江蘇省啟東市2023屆高考生物專項(xiàng)復(fù)習(xí)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)-制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、純化大腸桿菌（2）練習(xí)蘇教版

PAGEPAGE5實(shí)驗(yàn)——制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、純化大腸桿菌1．以下不屬于微生物常用的別離、純化方法的是〔〕A．單細(xì)胞挑取法B．平板劃線法或稀釋涂布平板法C．接斜面法D．選擇培養(yǎng)基別離法2．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)答復(fù)與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。(1)培養(yǎng)基中含有蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的根本成分是________和________。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是________。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃(4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有________種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越________。3．下表是用于從土壤中別離純化土壤細(xì)菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方。請(qǐng)答復(fù)：試劑用量牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g水1000mL(1)培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是________和________。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行__________處理。(2)別離純化微生物最常使用的接種方法是____________和______________兩種。在接種過程中，接種針或涂布器的滅菌方法是______________。(3)假設(shè)某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過多地連成一片，可能的原因是什么？________________________________________________________________________。4．關(guān)于微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)技術(shù)，以下表述正確的選項(xiàng)是〔〕A．溶化時(shí)將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入燒杯B．常見的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線利噴灑化學(xué)試劑等C．配制同體培養(yǎng)基時(shí)參加瓊脂，其目的是為微生物生長提供碳源D．用移液管稀釋菌液時(shí)，吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻5．近期網(wǎng)絡(luò)上流行一種利用制作酸奶來判斷牛奶好壞的方法，以下自制酸奶的方法也隨之在網(wǎng)絡(luò)廣泛流傳：①將牛奶倒入玻璃杯，放在沸水中加熱10分鐘。②降溫到420C，每杯牛奶參加③用干凈小勺攪拌均勻，在杯子外封上保鮮膜。④在420C下保溫5小時(shí)后，放在40C冰箱中冷藏1小時(shí)。請(qǐng)答復(fù)相關(guān)問題：(1)牛奶在沸水中加熱10分鐘，屬于____(消毒/滅菌〕的方式，你推測(cè)酸奶發(fā)酵劑中含有的成分是____，第②步降溫到42℃的目的是____，第③(2)除了沸水中加熱10分鐘外，本過程中還有哪些操作防止了酸奶被雜菌污染？其原理是？〔寫出兩條即可〕①操作:________，原理:____________________________________________________。②操作:________,原理：_____________________________________________________。(3)酸奶中的多種活菌對(duì)健康有益，假設(shè)要檢測(cè)不同酸奶中各種有益菌的數(shù)量是否達(dá)標(biāo)，可采用____法。6．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中別離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大局部微生物無法生長；在培養(yǎng)基中參加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌；在培養(yǎng)基中參加10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別別離出()①大腸桿菌②霉菌③放線菌④固氮細(xì)菌A．④②③ B．①②③C．①③④ D．③④7．為了保持菌種的純潔，需要進(jìn)行菌種的保藏，以下有關(guān)表達(dá)不正確的選項(xiàng)是()A．對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B．臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C．臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D．對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用低溫－4℃8．以下關(guān)于微生物的培養(yǎng)和別離的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是〔〕A．細(xì)菌能在培養(yǎng)基中以二分裂方式迅速擴(kuò)增B．噬菌體和大腸桿菌都可直接在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖C．滅菌的目的是消滅與培養(yǎng)菌競爭的雜菌D．與平板劃線法相比，稀釋涂布平板法分散細(xì)菌得到單菌落的效果更好9．現(xiàn)有四種突變型細(xì)菌1、2、3、4，它們都不能合成生長所必需的物質(zhì)E。A、B、C、D都是合成E物質(zhì)的必需中間產(chǎn)物，但不知這些物質(zhì)合成的順序。于是在培養(yǎng)基中分別單獨(dú)參加這幾種物質(zhì)并分析了這幾種物質(zhì)對(duì)各種突變型細(xì)菌生長的影響b結(jié)果如右表〔表中+表示細(xì)菌能正常生長—表示不能正常生長〕根據(jù)以上結(jié)果，推測(cè)這幾種物質(zhì)最可能的合成順序是〔〕突變型培養(yǎng)基中單獨(dú)參加的物質(zhì)ABCDE1

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+A．E→C→A→B→DB．D→B→A→C→EC．C→B→A→D→ED．C→D→B→A→E10．以下關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔〕A．操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置參考答案：1．答案：C解析：從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種微生物的過程稱為微生物的別離與純化，常用的別離、純化方法有：單細(xì)胞挑取法、平板劃線法等。接斜面法一般是將得到的單菌落接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，以便做鑒定或擴(kuò)大培養(yǎng)或保存之用。2．答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫箱無菌水(4)多高解析：此題主要考查培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)及其作用，滅菌方法，細(xì)菌培養(yǎng)的條件、方法和結(jié)果分析等方面知識(shí)。用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般要含有微生物生長所需要的碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等成分，碳源、氮源一般分別由糖類和蛋白質(zhì)所提供。對(duì)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。在檢測(cè)湖水中細(xì)菌的污染情況時(shí)，應(yīng)設(shè)置對(duì)照，才能得出可靠的結(jié)果。3．答案：(1)牛肉膏蛋白胨滅菌(2)平板劃線法稀釋涂布平板法蘸取酒精；引燃滅菌(3)菌液濃度過高；培養(yǎng)過程中被雜菌污染；利用接種針劃線時(shí)，劃下一個(gè)區(qū)域前沒有對(duì)接種針進(jìn)行滅菌處理解析：牛肉膏和蛋白胨都是從天然物質(zhì)中提取出來的，都含有豐富的有機(jī)物，可以為微生物提供碳源和氮源。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能使菌體分散開，但如果操作不當(dāng)，會(huì)使別離效果不理想。4．答案：D解析：溶化時(shí)將稱好的牛肉膏同稱量紙一同放入燒杯，參加少量的水，加熱，A選項(xiàng)錯(cuò)誤;灼燒是滅菌，B選項(xiàng)錯(cuò)誤;參加晾脂是使培養(yǎng)基變?yōu)榘牍虘B(tài)或固態(tài)，c選項(xiàng)錯(cuò)誤;移液管稀釋菌液時(shí)，使菌液與水充分混勻應(yīng)吹三次，D選項(xiàng)正確。5．答案：〔1〕消毒 乳酸菌 防止高溫使菌種失活防止雜菌掉落，構(gòu)建無氧環(huán)境〔2〕①操作：參加酸奶發(fā)酵劑 原理：迅速使乳酸菌形成優(yōu)勢(shì)種群，抑制雜菌生長②操作：封上保鮮膜 原理：防止雜菌掉落、并抑制耗氧雜菌生長③操作：42℃④用干凈的小勺原理：防止小勺帶上過多的雜菌〔3〕稀釋涂布平板〔法〕6．答案：A解析：缺乏氮源的培養(yǎng)基上大局部微生物無法生長，而固氮細(xì)菌能生長；在培養(yǎng)基中參加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌，霉菌能生長；在培養(yǎng)基中參加10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌，放線菌能生長。7．答案：D解析：對(duì)于需要長期保存的菌種，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中參加1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20℃8．答案：解析：B試題分析：細(xì)菌繁殖方式是二分裂方式，A正確；噬菌體是沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒，需要在活細(xì)胞中才能生活，在蛋白胨培養(yǎng)基中不能增殖，B錯(cuò)誤；滅菌目的是防止雜菌和培養(yǎng)菌發(fā)生競爭，C正確；稀釋涂布平板法比平板劃線法分散細(xì)菌得到單菌落的效果更好，D正確?？键c(diǎn)：此題考查微生物的培養(yǎng)和別離的知識(shí)。意在考查能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表〞所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用的能力。9．答案：B解析：試題分析：A、B、C、D是合成E物質(zhì)的一系列必需產(chǎn)物。這些突變型菌株可能在合成E物質(zhì)的某條途徑被阻斷，本實(shí)驗(yàn)通過單獨(dú)補(bǔ)充相應(yīng)的物質(zhì)，來尋找合成E物質(zhì)的過程。由突變型1中單獨(dú)參加C物質(zhì)和E物質(zhì)可以存活，可得C→E，由突變型2中單獨(dú)參加A、C、E物質(zhì)可以存活，可得A→C→E，由突變4中單獨(dú)參加A、B、C、E可以存活，可得B→A→C→E，綜合四組實(shí)驗(yàn)可得D→B→A→C→E。應(yīng)選B考點(diǎn)：此題考查微生物