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文檔簡介

1.發(fā)酵:果酒、果醋制作基礎知識利用微生物在有氧或無氧條件下的生命活動來制備微生物菌體及各種不同代謝產物的過程.發(fā)酵據氧氣需求情況據發(fā)酵生成產物需氧發(fā)酵厭氧發(fā)酵酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵(1)果酒制作的原理是什么?寫出反應方程式。先將淀粉水解成葡萄糖;再利用酵母菌分解葡萄糖生成丙酮酸,丙酮酸在厭氧和微酸性條件下,轉變成酒精。C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+能量酶C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量酶2.果酒的制作原理(3)酒精發(fā)酵的參與者

——酵母菌同化作用類型:異化作用類型:適宜發(fā)酵溫度:分類:生殖(主要方式):異養(yǎng)型兼性厭氧型18-25℃出芽生殖真菌(真核生物)過程:母體芽體新個體來源主要是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌(4)發(fā)酵需要適宜的條件:1)溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20℃

左右最適合酵母菌繁殖,酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18~25℃。2)喜歡葡萄汁等含糖量高的果汁。培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁。3)生活在偏酸環(huán)境中。3.果醋的制作原理(1)果醋制作的原理是什么?寫出反應方程式。當氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿酑2H5OH+O2CH3COOH+H2O酶(2)醋酸發(fā)酵參與者——醋酸菌同化作用類型:異化作用類型:適宜發(fā)酵溫度:生殖方式:分類:異養(yǎng)型需氧型30-35℃原核生物分裂生殖4、制作發(fā)酵裝置設計請分析此裝置中的充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接?結合果酒、果醋的制作原理,你認為應該如何使用這個發(fā)酵裝置?答:充氣口是在發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出CO2的;出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染,其作用類似巴斯德的鵝頸瓶。使用該裝置制酒時,應該關閉充氣口;制醋時,應將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。二、制作果酒和果醋的過程

挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果醋果酒安排在9月或10月進行:正值收獲季節(jié),葡萄價格便宜,品種多樣。此時葡萄上的酵母菌數量多且生活力強,發(fā)酵釀酒的效果好。溫度適宜,發(fā)酵現象非常明顯。1、實驗流程示意圖:專題2微生物的培養(yǎng)與應用三.培養(yǎng)基P2841.基本成分:

各種培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、水和無機鹽,此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。1、提供微生物生長繁殖所需營養(yǎng)和環(huán)境條件2、確保其它微生物無法混入二、實驗室培養(yǎng)微生物條件——培養(yǎng)基——無菌技術氧元素、氫元素H2O無機鹽NaCl碳源、氮源、維生素蛋白胨碳源、氮源、磷酸鹽、維生素牛肉膏提供的主要營養(yǎng)培養(yǎng)基組分培養(yǎng)細菌常用的培養(yǎng)基

——牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基②按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基①按化學組成不同劃分:合成培養(yǎng)基/天然培養(yǎng)基2.培養(yǎng)基的種類擴大培養(yǎng)、工業(yè)生產含瓊脂,用于菌落鑒定、分離和計數觀察微生物運動、保存菌種③按用途不同劃分鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基

可在培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長。

鑒別培養(yǎng)基是根據微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成的,用以鑒別不同種類的微生物。四.實驗室中微生物的篩選篩選菌株:人為提供有利于目的菌株生長的條件,同時抑制或了阻止其他微生物生長。選擇培養(yǎng)基:允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。五.以下選擇培養(yǎng)基可以分離哪些微生物?加入青霉素的培養(yǎng)基

殺死細菌、放線菌,分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基

殺死多種微生物,分離出金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基

分離出自生固氮菌(非固氮菌因缺少氮源被淘汰)不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基

分離出自養(yǎng)型微生物(異養(yǎng)微生物因缺少有機物被淘汰)大腸桿菌酵母菌放線菌霉菌菌落:單個或少數細菌在固體培養(yǎng)基上大量生長繁殖時,所形成的肉眼可見的具有一定形態(tài)結構的子細胞群體。不同微生物形成的菌落具有不同的特征,是鑒定菌種的重要依據。如菌落的大小、形狀、邊緣、光澤度、顏色、透明度等。六.菌落的概念白色或乳白色,光滑大腸桿菌菌落:七.無菌技術1、實驗室常用的消毒和滅菌方法:⑴消毒:

使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。煮沸法:100℃5-6min殺死微生物細胞和部分芽孢巴氏消毒法:70-75℃煮30min,殺死牛奶中微生物化學藥劑消毒法:酒精、氯氣

無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中,所有防止________污染的方法。_________必須無菌、_________也必須要無菌、___________時不能帶入其他雜菌主要包括:雜菌2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別

消毒:使用較溫和理化因素,僅殺死物體表面或內部的一部分對人體有害的微生物的過程。不能殺死芽孢和孢子。滅菌:使用強烈的理化因素消滅物體內外所有微生物,包括芽孢和孢子。各種器具培養(yǎng)基轉移菌種(2)灼燒滅菌——如接種環(huán)等:接種時,用于接種工具或其他金屬用具滅菌。直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒可以迅速徹底滅菌(3)干熱滅菌:用于耐高溫需干燥物品(玻璃器皿、金屬用具)(4)高壓蒸汽滅菌——培養(yǎng)基:用于培養(yǎng)基等物品的滅菌高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)灑精燈灼燒滅菌干熱滅菌培養(yǎng)基、無菌水、各種耐高溫的玻璃金屬器具100kPa、121℃下維持15-30min需要保持干燥耐高溫的玻璃金屬器皿160-170℃下加熱1-2h接種環(huán)等金屬器具3.思考討論1.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。2.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;

每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數的增加,使每次劃線時菌種的數目逐漸減少,以便得到菌落。

劃線結束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。3.思考討論3.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。4.在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條末端細菌的數目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。3.思考討論八.微生物數量測定測定土壤中的細菌數,一般選用104、105、106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)。

實驗時,每一濃度至少涂布3個平板,以增強實驗的說服力和準確性。

當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過統(tǒng)計平板上的菌落數,就能推測出樣品大約含有多少個活菌。課題2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數尿素[CO(NH2)2]——重要的農業(yè)氮肥。只能被土壤中細菌分解為NH3才能被植物吸收利用

CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3細菌脲酶分離產生脲酶的細菌課題背景使溶液的PH升高,使酚紅指示劑變紅

組織培養(yǎng)1958年,美國植物學家斯圖爾德等人,用胡蘿卜韌皮部的組織塊進行離體培養(yǎng),得到了完整的植株,并且能夠開花結果。成熟的胡蘿卜植株胡蘿卜肉質根薄片胡蘿卜試管苗胚狀體發(fā)育離體培養(yǎng)使用生長素和細胞分裂素的比較:

使用順序

實驗結果先使用生長素,后使用細胞分裂素有利于細胞分裂,但細胞不分化先使用細胞分裂素,后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用生長素和細胞分裂素分化頻率提高1、細胞分化2、細胞的全能性3、愈傷組織4、脫分化5、再分化6、外植體需要記住的幾個重要概念離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化芽根植物體植物組織培養(yǎng)過程植物組織培養(yǎng)條件

含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時光照等。一.實驗操作:

菊花的組織培養(yǎng)的實驗操作:1、制備MS培養(yǎng)基(注意無菌操作)2、外植體的選擇與消毒3、接種(注意無菌技術的操作、方向)4、培養(yǎng)(注意消毒和對光照的控制)5、移栽(注意試管苗的適應外部環(huán)境的過程)6、栽培二.脫分化和再分化的比較:比較內容脫分化再分化過程外植體→愈傷組織愈傷組織→幼苗形成體特點排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞有根、芽需要條件a.離體b.適宜的營養(yǎng)c.生長素/細胞分裂素的比例適中d.不需光a.離體b.適宜的營養(yǎng)c.生長素/細胞分裂素的比例高或低誘導生芽或生根d.光照

課堂小結:一、基礎知識1、植物組織培養(yǎng)的基本過程(1)有關的概念(細胞分化、細胞的全能性、脫分化、再分化、愈傷組織、外植體);(2)植物組織培養(yǎng)的基本過程。2、影響植物組織培

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