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關(guān)于實驗二微量吸管第1頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三一、微量吸管的使用【目的】掌握微量吸管的使用方法。【原理】利用微量吸管的虹吸作用吸取血液?!酒鞑摹课⒘课堋⑷槟z吸頭、一次性棉簽、試管、試管架、采血針?!驹噭肯礈煲海荷睇}水。【標本】采集末梢血第2頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三【操作】1.準備吸管及試管:2.加稀釋液取試管1支,加生理鹽水2ml。3.持管吸血4.拭凈余血用干脫脂棉沿吸管口方向拭凈余血,并檢查血量是否達到規(guī)定刻度。5.釋放血液將吸管插入含生理鹽水的試管底部,慢慢排出吸管內(nèi)的血液,再用上清液沖洗管內(nèi)余血3次。第3頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三二、改良牛鮑計數(shù)板的使用【目的】掌握改良牛鮑計數(shù)板計數(shù)池的基本結(jié)構(gòu)及使用方法。【原理】一定倍數(shù)稀釋的血液或體液,混勻后滴入具有固定體積和精密劃分刻度的改良牛鮑計數(shù)板中,在顯微鏡下對所選擇區(qū)域中的細胞進行計數(shù),再乘以稀釋倍數(shù),即可換算成單位體積內(nèi)的細胞數(shù)。第4頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三【器材】1.改良牛鮑計數(shù)板及蓋玻片
2.其它試管、試管架、吸管、微量吸管、乳膠吸頭、綢布、顯微鏡。
【標本】同上【操作】1.準備計數(shù)板先用流水沖洗計數(shù)板和蓋玻片除去所有殘留物,然后用乙醇洗滌,最后用綢布拭凈,采用推壓法從計數(shù)板下緣向前平推蓋玻片,將其蓋在計數(shù)池上。第5頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三2.先用低倍鏡(10倍物鏡)觀察,通過調(diào)節(jié)顯微鏡光柵減少光線進入量以便觀察整個計數(shù)板的結(jié)構(gòu)(大、中、小方格)及特征。再用高倍鏡(40倍物鏡)觀察紅細胞計數(shù)區(qū)域。3.充池充分混勻溶液,用微量吸管將稀釋血液滴入計數(shù)板和蓋玻片交界處,利用虹吸作用讓液體順其間隙充滿計數(shù)池;同樣方法再給另一側(cè)計數(shù)板充池。4.靜置計數(shù)板充池后應(yīng)平置于桌面上靜置3min,待細胞下沉后計數(shù)。5.計數(shù)原則需遵循一定的方向逐格進行,以免重復(fù)或遺漏。對壓線的細胞采用數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下的原則。記錄所數(shù)5個中方格的紅細胞數(shù)和4個大方格的白細胞數(shù)。第6頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三血細胞計數(shù)板的構(gòu)造24×20×0.6mm第7頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三計數(shù)池劃線1mm1mm第8頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三計數(shù)池劃線美國國家標準局(NBS)1941年規(guī)定:計數(shù)池大方格每邊長度的誤差應(yīng)在±1%內(nèi)(10±0.01mm);血蓋片與計數(shù)池間縫隙深度應(yīng)在±2%以內(nèi)(0.1±0.002mm)。第9頁,共11頁,2023年,2月20日,星期三第10頁,
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