—Cl、—CF3、—COCH3、—SCH2CH3等，R1基團(tuán)則為具有2～3個(gè)碳鏈的二甲或二乙胺基，或?yàn)楹s環(huán)如哌嗪和哌啶的衍生物等。.HCl.HCl鹽酸異丙嗪鹽酸氯丙嗪（二）主要理化性質(zhì)1、具有紫外和紅外吸收光譜特征本類(lèi)藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生。一般具有三個(gè)峰值，即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm）附近、和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm（ε為2.5×104～3×104）；本類(lèi)藥物母核中S為二價(jià)，易氧化，其氧化產(chǎn)物為亞砜和砜,它們具有四個(gè)吸收峰，與未氧化的吩噻嗪類(lèi)母核的吸收峰不同。（SO）（S）002、易氧化呈色本類(lèi)藥物硫氮雜蒽母核中二價(jià)S易氧化，其母核易被氧化成亞砜、砜而呈色。3、與金屬離子絡(luò)合呈色未被氧化的二價(jià)S能與金屬鈀離子形成有色配位化合物。其氧化產(chǎn)物亞砜、砜則無(wú)此反應(yīng)。4、堿性1、紫外特征吸收和紅外吸收光譜2、顯色反應(yīng)

1、氧化劑氧化顯色2、與鈀離子絡(luò)合顯色

吩噻嗪類(lèi)藥物分子結(jié)構(gòu)中的未被氧化的二價(jià)S能與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物。（三）、鑒別試驗(yàn)（一）、結(jié)構(gòu)特征與典型藥物的結(jié)構(gòu)

苯并二氮雜卓類(lèi)藥物為含氮雜原子、六元和七元環(huán)雙并合而成的有機(jī)化合物，其中1,4-苯并二氮雜卓類(lèi)藥物是目前臨床應(yīng)用最廣泛的鎮(zhèn)靜劑。中國(guó)藥典收載有氯氮卓（利眠寧），并將安定和硝基安定更名為地西泮和硝西泮。四、苯并二氮雜卓類(lèi)藥物地西泮氯氮卓阿普唑侖（一）化學(xué)鑒別

1、沉淀反應(yīng)2、水解后重氮化-偶合反應(yīng)氯氮卓和奧沙西泮加鹽酸溶液，加熱煮沸水解后，水解產(chǎn)物可有此反應(yīng)。而地西泮水解后則無(wú)此反應(yīng)。3、硫酸-熒光反應(yīng)4、分解產(chǎn)物的反應(yīng)5、氯化銅焰色反應(yīng)（二）、鑒別試驗(yàn)（二）紫外和紅外吸收光譜（三）薄層色譜法（一）、非水溶液滴定法

非水溶液滴定法，是國(guó)內(nèi)外藥典采用較多的含測(cè)方法，特別是對(duì)弱堿類(lèi)藥物及其鹽的測(cè)定。弱堿及其鹽在水溶液中用標(biāo)準(zhǔn)酸液直接進(jìn)行滴定沒(méi)有明顯的滴定突躍，滴定終點(diǎn)難于掌握。若采用非水酸性溶劑作為滴定介質(zhì)，則可顯著提高弱堿性藥物的相對(duì)堿度，使滴定突躍增大，滴定反應(yīng)順利完成。五、含量測(cè)定

除少數(shù)藥物以游離堿的形式供分析外，絕大多數(shù)為鹽類(lèi)（HCl鹽與H2SO4鹽）。這些鹽類(lèi)的滴定過(guò)程，實(shí)際上是一個(gè)置換滴定，即強(qiáng)酸滴定液置換出與游離堿結(jié)合的較弱的酸。反應(yīng)原理可用下列通式表示：BH+·A-+HClO4BH+·ClO4-+HA基本原理：

由于被置換出來(lái)的HA的酸性強(qiáng)弱不同，因此對(duì)滴定反應(yīng)的影響也不同。當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，必須采取措施除去或降低反應(yīng)產(chǎn)生的HA的酸性，使反應(yīng)順利完成。因此，必須根據(jù)不同情況采用相應(yīng)的測(cè)定條件。二、鈰量法

本法是氧化還原法，硝苯地平與吩噻嗪類(lèi)藥物可采用本法進(jìn)行測(cè)定。由于這些藥物具有還原性，在酸性介質(zhì)中可以用硫酸鈰滴定液直接滴定。前者用鄰二氮沸指示劑，后者不加指示劑而是利用藥物自身的顏色變化指示終點(diǎn)。三、比色法（一）酸性染料比色法

本法是在適當(dāng)?shù)膒H介質(zhì)中利用酸性染料（如磺酸酞類(lèi)）與堿性藥物定量結(jié)合呈色，采用比色法測(cè)定其含量。酸性染料是指具有酸性基團(tuán)的酸堿指示劑(磺酸酞類(lèi))，如溴酚藍(lán)、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠、溴甲酚紫等。本法具有一定的專(zhuān)屬性和準(zhǔn)確度，樣品需用量少，靈敏度高，適用于樣品量少、小劑量藥物及其制劑或體內(nèi)堿性藥物的測(cè)定。（二）鈀離子比色法1.基本原理

在適當(dāng)pH值溶液中，利用吩噻嗪類(lèi)藥物可與金屬鈀離子形成有色絡(luò)合物，借以進(jìn)行比色測(cè)定。

本法優(yōu)點(diǎn)可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪藥物的測(cè)定。因?yàn)槲幢谎趸亩r(jià)S能與金屬鈀離子形成有色配位化合物，當(dāng)硫原子已被氧化為亞砜或砜時(shí)，則不與Pd2+絡(luò)合呈色。

缺點(diǎn)是：樣品濃度高時(shí)，絡(luò)合物的溶解度較低，可能會(huì)導(dǎo)致絡(luò)合物析出。2.測(cè)定方法四、紫外分光光度法基于藥物據(jù)有紫外特征吸收光譜，在其最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，利用百分吸收系數(shù)計(jì)算；或與對(duì)照品溶液同時(shí)測(cè)定，計(jì)算含量。（一）直接分光光度法1、鹽酸異丙嗪片的測(cè)定

取本品10片，除去糖衣后，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于鹽酸異丙嗪12.5mg），置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（91000）適量，振搖15分鐘使鹽酸異丙嗪（二）萃取后分光光度法（三）萃取－雙波長(zhǎng)分光光度法（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法溶解，濾過(guò)，取續(xù)濾液10ml,置100ml量瓶中，再用鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，在249nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C17H20N2S·HCl的吸收系數(shù)（）為910計(jì)算，即得。2、鹽酸異丙嗪注射液的測(cè)定抗氧劑VitC對(duì)測(cè)定有干擾。測(cè)定波長(zhǎng)改在299nm處。3、奧沙西泮的測(cè)定﹒

E1%1cm五、氣相色譜法

氣相色譜法是一種有效地分離技術(shù)，它具有分離效果好、靈敏度高、選擇性好、用量少和分析速度快等特點(diǎn)，特別適合組分比較復(fù)雜的供試品中微量有機(jī)藥物及其代謝物的分離測(cè)定。由于絕大數(shù)藥物極性大，不易氣化，或?qū)岵环€(wěn)定，因此該法在藥物分析中的應(yīng)用不如HPLC法多（一）硫酸阿托品片劑的含量測(cè)定

USP(24)方法，色譜條件：玻璃填充柱，擔(dān)體為硅烷化硅藻土，固定液為3％OV－17，載氣為氮?dú)?，流?5ml/min，檢測(cè)器為FID。后馬托品為內(nèi)標(biāo)。（二）人血漿中硝苯地平的GC法測(cè)定及藥代動(dòng)力學(xué)研究六、高效液相色譜法

高效液相色譜法，在本類(lèi)藥物的含量測(cè)定中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，其中80％以上是采用反相HPLC法，利用本法可十分有效地分離和測(cè)定本類(lèi)藥物及分解產(chǎn)物。USP(24)收載的藥物有數(shù)十個(gè)品種采用本法測(cè)定。本章藥物僅有地西泮注射液在中是采用本法進(jìn)行測(cè)定。（一）反相HPLC法

反相HPLC法，是指流動(dòng)相的極性大于固定相極性的色譜方法。

在本法中常采用化學(xué)鍵合相作為固定相，即在硅膠表面，如鍵合為十八烷基時(shí)，則形成常用的十八烷基硅烷化鍵合硅膠（ODS）。在硅膠表面引入硅烷基形成的固定相極性很弱，而流動(dòng)相多采用水－甲醇或水－乙腈等大極性系統(tǒng)。在反相HPLC中，極性大的組分在分離時(shí)先流出柱子，極性弱的組分后流出柱子，適合于共存組分極性差異大的樣品的測(cè)定。1.地西泮注射液的反相HPLC法2.高效液相法測(cè)定硫酸阿托品片的含量（二）離子對(duì)高效液相色譜法

離子對(duì)色譜法，是離子對(duì)提取于色譜技術(shù)與相結(jié)合的產(chǎn)物，可用于分析呈離解狀態(tài)的藥物，如有機(jī)堿類(lèi)或有機(jī)酸類(lèi)藥物。離子對(duì)色譜法是將待測(cè)組分的反離子加入到流動(dòng)相中，與呈離解狀態(tài)藥物作用，生成可逆的離子對(duì)化合物。分離測(cè)定雜環(huán)類(lèi)藥物中吡啶類(lèi)、喹啉類(lèi)等藥物時(shí)，主要是采用烷基磺酸鹽或其他鹽類(lèi)作為離子對(duì)試劑（如戊烷磺酸鈉與庚烷磺酸鈉）。影響離子對(duì)形成的條件如溶液的pH、反離子的種類(lèi)、流動(dòng)相等流動(dòng)相一般呈酸性，以利于有機(jī)堿離解。維生素類(lèi)藥物的分析

-H維生素A醇-COCH3維生素A醋酸酯-COC15H31維生素A棕櫚酸酯R:（一）、結(jié)構(gòu)一、維生素A（VitaminA）共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯1、為一個(gè)具有共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯

（1）具有UV吸收

（2）存在多種立體異構(gòu)化合物

（3）易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)（二）、理化性質(zhì)△或有金屬離子存在時(shí)更易氧化2、不穩(wěn)定性3、與三氯化銻發(fā)生呈色反應(yīng)CHCl34、溶解性不溶于水易溶于有機(jī)溶劑和植物油等1、三氯化銻反應(yīng)CHCl3（三）、鑒別試驗(yàn)

維生素A在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶液中呈現(xiàn)不穩(wěn)定的藍(lán)色，再變?yōu)樽霞t色。反應(yīng)條件：①要求無(wú)水，如存在水可能產(chǎn)生氯化氧銻（SbOCl

）。②配制所用的氯仿不能含醇（應(yīng)用無(wú)醇氯仿）和光氣（COCl2）。③三氯化銻有腐蝕性。2、紫外吸收光譜維生素A分子中含有5個(gè)共軛雙鍵，其無(wú)水乙醇液在326nm波長(zhǎng)處有最大吸收。當(dāng)在鹽酸催化下加熱，即發(fā)生脫水反應(yīng)生成去水維生素A（A3）。去水維生素A比維生素A多一個(gè)共軛雙鍵，其最大吸收波長(zhǎng)向紅移，在340～390nm波長(zhǎng)間出現(xiàn)3個(gè)最大吸收峰。3、薄層色譜三、含量測(cè)定1、紫外分光光度法

利用維生素A醇和其醋酸酯分子中具多烯共軛體系結(jié)構(gòu)，在325～328nm處有選擇性吸收峰，故可進(jìn)行含量測(cè)定。（二）三氯化銻比色法維生素A可與三氯化銻的氯仿溶液作用，產(chǎn)生藍(lán)色，在618～620nm波長(zhǎng)處有最大吸收?？捎糜诰S生素A的比色測(cè)定。要求在5～10秒內(nèi)測(cè)定。本法缺點(diǎn)多，已被UV法取代。（三）高效液相色譜法氨基嘧啶環(huán)－CH2－噻唑環(huán)(季銨鹽)HClCl-維生素B1（鹽酸硫胺）二、維生素B1的分析1、溶解性①易溶于水②水溶液呈酸性2、UV共軛雙鍵λmax=246nm（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)嘧啶環(huán)——

伯氨噻唑環(huán)——

季銨1、可與酸成鹽2、與生物堿↓→↓3、含量測(cè)定——

非水堿量法（3）硫色素反應(yīng)（4）堿性（二）鑒別試驗(yàn)1、硫色素反應(yīng)（VitB1的專(zhuān)屬反應(yīng)）VitB1H+H+H+H+2、沉淀反應(yīng)3、氯化物反應(yīng)4、硝酸鉛反應(yīng)：與氫氧化鈉共熱，產(chǎn)生硫化鈉，與硝酸鉛反應(yīng)生成黑色沉淀。1、非水溶液滴定法（藥典用于測(cè)定原料藥）原理：利用噻唑環(huán)上季銨和嘧啶環(huán)上氨基的弱堿性，在非水溶液中用高氯酸液滴定。（三）含量測(cè)定2、UV分光光度法（藥典用于測(cè)定片劑、注射劑）（1）原理：維生素B1分子中具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，具有紫外吸收特征，可在其最大吸收波長(zhǎng)下測(cè)定吸收度，根據(jù)取樣量計(jì)算含量。（2）方法NaOH（三）硫色素?zé)晒夥ㄔ恚?）激發(fā)波長(zhǎng)365nm發(fā)射波長(zhǎng)435nm（2）方法與計(jì)算L－抗壞血酸三、維生素C的分析①易溶于水②水溶液呈酸性(一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1、溶解性C3－OH的pKa=4.17C2－OH的pKa=11.572、酸性一元酸二烯醇結(jié)構(gòu)二酮基結(jié)構(gòu)二烯醇結(jié)構(gòu)3、強(qiáng)還原性L(+)－抗壞血酸活性最強(qiáng)手性C（C4、C5）4、光學(xué)活性**△糖類(lèi)的顯色反應(yīng)50℃結(jié)構(gòu)與糖類(lèi)相似5、具糖的性質(zhì)6、UV特征（二）鑒別試驗(yàn)1、與AgNO3反應(yīng)2、與2，6-二氯靛酚反應(yīng)氧化型玫瑰紅色還原型藍(lán)色3、與堿性酒石酸銅反應(yīng)USP4、與KMnO4反應(yīng)5、糖類(lèi)的反應(yīng)6、紫外分光光度法指示劑淀粉指示液原理（1）1、碘量法（三）含量測(cè)定

取本品約0.2g，精密稱(chēng)定，加新沸過(guò)的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6（2）方法2、2，6-二氯靛酚鈉滴定法USPJP原理自身指示終點(diǎn)法（2）方法

維生素E（消旋-α-生育酚醋酸酯）苯并－二氫吡喃醇四、維生素E的分析名稱(chēng)R1R2相對(duì)活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)苯環(huán)+二氫吡喃環(huán)+飽和烴鏈1、易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水2、UV3、酯鍵易水解△1、硝化反應(yīng)75℃15′橙紅色（二）鑒別2、三氯化鐵－聯(lián)吡啶反應(yīng)△[O]3、紫外光譜法4、薄層色譜法5、其他方法（三）含量測(cè)定GC法GC特點(diǎn)選擇性好靈敏度高速度快分離效能好揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、極性強(qiáng)→衍生化易受樣品蒸氣壓限制甾體激素類(lèi)藥物的分析基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲ABCD12345678910111213141516171819分類(lèi)：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素腎上腺皮質(zhì)激素氫化可的松腎上腺皮質(zhì)激素醋酸地塞米松雄性激素丙酸睪酮蛋白同化激素苯丙酸諾龍?jiān)屑に攸S體酮雌激素炔雌醇一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17

–

α–醇酮基還原性

常見(jiàn)藥物有氫化可的松、醋酸潑尼松、醋酸氟輕松、倍他米松等。2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17–羥基可成酯

常見(jiàn)藥物有丙酸睪酮、甲睪酮、苯丙酸諾龍等。3.孕激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)

常見(jiàn)藥物有黃體酮、炔孕酮、炔諾酮、炔諾孕酮等。4.雌激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17–羥基可成酯

常見(jiàn)藥物有炔雌醇、炔雌醚、雌二醇、苯甲酸雌二醇等。（一）呈色反應(yīng)甾酮激素類(lèi)藥物黃色的腙羰基試劑（1）C3–酮基和C20–酮基這類(lèi)反應(yīng)也可用于定量分析（比色法）。常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼等。二、鑒別試驗(yàn)異煙腙（黃色）睪酮具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類(lèi)藥物呈色

亞硝基鐵氰化鈉間二硝基酚、芳香醛（2）甲酮基黃體酮藍(lán)紫色產(chǎn)物，具有專(zhuān)屬性亞硝基鐵氰化鈉其他甾體淡橙色或不顯色黃體酮藍(lán)紫色有機(jī)氟Fˉ有機(jī)破壞有機(jī)氯Clˉ（3）有機(jī)鹵素茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰硝酸-硝酸銀AgCl↓呈藍(lán)紫色茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色F-雌激素類(lèi)藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸（4）酚羥基腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅（二）沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀1.C17–

α–醇酮基（還原性）含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀2.炔基↓炔雌醇白3.與硝酸-硝酸銀的沉淀反應(yīng)含有氯取代的甾體激素類(lèi)藥物?！鱇OH(三)制備衍生物測(cè)定m.p.△△香（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)特臭特臭△４-3-酮240nm苯環(huán)280nm（五）UV法3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（六）IR法3750～3300cm-1ν醋酸可的松結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯1630cm-1ν3420cm-1亞甲基、角甲基吸收帶1750cm-11232cm-11052cm-1（七）TLC法

主要用于甾體激素類(lèi)藥物制劑的鑒別

方法：對(duì)照品法要求供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色和位置與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。炔諾酮TLC圖（八）HPLC法

主要用于甾體激素類(lèi)藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）

方法：對(duì)照品法要求在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對(duì)照品峰的tR一致。四、含量測(cè)定（一）UV法△４-3-酮：240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)：280nm（±）雌激素（二）反應(yīng)分光光度法1.適用于非分光光度活性藥物2.使待測(cè)組分光譜位移，避免干擾3.增加測(cè)定靈敏度4.增加選擇性弱、非分光光度活性藥物強(qiáng)分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)

腎上腺皮質(zhì)激素類(lèi)C17-α－醇酮基：強(qiáng)還原性O(shè)H-[還原]1.四氮唑比色法（1）原理三苯甲臜↓深紅氯化三苯四氮唑（TTC）紅四氮唑（RT）藍(lán)四氮唑（BT）雙甲臜（暗藍(lán)）2.其他比色法

異煙肼比色法

Kober反應(yīng)比色法ChP、USP、BP、JP均采用RP-HPLC（大多內(nèi)標(biāo)法）特點(diǎn)：用樣量少，靈敏度高，分離效果好，測(cè)定速度快（三）HPLC法藥物制劑分析的特點(diǎn)1、為了防治和診斷疾病的需要；2、為了保證藥物用法和用量的準(zhǔn)確；3、為了增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性；4、為了藥物使用、貯存和運(yùn)輸?shù)姆奖悖?、為了延長(zhǎng)藥物的生物利用度；6、為了降低藥物的毒性和副作用。

藥物制成制劑的目的一、中國(guó)藥典（2010年版）二部（21種）片劑注射劑酊劑栓劑膠囊劑軟膏劑眼用制劑丸劑植入劑糖漿劑氣霧劑膜劑顆粒劑口服溶液劑散劑耳用制劑鼻用制劑洗劑搽劑凝膠劑貼劑

利用物理、化學(xué)或生物測(cè)定方法對(duì)不同劑型的藥物進(jìn)行檢驗(yàn)分析，以確定被測(cè)的制劑是否符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。二、制劑分析的定義和特點(diǎn)（一）定義符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的原料藥賦形劑、稀釋劑附加劑（穩(wěn)定劑、防腐劑、著色劑）不同制劑

（二）制劑分析的特點(diǎn)（與原料藥的區(qū)別）例

VitC

原料制劑（片）[性狀]熔點(diǎn)，比旋度外觀顏色[鑒別]化學(xué)法，IR化學(xué)法[檢查]溶液的澄清度與顏色溶液的顏色熾灼殘?jiān)亓坎町愯F，銅，重金屬崩解時(shí)限[含量測(cè)定]碘量法碘量法1、鑒別試驗(yàn)不完全相同藥物制劑的鑒別可以參考原料藥的鑒別方法，若附加劑不干擾鑒別試驗(yàn)，可采用與原料藥相同的方法鑒別，如果附加劑對(duì)鑒別試驗(yàn)有干擾，則不能使用。如：IR通常只用于原料藥的鑒別，而不能用于制劑的鑒別。

一般原料藥項(xiàng)下的檢查項(xiàng)目不需重復(fù)檢查，只檢查在制備和儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)及制劑相應(yīng)的檢查項(xiàng)目。2、雜質(zhì)檢查不相同（1）檢查的項(xiàng)目不同如：阿司匹林“水楊酸”≤0.1%阿司匹林片“水楊酸”≤0.3%（2）雜質(zhì)限量的要求不同

對(duì)于相同的雜質(zhì)，原料藥的限量要求要比制劑高。如：片劑需要檢查重量差異和崩解時(shí)限等3、制劑需要進(jìn)行“制劑通則”的有關(guān)檢查

制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢查項(xiàng)下，除對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行檢查外，還需檢查是否符合劑型方面的有關(guān)規(guī)定。4、含量測(cè)定的方法不完全相同（1）干擾組分多要求含量測(cè)定方法具有一定的專(zhuān)屬性附加成份：賦形劑、穩(wěn)定劑、稀釋劑、抗氧劑、防腐劑、著色劑、調(diào)味劑鹽酸氯丙嗪（含量測(cè)定）原料：非水滴定法片劑：UV法(λ測(cè)

254nm)

注射劑：UV法(λ測(cè)

306nm)例如：硫酸阿托品（含量測(cè)定）原料：非水滴定法片劑注射劑酸性染料比色法（2）主要成分含量低要求含量測(cè)定方法具有一定的靈敏度（3）含量表示方法及合格范圍不同原料藥制劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）標(biāo)示量的百分含量（％）阿司匹林≥99.095.0～105.0VitB1≥99.0(干燥品)90.0～110.0VitC≥99.093.0～107.0紅霉素≥920單位/g90.0～110.0（4）含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算方法不同原料藥：百分含量＝m測(cè)得量m取樣量×100％制劑（片劑、膠囊、注射劑等）標(biāo)示量的百分含量×100％＝標(biāo)示量每片（顆、ml）測(cè)得含量片劑和注射劑的分析片劑常規(guī)檢查項(xiàng)目一、

片劑是指藥物與適宜的輔料通過(guò)制劑技術(shù)壓制而成的片狀或異形片狀的制劑?！?.3g/片±7.5%＞0.3g/片±5.0%（1）規(guī)定1、重量差異定義每片重量與平均重量之差異糖衣片、薄膜衣片應(yīng)包衣前檢查（3）規(guī)定超出限度片數(shù)≤2片超出限度1倍片數(shù)=0片（2）方法與標(biāo)示片重比較與平均片重比較每片重量??()平均片重素片片?202、崩解時(shí)限用崩解儀測(cè)定定義固體制劑在規(guī)定的介質(zhì)中，以規(guī)定的方法進(jìn)行檢查，崩解溶散并通過(guò)篩網(wǎng)所需時(shí)間的限度。素片≤15′薄膜衣片≤30′糖衣片≤60′腸溶衣片=120′完整(鹽酸液)≤60′崩解(磷酸緩沖液)（1）規(guī)定37℃泡騰片≤5′（15－25℃）（2）方法不合格時(shí)另取6片復(fù)試同時(shí)測(cè)定片?6崩解儀如圖：二、片劑含量均勻度和溶出度檢查（一）含量均勻度檢查1、定義小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑等每片（個(gè)）含量符合標(biāo)示量的程度。除另有規(guī)定外，片劑、膠囊劑或注射用無(wú)菌粉末，每片（個(gè)）標(biāo)示量不大于25mg或主藥含量小于每片（個(gè)）重量25%者；其他制劑，每個(gè)標(biāo)示量小于2mg或主藥含量小于每個(gè)重量2%者；貼劑，均應(yīng)檢查含量均勻度。

凡檢查此項(xiàng)的制劑不再檢查重量差異2、方法與計(jì)算

用規(guī)定的含量測(cè)定方法分別測(cè)定10片（個(gè)）藥物，計(jì)算每片（個(gè)）的含量Xi，然后計(jì)算

A+1.8S=？

S=標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)量型方案，二次抽檢法，以標(biāo)示量為參照值3、判斷標(biāo)準(zhǔn)（1）A+1.80S≤15.0另取20片復(fù)試,按30片計(jì)A+1.45S≤15.0（若改變限度，則改15.0）符合規(guī)定不符合規(guī)定符合規(guī)定（2）A+S＞15.0（3）A+1.80S＞15.0,且A+S≤15.0重量差異試驗(yàn)含量均勻度適用范圍普通片劑(混合均勻)小劑量片劑或較難混合均勻者檢查指標(biāo)片重差異每片含量偏離標(biāo)示量的程度特點(diǎn)簡(jiǎn)便快速準(zhǔn)確（二）溶出度的測(cè)定1、定義溶出度是指藥物從片劑等固體制劑在規(guī)定的溶劑中溶出的速率和程度。是一種模擬口服固體制劑在胃腸道里的崩解和溶出情況的體外試驗(yàn)法。主要用于難以溶解的藥物。凡檢查溶出度的制劑，不再進(jìn)行崩解時(shí)限的檢查。2、方法轉(zhuǎn)籃法：取6片（個(gè)）分別置溶出度儀的6個(gè)吊籃（或燒杯）中，37±0.5℃恒溫下，在規(guī)定的溶液里按規(guī)定的轉(zhuǎn)