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飼料分析蛋白測定第一頁,共十三頁,2022年,8月28日Contents1.適用范圍2.測定意義3.測定原理4.儀器設(shè)備及試劑5.測定步驟第二頁,共十三頁,2022年,8月28日適用范圍飼料中含氮物質(zhì)包括真蛋白質(zhì)和氨化物(非蛋白氮),兩者總稱為粗蛋白質(zhì)。本方法適用于配合飼料、濃縮飼料和單一飼料等粗蛋白質(zhì)含量的測定。第三頁,共十三頁,2022年,8月28日適用范圍蛋白氮(真蛋白質(zhì)提供氮源)非蛋白氮(氨基酸、酰胺、銨鹽)粗蛋白質(zhì)第四頁,共十三頁,2022年,8月28日測定意義蛋白質(zhì)是生命的基礎(chǔ),是細(xì)胞組成、酶、激素免疫抗體等的主要成分,是組織更新、修補(bǔ)的原料。飼料中蛋白質(zhì)的質(zhì)和量直接關(guān)系到動(dòng)物生命生長、發(fā)育、繁殖和生產(chǎn),因此,測定飼料中粗蛋白質(zhì)含量對(duì)動(dòng)物生活和生產(chǎn)有重要作用。測定飼料原料和成品料中粗蛋白質(zhì)含量的,為科學(xué)配置飼料提供可靠依據(jù)。第五頁,共十三頁,2022年,8月28日測定原理
凱氏法測定試樣中含氮量,即在催化劑作用下,用硫酸破壞有機(jī)物,使含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,在用標(biāo)準(zhǔn)濃度的酸滴定,測出氮含量,將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25,計(jì)算出粗蛋白質(zhì)含量。第六頁,共十三頁,2022年,8月28日儀器設(shè)備及試劑樣品粉碎機(jī)40目分析篩分析天平消化爐消化管凱氏蒸餾裝置滴定管98%濃硫酸硫酸鉀硫酸銅硼酸溶液標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液混合指示劑蔗糖第七頁,共十三頁,2022年,8月28日
試樣選取——四分法樣品第八頁,共十三頁,2022年,8月28日測定步驟1.試樣的消化稱取0.5~1g試樣,準(zhǔn)確至0.0001g,無損地放入消化管中,加入硫酸銅0.4g,硫酸鉀6g,與試樣混合均勻,再加濃硫酸10ml,將消化管放置在消化爐上加熱(此裝置需安裝在通風(fēng)櫥內(nèi)),待樣品焦化,泡沫消失,加大火力至410℃,直至溶液呈透明的藍(lán)綠色。將試樣消化液冷卻,無損失地轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中,冷卻后用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,則為試樣分解液。第九頁,共十三頁,2022年,8月28日測定步驟2.試樣的蒸餾取2%硼酸溶液20ml至錐形瓶中作為反應(yīng)吸收液,并加混合指示劑2滴,將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入該液面下。準(zhǔn)確移取試樣分解液10ml注入蒸餾裝置的反應(yīng)腔中,用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口,塞好玻璃塞,并在入口處加水密封好。再在堿液入口緩慢加入10~20ml40%氫氧化鈉溶液,亦使之流入反應(yīng)腔中,并把堿液入口封存好。進(jìn)行蒸餾。以錐形瓶中溶液變藍(lán)綠色開始計(jì)時(shí)3min,然后將冷凝管末端離開錐形瓶液面,再蒸餾1min,用少量蒸餾水沖洗冷凝管末端,洗液亦流入吸收液中。第十頁,共十三頁,2022年,8月28日測定步驟3.滴定用硼酸吸收氨后,立即用0.05mol/L的HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定,溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色為終點(diǎn)。4.空白測定稱取蔗糖0.01g,以代替試樣,按上述測定步驟進(jìn)行空白測定,消耗0.05mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積應(yīng)不得超過0.3ml。5.計(jì)算粗蛋白質(zhì)(%)=第十一頁,共十三頁,2022年,8月28日注意事項(xiàng)每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測定,以其算術(shù)平均值作為結(jié)果。本方法不能區(qū)別蛋白氮和非蛋白氮。每次蒸餾結(jié)束后,
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