GB/T 28073-2011南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28073—2011

南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

Detectionandidentificationofarabismosaicvirus

2011-12-30發(fā)布2012-06-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T28073—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國廈門出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國上海出入境檢驗(yàn)檢疫

:、

局中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國福建出入境檢驗(yàn)檢疫局

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人廖富榮于翠張永江陳紅運(yùn)林石明陳青黃蓬英沈建國吳媛

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28073—2011

南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了南芥菜花葉病毒血清學(xué)和分子生物學(xué)的檢測鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物種子鱗球莖苗木和組培苗等植物及其產(chǎn)品中南芥菜花葉病毒的檢測與鑒定

、、。

2南芥菜花葉病毒基本信息

中文名南芥菜花葉病毒

:。

英文名

:arabismosaicvirus。

異名啤酒花蕁麻病病毒大

:arabismosaicnepovirus;hopnettleheadvirus();rhubarbmosaicvirus(

黃花葉病毒懸鉤子黃矮病毒白臘樹

);raspberryyellowdwarfvirus();ashringandlinepatternviurs(

環(huán)線狀病毒大黃花葉病毒連翹黃網(wǎng)狀病毒

);rhabarber-mosaik-virus();forsythiayellownetvirus();

茉莉黃斑病毒

jasmineyellowblotchvirus()。

英文縮寫

:ArMV。

屬豇豆花葉病毒科線蟲傳多面體病毒屬Nepovirus

Comoviridae,。

南芥菜花葉病毒的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

利用基于抗原抗體反應(yīng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測定反轉(zhuǎn)錄和體外擴(kuò)增技

(DAS-ELISA)、DNA

術(shù)的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)進(jìn)行檢測鑒定

(RT-PCR)。

4主要儀器設(shè)備

本標(biāo)準(zhǔn)的檢測鑒定方法主要使用以下儀器設(shè)備

:

微量榨汁機(jī)酶標(biāo)儀洗板機(jī)微量天平感量儀熒光儀電泳儀水平電泳

、、、(:0.001g)、PCR、PCR、、

槽凝膠成像儀高速冷凍臺式離心機(jī)水浴槽計(jì)等和各種量程的可調(diào)移液器

、、、、pH(1000μL、200μL、

100μL、20μL、10μL、2μL)。

5檢測與鑒定

51DAS-ELISA檢測

.

把樣品充分研磨或在液氮中研磨按比例加入樣品提取緩沖液轉(zhuǎn)移到

0.5g~1.0g,1∶10,5mL

離心管中離心上清液作為的檢測提取液

,8000r/min5min,DAS-ELISA。

設(shè)置陰性對照陽性對照和空白對照陰性對照的種類和材料如種子或葉片應(yīng)該盡量與所檢測

、,(:)

樣品類型相一致具體操作過程見附錄