DB32T 4056-2021優(yōu)良食味半糯粳稻品質(zhì)

江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布ICS65.020.20CCSB2江蘇省地DB32方標(biāo)準(zhǔn)DBT4056—2021Qualityofsemiglutinousjaponicaricewithgoodtaste前言蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。江蘇省農(nóng)作物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口?；ā⑽汉Ｑ?、趙春芳、魏曉東、陳濤、趙慶勇、趙凌、姚姝、周麗慧、路凱、梁文化。優(yōu)良食味半糯粳稻品質(zhì)檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則及判定規(guī)則。范性引用文件，GB350稻谷GBT1354大米GBT90糧食檢驗(yàn)一般規(guī)則GBT491糧食、油料檢驗(yàn)扦樣、分樣法GBT15682糧油檢驗(yàn)稻谷、大米蒸煮食用品質(zhì)感官評(píng)價(jià)方法GBT91—2017優(yōu)質(zhì)稻谷GBT719稻谷整精米率檢驗(yàn)法GBT2294糧油檢驗(yàn)大米膠稠度的測(cè)定NY/T83米質(zhì)測(cè)定方法NY/T593食用稻品種品質(zhì)NY/T2639稻米直鏈淀粉的測(cè)定分光光度法定義半糯粳稻semi-glutinousjaponicarice等)的粳稻。優(yōu)良食味半糯粳稻semi-glutinousjaponicaricewithgoodtasteidentificationmolecularmarker質(zhì)量要求.2定等質(zhì)量指標(biāo)B一二三≥級(jí)≤123)含量/%13.0mm≥分≥法A種率檢驗(yàn)：按照GB/T17891—2017，附錄B執(zhí)行。精米率檢驗(yàn)：按照GB/T21719執(zhí)行。5.6直鏈淀粉(干基)含量檢驗(yàn)：按照NY/T2639執(zhí)行。規(guī)則判定規(guī)則等級(jí)判定等級(jí)分類半糯粳稻。(規(guī)范性)A.1原理低直鏈淀粉含量突變基因Wxmp、Wxmq和Wxmw是在Wxb基因的第4、第5和第6外顯子發(fā)生了單堿基突(圖A.1)。僅在第4外顯子第53位堿基發(fā)生G-A突變的為Wxmp基因，同時(shí)在第4外顯子第53位堿基發(fā)GA發(fā)生T-C突變的為Wxmq基因，僅在第6外顯子第62位堿基發(fā)生A/C突變的為Wxmw基因。利用四引物擴(kuò)增受阻突變體系PCR技術(shù)可針對(duì)第4和第6外顯子的變異位點(diǎn)進(jìn)行分子標(biāo)記檢測(cè)；利用成對(duì)引物可針對(duì)第5外顯子的變異位點(diǎn)進(jìn)行PCR擴(kuò)增和序列分析，根據(jù)突變位點(diǎn)的有無(wú)和類型，來(lái)判斷是否含有突變基因Wxmp、Wxmq和Wxmw。A.2儀器設(shè)備R成像系統(tǒng)、微量可調(diào)移液器(2uL、10uL、100uL、1000uL)。A.3試劑與溶液A.3.1DNA提取試劑A.3.2PCR擴(kuò)增試劑A.3.3電泳試劑DNATAE酸染料。A.3.4DNA回收試劑試劑盒。A.5分子標(biāo)記序列A用于鑒定Wxmq或Wxmp的分子標(biāo)記序列分子標(biāo)記鑒定，四引物序列為：正向外引物(Wxmq/Wxmp-O-F)序列為5'-ATGTTGTGTTCTTGTGTTCTTTGCAGGC-3'，反向外引物(Wxmq/Wxmp-O-R)序列為5'-GTAGATCTTCTCACCGGTCTTTCCCCAA-3'，正向內(nèi)引物(Wxmq/Wxmp-I-F)序列為5'-GGGTGAGGTTTTTCCATTGCTACAATCG-3'，反向內(nèi)引物(Wxmq/Wxmp-I-R)序列為5'-GTCGATGAACACACGGTCGACTCAAT-3'。：正向引物(Wxmq-F)序列為5'-GGCTTCACGCAACGGCGCTACAAATAG-3'，反向引物(Wxmq-R)序列為5'-CCATTCGCCTGCAAAGAACACAAGAAC-3'。AWxmw序列正向外引物(Wxmw-O-F)序列為5'-GCTTAGCTTCCACTGGTGATTTCA-3'，反向外引物(Wxmw-O-R)序列為5'-GTAGATGCCATTGGGCTGGTAGT-3'，WxmwIF5'-AACAACCCATACTTCAAAGGAACATC-3'，反向內(nèi)引物(Wxmw-I-R)序列為5'-TCTTGAGATCAATTGTAACTCCCCAT-3'。L伸5min，4℃保存。反應(yīng)在PCR擴(kuò)增儀(熱循環(huán)儀)上進(jìn)行。R伸5min，4℃保存。反應(yīng)在PCR擴(kuò)增儀(熱循環(huán)儀)上進(jìn)行。伸5min，4℃保存。反應(yīng)在PCR擴(kuò)增儀(熱循環(huán)儀)上進(jìn)行。A.8.1瓊脂糖凝膠制備 A.8.2上樣樣品制備A.8.3電泳A.8.4凝膠成像源下進(jìn)行PCR擴(kuò)增產(chǎn)物觀察，拍照備用。用成A.9結(jié)果分析A9.1分子標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果分析點(diǎn)為雜合位點(diǎn)。圖A.3Wxmq第5外顯子突變位點(diǎn)的核苷酸序列分析(M：分子量標(biāo)準(zhǔn)；1,4,8,9為含第5