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生物信息學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告姓名:__(dá)黃棟____(dá)___學(xué)號(hào):__(dá)___(dá)__指導(dǎo)老師:___(dá)宋曉峰____南京航空航天大學(xué)2023年11月實(shí)驗(yàn)一生物信息數(shù)據(jù)庫的檢索實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?.了解生物信息學(xué)的各大門戶網(wǎng)站以及其中的重要資源。2.了解重要數(shù)據(jù)庫的內(nèi)容及結(jié)構(gòu),理解各數(shù)據(jù)庫注釋的含義。3.以PubMed為例,學(xué)會(huì)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫的基本查詢檢索方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:(1)國際與國內(nèi)的生物信息中心國際NCBI、EBI、ExPASy,EMBL、SIB、TIGR以及國內(nèi)CBI、BioSino網(wǎng)站的熟悉及內(nèi)容的了解。核酸序列數(shù)據(jù)庫:genbank/EMBL-bank/DDBJNCBI網(wǎng)址:HYPERLINK""EBI網(wǎng)址:HYPERLINK""EMBL網(wǎng)址:HYPERLINK""蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫:SwissProt、ExPASy網(wǎng)址:HYPERLINK""Uniprot網(wǎng)址:HYPERLINK""蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫:PDB網(wǎng)址:HYPERLINK""(2)檢索練習(xí):ThespikeproteinofSARS-CoronaVirus在NCBI中的核酸記錄序列:?LOCUSCS2444393897bpDNAlinearPAT17-JUL-2023DEFINITIONSequence3fromPatentWO.ACCESSIONCS244439VERSIONCS244439.1GI:84659113KEYWORDS.SOURCESARScoronavirusORGANISMHYPERLINK""SARScoronavirusViruses;ssRNApositive-strandviruses,noDNAstage;Nidovirales;Coronaviridae;Coronavirinae;Betacoronavirus.REFERENCE1AUTHORSAltmeyer,R.,Nal-Rogier,B.,Chan,C.,Kien,F(xiàn).,Kam,Y.W.,Siu,Y.L.,Tse,K.S.,Staropoli,I.andManuguerra,J.C.TITLENucleicacids,polypeptides,methodsofexpression,andimmunogeniccompositionsassociatedwithsarscoronavirusspikeproteinJOURNALPatent:WO-A2315-DEC-2023;INSTITUTPASTEUR(FR);HongKongPasteurResearchCentreLimited(CN)FEATURESLocation/Qualifierssource1..3897/organism="SARScoronavirus"/mol_type="unassignedDNA"/db_xref="taxon:HYPERLINK""227859"HYPERLINK""CDS44..3847/note="unnamedproteinproduct"/codon_start=1/protein_id="HYPERLINK""CAJ56183.1"/db_xref="GI:84659114"/translation="MFIFLLFLTLTSGSDLDRCTTFDDVQAPNYTQHTSSMRGVYYPDEIFRSDTLYLTQDLFLPFYSNVTGFHTINHTFGNPVIPFKDGIYFAATEKSNVVRGWVFGSTMNNKSQSVIIINNSTNVVIRACNFELCDNPFFAVSKPMGTQTHTMIFDNAFNCTFEYISDAFSLDVSEKSGNFKHLREFVFKNKDGFLYVYKGYQPIDVVRDLPSGFNTLKPIFKLPLGINITNFRAILTAFSPAQDIWGTSAAAYFVGYLKPTTFMLKYDENGTITDAVDCSQNPLAELKCSVKSFEIDKGIYQ(mào)TSNFRVVPSGDVVRFPNITNLCPFGEVFNATKFPSVYAWERKKISNCVADYSVLYNSTFFSTFKCYGVSATKLNDLCFSNVYADSFVVKGDDVRQIAPGQTGVIADYNYKLPDDFMGCVLAWNTRNIDATSTGNYNYKYRYLRHGKLRPFERDISNVPFSPDGKPCTPPALNCYWPLNDYGFYTTTGIGYQPYRVVVLSFELLNAPATVCGPKLSTDLIKNQCVNFNFNGLTGTGVLTPSSKRFQPFQQFGRDVSDFTDSVRDPKTSEILDISPCSFGGVSVITPGTNASSEVAVLYQ(mào)DVNCTDVSTAIHADQLTPAWRIYSTGNNVFQTQAGCLIGAEHVDTSYECDIPIGAGICASYHTVSLLRSTSQKSIVAYTMSLGADSSIAYSNNTIAIPTNFSISITTEVMPVSMAKTSVDCNMYICGDSTECANLLLQYGSFCTQLNRALSGIAAEQDRNTREVFAQVKQMYKTPTLKYFGGFNFSQILPDPLKPTKRSFIEDLLFNKVTLADAGFMKQYGECLGDINARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDDMIAAYTAALVSGTATAGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKQIANQFNKAISQIQESLTTTSTALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQAAPHGVVFLHVTYVPSQERNFTTAPAICHEGKAYFPREGVFVFNGTSWFITQRNFFSPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIINNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYVWLGFIAGLIAIVMVTILLCCMTSCCSCLKGACSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYTGPGGDYKDDDDK"ORIGIN1ctatagggcgaattgggtaccgctagcggatccgcgcgccaccatgtttattttcctgct61gtttctgactctgaccagcggcagtgacctggaccggtgcaccacttttgatgatgtgca121ggctcctaattacactcagcatacttcctctatgaggggcgtgtactatcctgatgaaat(yī)181ttttagat(yī)ccgacactctgtatctgactcaggatctgtttctgccat(yī)tctattctaatgt241gacaggctttcat(yī)actattaat(yī)catacctttggcaaccctgtgatcccttttaaggatgg301cat(yī)ctattttgctgccacagagaagtccaatgtggtgcggggatgggtgttcggctctac361catgaacaacaagtcccagtccgtgattattattaacaattctactaatgtggtgatccg421agcctgtaactttgaactgtgtgacaacccattctttgctgtgtctaagcccat(yī)gggcac481acagacacatactatgatcttcgataatgcctttaat(yī)tgcactttcgagtacatctctga541tgccttttccctggat(yī)gtgtccgaaaagtccggcaactttaagcacctgcgagagtttgt601gtttaagaataaggatggctttctgtat(yī)gtgtataagggctatcagcctatcgacgtggt661gcgcgatctgccttctggctttaacactctgaagcctatttttaagctgcctctgggcat721taacattacaaat(yī)tttcgggccattctgacagcctttagccctgctcaggacatttgggg781cacctctgctgccgcctattttgtgggctatctgaagccaactacctttatgctgaagta841tgatgaaaatggcacaatcacagatgctgtggattgttctcagaat(yī)ccactggctgaact901gaagtgctctgtgaagagctttgagat(yī)tgacaagggaat(yī)ctaccagacctctaatttccg961cgtggtgccctctggagatgtggtgagattccctaatat(yī)tacaaacctgtgtccttttgg1021agaagtgtttaatgctactaagttcccttctgtgtat(yī)gcctgggagagaaagaagatttc1081taattgtgtggctgattactctgtgctgtacaactccacattttttagcacctttaagtg1141ctatggcgtgtctgccactaagctgaatgatctgtgcttctccaat(yī)gtgtatgccgattc1201ttttgtggtgaagggagatgatgtgagacagatcgccccaggacagactggcgtgat(yī)tgc1261tgat(yī)tacaattataagctgccagat(yī)gatttcatgggctgtgtgctggcttggaatactag1321gaacattgatgctacttccactggcaat(yī)tataattacaagtat(yī)cggtatctgagacatgg1381caagctgaggccctttgagagagacatctctaacgtgcctttcagccctgatggcaagcc1441ttgcaccccacctgctctgaattgttattggccactgaatgat(yī)tatggcttttacaccac1501tactggcattggctaccagccttacagagtggtggtgctgtcttttgaactgctgaatgc1561ccctgccacagtgtgtggaccaaagctgtccactgacctgattaagaaccagtgtgtgaa1621ctttaactttaatggactgactggcactggcgtgctgactccttctagcaagagatttca1681gccatttcagcagtttggccgggatgtgtctgatttcactgattccgtgcgagatcctaa1741gacatctgaaatcctggacatttccccttgctcttttggcggcgtgagcgtgattacacc1801tggaacaaatgcttcctctgaagtggctgtgctgtat(yī)caggatgtgaactgcactgatgt1861gtctacagccatccatgccgat(yī)cagctgacaccagcttggcgcatctat(yī)tctactggaaa1921caatgtgttccagactcaggccggctgtctgatcggagctgagcat(yī)gtggacacttctta1981tgagtgcgacattcctat(yī)tggagctggcatttgtgctagttaccatacagtgtctctgct2041gcggagtactagccagaagtctattgtggcttatactatgtctctgggcgctgatagttc2101cattgcttactctaataacaccattgctat(yī)ccctactaacttttccattagcattactac2161agaagtgatgcctgtgtctatggctaagacctccgtggattgtaatatgtacatctgcgg2221agattctaccgaatgtgctaatctgctgctgcagtatggcagcttttgcacacagctgaa2281tcgggctctgtctggcattgctgctgaacaggatcgcaacacacgggaagtgttcgctca2341agtgaagcagatgtataagaccccaactctgaagtattttggcggctttaat(yī)ttttccca2401gat(yī)cctgcctgaccctctgaagcccactaagcggtcttttattgaggacctgctgtttaa2461caaagtgacactggctgatgctggctttatgaagcagtatggcgaatgcctgggcgatat2521taatgctagagatctgatttgtgcccagaagttcaatggcctgacagtgctgcctcctct2581gctgactgatgat(yī)atgattgctgcctacactgctgctctggtgtctggcactgccactgc2641tggatggacat(yī)ttggcgctggcgctgctctgcagatcccttttgctatgcagat(yī)ggccta2701tcggttcaatggcattggagtgacccagaat(yī)gtgctgtatgagaaccagaagcagat(yī)tgc2761caaccagtttaacaaggccattagtcagattcaggaatccctgacaacaacatccactgc2821cctgggcaagctgcaggacgtggtgaaccagaatgctcaggccctgaacacactggtgaa2881gcagctgagcagcaat(yī)tttggcgccatttccagtgtgctgaatgatatcctgtcccgact2941ggataaagtggaggccgaagtgcagattgacaggctgattacaggcagactgcagagcct3001gcagacctatgtgacacagcagctgatcagggctgctgaaatcagggcttctgccaatct3061ggctgctactaagatgtctgagtgtgtgctgggacagtccaagagagtggacttttgtgg3121aaagggctaccacctgatgtccttcccacaggctgcccctcatggagtggtgttcctgca3181tgtgacctatgtgccatcccaggagaggaacttcaccacagccccagccatttgtcatga3241aggcaaggcctacttccctcgggaaggcgtgttcgtgtttaatggcacttcttggtttat3301tacacagcggaacttctttagcccacagatcatcactacagacaatacatttgtgtccgg3361aaattgtgatgtggtgattggcatcat(yī)taacaacacagtgtatgatcctctgcagcctga3421gctggactccttcaaggaagagctggacaagtacttcaagaatcatacatccccagatgt3481ggatctgggcgacatttccggcattaacgcttctgtggtgaacat(yī)tcagaaggaaattga3541ccgcctgaatgaagtggctaagaatctgaatgaatccctgattgacctgcaggaactggg3601caagtat(yī)gagcagtatattaagtggccttggtatgtgtggctgggcttcattgctggact3661gattgccatcgtgatggtgacaatcctgctgtgttgcatgacctcctgttgcagttgcct3721gaagggcgcttgctcttgtggatcttgctgcaagtttgatgaggatgactctgagccagt3781gctgaagggcgtgaagctgcattacacagggcccggcggcgactacaaggacgatgacga3841caagtgatagatcgat(yī)gcatggatccgtttaaaccgagctccagctttgttcccttaThespikeproteinofSARS-CoronaVirus在SWISS-PROT蛋白質(zhì)序列:ThespikeproteinofSARS-CoronaVirus在PDB蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)序列:(3)文獻(xiàn)信息的查找與管理有效地使用NCBIPubMed提供的各種重要功能,查詢并下載相關(guān)課題或研究方向的論文文摘與文獻(xiàn)全文。查詢InfluenzaAViruses分子進(jìn)化研究方向的文章。(3)NCBI數(shù)據(jù)庫簡(jiǎn)介:Nucleotide該數(shù)據(jù)庫由國際核苷酸序列數(shù)據(jù)庫成員HYPERLINK""\t"_blank"美國國立衛(wèi)生研究院GenBank、日本DNA數(shù)據(jù)庫(DDBJ)和HYPERLINK""\t"_blank"英國HinxtonHall的歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫(EMBL)三部分?jǐn)?shù)據(jù)組成。這三個(gè)組織聯(lián)合組成國際核苷酸序列數(shù)據(jù)庫協(xié)作體,天天互換各自數(shù)據(jù)庫中的新增序列記錄實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)共享。其中的序列數(shù)據(jù)也通過與HYPERLINK""\t"_blank"基因組序列數(shù)據(jù)庫(GSDB)合作獲取;專利序列數(shù)據(jù)通過與美國專利與商標(biāo)局、國際專利局合作獲取。Genome即HYPERLINK""\t"_blank"基因組數(shù)據(jù)庫,提供了多種基因組、完全染色體、Contiged序列圖譜以及一體化基因物理圖譜。Structure即結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫或稱分子模型數(shù)據(jù)庫(MMDB),包含來自X線晶體學(xué)和三維結(jié)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。MMDB的數(shù)據(jù)從PDB(ProteinDataBank)獲得。NCBI已經(jīng)將結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)交叉鏈接到書目信息、序列數(shù)據(jù)庫和NCBI的Taxonomy中運(yùn)用NCBI的3D結(jié)構(gòu)瀏覽器和Cn3D,可以很容易地從Entrez獲得分子的分子結(jié)構(gòu)間互相作用的圖像。Taxonomy即生物學(xué)門類數(shù)據(jù)庫,可以按生物學(xué)門類進(jìn)行檢索或?yàn)g覽其核苷酸序列、蛋白質(zhì)序列、結(jié)構(gòu)等。PopSet包含研究一個(gè)人群、一個(gè)種系發(fā)生或描述人群變化的一組組聯(lián)合序列。PopSet既包含核酸序列數(shù)據(jù)又包含蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)。Entrez功能強(qiáng)大,在于它的大多數(shù)記錄可互相鏈接,既可在同一數(shù)據(jù)庫內(nèi)鏈接,也可在數(shù)據(jù)庫之間進(jìn)行鏈接。當(dāng)運(yùn)用BLAST軟件比較某氨基酸或DNA序列與庫中其他氨基酸或DNA序列差異即進(jìn)行相似性檢索時(shí),則會(huì)涉及到蛋白質(zhì)庫或核苷酸庫的庫內(nèi)鏈接。庫間鏈接發(fā)生在核苷酸數(shù)據(jù)庫內(nèi)的記錄與PubMed庫中已發(fā)表序列的引文間的鏈接,或蛋白質(zhì)序列記錄與核苷酸序列庫中編碼它的核苷酸序列間的鏈接。NCBI數(shù)據(jù)庫檢索NCBI數(shù)據(jù)庫的檢索方法很簡(jiǎn)樸,在檢索框中輸入檢索詞,檢索詞間默認(rèn)邏輯關(guān)系為AND,檢索規(guī)則基本同PubMed??梢酝ㄟ^下拉菜單選擇記錄的顯示格式,通常選擇GenBankReport格式或FASTAReport格式。當(dāng)選擇GenBankReport格式后,屏幕顯示較完整的基因記錄,其內(nèi)容涉及:基因位點(diǎn)(Locus)、基因定義(Definition)、基因存取號(hào)(Accession)、核酸編號(hào)(NID)、關(guān)鍵詞(Keywords)、來源(Source)、組織分類(Organism)、參考文獻(xiàn)(Reference)、著者(Author)、題目(Title)、期刊Journal)、Medline存取號(hào)(Medline)、序列特性(Feat(yī)ures)、基因(Gene)、CDS(cDNA)、等位基因(Allele)對(duì)等的肽(Mat(yī)-Peptide)、計(jì)算堿基數(shù)(BaseCount)、原序列(Origin)。而FASTAReport格式僅涉及檢出序列的簡(jiǎn)要特性描述。OMIMHYPERLINK""\t"_blank"孟德爾遺傳學(xué)(OMIM)數(shù)據(jù)庫是人類基因和基因疾病的目錄數(shù)據(jù)庫。該數(shù)據(jù)庫涉及原文信息、圖片和參考信息,同時(shí)還可以鏈接到Entrez系統(tǒng)MEDLINE數(shù)據(jù)庫中相關(guān)文獻(xiàn)和序列信息。主頁如圖3所示。BLAST相似性檢索BLAST(BasicLocalAlignmentSearchTool)是用于序列相似性檢索的一個(gè)重要數(shù)據(jù)庫,是區(qū)分基因和基因特性的工具。該軟件能在15秒內(nèi)完畢整個(gè)DNA數(shù)據(jù)庫的序列檢索。BLAST記錄的相關(guān)度有明確的記錄學(xué)解釋,以便更容易地將相關(guān)記錄與的數(shù)據(jù)庫記錄相區(qū)分。在NCBI主頁的左工具條中,點(diǎn)擊BLAST圖標(biāo),即進(jìn)入BLAST主頁。BLAST主頁提供了幾種BLAST檢索軟件。其中BLAST2.0是一種新的BLAST檢索工具,它在原有基礎(chǔ)上作了改善,運(yùn)營速度更快,靈敏度更高,同時(shí)具有GappedBLAST和PSI-BLAST兩種軟件的新功能。GappedBLAST允許在對(duì)準(zhǔn)的序列中引入空位(堿基缺失或插入),引入空位(Gaps)意味著在比較兩個(gè)相關(guān)序列時(shí)不會(huì)出現(xiàn)中斷(Break)現(xiàn)象。這些空位對(duì)準(zhǔn)的記分系統(tǒng)更能反映相關(guān)序列的類似限度。PSI-BLAST的全稱是Position-SpecificIteratedBALST,即特殊位置反復(fù)BLAST,它提供了自動(dòng)、易用的概貌(Profile)檢索,是查找序列同源的有效工具。實(shí)驗(yàn)規(guī)定:(1)以其中的一個(gè)信息中心網(wǎng)站為例,列舉其中的重要資源(數(shù)據(jù)庫、網(wǎng)上分析、生物計(jì)算、數(shù)據(jù)下載等)。(2)可以解釋給定序列或基因組數(shù)據(jù)的含義。(3)檢索文獻(xiàn)的技巧和效率。實(shí)驗(yàn)二序列多重比對(duì)及進(jìn)化分析實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)序列比對(duì)工具BLAST以及ClustalW等的使用,可以對(duì)序列數(shù)據(jù)進(jìn)行初步的分析。掌握基于DNA序列和蛋白質(zhì)序列構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹的常用方法和常用工具。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:在GeneBank數(shù)據(jù)庫中,檢索10條輪狀病毒(Homosapiens,Rotavirus)VP7基因的DNA序列,并使用CLUSTALW軟件對(duì)序列進(jìn)行多重序列比對(duì);檢索結(jié)果詳見電子稿附件:VP7.txt文獻(xiàn)多重序列比對(duì)結(jié)果詳見電子稿附件:VP7.aln文獻(xiàn)在GeneBank數(shù)據(jù)庫中檢索10條SARS病毒Spike蛋白的氨基酸序列,使用CLUSTALX軟件對(duì)這十條序列進(jìn)行多重序列比對(duì);檢索結(jié)果詳見電子稿附件:SpikeSARS.txt文獻(xiàn)多重序列比對(duì)結(jié)果詳見電子稿附件:SpikeSARS.aln文獻(xiàn)使用ClustalW軟件或其他軟件包構(gòu)建上述DNA分子系統(tǒng)發(fā)生樹。實(shí)驗(yàn)規(guī)定:提交使用CLUSTALX及PHYLIP軟件進(jìn)行多重序列比對(duì)及構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹的結(jié)果;VP7outtree:SpikeofSARSouttree:總結(jié)多重序列比對(duì)及構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹的關(guān)鍵事項(xiàng)。選擇合適的比對(duì)算法,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹時(shí)適當(dāng)選擇獨(dú)立關(guān)系的分支序列。實(shí)驗(yàn)三蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析及結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、掌握蛋白質(zhì)序列檢索的操作方法;2、熟悉蛋白質(zhì)基本性質(zhì)分析;3、了解蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)。5.學(xué)會(huì)運(yùn)用結(jié)構(gòu)瀏覽軟件對(duì)生物大分子的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀測(cè)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:使用Entrez或SRS信息查詢系統(tǒng)檢索水通道(Aquaporin-1,AQP1)蛋白質(zhì)序列。>gi|57163949|ref|NP_.1|aquaporin-1[Ovisaries]MASEFKKKLFWRAVVAEFLAMILFIFISIGSALGFHYPIKSNQTTGAVQDNVKVSLAFGLSIATLAQSVGHISGAHLN(yùn)PAVTLGLLLSCQISILRAIMYIIAQCVGAIVATVILSGITSSLPDNSLGLNALAPGVNSGQGLGIEIIGTLQLVLCVLATTDRRRRRDLGDSGPLAIGFSVALGHLLAIDYTGCGINPARSFGSSVITHNFQDHWIFWVGPFIGAALAVLIYDFILAPRSSDLTDRVKVWTSGQVEEYDLDADDINSRVEMKPK給出實(shí)例了解生物大分子結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫PDB中的記錄方式,看懂記錄中的內(nèi)容并會(huì)運(yùn)用Rasmol軟件觀測(cè)蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)。PDB文獻(xiàn)1IH5.pdb的記錄方式分析見附錄。下圖為在Rasmal軟件中觀測(cè)的結(jié)果:球棒模型三維圖含標(biāo)注的分組絲帶模型使用BioEdit軟件對(duì)上述蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分子質(zhì)量、氨基酸組成、和疏水性等基本性質(zhì)分析。分子質(zhì)量與氨基酸組成:疏水性分析:使用PSIPREDwebserver(HYPERLINK"")對(duì)水通道蛋白質(zhì)序列進(jìn)行二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)。同時(shí)上uniprot數(shù)據(jù)庫查看水通道蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu),并做對(duì)比。在線分析:Uniprot與PDB數(shù)據(jù)庫:預(yù)測(cè)結(jié)果與數(shù)據(jù)庫結(jié)果基本一致。實(shí)驗(yàn)規(guī)定:提交使用上述軟件對(duì)人水通道蛋白質(zhì)序列進(jìn)行基本性質(zhì)分析、結(jié)構(gòu)分析以及二級(jí)結(jié)構(gòu)和三維結(jié)構(gòu)的分析結(jié)果;見上圖。實(shí)驗(yàn)四核酸序列分析一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆找阎蛭粗蛄薪邮芴?hào)的核酸序列檢索的基本環(huán)節(jié);掌握使用BioEdit軟件進(jìn)行核酸序列的基本分析;熟悉共有序列l(wèi)ogo圖的使用;熟悉RNAfold軟件的使用;三.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、使用Entrez或SRS信息查詢系統(tǒng)檢索人瘦素(leptin)的mRNA、基因組DNA、外顯子等核酸序列,連接提取該序列內(nèi)容,閱讀序列格式的解釋,理解其含義;2、使用BioEdit軟件對(duì)上述核酸序列進(jìn)行分子質(zhì)量、堿基組成、堿基分布、序列變換等基本分析,并從BioEdit軟件的“help”欄了解該軟件的其它功能;3.使用weblogo方法(HYPERLINK"")對(duì)多序列比對(duì)結(jié)果構(gòu)建共有序列進(jìn)行可視化表達(dá)。4.使用RNAfold(HYPERLINK""),對(duì)microRNA前體的二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)。四.實(shí)驗(yàn)方法1、調(diào)用Internet瀏覽器,并在其地址欄輸入Entrez網(wǎng)址:HYPERLINK""\t"_parent";2、在輸入欄輸入homosapiensleptin;將檢索的核酸序列輸入BioEdit軟件進(jìn)行序列基本分析;3、對(duì)如下的多序列進(jìn)行共有序列的分析:>19082_AF115399ttctctgaaatatgaatttagACTGGTACTTATCATGGAG>45328_AB000381gcctgctttctcccctctcagGGACTTACAGTTTGAGATG>45328_AB000381cattgctgcttctttttttagGCATAAATTCTCGTGAACT>45330_AB001517aacttcctgtgtgttttgcagACAGCTGGATAGAAAACGA>45331_AB001517acaattttgttttcttcacagTTTTCAAATTTGCTGGGTA>45331_AB001517tgtggtttttgtctttat(yī)cagCAACAAATCTGACACGCTG>45331_AB001517gtgacctct
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