光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用

光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用一、目的要求1.熟悉光學(xué)顯微鏡各部分的結(jié)構(gòu)和用途，掌握顯微鏡維護(hù)的基本知識(shí)。2.初步掌握低倍鏡、高倍鏡和油鏡的使用方法。二、實(shí)驗(yàn)用品和材料

1.字母裝片、動(dòng)物血細(xì)胞裝片。2.顯微鏡、擦鏡紙、載玻片、抹布、香柏油、二甲苯。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）顯微鏡的構(gòu)造

顯微鏡的種類很多，常用的是復(fù)式顯微鏡，由3個(gè)主要部分構(gòu)成：①機(jī)械部分；②光學(xué)部分；③照明部分。1．機(jī)械部分（1）鏡座：顯微鏡的基座，支撐著整個(gè)鏡體，起穩(wěn)固作用。（2）鏡柱：垂直于鏡座上的短柱，用以支持鏡臂。（3）傾斜關(guān)節(jié)：鏡柱與鏡臂間的活動(dòng)關(guān)節(jié)，可使鏡臂傾斜，以利觀察。（4）鏡臂：鏡柱上方呈弓形結(jié)構(gòu)的部分。（5）調(diào)節(jié)器：鏡柱兩側(cè)兩對(duì)齒輪，較大的稱粗調(diào)節(jié)器，較小的稱細(xì)調(diào)節(jié)器，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)能使鏡筒上下移動(dòng)用來調(diào)節(jié)焦距。（6）鏡筒：位于鏡臂前方，上端裝置目鏡，下端連接物鏡轉(zhuǎn)換器。（7）物鏡轉(zhuǎn)換器：又稱旋轉(zhuǎn)盤，位于鏡筒下端的一個(gè)可旋轉(zhuǎn)的凹形圓盤。一般裝有2~4個(gè)放大倍數(shù)不同的物鏡。（8）載物臺(tái)：鏡臂下面的平臺(tái)，用以承放玻片標(biāo)本。其中央有一圓形的通光孔，光線可通過它由下向上反射。（9）標(biāo)本推進(jìn)器：位于鏡臺(tái)的后方或側(cè)面邊緣，連一可動(dòng)弧形彈簧夾。其下方一側(cè)有兩個(gè)旋鈕，轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕可調(diào)節(jié)推進(jìn)器，使玻片標(biāo)本前后或左右移動(dòng)。2．照明部分（1）照明裝置：即光源，位于底座，開關(guān)在底座一側(cè)，旁邊有旋鈕可以調(diào)節(jié)燈光的明暗。（2）聚光器：在載物臺(tái)下方，作用是聚焦光線，增強(qiáng)視野的亮度，聚光器的一側(cè)有一個(gè)螺旋，旋動(dòng)它可升降聚光鏡，上升時(shí)可增強(qiáng)反射光，反之可減弱。（3）光圈：聚光器下方的圓環(huán)結(jié)構(gòu)，為多片半圓形的薄金屬片疊合而成。圓環(huán)外緣有一小柄，撥動(dòng)它能使金屬薄片分開或合攏，用以控制光線的強(qiáng)弱。3．光學(xué)部分（1）目鏡：裝在鏡筒的上端。放大倍數(shù)有5~25倍等數(shù)種，“5×”即標(biāo)志5倍，“10×”即10倍。（2）

物鏡：嵌裝在旋轉(zhuǎn)盤上，一般分低倍鏡、高倍鏡和油鏡三種。其上刻有4×或10×為低倍鏡；40×或45×為高倍鏡；90×或100×油鏡。各物鏡的長短不同，一般是越短的放大率越低，越長的放大率越高。顯微鏡放大倍數(shù)=目鏡放大率×物鏡放大率。例如：所使用的目鏡是10×，物鏡是40×，則放大倍數(shù)為400倍。（二）顯微鏡的使用方法右手握住鏡臂，左手托鏡座，從鏡箱內(nèi)取出顯微鏡，放在身前稍左側(cè)的實(shí)驗(yàn)桌上，鏡臂對(duì)著胸前，使鏡筒向前方，鏡座與桌邊距離約6.6cm，坐于適當(dāng)高度的凳上操作。1.低倍鏡的使用（1）先向上轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使載物臺(tái)下降，再轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)盤，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，即能聽到“咔”的固定響聲，同時(shí)手也感到有阻力，說明物鏡與鏡筒已成一直線。（2）對(duì)光：打開光圈，旋轉(zhuǎn)聚光器升降螺旋，使聚光器升到與鏡臺(tái)平齊。用左眼在目鏡上觀察（兩眼齊睜），同時(shí)調(diào)節(jié)光源亮度，使視野內(nèi)的光線適中。（3）玻片標(biāo)本：將標(biāo)本片有蓋玻片的一面向上，置于載物臺(tái)上，用彈簧夾固定住，然后移動(dòng)玻片，使標(biāo)本對(duì)準(zhǔn)通光孔。（4）調(diào)焦：從側(cè)面觀察低倍鏡，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使載物臺(tái)上升，當(dāng)?shù)捅剁R距標(biāo)本約0.5cm時(shí)，從目鏡上觀察，慢慢向上轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，直至視野出現(xiàn)清晰物象為止。如物象不在視野中央，可稍移動(dòng)玻片標(biāo)本的位置，注意玻片移動(dòng)方向與物象移動(dòng)方向恰好相反。2.高倍鏡的使用：使用高倍鏡必須按照上述步驟，先在低倍鏡下找到物象后，再把放大的部分移到視野的中央，調(diào)節(jié)到最清晰的程度后，進(jìn)行以下操作：（1）轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡與鏡筒成一直線，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)速度要慢，特別當(dāng)心高倍鏡是否觸碰到玻片，如觸碰到玻片證明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新調(diào)節(jié)。（2）調(diào)焦：從目鏡觀察，這時(shí)物象往往不甚清楚，可用細(xì)調(diào)節(jié)器慢慢向上或向下轉(zhuǎn)動(dòng)（切勿用粗調(diào)節(jié)器），轉(zhuǎn)動(dòng)范圍不宜過大，一般只需向上或向下轉(zhuǎn)動(dòng)一圈，就能清晰地看到物象。

需要更換玻片標(biāo)本時(shí)，應(yīng)先轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升之后，才能取下玻片標(biāo)本。

3.油鏡的使用（1）使用油鏡時(shí)必須先在低倍鏡下看到一清晰物象后再換高倍鏡觀察，并使觀察的物象位于高倍鏡的視野中央。（2）轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)盤，使高倍鏡移向一側(cè)，在所要觀察的蓋玻片上，滴上一滴香柏油，從側(cè)面觀察，轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換盤將油鏡鏡筒移至鏡筒下方，與鏡筒成一直線，使油鏡鏡頭與香柏油接觸，用眼觀察目鏡，慢慢上下轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器，直至視野中央出現(xiàn)清晰的物象為止。油鏡用完后須用擦鏡紙沾少許二甲苯將玻片標(biāo)本及油鏡上的香柏油擦干凈。

4．低倍鏡和高倍鏡使用練習(xí)（1）依照上述低倍鏡使用方法，觀察文字或字母裝片，反復(fù)練習(xí)對(duì)光、調(diào)光、標(biāo)本放置、調(diào)焦和玻片移動(dòng)等。注意將玻片前后左右移動(dòng)時(shí)，物象與玻片移動(dòng)方向是否一致，玻片上的字母是正象還是反象？為什么？（2）觀察頭發(fā)交叉裝片，先用低倍鏡觀察，找到兩根毛發(fā)后，將毛發(fā)交叉點(diǎn)移到視野中央，然后換高倍鏡觀察，轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器觀察，判斷哪條毛發(fā)在上方，哪條在下方。5．油鏡的使用練習(xí)（1）取一張血涂片，先用低倍鏡再用高倍鏡觀察。（2）用油鏡觀察，并分辨紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。比較三種物鏡的放大倍數(shù)和分辨力。（3）觀察完畢，務(wù)必將油鏡按上述方法擦凈。繪圖生物實(shí)驗(yàn)圖不同于一般美術(shù)圖，也不同于機(jī)械制圖。生物繪圖要求將標(biāo)本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確地描述下來，然后詳加說明，要求形象自然，比例適當(dāng)，線條清晰。

生物繪圖一般用點(diǎn)、線表示，輪廓用線條描繪，明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細(xì)點(diǎn)的疏密表示之，圖紙應(yīng)選擇能夠用橡皮拭擦的上好白紙，繪圖時(shí)先用中軟鉛筆繪出輪廓，然后用較硬的鉛筆繪出全圖，圖中各部分應(yīng)注字說明，圖與字之間用水平細(xì)線連接，圖的標(biāo)題填在圖的下方，同時(shí)標(biāo)明放大倍數(shù)。

（三）使用顯微鏡的注意事項(xiàng)

1．拿顯微鏡應(yīng)右手緊握鏡臂，左手托住鏡座，不能用一手隨便斜提，以防止目鏡從鏡筒滑出和反光鏡脫落。2．顯微鏡用完后，必須將目鏡、物鏡等用清潔的擦鏡紙或綢布輕輕揩擦，切勿口吹、手摸或用粗布揩擦，勿用乙醇及其他藥物，以免侵蝕鏡臺(tái)或鏡頭。3．使用顯微鏡應(yīng)先用低倍鏡調(diào)節(jié)光源，如觀察組織細(xì)胞或染色較淺的標(biāo)本時(shí)，要適當(dāng)關(guān)小光圈，使物象清晰。4．放置玻片標(biāo)本時(shí)，應(yīng)將有蓋玻片的一面向上，用標(biāo)本夾輕輕固定住玻片，再把要觀察的部分對(duì)準(zhǔn)通光孔的正中央。如果玻片標(biāo)本放反了，不僅不易找到物象，并且容易壓碎玻片，損傷物鏡。（三）使用顯微鏡的注意事項(xiàng)5．用雙筒微鏡觀察時(shí)，調(diào)整兩目鏡的距離以適合本人的瞳孔距離；用單筒微鏡觀察時(shí)要兩眼齊睜，用左眼從目鏡中尋找物象，仔細(xì)觀察，用右眼看紙繪圖。6.使用低倍鏡用粗調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)物距，使用高倍鏡必須用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)物距。粗、細(xì)調(diào)節(jié)器都不能做單方向的旋轉(zhuǎn)，防止壓碎玻片。7．不要隨意取出物鏡，以防灰塵落入。禁止任意拆卸任何零件，以防意外損失。8．顯微鏡用完后，應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使載物臺(tái)徐徐下降，取下玻片，并轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)盤，使物鏡離開聚光鏡，調(diào)暗光線，關(guān)閉電源。再裝入箱內(nèi)。四、作業(yè)與思考

1．作業(yè)（1）畫圖注明光學(xué)