艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室生物安全

生物安全防護(hù)三原則1.安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置和措施（一級防護(hù)）2.實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求（二級防護(hù)）3.嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和規(guī)程等方面采取綜合措施來達(dá)到：確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染的目的。

第一頁，共36頁。一級屏障（primarybarrier）是操作者和被操作對象之間的隔離，也稱一級隔離如生物安全柜分3級-I、II、III級個(gè)體防護(hù)裝備口罩、面具、眼鏡，防護(hù)衣、帽、褲、鞋、靴、襪、手套、正壓服等實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的內(nèi)容包括：第二頁，共36頁。二級防護(hù)屏障(secondarybarrier)

實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)設(shè)計(jì)構(gòu)成二級防護(hù)屏障1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的安全要求，把實(shí)驗(yàn)室分為清潔區(qū)、半污染和污染區(qū)。2.空調(diào)通風(fēng)的氣流方向永遠(yuǎn)保持：新風(fēng)→HEPA→清潔區(qū)→半污染區(qū)→污染區(qū)→HEPA→外排。3.III級生物安全實(shí)驗(yàn)室的負(fù)壓值為:

污染區(qū):-（40±5）Pa;半污染區(qū):-（20±5）Pa第三頁，共36頁。三是：建立嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序及安全管理規(guī)程第四頁，共36頁。實(shí)驗(yàn)室安全管理現(xiàn)狀

1、單位領(lǐng)導(dǎo)重視不夠2、有制度、執(zhí)行不嚴(yán)、措施不力

3、安全意識有待增強(qiáng)、存在僥幸心理

4、管理沒有完全到位，措施不落實(shí)5、實(shí)驗(yàn)室條件簡陋和布局不合理（臨床實(shí)驗(yàn)室）

6、缺少系統(tǒng)的安全知識和專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)

7、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)條件有待改善

8、實(shí)驗(yàn)室感染時(shí)有發(fā)生

9、責(zé)任不明確，管理有難度

10、對實(shí)驗(yàn)室安全管理重要性認(rèn)識不足

生物安全管理工作任重道遠(yuǎn)！第五頁，共36頁。范圍本章規(guī)定了艾滋病實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防。適用于全國各級各類艾滋病實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防。第六頁，共36頁。規(guī)范性引用文件《醫(yī)務(wù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護(hù)工作指導(dǎo)原則（試行）》中華人民共和國衛(wèi)生部，2004年5月31日頒布，2004年6月1日起實(shí)施。《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2008，2009年7月1日起實(shí)施。《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則（WS233-2002）》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，2002-12-03發(fā)布，2003-08-01實(shí)施。GuidelinesfortheSafeTransportofInfectiousSubstancesandDiagnosticSpecimens.WHO1997.《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》中華人民共和國衛(wèi)生部2002-11-15發(fā)布，2003-04-01起實(shí)施。第七頁，共36頁。HIV相關(guān)檢測的生物安全級別4.1HIV抗體檢測（包括篩查和確證實(shí)驗(yàn)）、抗原檢測和相關(guān)的免疫學(xué)檢測應(yīng)在符合Ⅱ級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。4.3HIV核酸提取和檢測均應(yīng)在符合Ⅱ級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。4.4HIV病毒株應(yīng)保存在符合Ⅲ級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室；HIV陽性樣品，包括全血、血清、血槳和其他組織（液）、核酸提取物應(yīng)保存在符合BSL-2要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室。第八頁，共36頁。5生物安全保證措施5.1建立安全制度實(shí)驗(yàn)室主任是實(shí)驗(yàn)室安全的第一責(zé)任人，對實(shí)驗(yàn)室工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，負(fù)責(zé)制定全面的實(shí)驗(yàn)室安全管理制度并監(jiān)督落實(shí)。所有工作人員都應(yīng)無條件遵守實(shí)驗(yàn)室安全管理制度，保護(hù)自己和他人的安全。艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立下列安全制度，每年都應(yīng)對安全制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其落實(shí)情況進(jìn)行檢查和修訂，并有記錄。第九頁，共36頁。5.1.1實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序（S-SOP）。5.1.2意外事故處理預(yù)案，主要是生物安全意外事故。內(nèi)容包括應(yīng)急處理、登記和報(bào)告、調(diào)查和處理。5.1.3信息安全及保密制度：與HIV/AIDS檢測相關(guān)的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，包括送檢單、檢測記錄、樣品登記、報(bào)告單及工作人員年度檢測結(jié)果等，不得對無關(guān)人員透露檢測結(jié)果第十頁，共36頁。5.2培訓(xùn)和管理5.2.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行全員安全培訓(xùn)并強(qiáng)化“普遍性防護(hù)原則”安全意識，所有的血液、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在的傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。所有管理和檢測人員都應(yīng)接受省級以上艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室主持的安全培訓(xùn)，包括上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受管理人員的監(jiān)督。第十一頁，共36頁。5.2.2必須對新上崗人員進(jìn)行安全教育和培訓(xùn)，使他們清楚實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，通過考核等方式確認(rèn)他們具備安全操作的能力后方可單獨(dú)工作。5.2.3必須對新調(diào)入人員、外來合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員進(jìn)行生物安全培訓(xùn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任批準(zhǔn)后，方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。5.2.4生物安全培訓(xùn)和監(jiān)督應(yīng)有客觀詳實(shí)的記錄。5.2.5實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)詳細(xì)了解所有工作人員的教育和培訓(xùn)背景、特長、性格特點(diǎn)等。要根據(jù)人員特點(diǎn)、工作種類、所涉及的生物材料合理安排工作區(qū)域，要定期對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行安全檢查。第十二頁，共36頁。5.3個(gè)人保健和防護(hù)5.3.1遇有手部皮膚有開放性傷口及其他不適于工作的情況，應(yīng)暫停工作。5.3.2皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等，應(yīng)用防水敷料嚴(yán)密覆蓋。5.3.3應(yīng)為每一名在艾滋病實(shí)驗(yàn)室工作的人員提供充足的防護(hù)服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和覆蓋足背的工作鞋。應(yīng)將清潔的防護(hù)服和其他個(gè)人防護(hù)用品置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)的專用處存放。5.3.4實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置應(yīng)急沖洗眼睛裝置。5.3.5工作人員上崗前必須進(jìn)行HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志物檢測，應(yīng)接種乙肝疫苗。應(yīng)每年對工作人員采血檢測HIV抗體，血清應(yīng)長期保留。第十三頁，共36頁。5.3.6進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。5.3.7嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。第十四頁，共36頁。5.3.8實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)穿合適防護(hù)服（白大衣、隔離衣或一次性工作服）、戴手套和口罩、穿實(shí)驗(yàn)室專用的工作鞋。如接觸物的傳染性大、應(yīng)戴雙層手套；含有HIV的液體（樣品或病毒培養(yǎng)液）有可能噴濺時(shí)，應(yīng)戴防護(hù)眼鏡、穿防水（如塑料）圍裙。工作完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，用肥皂和流動水洗手。穿過的污染的防護(hù)服應(yīng)及時(shí)放入污物袋中，消毒后方可洗滌或廢棄。操作過程中，如發(fā)現(xiàn)防護(hù)服被污染應(yīng)立即更換，如手套破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并換上新手套。不能用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。不要將手套清洗或消毒后再次使用，因?yàn)槭褂帽砻婊钚詣┣逑纯墒故痔讓λ耐ㄍ感栽黾?，消毒劑可以引起手套的破損。5.3.9禁止使用口腔吸液管，必須使用移液器來操作實(shí)驗(yàn)的所有液體。第十五頁，共36頁。6污染物處理6.1應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》處置實(shí)驗(yàn)室廢棄物。6.2艾滋病實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。第十六頁，共36頁。6.3艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法6.3.1物理消毒方法6.3.1.1高壓蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;6.3.1.2干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140℃，保持2～3h。6.3.2化學(xué)消毒方法6.3.2.1含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000～5000mg/L）6.3.2.275%乙醇6.3.2.32%戊二醛6.3.3艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室物品常用的消毒方法6.3.3.1廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉。6.3.3.2生物安全柜工作臺面和儀器表面：75%乙醇。6.3.3.3溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。6.3.3.4污染的臺面和器具：2000mg/L次氯酸鈉,也可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。第十七頁，共36頁。7意外事故處理發(fā)生意外事故時(shí)，應(yīng)針對事故的類型立即進(jìn)行緊急處理，主要包括：7.1皮膚針刺傷或切割傷，應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗，盡可能擠出損傷處的血液，用70%乙醇或其它消毒劑消毒傷口。7.2皮膚污染：用水和肥皂沖洗污染部位，并用適當(dāng)?shù)南緞┙?，?0%乙醇或其它皮膚消毒劑。7.3粘膜污染：用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。7.4衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進(jìn)行消毒處理。第十八頁，共36頁。7.5污染物潑濺：小范圍污染物潑濺，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理和清洗。發(fā)生大范圍污染物潑濺事故時(shí)，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場，查清情況，確定消毒的程序。7.6發(fā)生空氣污染時(shí)，可采用低溫蒸汽甲醛氣體對空氣進(jìn)行消毒，但甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。第十九頁，共36頁。7.7如果發(fā)生重大潑濺事故，應(yīng)采取以下措施進(jìn)行：7.7.1從污染處疏散人員，但要防止污染擴(kuò)散；7.7.2控制污染擴(kuò)散，鎖門并禁止人員進(jìn)入；7.7.3通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)、安全負(fù)責(zé)人等，查清情況，確定消毒處理的程序；7.7.4必要時(shí)可進(jìn)行生物安全柜和/或?qū)嶒?yàn)室的低溫蒸汽甲醛氣體消毒，使用這種方法生物安全柜和/或?qū)嶒?yàn)室必須密閉，人員必須離開。具體操作可按說明書執(zhí)行。7.7.5溢漏處可用經(jīng)消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋；消毒劑作用10－15分鐘后，移走吸水性物質(zhì)，用消毒劑沖洗，用水清洗。第二十頁，共36頁。7.8意外及事故的登記、報(bào)告和檢測7.8.1對重大意外和事故必須進(jìn)行登記，對職業(yè)暴露事故應(yīng)填寫“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”（附表9）。內(nèi)容包括：7.8.1.1意外和事故發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及詳細(xì)經(jīng)過。詳細(xì)記錄職業(yè)暴露發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及經(jīng)過；暴露方式；損傷的具體部位、程度；暴露物種類（培養(yǎng)液、血液或其它體液）和含有HIV的情況；7.8.1.2事故處理方法和經(jīng)過，包括專家或領(lǐng)導(dǎo)赴現(xiàn)場指導(dǎo)和處理的情況。處理方法及經(jīng)過；是否采用暴露后預(yù)防藥物，詳細(xì)記錄用藥情況、首次用藥時(shí)間（暴露后幾小時(shí)或幾天）、藥物毒副作用情況（包括肝腎功能化驗(yàn)結(jié)果）、用藥的依從性。7.8.1.3隨訪和檢測的日期、項(xiàng)目和結(jié)果。第二十一頁，共36頁。7.8.2對重大意外和事故必須進(jìn)行報(bào)告和檢測7.8.2.1發(fā)生重大事故時(shí)，在緊急處理的同時(shí)要立即向主管領(lǐng)導(dǎo)和專家報(bào)告。同時(shí)抽血檢測HIV抗體，暴露后4周、8周、12周、6個(gè)月要定期檢測。7.8.2.2發(fā)生小型事故時(shí)可在緊急處理后立即將事故情況和處理方法報(bào)告主管領(lǐng)導(dǎo)和專家。第二十二頁，共36頁。8職業(yè)暴露后預(yù)防職業(yè)暴露指醫(yī)務(wù)人員從事診療、護(hù)理、檢驗(yàn)等工作過程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他銳器刺破皮膚，有可能被艾滋病病毒感染的情況。職業(yè)暴露也包括其他行業(yè)的工作人員，如警察、公安、司法等部門的工作人員，羈押或勞教機(jī)構(gòu)、戒毒所和殯葬業(yè)的工作人員，在工作過程中被艾滋病病毒感染者或艾滋病病人的血液、體液污染皮膚、粘膜或者刺破皮膚等情況。第二十三頁，共36頁。職業(yè)暴露發(fā)生后，通常應(yīng)遵循四條原則：及時(shí)處理原則，報(bào)告原則，保密原則，知情同意原則。發(fā)生職業(yè)暴露以后，可以服用抗病毒藥物，進(jìn)行暴露后預(yù)防。艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防（PostexposureProphylaxis，PEP）包括急救、對暴露級別的評估、對暴露源的評估、預(yù)防性用藥、報(bào)告與保密。第二十四頁，共36頁。8.1局部急救處理：發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后應(yīng)實(shí)行急救。應(yīng)立即實(shí)施以下局部處理措施：8.1.1刺激出血：如皮膚有傷口，應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液。8.1.2用洗手液和流水清洗傷口或污染的皮膚。如果是粘膜，應(yīng)用大量生理鹽水沖洗粘膜。8.1.3.受傷部位的傷口沖洗后，應(yīng)當(dāng)用消毒液，如：75%酒精或者0.5%碘伏進(jìn)行消毒，并包扎傷口；8.1.4到艾滋病專業(yè)防治機(jī)構(gòu)進(jìn)行進(jìn)一步咨詢和處理。第二十五頁，共36頁。8.2對暴露感染的危險(xiǎn)進(jìn)行評估發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后，所在醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)組織專業(yè)人員對暴露的級別和暴露源的病毒載量水平進(jìn)行分析、綜合評估HIV感染的危險(xiǎn)，必要時(shí)邀請本省或國家艾滋病專家參加分析和評估。根據(jù)暴露級別和暴露源病毒載量的水平估計(jì)HIV感染的危險(xiǎn)，確定是否進(jìn)行預(yù)防性用藥及采取何種預(yù)防方案。第二十六頁，共36頁。8.2.1對暴露的評估8.2.1.1輕度暴露：指皮膚被實(shí)心針刺傷或表皮傷，或粘膜接觸少量（幾滴）感染性液體。8.2.1.2重度暴露：指皮膚被空心針刺傷、深部刺傷，被可見到有血液的器械刺傷或器械曾放置于病人的動脈和靜脈。粘膜接觸大量感染性液體（大量血液噴濺）。8.2.2對暴露源的評估如果暴露源沒有HIV的檢測結(jié)果，最好做快速HIV抗體檢測。如果暴露源有急性HIV綜合征的癥狀，應(yīng)同時(shí)檢測病毒載量。8.2.2.1HIV陽性1類：無癥狀HIV感染或已知病毒載量<1500cp/ml。8.2.2.2HIV陽性2類：有癥狀HIV感染，艾滋病期，急性血清學(xué)陽轉(zhuǎn)，或已知高病毒載量第二十七頁，共36頁。8.3確定是否需要藥物預(yù)防及其方案根據(jù)暴露的類型及暴露源的狀況，確定是否需要進(jìn)行藥物預(yù)防，及采取何種暴露后預(yù)防（PEP）方案。8.3.1皮膚受傷暴露8.3.1.1HIV陽性1類/輕度暴露，可以采用基礎(chǔ)PEP方案。8.3.1.2HIV陽性1類/重度暴露，可以采用擴(kuò)大PEP方案。8.3.1.3HIV陽性2類/輕度暴露，可以采用擴(kuò)大PEP方案。8.3.1.4HIV陽性2類/重度暴露，可以采用擴(kuò)大PEP方案。第二十八頁，共36頁。8.3.2粘膜或不完整皮膚暴露8.3.2.1HIV陽性1類/少量暴露，可以考慮基本PEP方案8.3.2.2HIV陽性1類/大量暴露，可以采用擴(kuò)展PEP方案8.3.2.3HIV陽性2類/少量暴露，可以采用基本PEP方案8.3.2.4HIV陽性2類/大量暴露，可以采用擴(kuò)展PEP方案第二十九頁，共36頁。8.4暴露后預(yù)防方案8.4.1基本PEP方案：指聯(lián)合使用2種核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。齊多夫定（AZT）600mg/dbid+拉米夫定（3TC）150mgbid；拉米夫定（3TC）150mgbid+司他夫定（d4T）30～40mgbid；去羥基苷（ddI）250mgbid+司他夫定（d4T）40mgbid8.4.2擴(kuò)展PEP方案：在基本方案的基礎(chǔ)上，加一種蛋白酶抑制劑。茚地那韋（IDV；Crixivan）800mgq8h空腹時(shí)服用；奈非那韋（NFV；Viracept）750mgtid進(jìn)食時(shí)服用；依非韋倫（EFV；Sustiva）600mgqn；阿巴卡韋（ABC）300mgbid8.4.3確定暴露后預(yù)防方案還要考慮在我國注冊批準(zhǔn)藥物的品種，根據(jù)我國的實(shí)際，可考慮的是雙汰芝（AZT與3TC聯(lián)合制劑）、去羥肌苷（ddI）加司坦夫定（d4T）等。第三十頁，共36頁。8.5暴露后預(yù)防的時(shí)間：預(yù)防性用藥應(yīng)在暴露后立即開始，一般在1h之內(nèi)服藥效果最好。對于感染危險(xiǎn)性很高的暴露者，即使間隔時(shí)間很長（比如1～2周），也應(yīng)考慮使用預(yù)防性治療；因?yàn)榧词共荒芊乐垢腥?，早期治療對HIV急性感染也有好處。由于服用4周AZT才有一定保護(hù)作用，如果無很大的副作用，預(yù)防性治療用藥時(shí)間應(yīng)持續(xù)4周。第三十一頁，共36頁。8.6暴露后預(yù)防的監(jiān)測：使用PEP以