標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 21768-2008 化學(xué)品 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)/非程序性DNA合成試驗(yàn)方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)，旨在提供一種評估化學(xué)品是否能夠引起哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)DNA損傷及隨后的修復(fù)過程的方法。該標(biāo)準(zhǔn)具體描述了通過檢測非程序性DNA合成（unscheduled DNA synthesis, UDS）來評價(jià)化學(xué)物質(zhì)潛在遺傳毒性作用的技術(shù)流程。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)采用的是體外培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞作為測試系統(tǒng)。首先需要準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)募?xì)胞株，并確保其處于良好的生長狀態(tài)。接著，在受試物存在的情況下培養(yǎng)這些細(xì)胞一定時(shí)間后，加入放射性標(biāo)記的胸腺嘧啶核苷類似物如3H-thymidine或者BrdU等，讓它們被正在修復(fù)損傷DNA的細(xì)胞所吸收并整合入新合成的DNA鏈中。如果某種化學(xué)品導(dǎo)致了DNA損傷，則受損細(xì)胞會(huì)試圖通過增加UDS來進(jìn)行修復(fù)工作；此時(shí)，通過測量細(xì)胞內(nèi)摻入的放射性標(biāo)記物量即可間接反映出UDS水平的變化情況。

此外，《GB/T 21768-2008》還詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)過程中所需的各種試劑、設(shè)備以及操作步驟，包括但不限于細(xì)胞接種密度、受試物濃度設(shè)置原則、孵育條件控制、樣品處理方式等關(guān)鍵參數(shù)。同時(shí)強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性，要求設(shè)立陰性對照組和陽性對照組以保證結(jié)果的有效性和可靠性。

對于數(shù)據(jù)解讀部分，標(biāo)準(zhǔn)建議使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對不同組別間UDS活性差異進(jìn)行分析比較，從而判斷待測化學(xué)品是否具有誘導(dǎo)DNA損傷的能力及其程度如何。最后，基于所有獲得的信息綜合考量，可以對該化學(xué)品的安全性做出初步評價(jià)。


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  • 廢止
  • 已被廢除、停止使用，并不再更新
  • 2008-05-12 頒布
  • 2008-09-01 實(shí)施
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GB/T 21768-2008化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)/非程序性DNA合成試驗(yàn)方法_第1頁
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文檔簡介

犐犆犛１３．３００；１１．１００

犃８０

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２１７６８—２００８

化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞犇犖犃損傷與

修復(fù)／非程序性犇犖犃合成試驗(yàn)方法

犆犺犲犿犻犮犪犾—犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犇犖犃犱犪犿犪犵犲犪狀犱狉犲狆犪犻狉／狌狀狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃

狊狔狀狋犺犲狊犻狊狑犻狋犺犿犪犿犿犪犾犻犪狀犮犲犾犾狊犻狀狏犻狋狉狅

２００８０５１２發(fā)布２００８０９０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞犇犖犃損傷與

修復(fù)／非程序性犇犖犃合成試驗(yàn)方法

ＧＢ／Ｔ２１７６８—２００８

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京復(fù)興門外三里河北街１６號

郵政編碼：１０００４５

網(wǎng)址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ

電話：６８５２３９４６６８５１７５４８

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社秦皇島印刷廠印刷

各地新華書店經(jīng)銷

開本８８０×１２３０１／１６印張０．５字?jǐn)?shù)８千字

２００８年７月第一版２００８年７月第一次印刷

書號：１５５０６６·１３２１７７

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書

犌犅／犜２１７６８—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)等同采用經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（ＯＥＣＤ）化學(xué)品測試指南Ｎｏ．４８２（１９８６年）《體外哺乳動(dòng)物細(xì)

胞ＤＮＡ損傷與修復(fù)／非程序性ＤＮＡ合成試驗(yàn)》（英文版）。

本標(biāo)準(zhǔn)作了下列編輯性修改：

———增加了范圍部分；

———計(jì)量單位改成我國法定計(jì)量單位；

———?jiǎng)h除ＯＥＣＤ的參考文獻(xiàn)部分。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國危險(xiǎn)化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（ＳＡＣ／ＴＣ２５１）提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所。

本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位：廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局、天津市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉清君、程樹軍、許崇輝、任軍、張園。

Ⅰ

書

犌犅／犜２１７６８—２００８

化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞犇犖犃損傷與

修復(fù)／非程序性犇犖犃合成試驗(yàn)方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞ＤＮＡ損傷與修復(fù)非程序性ＤＮＡ合成試驗(yàn)的范圍、術(shù)語和

定義、試驗(yàn)基本原則、試驗(yàn)方法、試驗(yàn)數(shù)據(jù)和報(bào)告。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測能誘發(fā)哺乳動(dòng)物細(xì)胞ＤＮＡ損傷與修復(fù)的化學(xué)物質(zhì)。

２術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

２．１

程序性犇犖犃合成狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃狊狔狀狋犺犲狊犻狊

正常情況下，ＤＮＡ合成僅在細(xì)胞有絲分裂周期的Ｓ期進(jìn)行，稱為程序性ＤＮＡ合成。

２．２

非程序性犇犖犃合成狌狀狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃狊狔狀狋犺犲狊犻狊（犝犇犛）

化學(xué)物質(zhì)或物理因素引起ＤＮＡ損傷，切除和移除受損片段后進(jìn)行的ＤＮＡ修復(fù)合成。

３試驗(yàn)基本原則

體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞非程序性ＤＮＡ合成試驗(yàn)（ＵＤＳ）描述了使用原代哺乳動(dòng)物細(xì)胞或連續(xù)細(xì)胞系檢

測ＤＮＡ修復(fù)合成的操作方法。非程序性ＤＮＡ合成的終點(diǎn)可以通過放射自顯影技術(shù)測定放射性標(biāo)記

的核苷，如氚標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷（３ＨＴｄＲ）的吸收量來進(jìn)行，也可或通過液體閃爍計(jì)數(shù)（ＬＳＣ）法

進(jìn)行測定。ＵＤＳ也可以采用體

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