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隨著血栓與止血檢驗(yàn)在臨床科室的廣泛應(yīng)用,凝血項(xiàng)目的檢測(cè)已成為出血性疾病和血栓性疾病的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目;也成為手術(shù)患者術(shù)前篩查有無(wú)凝血系統(tǒng)疾病的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目;也是判斷抗凝和溶栓治療監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵指標(biāo)。第一頁(yè),共55頁(yè)。內(nèi)容導(dǎo)讀一、血栓及止血基本理論二、凝血項(xiàng)目測(cè)定的原理及臨床意義三、全自動(dòng)凝血分析儀的檢測(cè)方法及原理四、凝血標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)五、凝血檢測(cè)相關(guān)問(wèn)題第二頁(yè),共55頁(yè)。一、血栓及止血基本理論
1、血液凝固2、凝血因子及其命名3、凝血過(guò)程4、瀑布學(xué)說(shuō)5、抗凝及溶栓治療監(jiān)測(cè)的指標(biāo)第三頁(yè),共55頁(yè)。1、血液凝固
血液凝固是血液由液體狀態(tài)轉(zhuǎn)為凝膠狀態(tài)的過(guò)程,簡(jiǎn)稱(chēng)為凝血。
機(jī)體的凝血系統(tǒng)是非常精妙的平衡系統(tǒng),由凝血與抗凝兩方面組成,正常生理狀態(tài)下兩者維持著動(dòng)態(tài)平衡,血液在血管中維持著流動(dòng)狀態(tài),而血管損傷時(shí)便快速形成凝塊,當(dāng)止血功能障礙時(shí)便發(fā)生血栓栓塞或出血現(xiàn)象。第四頁(yè),共55頁(yè)。第五頁(yè),共55頁(yè)。第六頁(yè),共55頁(yè)。電鏡下的血凝塊第七頁(yè),共55頁(yè)。
血液凝固(瀑布學(xué)說(shuō))該學(xué)說(shuō)認(rèn)為血液凝固過(guò)程基本上是一系列凝血因子有限水解的過(guò)程,凝血過(guò)程一旦開(kāi)始,各個(gè)凝血因子便一個(gè)激活另一個(gè),形成一個(gè)“瀑布”樣的反應(yīng)鏈直至血液凝固。每個(gè)凝血因子都被其因子或其他有關(guān)因素激活,最后生成纖維蛋白。
第八頁(yè),共55頁(yè)。2、凝血因子及其命名
概念:把在血液和組織中直接產(chǎn)凝血的物質(zhì)統(tǒng)稱(chēng)為凝血因子
因子II、VII、IX、X都是在肝臟合成的,合成時(shí)需維生素K參與,因此也稱(chēng)為維生素K依賴(lài)因子。第九頁(yè),共55頁(yè)。
3、凝血過(guò)程包含:三條途徑或兩個(gè)系統(tǒng)①內(nèi)源性凝血途徑:指由因子X(jué)II被激活到IXa-VIIIa-Ca2+-PF3復(fù)合物形成的過(guò)程。②外源性凝血途徑:指從組織因子(TF)釋放入血到TF-VIIa-Ca2+復(fù)合物形成的過(guò)程。③共同途徑:指從因子X(jué)的激活到纖維蛋白形成的過(guò)程,它是內(nèi)、外源凝血系統(tǒng)的共同凝血階段。第十頁(yè),共55頁(yè)。凝血過(guò)程內(nèi)源凝血途徑外源凝血途徑共同凝血途徑第十一頁(yè),共55頁(yè)。4、凝血過(guò)程(瀑布學(xué)說(shuō))第十二頁(yè),共55頁(yè)。1、口服抗凝藥監(jiān)測(cè):PT,(華法林,香豆素類(lèi)等):2、肝素治療監(jiān)測(cè):APTT,TT,AT-III(抗凝血酶III)3、溶栓治療監(jiān)測(cè):(鏈激酶,尿激酶,蛇毒等)一級(jí)監(jiān)測(cè):PT,TT,F(xiàn)IB二級(jí)監(jiān)測(cè):D-Dimer(D-二聚體),F(xiàn)DP(纖維蛋白降解產(chǎn)物)PLG(纖溶酶原),a2-AP(a2-抗纖溶酶)。5、抗凝及溶栓治療監(jiān)測(cè)的指標(biāo)第十三頁(yè),共55頁(yè)。
二、凝血項(xiàng)目測(cè)定的原理及
臨床意義1、凝血酶原時(shí)間測(cè)定2、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定3、凝血酶時(shí)間測(cè)定4、纖維蛋白原測(cè)定5、D-二聚體測(cè)定第十四頁(yè),共55頁(yè)。
【原理】在受檢血漿中加入過(guò)量的組織凝血活酶(人腦、兔腦、胎盤(pán)及肺組織等的浸出液)和鈣離子,使凝血酶原變?yōu)槟?,后者使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。觀察血漿凝固所需時(shí)間即凝血酶原時(shí)間?!静襟E】血漿+組織因子+鈣離子觀察凝固時(shí)間【參考值】
PT(凝血酶原時(shí)間):10-14s
PTA(活動(dòng)度):80%-120%PTR(比值)INR(國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值):
1、凝血酶原時(shí)間測(cè)定(prothrombintime,PT)
第十五頁(yè),共55頁(yè)。
【結(jié)果報(bào)告形式】
凝血酶原時(shí)間(PT):大于正常3秒以上為異常。凝血酶原活動(dòng)度(PTA)=PTR×100%PT比值(PTR)=患者PT/正常對(duì)照PT國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)=PTRISI
1、凝血酶原時(shí)間測(cè)定(prothrombintime,PT)
INR:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值ISI:國(guó)際敏感指數(shù)
第十六頁(yè),共55頁(yè)。1、凝血酶原時(shí)間測(cè)定(prothrombintime,PT)
【分析流程】50μl血漿100μlPT試劑溫育3分鐘------檢測(cè)第十七頁(yè),共55頁(yè)?!九R床應(yīng)用】1、是反映外源性凝血系統(tǒng)最常用的篩查試驗(yàn)。2、是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的首選指標(biāo)。3、是維生素K缺乏的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。
【異常意義】1、PT延長(zhǎng)見(jiàn)于:
①先天性凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏。
②后天性缺乏,見(jiàn)于DIC、嚴(yán)重肝病、維生素K缺乏等。2、PT縮短見(jiàn)于:DIC早期高凝狀態(tài)、血栓性疾病、心肌梗死等。3、口服抗凝劑的監(jiān)測(cè)。1、凝血酶原時(shí)間測(cè)定(prothrombintime,PT)
第十八頁(yè),共55頁(yè)。
世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦應(yīng)用口服抗凝劑時(shí)
【INR的允許范圍】:非髖部外科手術(shù)前1.5-2.5;髖部外科手術(shù)前2.0-3.0;深靜脈血栓形成2.0-3.0;治療肺梗塞2.0-4.0;預(yù)防動(dòng)脈血栓形成3.0-4.0;1、凝血酶原時(shí)間測(cè)定(prothrombintime,PT)
第十九頁(yè),共55頁(yè)?!驹怼吭诳鼓獫{中,加入足量的活化接觸因子激活劑和部分凝血活酶(代替血小板的磷脂),再加入適量的鈣離子即可滿(mǎn)足內(nèi)源性抗凝血的全部條件。從加入鈣離子到血漿凝固所需的時(shí)間即稱(chēng)為活化部分凝血活酶時(shí)間?!静襟E】血漿+FXII激活劑+部分凝血活酶+鈣離子觀察凝固時(shí)間.【參考值】正常對(duì)照為20~35s,超過(guò)正常對(duì)照10s以上為異常。
2、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(Activatedpartialthromboplastintime,APTT)第二十頁(yè),共55頁(yè)。50μl血漿
2、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(Activatedpartialthromboplastintime,APTT)【分析流程】樣品量血漿50μl試劑量APTT試劑50μl25mmol/L氯化鈣溶液50μl50μlAPPT試劑50μl的氯化鈣溶液1分鐘加熱
3分鐘加熱-----------檢測(cè)第二十一頁(yè),共55頁(yè)。
2、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(Activatedpartialthromboplastintime,APTT)【臨床應(yīng)用】
1、是檢查內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是否正常的篩查試驗(yàn)。
2、用于證實(shí)先天性或獲得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ是否缺陷。
3、是普通肝素治療監(jiān)測(cè)的首選指標(biāo)。第二十二頁(yè),共55頁(yè)。
2、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(Activatedpartialthromboplastintime,APTT)【異常意義】1、延長(zhǎng):(1)見(jiàn)于因子ⅧⅨ和Ⅺ水平減低,如甲型血友病、乙型血友病等。(2)嚴(yán)重的凝血酶原、因子Ⅴ、Ⅹ和纖維蛋白原缺乏。如肝臟疾病、阻塞性黃疸、應(yīng)用肝素以及低(無(wú))纖維蛋白原血癥。(3)纖容活力增強(qiáng),如繼發(fā)性、原發(fā)性纖溶以及血循環(huán)中含有纖維蛋白(原)降解物(FDP)。
2、縮短(1)高凝狀態(tài),如DIC的高凝血期,促凝物質(zhì)進(jìn)入血流以及凝血因子的活性增高等。(2)血栓性疾病,如心肌梗塞、不穩(wěn)定性心絞痛、腦血管病變、糖尿病伴血管病變、肺梗死、深靜脈血栓形成、妊高征和腎病綜合征等。第二十三頁(yè),共55頁(yè)。
【原理】在受檢血漿中加入標(biāo)準(zhǔn)化的凝血酶溶液后,在凝血酶的作用下纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,記錄血漿凝固所需的時(shí)間為凝血酶時(shí)間。
【步驟】血漿+凝血酶觀察凝固時(shí)間
【參考值】正常對(duì)照為14~21s,大于正常對(duì)照3s以上為異常。
3、凝血酶時(shí)間測(cè)定(Thrombintime,TT)第二十四頁(yè),共55頁(yè)。
3、凝血酶時(shí)間測(cè)定(Thrombintime,TT)【分析流程】50μl血漿100μl凝血酶試劑溫育3分鐘------檢測(cè)第二十五頁(yè),共55頁(yè)。
3、凝血酶時(shí)間測(cè)定(Thrombintime,TT)【臨床應(yīng)用】1、用于判定血栓前狀態(tài)或血栓性疾病的篩查項(xiàng)目。2、用于纖維蛋白形成障礙或懷疑重度纖維蛋白原缺乏的篩查。3、肝素誘導(dǎo)凝血酶時(shí)間延長(zhǎng)和纖維蛋白形成障礙的鑒別診斷。。第二十六頁(yè),共55頁(yè)。
3、凝血酶時(shí)間測(cè)定(Thrombintime,TT)
【異常意義】
1、延長(zhǎng):
①見(jiàn)于肝素增多或類(lèi)肝素抗凝物質(zhì)增多。如SLE、肝病、腎病等,低(無(wú))纖維蛋白血癥。
②纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)增多、如DIC、原發(fā)性纖溶等。③肝素抗凝治療、體外循環(huán)、血液透析等。
2、縮短:見(jiàn)于血標(biāo)本有微小凝塊或鈣離子存在時(shí)。第二十七頁(yè),共55頁(yè)。4、纖維蛋白原(FibrinogenFIB或Fbg)測(cè)定:【測(cè)定原理】Clauss法,也叫凝血酶法。為WHO推薦的測(cè)定Fbg的參考方法。即在被檢血漿中加入過(guò)量的凝血酶,血漿即凝固,其凝固時(shí)間與纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān),從國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品Fbg參比血漿測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中可獲得Fbg濃度?!緟⒖挤秶浚?.00-4.00g/L第二十八頁(yè),共55頁(yè)。
4、纖維蛋白原(FibrinogenFIB或Fbg)測(cè)定:【分析流程】10μl血漿90ulOwren’sVeronal緩沖液50μl凝血酶試劑3分鐘加熱------檢測(cè)第二十九頁(yè),共55頁(yè)。
4、纖維蛋白原(FibrinogenFIB或Fbg)測(cè)定:【異常意義】1、減低:(<1.5g/L)見(jiàn)于肝臟疾病、DIC中晚期、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)、低(無(wú))纖維蛋白原血癥、溶栓治療等。2、增高:纖維蛋白原是一種急性時(shí)相蛋白,其增加往往是機(jī)體的一種非特異反應(yīng)。常見(jiàn)于下列疾病:急性感染,惡性腫瘤、心機(jī)梗塞、外科術(shù)后、血栓前狀態(tài)或血栓性疾病。【臨床應(yīng)用】1、在溶栓時(shí)、抗凝治療時(shí)、手術(shù)前監(jiān)測(cè)凝血功能。2、是預(yù)防血栓形成的獨(dú)立因素。3、腫瘤病人化療后監(jiān)測(cè)Fbg,防止Fbg降低時(shí)出現(xiàn)大出血。第三十頁(yè),共55頁(yè)。5、D-二聚體測(cè)定(儀器分析法)【原理】免疫比濁法
將待測(cè)物質(zhì)相對(duì)應(yīng)的單克隆抗體包被在聚苯乙烯膠乳顆粒上,當(dāng)標(biāo)本中含有D-二聚體時(shí),單克隆抗體即與交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物(D-二聚體)的交聯(lián)區(qū)域結(jié)合。單克隆抗體能觸發(fā)凝集反應(yīng),引起濁度的增加。儀器在800nm處通過(guò)對(duì)濁度改變的監(jiān)測(cè),將吸光度轉(zhuǎn)換成濃度值,由此獲得樣本中D-二聚體的含量?!緟⒖贾怠?-1mg/L第三十一頁(yè),共55頁(yè)。5、D-二聚體測(cè)定(儀器分析法)【臨床應(yīng)用】1、用于彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的早期診斷。2、用于血栓疾病的診斷和溶栓療效的觀察。3、用于肝炎病情的觀察。4、在血液病方面的臨床應(yīng)用。5、慢性支氣管炎急性發(fā)作期合并肺部感染。6、在深靜脈血栓、急性心梗、肺栓塞、腦梗死診斷中的應(yīng)用。第三十二頁(yè),共55頁(yè)。5、D-二聚體測(cè)定(儀器分析法)【臨床意義】1、D-二聚體被視為DIC早期診斷的首選標(biāo)志物。2、D-二聚體可做為溶栓療效觀察的一個(gè)特異性指標(biāo)。3、D-二聚體含量的升高幅度與肝炎病情的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。4、D-二聚體是唯一反映凝血和纖溶的理想指標(biāo)。5、D-二聚體是目前鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶的理想指標(biāo)。6、D-二聚體被視為體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)的分子標(biāo)志物。7、D-二聚體升高不能診斷血栓的形成部位卻能夠提示體內(nèi)是否有血栓的形成。第三十三頁(yè),共55頁(yè)。血凝四項(xiàng)手工法操作步驟(試管法)項(xiàng)目PTAPTTTT血漿100ul100ul100ulAPTT—100ul—混勻后將試劑和標(biāo)本置于37°水浴箱PT200ul——CaCl2—100ul—TT——200ul
觀察凝固時(shí)間第三十四頁(yè),共55頁(yè)。三、全自動(dòng)凝血分析儀的檢測(cè)
方法及原理1、儀器檢測(cè)功能2、儀器檢測(cè)方法及原理第三十五頁(yè),共55頁(yè)。1、儀器檢測(cè)功能:
SysmexCA-7000及CS-5100全自動(dòng)凝血分析儀檢測(cè)項(xiàng)目有十幾種,常規(guī)的檢驗(yàn)項(xiàng)目有PT、APTT、TT、Fbg、D-二聚體、FDP等。兩臺(tái)儀器檢測(cè)原理相同,具有全自動(dòng)濃度稀釋分析功能、自動(dòng)再檢、自動(dòng)連鎖篩選等功能,全自動(dòng)進(jìn)樣架進(jìn)樣、全能隨機(jī)分析、急診隨時(shí)插入分析。采用高頻振蕩混勻技術(shù),能夠保證樣本和試劑充分混勻,四組檢測(cè)波長(zhǎng)能夠滿(mǎn)足不同廠家試劑的需求。第三十六頁(yè),共55頁(yè)。2、儀器檢測(cè)方法:
全自動(dòng)血凝分析系統(tǒng)CA-7000用于凝血、抗凝、纖維蛋白溶解系統(tǒng)因子的檢測(cè),系統(tǒng)采用以下三種檢測(cè)方法:
1)、凝固法
2)、
發(fā)色底物法
3)、免疫分析法注:凝固法采用了散射光加百分比凝固測(cè)定原理,能有效地避免溶血、脂血和及黃疸標(biāo)本對(duì)凝固分析測(cè)定干擾第三十七頁(yè),共55頁(yè)。(一)凝固法(檢測(cè)原理):對(duì)固定數(shù)量的血漿進(jìn)行了一定時(shí)間的預(yù)熱之后,把試劑加進(jìn)去。被加進(jìn)了試劑的樣品再暴露到光底下,然后在凝固的過(guò)程中(即纖維蛋白原向纖維蛋白的轉(zhuǎn)變),隨著散射光強(qiáng)度的變化,就可以檢測(cè)到血漿渾濁度的變化。通過(guò)散射光強(qiáng)度的變化,就可以得到一個(gè)凝固曲線(xiàn),通過(guò)百分比檢測(cè)方法就可以知道血漿凝固的時(shí)間。第三十八頁(yè),共55頁(yè)。1.光學(xué)檢測(cè)方法(散射光檢測(cè)方法)CA-7000使用的是光學(xué)檢測(cè)方法,而且在凝固的過(guò)程中,隨著散射光強(qiáng)度的變化,可以檢測(cè)到血漿的渾濁度的變化。從一個(gè)光源發(fā)出的光(660nm的波長(zhǎng))到達(dá)這個(gè)樣品。樣品由于渾濁而使光變得離散起來(lái)。散射光被光電二極管接收,光電二極管再把接收到的光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娮有盘?hào)。這些電子信號(hào)通過(guò)一個(gè)微型計(jì)算機(jī)的存儲(chǔ)和計(jì)算,就可以得到凝固的時(shí)間。第三十九頁(yè),共55頁(yè)。2.凝固點(diǎn)檢測(cè)方法(百分比檢測(cè)方法)在樣品中加入凝固試劑之后,在凝固開(kāi)始之前,將散射光的強(qiáng)度定義為0%;而在凝固完成的那一刻,將散射光的強(qiáng)度定義為100%。這樣從凝固曲線(xiàn)中,就可以找到散射光的強(qiáng)度從剛開(kāi)始到預(yù)先設(shè)定的檢測(cè)百分比的時(shí)間。這就是的凝固時(shí)間。(在下圖中,凝固檢測(cè)點(diǎn)被設(shè)置為50%。)有了這個(gè)方法,即使散射光的強(qiáng)度發(fā)生一點(diǎn)點(diǎn)的變化,凝固的時(shí)間也可以被檢測(cè)到。散射光的強(qiáng)度血漿凝固的時(shí)間第四十頁(yè),共55頁(yè)。(二)免疫分析法(檢測(cè)原理)將待測(cè)物質(zhì)相對(duì)應(yīng)的抗體包被在大小均一,直徑為15-60nm的膠乳顆粒上。包被后的抗體與抗原結(jié)合后形成的復(fù)合物體積增大,引起透射光的變化,由吸光度變化推算出所檢測(cè)物質(zhì)含量。儀器采用發(fā)色底物單元的透射光檢測(cè)系統(tǒng)。第四十一頁(yè),共55頁(yè)。(三)發(fā)色底物法(檢測(cè)原理)
首先人工合成含某種活性酶裂解位點(diǎn)的化合物,且化合物連接上產(chǎn)色物質(zhì),在檢測(cè)過(guò)程中產(chǎn)色物質(zhì)可被解離下來(lái),使被檢樣品中產(chǎn)生顏色變化,根據(jù)酶活性同吸光度的變化、酶活性同所需檢測(cè)物質(zhì)含量間存在一定的數(shù)量關(guān)系,由吸光度變化推算出所檢測(cè)物質(zhì)含量。產(chǎn)色物質(zhì)一般選用連接對(duì)硝基苯胺(PNA)。儀器采用透射光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。光源發(fā)出的光經(jīng)過(guò)三種濾光片可以分隔成405nm、575nm、800nm的光.選用405nm波長(zhǎng)的光照射樣本,光電二級(jí)管接收到透射光并轉(zhuǎn)換成電信號(hào),通過(guò)微計(jì)記錄每分鐘吸光度變化。利用吸光度變化和濃度的關(guān)系來(lái)檢測(cè)相對(duì)應(yīng)的待測(cè)物濃度百分比活性)。第四十二頁(yè),共55頁(yè)。四、凝血標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)第四十三頁(yè),共55頁(yè)。標(biāo)本采集注意事項(xiàng)①抗凝劑與血液的比例要準(zhǔn)確,比例1:9。②采血時(shí)防止組織損傷,避免外源因子進(jìn)入。③避免從輸液管取血,以防標(biāo)本稀釋或用藥影響。④抽血時(shí)的壓力、時(shí)間長(zhǎng)短會(huì)影響局部血液的濃縮,可影響血小板釋放和某些凝血因子的活性。⑤標(biāo)本盡快送檢、最好在2h內(nèi)檢測(cè)完畢。⑥分離血漿時(shí),離心速度和時(shí)間要充足,務(wù)必除去血小板,特別是用于肝素治療監(jiān)測(cè)時(shí),因殘留血小板中的PF4可影響肝素的效果。第四十四頁(yè),共55頁(yè)。不合格標(biāo)本第四十五頁(yè),共55頁(yè)。第四十六頁(yè),共55頁(yè)。DIC的實(shí)驗(yàn)診斷篩查試驗(yàn):PLT、PT、APTT、FIB。確診試驗(yàn):TT、FDP、D-D、3P、PLG、α2-AP、AT-III。分子標(biāo)志物:F1+2、FPA、TAT、PAP第四十七頁(yè),共55頁(yè)。五、凝血測(cè)定的相關(guān)問(wèn)題第四十八頁(yè),共55頁(yè)。1、實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)指標(biāo)1)APTT:通常在應(yīng)用肝素6小時(shí)后檢測(cè)APTT,一般以比對(duì)照延長(zhǎng)1.5倍為宜,不宜超過(guò)正常對(duì)照的2-2.5倍。2)FIB:應(yīng)維持FIB定量在,較為適宜,極限不應(yīng)低于1.0g/L。否則易發(fā)生出血。3)TT:溶栓治療效果判斷一般認(rèn)為應(yīng)維持在正常對(duì)照的倍為宜。極限不應(yīng)超過(guò)正常對(duì)照的3-4倍。4)FDP:正常值血清含量﹤10mg/L。溶栓治療維持FDP值在300-400mg/L。第四十九頁(yè),共55頁(yè)。1)PLT<100×109/L2)Fg<1.5g/L,進(jìn)行性下降3)PT時(shí)間延長(zhǎng)3s以上4)3P試驗(yàn)陽(yáng)性5)D-dimer,TT延長(zhǎng)6)優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間縮短2、DIC的診斷試驗(yàn)第五十頁(yè),共55頁(yè)。4、嚴(yán)重肝病所致的
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