安徽省蒙城縣一中2023年高三下學期聯(lián)考生物試題含解析

2023年高考生物模擬試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．金藻是一種常見的赤潮藻，呈磚紅色，下圖表示在富營養(yǎng)化的近海海域，金藻種群的數(shù)量變化模型，下列敘述正確的是（）A．若金藻種群在c點時數(shù)量為N，則該種群的環(huán)境容納量為2NB．金藻數(shù)量增長過程中，在c點時進行治理效果最佳C．當金藻種群數(shù)量到達e點時，其自然增長率最大D．金藻種群增長過程中出現(xiàn)環(huán)境阻力是在d點之后2．圖甲是青蛙離體的神經(jīng)－肌肉標本示意圖，圖中AB＋BC＝CD，乙是突觸放大模式圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是()A．刺激C處，A、D處可同時檢測到膜電位變化B．刺激D處，肌肉和F內(nèi)的線粒體活動均明顯增強C．興奮從E到F，發(fā)生“電信號→化學信號→電信號”的轉(zhuǎn)變D．③的內(nèi)容物釋放到②中主要借助生物膜的流動性3．下圖表示某基因表達的過程，下列敘述正確的是A．合成②時需要DNA聚合酶與基因中的啟動部位結(jié)合B．細胞核內(nèi)產(chǎn)生的②需要在細胞溶膠內(nèi)進行加工C．③的移動方向是從右向左D．④是以DNA上的某基因區(qū)段為模板轉(zhuǎn)錄而來4．澳大利亞一項新研究發(fā)現(xiàn)，女性在懷孕期間除多吃富含蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的食物外，還應(yīng)多吃富含植物纖維素的食物，這有利于胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．蛋白質(zhì)、核酸和纖維素都以碳鏈作為基本骨架B．組成人體蛋白質(zhì)的某些氨基酸必須從食物中獲得C．人體內(nèi)的細胞能分泌分解纖維素的酶將其水解為單糖D．膽固醇既參與人體血脂的運輸，也參與細胞膜的構(gòu)成5．下圖為某些物質(zhì)的跨膜運輸過程示意圖。下列分析正確的是（）A．一種物質(zhì)進出細胞的方式可以不同B．分析可知，Na+進出細胞的方式均為主動運輸C．加入線粒體抑制劑，對a分子的跨膜運輸沒有影響D．a(chǎn)分子運出細胞的速率僅取決于膜兩側(cè)的濃度差6．下圖表示蝴蝶蘭在正常條件下和長期干旱條件下CO2吸收速率的日變化，據(jù)圖分析，下列敘述正確的是A．長期干旱條件下，蝴蝶蘭可通過夜間吸收CO2以適應(yīng)環(huán)境B．長期干旱條件下，葉肉細胞在10～16時不能進行光反應(yīng)C．正常條件下，12時CO2吸收速率最快，植株干重最大D．長期干旱條件下，葉肉細胞在0~4時不能產(chǎn)生ATP和[H]二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）氣孔是氣體進出葉片及蒸騰作用喪失水分的“門戶”，強光下植物蒸騰作用強，氣孔充分開放。氣孔的開放與關(guān)閉分別與保衛(wèi)細胞的吸水與失水有關(guān)。科研人員通過基因工程技術(shù)在擬南芥氣孔的保衛(wèi)細胞中表達了一種K+通道蛋白（BLINK1），如圖所示。該通道能調(diào)控氣孔快速開啟與關(guān)閉，而野生株氣孔關(guān)閉較慢。請回答下列問題：（1）除離子通道蛋白外，細胞膜上還有水通道蛋白。水通道與人體體液平衡密切相關(guān)，如腎小球的濾過作用和腎小管的重吸收作用，都與水通道蛋白的_________有直接關(guān)系。（2）據(jù)圖分析，含BLINK1的植株在光照下氣孔快速開啟，最可能的原因是__________________。（3）若將長勢基本一致的含BLINK1的擬南芥植株與野生株擬南芥植株置于較強光照強度的連續(xù)光照條件下，測定每升水產(chǎn)植物莖干重（克），預(yù)期結(jié)果是含BLINK1的擬南芥植株每升水產(chǎn)植物莖干重（克）_________（填“大于”“小于”或“基本等于”）野生株擬南芥植株的每升水產(chǎn)植物莖干重（克）。（4）若將長勢基本一致的含BLINK1的擬南芥植株與野生株擬南芥植株置于較強光照強度的間隔光照（強光和弱光交替光照）條件下，測定每升水產(chǎn)植物莖干重（克），預(yù)期結(jié)果是含BLINK1的擬南芥植株每升水產(chǎn)植物莖干重（克）_________（填“大于”“小于”或“基本等于”）野生株擬南芥植株的每升水產(chǎn)植物莖干重（克），預(yù)期此結(jié)果的理由是_________________________。8．（10分）濕地有“地球之腎”之稱，杭州西溪濕地是我國第一個集城市濕地、農(nóng)耕濕地、文化濕地于一體的國家級濕地公園，有“天堂綠肺”的美譽，已列入“國際重要濕地”名錄，其動、植物種類豐富。請分析回答：（1）西溪濕地能美化環(huán)境，還具有______、__________等生態(tài)功能（列舉兩方面即可），這些功能體現(xiàn)了生物多樣性的_____________價值。（2）濕地生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能之所以能較長時間保持相對穩(wěn)定，是因為該生態(tài)系統(tǒng)具有較強的自我調(diào)節(jié)能力，這種能力的基礎(chǔ)是_______________；濕地中處于某食物鏈同一環(huán)節(jié)上的所有生物的總和屬于一個______________。（3）濕地公園的植物除垂柳、柿樹等物種外，湖濱處有荻、蒲和蘆葦?shù)辱杷参铮瑴\水處有荇菜、蓮和芡實等浮水植物，深水處有苦菜、眼子菜和黑藻等沉水植物；湖中水產(chǎn)主要有鯉魚、草魚、鰱魚、鳙魚、鯽魚等。植物的垂直分層主要是由____________決定的，動物的垂直分層主要是由植物創(chuàng)造的多種多樣的__________決定的。9．（10分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，其目的是_________________________。10．（10分）研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油具有抑菌、抑制腫瘤等作用，是一種具有廣闊開發(fā)前景的芳香油資源。青蒿素是目前公認的最有效治療瘧疾的藥物，易溶于有機溶劑，60℃以上易分解。回答下列問題：(1)柚皮精油可采用水蒸氣蒸餾法提取，它是利用________將________較強的柚皮精油攜帶出來，形成油水混合物。在油水混合物中，加入________可使油水出現(xiàn)明顯分層；分離得到的油層應(yīng)加入________進行除水。(2)水蒸氣蒸餾易使柚皮精油有效成分部分水解，為避免此缺點，可采用________法提取柚皮精油。為提高出油率，需先對柚皮進行的處理是________________________，以分解果膠。(3)青蒿素宜采用萃取法提取，現(xiàn)有四氯化碳(沸點76.5℃)和乙醚(沸點34.5℃)兩種溶劑，應(yīng)選用__________________作為萃取劑，不選用另外一種的理由是________________________________________________________________________。11．（15分）健那綠染液是將活細胞中線粒體染色的專一性染料，線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍綠色，而在周圍的細胞質(zhì)中染料被還原，成為無色狀態(tài)，線粒體能在健那綠染液中維持活性數(shù)小時。請回答下列問題：（1）某同學設(shè)計的探究酵母菌細胞呼吸的實驗裝置如下，圖一需改進的地方是_________；圖二需改進的地方是_________。酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的酒精可以使酸性重鉻酸鉀從_________色變?yōu)開________色。（2）健那綠染色發(fā)現(xiàn)，圖一A內(nèi)酵母鏡檢線粒體呈藍綠色，圖二B內(nèi)鏡檢無法看到，推測該染色劑的使用除要求活體外，還需_________條件。（3）觀察線粒體的形態(tài)和分布的實驗一般不選擇高等植物葉肉細胞的原因是_________。（4）將動物細胞破裂后用_________可以分離得到線粒體。線粒體內(nèi)膜上的脂類與蛋白質(zhì)的比值為3∶1，外膜中的比值接近1∶1，這種差異的主要原因有_________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】

在資源無限、空間無限和不受其他生物制約的理想條件下，種群就會呈指數(shù)增長，指數(shù)增長（“J”形增長）的特點是起始增長很慢，但隨著種群基數(shù)的加大，增長會越來越快。每單位時間都按種群的一定百分數(shù)或倍數(shù)增長，其增長勢頭強大。邏輯斯蒂增長是指在資源有限、空間有限和受到其他生物制約條件下的種群增長方式，其增長曲線很像字母S，又稱“S”形增長曲線。種群的邏輯斯蒂增長總是受到環(huán)境容納量（K）的限制，環(huán)境容納量是指在長時間內(nèi)環(huán)境所能維持的種群最大數(shù)量。種群的自然增長率=出生率-死亡率?！驹斀狻緼、c點時種群數(shù)量為N（K/2），則該種群的環(huán)境容納量為2N，A正確；B、c點是金藻增長最快的點，在c點時進行治理效果不好，B錯誤；C、當金藻種群數(shù)量到達e點時，種群較穩(wěn)定，出生率和死亡率接近，其自然增長率為0（最?。?，C錯誤；D、金藻種群在增長過程中環(huán)境阻力一直存在，因此呈現(xiàn)“S”形增長，D錯誤。故選A。2、D【解析】

據(jù)圖分析，圖甲是青蛙離體的神經(jīng)-肌肉標本示意圖；乙是突觸放大模式圖，其中①為突觸前膜；②為突觸間隙；③為突觸小泡，內(nèi)含神經(jīng)遞質(zhì)?！驹斀狻繄D中AB+BC=CD，但興奮在突觸處的傳遞速度較慢，因此刺激C處，先在A處檢測到膜電位，后在D處檢測到膜電位變化，A錯誤；由于興奮在突觸處只能單向傳遞，刺激D處，興奮不能達到肌肉，所以肌肉和F內(nèi)的線粒體活動沒有明顯變化，B錯誤；興奮只能從F傳遞到E，不能從E傳遞到F，C錯誤；③的內(nèi)容物釋放到②中的方式為胞吐，需要借助生物膜的流動性，D正確。【點睛】解答本題的關(guān)鍵是識記突觸的結(jié)構(gòu)，能準確判斷圖中各結(jié)構(gòu)的名稱；識記神經(jīng)沖動的產(chǎn)生過程，掌握神經(jīng)沖動在神經(jīng)元之間的傳遞過程，能結(jié)合圖中信息準確判斷各選項。3、D【解析】

合成②為轉(zhuǎn)錄過程，需要RNA聚合酶結(jié)合啟動部位，A錯誤；細胞核內(nèi)產(chǎn)生的②mRNA，需要在細胞核內(nèi)加工，B錯誤；根據(jù)連接在核糖體上的肽鏈的長度可知，③過程核糖體沿著mRNA由左向右移動，C錯誤；④是tRNA，由DNA轉(zhuǎn)錄形成的，D正確。故選：D。4、C【解析】

所有生物體內(nèi)的生物大分子都是以碳鏈為骨架的，每一個單體都是以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架，由許多單體連接成多聚體。在人體內(nèi)不能合成，只能從食物中獲得的氨基酸稱為必需氨基酸，能在體內(nèi)合成的氨基酸稱為非必需氨基酸?！驹斀狻緼、蛋白質(zhì)、核酸、多糖（纖維素、糖原等）都是以碳鏈作為基本骨架，A正確；B、組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸分為必需氨基酸和非必需氨基酸，必需氨基酸需從食物中獲得，B正確；C、人體細胞不能分泌分解纖維素的酶，C錯誤；D、人體中的膽固醇既參與血液中脂質(zhì)的運輸，也是細胞膜的重要組成成分，D正確。故選C。5、A【解析】

物質(zhì)的跨膜運輸方式可以分為自由擴散、協(xié)助擴散和主動運輸，其中協(xié)助擴散是一種順濃度梯度的運輸方式，特點為需要載體蛋白的協(xié)助但不消耗能量，而主動運輸是一種逆濃度梯度的運輸方式，特點為需要載體蛋白并消耗能量。【詳解】A、根據(jù)圖中a分子的濃度關(guān)系，可以推測a分子通過載體②進入細胞屬于主動運輸，通過載體③運出細胞屬于順濃度梯度的協(xié)助擴散，A正確；B、細胞外Na+的濃度較細胞內(nèi)高，因此Na+進入細胞屬于協(xié)助擴散，運出細胞為主動運輸，B錯誤；C、a分子進入細胞為主動運輸，加入線粒體抑制劑會影響能量的供應(yīng)從而影響a分子的運輸，C錯誤；D、a分子運出細胞的速率還受載體蛋白的限制，D錯誤；故選A。6、A【解析】

首先題干中“在長期干旱條件下，觀賞植物蝴蝶蘭可在夜間吸收CO2并貯存在細胞中”這句話提出在長期干旱條件下，蝴蝶蘭除了可以進行呼吸作用外還可在夜間吸收CO2并貯存在細胞中，但是由于光照增強，溫度升高，蝴蝶蘭在4?10之間時吸收CO2的速率逐漸降低，而白天10?16時CO2的吸收速率降為0，這是由于光照過強蝴蝶蘭的氣孔是關(guān)閉的，但是到16點之后，光照強度減弱，氣孔有逐漸張開．而在正常情況下，在6點之前，20點之后，植物只進行呼吸作用；6點之后開始出現(xiàn)光合作用，并逐漸增強，在與橫軸的交點處，光合作用等于呼吸作用強度?！驹斀狻緼、圖中可以看出，在長期干旱條件下，蝴蝶蘭除了可以進行呼吸作用外還可在夜間吸收CO2并貯存在細胞中，而白天時氣孔關(guān)閉，A正確；

B、10?16時CO2的吸收速率降為0，此時的光合作用速率等于呼吸作用的速率，B錯誤；

C、正常條件下，12時CO2吸收速率最快，表明光合作用最強，但是植株干重在20點之前與橫軸的交點處最大，C錯誤；

D、葉肉細胞在0?4時不進行光合作用，但是要進行呼吸作用，有氧呼吸過程的一、二兩個階段會產(chǎn)生[H]，三個階段均能產(chǎn)生ATP，D錯誤。

故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、結(jié)構(gòu)與功能K＋進入保衛(wèi)細胞，提高了細胞內(nèi)的滲透壓，保衛(wèi)細胞吸水，導致氣孔快速開啟基本等于大于因為間隔光照下，光照時含BLINK1植株氣孔能快速打開，加快二氧化碳攝入，弱光時，氣孔能快速關(guān)閉，減少水分蒸發(fā)量，所以每升水產(chǎn)植物莖干重（克）大。而野生植株在弱光時，氣孔關(guān)閉慢，水分蒸發(fā)量較高，每升水產(chǎn)植物莖干重（克）小【解析】

滲透吸水：細胞通過滲透作用吸收水分的活動叫做滲透吸水。滲透作用，即水分子(或其他溶劑分子)透過半透膜，從低濃度溶液向高濃度溶液的擴散。水通道蛋白，是一種位于細胞膜上的蛋白質(zhì)，在細胞膜上組成"孔道"，可控制水在細胞的進出，就像是"細胞的水泵"一樣。水通道是由約翰霍普金斯大學醫(yī)學院的美國科學家彼得·阿格雷所發(fā)現(xiàn)，他與通過X射線晶體學技術(shù)確認鉀離子通道結(jié)構(gòu)的洛克斐勒大學霍華休斯醫(yī)學研究中心的羅德里克·麥金農(nóng)共同榮獲了2003年諾貝爾化學獎。【詳解】（1）水通道蛋白具有運輸水分的功能，這與其特有的結(jié)構(gòu)是相適應(yīng)的，故水分的吸收與水通道蛋白的結(jié)構(gòu)與功能有關(guān)。（2）保衛(wèi)細胞吸水，氣孔開啟。在光照下，含BLINK1植株的保衛(wèi)細胞吸收K＋，使細胞內(nèi)滲透壓升高，保衛(wèi)細胞吸水，從而氣孔能夠快速開啟。（3）在較強光照強度的連續(xù)光照條件下，含BLINK1擬南芥植株與野生株擬南芥植株的氣孔均開放，所以兩種植株每升水產(chǎn)植物莖干重（克）基本相等。（4）間隔光照下，光照時含BLINK1植株氣孔能快速打開，加快二氧化碳攝入，弱光時，氣孔能快速關(guān)閉，減少水分蒸發(fā)量；野生株擬南芥植株在光照下氣孔能快速打開，但不能快速關(guān)閉，水分蒸發(fā)量大，所以含BLINK1的擬南芥植株每升水產(chǎn)植物莖干重大于野生株擬南芥植株的每升水產(chǎn)植物莖干重?！军c睛】能夠從題干信息中獲得有用信息，并能結(jié)合問題認真分析是正確解題的關(guān)鍵！熟知氣孔開放和關(guān)閉的機理是解答本題的另一關(guān)鍵！8、涵養(yǎng)水源、凈化水質(zhì)、調(diào)蓄洪水、調(diào)節(jié)氣候直接和間接負反饋調(diào)節(jié)種群（或答“營養(yǎng)級”）光照強度（和光質(zhì)）棲息空間和食物條件【解析】

1、群落的垂直結(jié)構(gòu)是指在垂直方向上大多數(shù)群落都具有明顯的分層現(xiàn)象。植物的垂直結(jié)構(gòu)提高了群落利用陽光等環(huán)境資源能力；植物的垂直結(jié)構(gòu)又為動物創(chuàng)造了多種多樣的棲息空間和食物條件，所以動物也有分層現(xiàn)象。2、生物多樣性的價值：①直接價值：對人類有食用、藥用和工業(yè)原料等使用意義,以及有旅游觀賞、科學研究和文學藝術(shù)創(chuàng)作等非實用意義的。②間接價值：對生態(tài)系統(tǒng)起重要調(diào)節(jié)作用的價值(生態(tài)功能)。③潛在價值：目前人類不清楚的價值?！驹斀狻浚?）西溪濕地生態(tài)系統(tǒng)能美化環(huán)境，體現(xiàn)了生物多樣性的直接價值，此外還具有涵養(yǎng)水源、凈化水質(zhì)、調(diào)蓄洪水、調(diào)節(jié)氣候等生態(tài)功能，這些功能體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值。（2）生態(tài)系統(tǒng)具有較強的自我調(diào)節(jié)能力的基礎(chǔ)是負反饋調(diào)節(jié)；濕地中處于某食物鏈同一環(huán)節(jié)上的所有生物的總和屬于一個營養(yǎng)級。（3）植物的垂直分層主要是由光照強度決定的，動物的垂直分層主要是由植物創(chuàng)造的多種多樣的棲息空間和食物條件決定的?！军c睛】本題考查生物多樣性的價值、群落的結(jié)構(gòu)、生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的相關(guān)知識，意在考查學生的識圖能力和判斷能力，難度不大。9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達載體?；虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設(shè)置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-