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文檔簡介

現(xiàn)代生物科技專題→教材必背知識1、實現(xiàn)基因工程的操作過程至少需要三種工具,即準確切割DNA的“手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶、將DNA片段再連接起來的“縫合針”——DNA連接酶、將體外重組好的DNA導入受體細胞的“運輸工具”——運載體。(P4)2、獲取目的基因是實施基因工程的第一步。(P8)3、基因表達載體的構(gòu)建是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。(P11)4、將目的基因?qū)胧荏w細胞是實施基因工程的第三步。(P11)5、目的基因?qū)胧荏w細胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性,只有通過檢測與鑒定才能知道。這是基因工程的第四步工作。也是檢查基因工程是否成功的一步。(P13)6、基因工程的應(yīng)用:抗蟲轉(zhuǎn)基因植物、抗病轉(zhuǎn)基因植物、其他抗逆轉(zhuǎn)基因植物、利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)、用于提高動物生長速度、用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物、用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體。(P18—21)7、基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。(P26)8、具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能,也就是說,每個生物細胞都具有全能性的特點。(P33)9、植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下,將離體的植物器官、組織、細胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。(P36)10、植物體細胞雜交就是將不同種的植物體細胞,在一定條件下融合成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。(P37)11、植物細胞工程的實際應(yīng)用:植物繁殖的新途徑——微型繁殖、作物脫毒、人工種子;作物新品種的培育——單倍體育種、突變體的利用;細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(P38—40)12、動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖。(P44)13、動物細胞核移植是將動物的一個細胞的細胞核,移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。(P47)14、動物細胞融合也稱細胞雜交,是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。(P52)15、胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。(P74)16、胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。(P78)17、生態(tài)經(jīng)濟主要是通過實行“循環(huán)經(jīng)濟”的原則,使一個系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物,能夠成為本系統(tǒng)或者另一個系統(tǒng)的生產(chǎn)原料,從而實現(xiàn)廢棄物的資源化,而實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一就是生態(tài)工程。(P108)18、在肯定生態(tài)工程的作用,特別是對恢復和重建受損態(tài)環(huán)境的重要作用的同時,不要忘記大自然固有的強大的生態(tài)恢復力量;更不能誤認為只要有了生態(tài)工程,就可以走發(fā)達國家“先污染、破壞,后治理”的老路。(P124)→教材必會知識1、DNA重組技術(shù)的基本工具(1)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)——“分子手術(shù)刀”。能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有特異性。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。(2)DNA連接酶——“分子縫合針”。(3)基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車”。最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。其它載體:噬菌體、動植物病毒2、基因工程的基本操作程序。第一步:目的基因的獲?。ǐ@取目的基因的方法基因文庫、人工合成、PCR技術(shù));第二步:基因表達載體的構(gòu)建(組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因+復制原點);第三步:將目的基因?qū)胧荏w細胞(常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等);第四步:目的基因的檢測和鑒定。3、導入動物細胞的方法是顯微注射法,常用的受體細胞是受精卵。4、蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)。5、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是離體的植物細胞具有全能性。植物組織培養(yǎng)過程:離體的植物組織、器官或細胞愈傷組織胚狀體或叢芽試管苗。6、植物體細胞雜交技術(shù)中用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,誘導細胞融合的方法有離心、振動、電激等物理方法和聚乙二醇等化學方法。7、動物細胞工程常用的技術(shù)手段:動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、動物細胞融合等。8、動物細胞培養(yǎng)過程:取動物組織塊→分散組織細胞(用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理)→配制細胞懸液→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)。9、動物體細胞核移植技術(shù)是將動物一個細胞的細胞核,移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。10、動物細胞融合技術(shù)中常用的誘導因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒和電激等。

11、動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較:(重點記憶)細胞工程植物體細胞雜交動物細胞融合理論基礎(chǔ)細胞的全能性、細胞膜的流動性細胞增殖、細胞膜的流動性融合前處理酶解法去除細胞壁(纖維素酶、果膠酶)注射特定抗原,免疫處理正常小鼠誘導手段物理法:離心、振動、電激化學法:聚乙二醇(PEG)物理法:離心、振動、電激化學法:聚乙二醇生物法:滅活的病毒(滅活的仙臺病毒)誘導過程第一步:原生質(zhì)體的制備(酶解法)第二步:原生質(zhì)體融合(物、化法)第三步:雜種細胞的篩選和培養(yǎng)第四步:雜種植株的誘導與鑒定正常小鼠免疫處理動物細胞的融合(物、化、生法)雜交瘤細胞的篩選與培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性細胞培養(yǎng)單克隆抗體的提純用途和意義克服遠緣雜交的不親和障礙,大大擴展雜交的親本組合范圍應(yīng)用:白菜-甘藍等雜種植株制備單克隆抗體診斷、治療、預(yù)防疾病,例如“生物導彈”治療癌癥12、雜交瘤細胞既能無限增殖,又能產(chǎn)生某種特異性抗體(單克隆抗體)。

13、單克隆抗體的制備過程:14、.胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術(shù),如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養(yǎng)等。15、.受精是指精子與卵子結(jié)合形成合子的過程,包括受精前的準備階段和受精階段。防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)。16、卵裂期的特點是細胞分裂方式為有絲分裂,細胞的數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體積并不增加,或略有縮小。17、早期發(fā)育的胚胎分為桑椹胚、囊胚和原腸胚3個階段。18、哺乳動物的體外受精主要包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能及受精等主要步驟。19、培養(yǎng)哺乳動物早期胚胎的培養(yǎng)液成分:無機鹽、有機物、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及血清、血漿等物質(zhì)。20、胚胎移植不屬于生殖方式,僅屬于一種技術(shù),可用于有性和無性生殖產(chǎn)生的胚胎的移植。

21、胚胎移植基本程序主要包括:22、胚胎移植的意義是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。23、對囊胚進行分割時要注意將內(nèi)細胞團均等分割。24、哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細胞核大,核仁明顯;在功能上具有發(fā)育的全能性。25、基因身份證是把個人的致病基因和易感基因檢測出來,記錄在磁卡上,做成個人基因身份證。26、生物武器的種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。27、生態(tài)經(jīng)濟主要是通過實行“循環(huán)經(jīng)濟”的原則,使一個系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物,能夠成為本系統(tǒng)或者另一個系統(tǒng)的生產(chǎn)原料,從而實現(xiàn)廢棄物的資源化,而實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一就是生態(tài)工程。28、生態(tài)工程所遵循的基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學和工程學原理。→易錯易混知識1、在植物組織培養(yǎng)中,生長素/細胞分裂素比例高時有利于根的分化,比例低時有利于芽的分化,比例適中促進愈傷組織的形成。2、離體的植物體細胞與生殖細胞都可以作為植物組織培養(yǎng)的外植體,因為這些細胞都至少含有一個染色體組,具有全能性。3、愈傷組織的細胞排列整齊而緊密且為高度液泡化、無定型狀的薄壁細胞。4、檢測受體細胞是否導入了目的基因,以及受體細胞中導入的目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,可用相同的目的基因探針進行診斷。5、動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理都是細胞的全能性。如果要獲得轉(zhuǎn)基因植物,可選用植物的體細胞作受體細胞,然后通過組織培養(yǎng)技術(shù)獲得;如果要獲得轉(zhuǎn)基因動物,可選用動物的體細胞作受體細胞,然后通過動物細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得。6、通過轉(zhuǎn)基因方式獲得的抗蟲棉具有永久抗蟲的能力。7、用相同的限制酶切割DNA留下的粘性末端是一定相同的;用不同的限制酶切割不同的DNA留下的粘性末端一定是不相同的。8、在植物組織培養(yǎng)的過程中,脫分化階段可不需要光照,再分化階段必需要給予光照。9、在植物組織培養(yǎng)過程中,加入適量的蔗糖不僅可以為細胞提供碳源和能源物質(zhì),而且可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓。10、植物產(chǎn)生的種子能發(fā)育成新的個體,是種子細胞全能性的體現(xiàn)。11、在微生物培養(yǎng)中,培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法;接種環(huán)通常通過灼燒滅菌;無菌操作臺通常通過紫外線進行消毒;人的手雙手一般用化學消毒。12、采用轉(zhuǎn)基因方法將人的凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫眩嘤隽宿D(zhuǎn)基因羊。但是人的凝血因子只存在于轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中。這說明,在該轉(zhuǎn)基因山羊中,只有乳腺細胞中存在人凝血因子基因,而其他細胞中不存在。13、DNA連接酶與DNA聚合酶都是催化磷酸二酯鍵的形成,但前者

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