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檢驗科分子生物室出科小結(jié)歲月如梭,光陰似箭,不知不覺在檢驗科分子生物室的時間已接近尾聲了?;叵朐跈z驗科實習(xí)的這三個月時間里,在指導(dǎo)老師的帶領(lǐng)下自己真的學(xué)會了不少。通過自己的勤奮在積極協(xié)助老師完成分子生物檢驗項目的同時,我發(fā)現(xiàn)自己的操作能力不說有了很大程度的提高但也有了更大的進步了,相比在學(xué)校的時候操作起來更熟練了。分子診斷學(xué)作為一門新興的學(xué)科,在疾病的診斷、療效監(jiān)測等多方面都逐漸扮演起了重要的角色,但真正能很好的將分子生物學(xué)診斷信息運用好的醫(yī)務(wù)工作者還只是少數(shù),不少醫(yī)生目前仍對傳統(tǒng)的檢驗項目的臨床意義和可信度仍然懷有質(zhì)疑的態(tài)度,更不用說一些剛發(fā)展起來的檢驗項目。因此作為檢驗專業(yè)的實習(xí)生不僅要掌握分子診斷學(xué)常用檢驗項目的原理、方法,更應(yīng)該孰知其臨床意義,更好的與臨床進行溝通,才能更好的運用先進的檢驗診斷技術(shù)為患者服務(wù)。我的實習(xí)內(nèi)容主要有:HBVDNA檢測(定性和定量)、HCVRNA檢測(定量):核酸提取是擴增前最主要的步驟,每個環(huán)節(jié)都要注意防止交義污染。主要步驟:每個EP管加100微升DNA濃縮液,再加100微升待測血清,震蕩混勻,離心12000rpmx10min用加樣槍棄上清,加30微升DNA提取液,震蕩,金屬?。?00〃C)10min,離心12000rpmx5min。提取后,配試劑,加樣,擴增1h45min,擴增儀型號為7300。分析結(jié)果。注意,金屬浴過程中,金屬浴箱要蓋上,每個EP管要蓋嚴(yán),防止加熱過程中發(fā)生爆管,造成實驗室的污染。若發(fā)生爆管,詳細(xì)記錄好發(fā)生爆管的標(biāo)本編號,爆管發(fā)生的原因,時間等情況。HSV-II型病毒DNA檢測(定量)、HPV病毒(6、11型和16、18型)DNA檢測(定量)的標(biāo)本均為分泌物,標(biāo)本加生理鹽水,震蕩,取1ml至EP管,離心12000rpmx5min,棄上清,注意沉淀易漂起,不要講沉淀棄掉,加50微升DNA提取液,農(nóng)蕩,金屬?。?00C)10min。然后配試劑,加樣,擴增1h20min,PCR儀為7600。檢驗結(jié)果需要與患者的病史、臨床信息綜合分析,絕對不可僅僅只憑PCR結(jié)果進行疾病的診斷。核酸雜交主要是指HPV21型檢測,標(biāo)本多為女性的陰道分泌物,首先提取DNA,進行核酸體外擴增,得到擴增產(chǎn)物,然后金屬浴煮沸,淬火,得到大量單鏈的DNA片段,將單鏈DNA片段加入到500微升雜交液中(之前的DNA提取及淬火等操作在標(biāo)本處理間進行,擴增在核酸擴增間進行),并到產(chǎn)物分析間進行核酸的雜交,每臺雜交儀可一次做15個標(biāo)本,應(yīng)注意防止漏液和交叉污染。其他流式細(xì)胞術(shù)等,但由于標(biāo)本量較少,平時多的不多。通過在三個月的實習(xí),我熟悉分子室常規(guī)的檢查項目,掌握標(biāo)本的簽收和處理,掌握PCR的原理,核酸(DNA和RNA)的提取,PCR儀的使用,熟悉核酸雜交的原理和操作方法及雜交儀的使用。了解各檢測項目的臨床意義。分子診斷學(xué)是一門有力的科研武器不僅可以運用于臨床診斷,在今后的工作中我們也可以運用這一門學(xué)科,在學(xué)術(shù)上進行更深入的探索在實習(xí)結(jié)束之際,我要感謝分子生物學(xué)室每一位老師,感謝他們耐心、親切的教導(dǎo),是他們嚴(yán)謹(jǐn)、一絲不茍的工作態(tài)度教育了我,是他們團結(jié)協(xié)作、融洽的工作氣氛感染了我。他們循循善誘給我講解,他們耐心規(guī)范了我的操作,他們給予我很大的信任與鼓勵,。而我能做的是在今后的
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