藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座

第二章藥品判別試驗(yàn)藥分教研室1藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第1頁(yè)一、概述

藥品判別試驗(yàn)（identificationtest)是依據(jù)藥品分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì),采取化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來(lái)證實(shí)已知藥品真?zhèn)?。而不是?duì)未知物進(jìn)行定性分析。是藥檢工作首要任務(wù)，雜質(zhì)檢驗(yàn)、含量測(cè)定前提。2藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第2頁(yè)二、判別試驗(yàn)項(xiàng)目性狀普通判別試驗(yàn)專(zhuān)屬判別試驗(yàn)3藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第3頁(yè)性狀外觀(guān)：感觀(guān)要求，普通性描述。溶解度：反應(yīng)了在某種溶劑中溶解性能。物理常數(shù):評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量主要指標(biāo)，反應(yīng)藥品純凈程度。熔點(diǎn)、

比旋度、吸收系數(shù)、凝點(diǎn)、折光率相對(duì)密度、餾程、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值等4藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第4頁(yè)外觀(guān)：指藥品外表感觀(guān)和色澤，包含聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味如：維生素B1“本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶粉末；

有微弱特臭，味苦；

干燥品在空氣中迅即吸收約4%水分”（色澤）（聚集狀態(tài)）（臭）（味）5藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第5頁(yè)溶解度試驗(yàn)法：①供試品準(zhǔn)確稱(chēng)取研成細(xì)粉

②在25℃±2℃，加溶劑

③每隔5min振搖30s無(wú)目視可見(jiàn)溶質(zhì)顆粒或液滴時(shí)，即視為完全溶解

極易溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑不到1ml中溶解；易溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1～不到10ml中溶解；溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑10～不到30ml中溶解；略溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑30～不到100ml中溶解；微溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑100～不到1000ml中溶解;極微溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1000～不到10000ml中溶解；幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)1g(ml)在溶劑10000ml中不能完全溶解。6藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第6頁(yè)物理常數(shù)1、熔點(diǎn)1）定義：Ch.P要求,熔點(diǎn)系指一個(gè)物質(zhì)由固體熔化成液體溫度、熔融同時(shí)分解溫度，或在熔化時(shí)自初熔至全熔一段溫度。如：雌二醇：175～180℃醋酸地塞米松：223～233℃樣品發(fā)毛收縮液滴（初熔）澄清（全熔）7藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第7頁(yè)

2）測(cè)定方法分三法：第一法：測(cè)定易粉碎固體藥品第二法：測(cè)定不易粉碎固體藥品第三法：測(cè)定凡士林或其它類(lèi)似物質(zhì)（詳見(jiàn)：Ch.P年版二部附錄ⅥC

）8藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第8頁(yè)2、比旋度偏振光透過(guò)長(zhǎng)1dm并每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g溶液，在一定波長(zhǎng)與溫度下測(cè)得旋光度稱(chēng)為比旋度。本藥典系用鈉光譜D線(xiàn)(589.3nm)測(cè)定旋光度，除另有要求外，測(cè)定管長(zhǎng)度為1dm，測(cè)定溫度為20℃。偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時(shí)針?lè)较颍橛倚?，以“＋”符?hào)表示；使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者(反時(shí)針?lè)较?為左旋，以“－”符號(hào)表示Ch.P年版二部附錄ⅥE9藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第9頁(yè)3、吸收系數(shù)

吸光物質(zhì)在給定波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，單位濃度、單位液層厚度時(shí)吸收度

溶液濃度液層厚度溶液濃度液層厚度摩爾吸收系數(shù)(ε)百分吸收系數(shù)10藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第10頁(yè)含有相同結(jié)構(gòu)化合物可能有相同λmax，但吸收系數(shù)有差異11藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第11頁(yè)普通判別試驗(yàn)

（generalidentificationtest）是指依據(jù)某一類(lèi)藥品共同化學(xué)結(jié)構(gòu)或相同理化特征，來(lái)判別藥品真?zhèn)巍Ｓ袡C(jī)藥品--------官能團(tuán)無(wú)機(jī)藥品--------陰離子、陽(yáng)離子普通判別試驗(yàn)用于證實(shí)藥品是哪一類(lèi)，要深入證實(shí)是哪一個(gè)藥品，還需要結(jié)合專(zhuān)屬判別試驗(yàn)

12藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第12頁(yè)普通判別試驗(yàn)

（generalidentificationtest）

Ch.P附錄Ⅲ中有：有機(jī)氟類(lèi)、有機(jī)酸鹽類(lèi)（水楊酸鹽）、芳香第一胺類(lèi)、托烷生物堿類(lèi)、丙二酰脲類(lèi)無(wú)機(jī)金屬類(lèi)（Na+,K+,Ca2+,Ba2+,Li+,Fe3+,Al3+,Zn2+,Cu2+,Ag+,Hg2+等）無(wú)酸鹽類(lèi)(Cl-、

SO42-、NO3-)13藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第13頁(yè)1.有機(jī)氟化物有機(jī)氟氧瓶燃燒無(wú)機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰藍(lán)紫色絡(luò)合物+F-+Ce3+pH4.3堿液吸收14藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第14頁(yè)2.有機(jī)酸鹽(1)水楊酸鹽水楊酸+FeCl3中性條件弱酸性條件紅色配位化合物紫色配位化合物6+4FeCl3+12HCl水楊酸鹽+稀鹽酸→水楊酸（白色沉淀）溶于醋酸銨15藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第15頁(yè)(2)酒石酸鹽供試品溶液（中性）+氨制硝酸銀銀鏡水浴中HO—CH—COOHHO—CH—COOH+2Ag(NH3)2OHHO—C—COONH4HO—C—COONH42Ag++2NH3+2H2O水浴中16藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第16頁(yè)3.芳香第一胺類(lèi)供試品+

稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃色到猩紅色沉淀N2+Cl-.+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2ON2+Cl-.++NaOH+NaCl+2H2O17藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第17頁(yè)

4.托烷生物堿類(lèi)這類(lèi)生物堿中含有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitali反應(yīng),顯紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色莨菪酸18藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第18頁(yè)5.無(wú)機(jī)金屬鹽（Na,K,Ca,NH4+)

焰色反應(yīng)：Na顯鮮黃色；K顯紫色；Ca顯磚紅色

銨鹽：

供試品+NaOH氨氣使?jié)駶?rùn)紅色石蕊試紙變藍(lán)使硝酸亞汞試液濕潤(rùn)濾紙顯黑色19藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第19頁(yè)6.無(wú)機(jī)酸根氯化物：Cl-+Ag+AgCl白色乳狀

Cl-+MnO2Mn2++Cl2硫酸鹽：SO42-+Ba2+BaSO4白色

SO42-+Pb2+PbSO4白色加鹽酸，無(wú)白色沉淀硝酸鹽：Cu+NO3-Cu(NO3)2+2NO2（紅棕色）Fe2++NO3-Fe3++NO區(qū)分NO3-、NO2-H2SO4使?jié)駶?rùn)KI_淀粉試紙變藍(lán)

KMnO4褪色NO2-不褪色NO3-H2SO4H2SO420藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第20頁(yè)專(zhuān)屬判別試驗(yàn)

（specificidentificationtest）是證實(shí)某一個(gè)藥品依據(jù)。依據(jù)一類(lèi)藥品中每一個(gè)藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)差異理化特征，選取一些特有靈敏定性反應(yīng)，來(lái)判別藥品真?zhèn)巍Ｆ胀ㄅ袆e試驗(yàn)依據(jù)某類(lèi)藥品共同特點(diǎn)，區(qū)分不一樣類(lèi)藥品。專(zhuān)屬判別試驗(yàn)在普通判別試驗(yàn)基礎(chǔ)上，利用各種藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，判別各個(gè)藥品單體。21藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第21頁(yè)共性丙二酰脲-CONHCONHCO-

可與一些金屬離子（Ag+、Cu2+、Hg2+等）反應(yīng)呈色或產(chǎn)生沉淀巴比妥類(lèi)藥品R+2AgNO3+2HNO3普通判別試驗(yàn)22藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第22頁(yè)與Pb2+反應(yīng)生成黑色PbS甲醛硫酸反應(yīng)碘取代反應(yīng)專(zhuān)屬判別試驗(yàn)

硫噴妥鈉司可巴比妥苯巴比妥23藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第23頁(yè)二、判別方法（一）化學(xué)判別法（二）光譜判別法（三）X射線(xiàn)衍射法（四）色譜判別法（五）生物法24藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第24頁(yè)（一）化學(xué)判別法

供試品加入適當(dāng)試劑，在一定條件下，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，經(jīng)過(guò)產(chǎn)生可觀(guān)察到顯著現(xiàn)象，來(lái)判別藥品真?zhèn)畏椒ā?/p>

化學(xué)判別法特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)快速、試驗(yàn)成本低、應(yīng)用廣

但專(zhuān)屬性比儀器分析法差

分為：

（1）呈色反應(yīng)判別法

（2）沉淀生成反應(yīng)判別法

（3）熒光反應(yīng)判別法

（4）氣體生成反應(yīng)判別法

（5）試劑褪色判別法

25藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第25頁(yè)（一）、化學(xué)判別法

（1）呈色反應(yīng)判別法

供試品加入適當(dāng)試劑，在一定條件下，反應(yīng)生成有色產(chǎn)物

判別方法①三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）②有機(jī)氟化物茜素氟藍(lán)法③芳香第一胺類(lèi)重氮化-偶合反應(yīng)④托烷生物堿類(lèi)-Vitali反應(yīng)⑤腎上腺皮質(zhì)激素類(lèi)四氮唑⑥含羰基結(jié)構(gòu)苯肼反應(yīng)⑦氨基酸及氨基糖苷類(lèi)茚三酮呈色反應(yīng)⑧雙縮脲反應(yīng)26藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第26頁(yè)③芳香第一胺類(lèi)芳伯胺+

稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃色到猩紅色重氮化-偶合反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚紅色27藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第27頁(yè)①三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）藍(lán)紫色對(duì)乙酰氨基酚

（一）化學(xué)判別法

（1）呈色反應(yīng)判別法

②有機(jī)氟化物氧瓶燃燒無(wú)機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰堿液吸收藍(lán)紫色絡(luò)合物有機(jī)氟28藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第28頁(yè)④托烷生物堿類(lèi)-Vitali反應(yīng)這類(lèi)生物堿中含有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitali反應(yīng),顯紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色29藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第29頁(yè)⑤腎上腺皮質(zhì)激素類(lèi)四氮唑+2e[H]四氮唑甲臜

皮質(zhì)激素含有還原性，能將四氮唑還原為有色甲臜

30藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第30頁(yè)⑥含羰基結(jié)構(gòu)苯肼反應(yīng)++H2O苯肼苯腙31藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第31頁(yè)⑦氨基酸及氨基糖苷類(lèi)茚三酮呈色反應(yīng)

左旋多巴+CO2+3H2O+比如：32藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第32頁(yè)⑧雙縮脲反應(yīng)（開(kāi)環(huán)分解）藍(lán)紫色33藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第33頁(yè)（2）沉淀生成反應(yīng)判別法

供試品加入適當(dāng)試劑，在一定條件下，反應(yīng)生成沉淀

（一）化學(xué)判別法③還原性基團(tuán)銀鏡反應(yīng)①丙二酰脲類(lèi)硝酸銀反應(yīng)②氯化物銀鹽沉淀⑦含氮雜環(huán)類(lèi)與生物堿沉淀劑（碘化鉍鉀、硅鎢酸）沉淀反應(yīng)⑤苯甲酸鹽類(lèi)三氯化鐵反應(yīng)④生成氧化亞銅紅色沉淀反應(yīng)⑥與重金屬離子沉淀反應(yīng)⑧磺胺類(lèi)藥品銅鹽反應(yīng)34藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第34頁(yè)丙二酰脲類(lèi)硝酸銀反應(yīng)+2AgNO3+2HNO3Cl-+Ag+AgCl氯化物銀鹽沉淀35藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第35頁(yè)含有還原性基團(tuán)藥品——銀鏡反應(yīng)+AgNO3+NH3·H2OAg異煙肼葡萄糖+堿性酒石酸銅試液（Fehling試液）氧化亞銅+葡萄糖酸36藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第36頁(yè)苯甲酸鹽類(lèi)三氯化鐵反應(yīng)+3FeCl3+OH-+7NaCl+2Cl-赭色沉淀37藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第37頁(yè)利多卡因與重金屬離子反應(yīng)2+CoCl2H+亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀38藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第38頁(yè)含氮雜環(huán)類(lèi)生物堿沉淀反應(yīng)苯并二氮雜類(lèi)+BiI3·橙紅色沉淀

氯氮氟西泮氯硝西泮+12W03·Si02灰白色沉淀4KIC2H5OH白色C2H5OH黃色阿托品+HgCl2東莨菪堿+HgCl2托烷類(lèi)生物堿39藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第39頁(yè)吡啶環(huán)類(lèi)2+CuSO4+2NH4SCNCu(SCN)2+(NH4)2SO4草綠色配合物沉淀40藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第40頁(yè)磺胺類(lèi)藥品成銅鹽反應(yīng)

磺酰氨基上活潑氫原子，可被一些金屬離子取代，生成有色金屬鹽沉淀。磺胺類(lèi)藥品鈉鹽溶液，加硫酸銅試液生成不一樣顏色銅鹽沉淀，可供區(qū)分及判別。41藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第41頁(yè)

(3)熒光反應(yīng)判別法

①藥品本身在可見(jiàn)光下發(fā)射熒光

如：硫酸奎寧溶液顯藍(lán)色熒光

②藥品與適當(dāng)試劑反應(yīng)后發(fā)射熒光

如：氯普噻噸+HNO3后，紫外下顯綠色

VB1硫色素（藍(lán)色熒光）堿性K3Fe(CN)6（一）化學(xué)判別法42藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第42頁(yè)（4）氣體生成反應(yīng)判別法

①大多數(shù)伯胺（銨）類(lèi)藥品、酰尿類(lèi)以及一些酰胺類(lèi)藥品，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣。

紅色石蕊試紙變藍(lán)

硝酸亞汞試液濕潤(rùn)試紙顯黑色（一）化學(xué)判別法43藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第43頁(yè)②化學(xué)結(jié)構(gòu)含硫藥品，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后加熱產(chǎn)生硫化氫氣體硫鳥(niǎo)嘌呤●7H2O強(qiáng)酸?H2S（臭雞蛋氣味）使醋酸鉛試紙變黑44藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第44頁(yè)③含碘有機(jī)藥品經(jīng)直火加熱可生成紫色碘蒸汽④含醋酸酯和乙酰胺類(lèi)藥品，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯香味。45藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第45頁(yè)（一）化學(xué)判別法（5）試劑退色維生素C與二氯靛酚反應(yīng)46藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第46頁(yè)（6）測(cè)定生成物熔點(diǎn)法

制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)法藥品＋試劑新化合物有一定mp;藥品酸化或堿化生成游離酸或堿。操作繁瑣費(fèi)時(shí)間，應(yīng)用較少。（一）化學(xué)判別法47藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第47頁(yè)紫外光譜（UV）紅外光譜（IR）近紅外光譜法（NIRS）原子吸收法（AAS）核磁共振法（NMR）二、判別方法（二）光譜判別法48藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第48頁(yè)1、紫外光譜判別法

紫外光譜法操作簡(jiǎn)便、快速。

用作判別專(zhuān)屬性遠(yuǎn)不如紅外光譜法。

紫外光譜相同物質(zhì)不一定是同一個(gè)物質(zhì)。（二）光譜判別法49藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第49頁(yè)紫外光譜法常有方法測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)，或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)；要求濃度供試液在最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定吸收度；

要求吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法；要求吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法；

經(jīng)化學(xué)處理后,測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特征以上方法可單用，也可幾個(gè)結(jié)合起來(lái)使用，以提升專(zhuān)屬性

50藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第50頁(yè)①測(cè)定最大吸收波長(zhǎng),或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)乙胺嘧啶供試品在0.1mol/L鹽酸介質(zhì)中紫外吸收在272nm處為峰,216nm處為谷。51藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第51頁(yè)②要求吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法兩性霉素在362nm、381nm、405nm波優(yōu)點(diǎn)有最大吸收.要求362nm/381nm處吸光度比值小于0.6

381nm/405nm波長(zhǎng)比值小于0.9VB12361nm/278nm1.70～1.88361nm/550nm3.15～3.45

52藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第52頁(yè)

己稀雌酚注射液用供試品溶液250-450nm波長(zhǎng)吸收光譜與對(duì)照品是否一致判別。③與對(duì)照品比較,對(duì)比吸收光譜一致性53藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第53頁(yè)

Ch.P示例一鹽酸布比卡因判別試驗(yàn)0.40mg/mlλmax:263nm、271nmA:0.53~0.58;0.43~0.48要求一定濃度供試液在最大吸收波優(yōu)點(diǎn)吸光度示例二地蒽酚判別試驗(yàn)λmax:257nm、289nm、356nmA257/A289=1.06~1.10A356/A289=0.90~0.94要求最大吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法54藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第54頁(yè)示例三氯貝丁酯判別試驗(yàn)

0.10mg/mlλmax:280nm、288nm

10μg/mlλmax:226nm要求一定濃度下供試液最大吸收波長(zhǎng)示例二專(zhuān)屬性相對(duì)很好55藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第55頁(yè)USP采取對(duì)照品法

供試藥與其對(duì)照品按同一方法處理，在一樣條件下紫外光譜圖一致。BP要求一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)，僅有一個(gè)最大或最小吸收J(rèn)P與Ch.P相同

各國(guó)紫外判別法比較56藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第56頁(yè)2、紅外分析法

IR光譜法是有機(jī)藥品分子振動(dòng)-轉(zhuǎn)動(dòng)光譜，能反應(yīng)藥品分子

結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，分子中每個(gè)基團(tuán)普通都由對(duì)應(yīng)吸收峰，且特征性強(qiáng)，（除光學(xué)異構(gòu)體及長(zhǎng)鏈烷烴同系物外）幾乎沒(méi)有兩種化合物含有完

全相同紅外吸收光譜，即紅外吸收光譜含有“指紋性”，被廣泛地應(yīng)用于化合物判別。

特點(diǎn)

專(zhuān)屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高特點(diǎn)，應(yīng)用廣（固、液、氣）

主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確原料藥以及結(jié)構(gòu)相近同類(lèi)物質(zhì)。

（二）光譜判別法57藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第57頁(yè)2、紅外分析法

標(biāo)準(zhǔn)圖譜法：Ch.P要求按指定條件繪制供試品紅外光吸收?qǐng)D譜，與《藥品紅外光譜集》中對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)比，假如峰位、峰形、相對(duì)強(qiáng)度都一致時(shí)，即為同一個(gè)藥品。

對(duì)照品法：將供試品與對(duì)照品在一樣條件下繪制紅外圖譜，彼此對(duì)比是否一致方法?？上灰粯觾x器和操作條件造成誤差。58藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第58頁(yè)試樣制備方法壓片法供試品（約1mg)+干燥KBr/KCl(約200mg)研磨均勻（瑪瑙研缽）

置壓膜中真空加壓至0.8-1GPa2-3min均勻透明片無(wú)顯著顆粒供試片同法制空白KBr/KCl片，做空白校正，扣除背景干擾59藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第59頁(yè)糊法供試品（約5mg）,滴加少許液體石蠟或其它液體制成糊狀物瑪瑙研缽取適量夾于兩個(gè)KBr片（150mg/片）之間供試片KBr（約300mg）制成空白片，作背景校正60藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第60頁(yè)

膜法

供試品多為高分子聚合物，可做成液膜鋪展于適宜鹽片上。

溶液法

液體供試品（或溶于適宜溶劑內(nèi)），制成1%-10%溶液，置于0.1-0.5mm厚液體池中，即可測(cè)得。61藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第61頁(yè)應(yīng)用光譜圖比對(duì)時(shí)應(yīng)注意問(wèn)題1）固體藥品應(yīng)按要求方法進(jìn)行預(yù)處理2）鹽酸鹽類(lèi)藥品制片時(shí)普通使用KCl做基質(zhì)3）注意儀器本身影響可與標(biāo)準(zhǔn)聚苯乙烯薄膜比對(duì)，校正4）不適用多組分、多晶形藥品5）以新版《藥品紅外光譜集》為準(zhǔn)6）制劑判別，應(yīng)消除輔料干擾，提取分離后再制片7）Ch.P4000-400cm-1

BP-400cm-1

62藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第62頁(yè)

各國(guó)紅外光譜法比較Ch.P采取標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法BP采取標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法、對(duì)照品法USP采取對(duì)照品法JP要求條件下測(cè)定一定波優(yōu)點(diǎn)特征吸收峰。63藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第63頁(yè)（二）光譜判別法

3、近紅外光譜法

近紅外譜區(qū):12800-4000cm-1

750-2500nm經(jīng)過(guò)測(cè)定被測(cè)物在近紅外區(qū)特征光譜，進(jìn)行定性、定量分析一個(gè)分析技術(shù)。特點(diǎn)1、取得信息多:密度、粒子尺寸、直徑、大分子聚合度等2、樣品無(wú)需預(yù)處理，可直接裝入樣品池測(cè)定3、分析速度要快掃描：5次/s，普通掃描50次分析一次2-3min4、靈敏度高，應(yīng)用范圍廣64藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第64頁(yè)近紅外分析普通程序（1）參考庫(kù)建立

統(tǒng)計(jì)一定數(shù)量批次物質(zhì)譜圖（不一樣生產(chǎn)企業(yè)、物理形態(tài)、粒度差異）信息。（2）數(shù)據(jù)預(yù)處理

對(duì)各譜圖進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，建立分析模型（3）數(shù)據(jù)評(píng)定

將待測(cè)物譜圖與譜庫(kù)中單一或平均參考譜圖比較。（4）數(shù)據(jù)庫(kù)驗(yàn)證

專(zhuān)屬性、耐用性驗(yàn)證65藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第65頁(yè)板藍(lán)根注射液和川芎注射液近紅外圖譜三個(gè)產(chǎn)地異穗卷柏近紅外譜圖66藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第66頁(yè)4、原子吸收法利用原子蒸氣能夠吸收由該元素作為陰極空心陰極燈發(fā)出特征譜線(xiàn)特征，依據(jù)供試溶液在特征譜線(xiàn)處最大吸收和特征譜線(xiàn)強(qiáng)度減弱程度進(jìn)行定量、定性分析。

主要用于元素分析

5、核磁共振經(jīng)過(guò)測(cè)定供試品指定基團(tuán)上質(zhì)子峰化學(xué)位移和偶合常數(shù)進(jìn)行判別。（二）光譜判別法

67藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第67頁(yè)

（三）X射線(xiàn)粉末衍射法X射線(xiàn)波長(zhǎng)0.01-1nm電磁波利用晶體對(duì)X射線(xiàn)衍射效應(yīng)來(lái)進(jìn)行定性、定量分析方法。用于結(jié)晶物質(zhì)判別，供試品與參考品X衍射圖比較衍射角?面間距d相對(duì)強(qiáng)度68藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第68頁(yè)（三）X射線(xiàn)粉末衍射法影響原因：藥品本身特征入射X射線(xiàn)波長(zhǎng)及強(qiáng)度供試品結(jié)晶度、密度、體積室驗(yàn)溫度研磨壓力等69藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第69頁(yè)（四）色譜判別法

利用不一樣物質(zhì)在不一樣色譜條件下，產(chǎn)生各自特征色譜行為（保留時(shí)間，比移值）進(jìn)行判別試驗(yàn)。常采取對(duì)比法與對(duì)照品、已知藥品，在相同條件下進(jìn)行色譜分離并比較。TLCHPLCGC70藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第70頁(yè)（四）色譜判別法1、薄層色譜判別法(TLC)

薄層色譜法含有專(zhuān)屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、試驗(yàn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。在判別試驗(yàn)中，薄層色譜法是色譜法中應(yīng)用最廣一個(gè)方法。Ch.p（）一部，1523項(xiàng)經(jīng)過(guò)Rf值，斑點(diǎn)顏色進(jìn)行定性。71藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第71頁(yè)72藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第72頁(yè)（四）色譜判別法2、HPLC、GC色譜分析法

供試品和對(duì)照色譜峰保留時(shí)間一致。在判別試驗(yàn)中，通常含量測(cè)定同時(shí)用于判別一個(gè)方法。73藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第73頁(yè)（四）色譜判別法

3、質(zhì)譜判別法在高真空狀態(tài)下將被測(cè)物離子化，按離子質(zhì)荷比大小分離，經(jīng)過(guò)離子譜峰強(qiáng)度及相互關(guān)系，提供分子結(jié)構(gòu)相關(guān)信息，從而進(jìn)行定性分析。離子準(zhǔn)確質(zhì)量數(shù)化合物分子式碎片離子化合物結(jié)構(gòu)74藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第74頁(yè)色譜譜判別法小結(jié)

適合用于復(fù)雜環(huán)境下藥品有效成份及雜質(zhì)判別,含有分離、分析同時(shí)進(jìn)行特點(diǎn).高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)——供試品和對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間一致.薄層掃描法(TLC)——對(duì)照品比較法，供試品斑點(diǎn)與對(duì)照品Rf值及斑點(diǎn)顏色應(yīng)一致.色譜法（HPLCGCTLC)75藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第75頁(yè)（五）生物學(xué)法

是利用微生物或試驗(yàn)動(dòng)物判別法胰島素生物檢定法

肝素生物檢定法76藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第76頁(yè)藥品判別方法新動(dòng)向1、儀器方法用于藥品判別數(shù)量大大增加，USP、BP儀器判別法：化學(xué)判別法（2:1）BP：主要用TLCUSP：HPLC2、制劑廣泛采取IR法判別77藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第77頁(yè)例1.維生素C判別（1）藥典中要求：維生素C比旋度應(yīng)為+20.5～+21.5°

(2)在維生素C分子中含有烯二醇結(jié)構(gòu)，這個(gè)結(jié)構(gòu)含有很強(qiáng)還原性，能夠和一些氧化劑作用。樣品（0.2g）10ml水5ml黑色Ag↓AgNO3（3）紅外光譜與對(duì)照?qǐng)D譜一致。二、判別方法78藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第78頁(yè)三、判別試驗(yàn)條件（一）溶液濃度

溶液濃度主要指被判別物質(zhì)濃度，其大小影響結(jié)果判斷。（如化學(xué)法中要觀(guān)察沉淀、顏色；UV法中λmax,A,E1%1cm)（二）溶液溫度

溫度過(guò)高可使產(chǎn)物分解，造成顏色變淺，沉淀溶解，甚至觀(guān)察不到結(jié)果，故試驗(yàn)中應(yīng)注意溫度控制。79藥物的鑒別試驗(yàn)專(zhuān)家講座第79頁(yè)

（三）溶液酸堿度

許多判