第五章-色譜柱綜述

第五章

色譜柱色譜柱確認(rèn)填充柱與毛細(xì)管柱的區(qū)分計(jì)算柱效和分別度介紹快速色譜介紹保留時(shí)間鎖定功能理解柱的選擇性確認(rèn)柱操作的步驟學(xué)習(xí)爐溫的恒溫操作和程序升溫操作樣品流動(dòng)相固定相分別的過(guò)程示意圖安排填充填充柱載氣液體相固體支撐物特別多的孔具有極大的表面積氣液色譜(GLC)壁涂開(kāi)管柱(WCOT)液體相毛細(xì)管柱(占應(yīng)用的90%)“相似相溶"或同極性相互作用通過(guò)樣品在固定相中的分配或不同溶解度實(shí)現(xiàn)分離組分基于不同的極性而分離(偶極力的作用)通常例如： 醇類(lèi)是極性化合物 聚乙二醇(Carbowax)是極性固定相氣液色譜(GLC)ABCD氣流色譜過(guò)程示意圖柱效: 色譜柱形成尖銳峰的能力分離度: 色譜柱將兩個(gè)峰彼此分開(kāi)的能力選擇性: 色譜柱確認(rèn)兩個(gè)峰化學(xué)與/或物理性質(zhì)差別的能力優(yōu)差優(yōu)差柱分別指標(biāo)分析物時(shí)間進(jìn)樣不保留組分tmtR'tR我們希望知道組分保留在固定相中的真實(shí)時(shí)間。將n與柱長(zhǎng)相比：或每米塔板數(shù)(N)=nL每塊理論塔板高度(HETP)=nL因此，柱效越高，“N”值越大，“HETP”值越小n=5.545tR'Wh2tR-tm=tR'tR'tR'計(jì)算柱效Rt'=調(diào)整保留時(shí)間n=有效理論塔板數(shù)Wh=半峰寬柱長(zhǎng)(cm)不保留組分的保留時(shí)間(sec)線(xiàn)速度=估算不保留組分的保留時(shí)間如果溶劑是流出的第一個(gè)組分，就使用它的保留時(shí)間。也可從打火機(jī)中取5cc丁烷氣，使用丁烷峰的保留時(shí)間。GC/MS用空氣的保留時(shí)間使用如下公式來(lái)估算柱長(zhǎng)：Length=

dk其中d=柱卷成的圈的直徑k=柱圈圈數(shù)

=3.14使用下面的公式，可利用線(xiàn)速度計(jì)算流量

流量(ml/min)=r2

m60其中r=柱半徑cmm=平均線(xiàn)速度cm/sec60=從sec到min的轉(zhuǎn)換因子測(cè)量線(xiàn)速度和流量HETPC傳質(zhì)阻力項(xiàng)A渦流項(xiàng)分子擴(kuò)散項(xiàng)m(optm)}}B{HETP=A++CmBm柱效受載氣線(xiàn)速度和流量影響。曲線(xiàn)的最低點(diǎn)代表最小板高HETP(或最大每米理論塔板數(shù))也就是最好的柱效。毛細(xì)管柱中不存在“A”項(xiàng)。柱效與載氣線(xiàn)速度HETP與線(xiàn)速度形成的曲線(xiàn)叫做范德姆特曲線(xiàn)。曲線(xiàn)最低點(diǎn)的線(xiàn)速度值即為可獲得最好柱效的最佳線(xiàn)速度值。1. 運(yùn)用內(nèi)徑更小的柱子。2. 減小固定相百分組成或固定相液膜厚度。3.減小進(jìn)樣量。4.選用更長(zhǎng)的柱子。5.運(yùn)用程序升溫改善后流出組分峰形。@ 好的進(jìn)樣技術(shù)可以保障高柱效。進(jìn)樣應(yīng)當(dāng)緊湊快速， 以免峰展寬。如何提高柱效時(shí)間(Min.)4564.55.51.0E52.0E53.0E54.0E55.0E56.0E5響應(yīng)值RT=4.41RT=4.59RT=5.10分別度是柱將兩個(gè)相鄰峰分開(kāi)實(shí)力的反映。通過(guò)兩個(gè)欲分別相鄰峰的分開(kāi)程度來(lái)測(cè)算分別度。一般我們選擇兩個(gè)最難分開(kāi)的峰，假如它們被成功分開(kāi)，那么其它的也就解決了。1.18(RT-RT)21(W+W)12R=R=1.5認(rèn)為可以實(shí)現(xiàn)基線(xiàn)分別W1=化合物1的半峰寬W2=化合物2的半峰寬分別度1.欲分別樣品2.柱內(nèi)徑3.固定相4.柱長(zhǎng)5.膜厚或填充劑%量A. 柱容量B. 保留實(shí)力C. 惰性D. 柱效E. 流失柱選擇方面的考慮先試手邊的柱子向同事詢(xún)問(wèn)查詢(xún)已發(fā)表的相像應(yīng)用假如難以確定，先用一個(gè)非極性柱，如HP1或HP5這只是一些好的開(kāi)端，而操作者必需自行優(yōu)化條件。柱選擇色譜柱類(lèi)型載氣條件色譜爐條件進(jìn)樣參數(shù)檢測(cè)器參數(shù)樣品信息

應(yīng)用舉例說(shuō)明：恒溫程序升溫在整個(gè)分析過(guò)程中，色譜爐溫保持恒定。用初始時(shí)間設(shè)定運(yùn)行結(jié)束時(shí)間。升溫速率設(shè)為“0”。后流出的峰展寬。

當(dāng)組分有較寬的沸點(diǎn)范圍(>100°C)時(shí)運(yùn)用。削減分析時(shí)間并使峰變窄。增加柱流失，引起基線(xiàn)漂移?？稍O(shè)多階程序升溫。HP6890可設(shè)“快速變更速率”至120°C/min。柱溫操作