WS/T 360-2011流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群指南

ICS11020

C50.

中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

WS/T360—2011

流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群指南

Guidelinesforperipherallymphocytesubsetsbyflowcytometry

2011-12-14發(fā)布2012-06-01實(shí)施

中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

WS/T360—2011

目次

前言…………………………

Ⅰ

范圍………………………

11

術(shù)語和定義………………

21

試劑………………………

32

標(biāo)本采集和處理…………………………

43

細(xì)胞絕對計數(shù)方法………………………

55

免疫熒光染色……………

66

對照標(biāo)本…………………

77

流式細(xì)胞儀的質(zhì)量控制…………………

88

標(biāo)本和數(shù)據(jù)分析…………………………

910

臨床意義………………

1013

結(jié)果報告和審核………………………

1114

數(shù)據(jù)儲存………………

1214

室內(nèi)質(zhì)量控制…………………………

1315

室間質(zhì)量評價…………………………

1415

人員培訓(xùn)要求…………………………

1515

附錄資料性附錄四色抗體組合方案進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群分析的示意散點(diǎn)圖……

A()16

參考文獻(xiàn)……………………

17

WS/T360—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人崔巍黃春梅王斐楊卓陳倩

:、、、、。

Ⅰ

WS/T360—2011

流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群指南

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞細(xì)胞細(xì)胞+細(xì)胞和

(T、B、NK、CD4T

+細(xì)胞的技術(shù)要點(diǎn)包括標(biāo)本采集和運(yùn)輸免疫熒光染色技術(shù)流式細(xì)胞儀檢測和分析結(jié)果報

CD8T),、、、

告和審核等方面

。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

21

.

分化抗原clusterofdifferentiationCD

,

不同譜系細(xì)胞在分化成熟活化過程中出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)志細(xì)胞表面標(biāo)志通常用單克

、、,。

隆抗體來識別每個抗體都有指定的編號能被特定抗體識別的特定抗原通常具有相同的編號例

。CD,,

如被抗體識別的抗原稱為抗原

,“CD1”“CD1”。

22

.

前向散射光forwardanglelightscatterFALSFSCFS

、、

光學(xué)檢測器在入射光的正前方所收集的低角度光信號與細(xì)胞或顆粒的大小和體積有關(guān)

,。

23

.

側(cè)向散射光sidescatterSSC

,

光學(xué)檢測器在入射光的直角處所收集的細(xì)胞散射的光信號與細(xì)胞或顆粒的內(nèi)部和表面結(jié)構(gòu)復(fù)雜

,

程度有關(guān)如細(xì)胞質(zhì)顆粒性膜不規(guī)則性及核形等

,、。

24

.

熒光強(qiáng)度fluorescenceintensity

結(jié)合到細(xì)胞或顆粒上的熒光素的量熒光信號的通道數(shù)越大提示熒光強(qiáng)度越強(qiáng)在恰當(dāng)?shù)臈l件

。。

下熒光強(qiáng)度與一個細(xì)胞和特定熒光素相結(jié)合的位點(diǎn)數(shù)相關(guān)

,。

25

.

自發(fā)熒光autofluorescence

未染色細(xì)胞自身發(fā)出的熒光通常由嘧啶和黃素核苷酸所產(chǎn)生自發(fā)熒光的強(qiáng)度取決于激發(fā)光的

。,

波長且隨所分析細(xì)胞的類型和或細(xì)胞活化狀態(tài)而改變通過特殊的標(biāo)本處理方法可以降低自發(fā)熒

,()。

光的強(qiáng)度如用結(jié)晶紫孵育

()。

26

.

顏色補(bǔ)償colorcompensation

由于一種熒光素發(fā)射的熒光疊加到其他熒光素發(fā)射的波長范圍內(nèi)而造成熒光信號重疊