干細胞臨床應(yīng)用

干細胞臨床應(yīng)用第1頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四人類許多重大疾病如糖尿病、帕金森氏癥、亨廷頓氏癥都與關(guān)鍵細胞或器官的不可逆損傷有關(guān)；世界上每天都有數(shù)以十萬計的嚴重腎臟衰竭病人、心臟衰竭病人掙扎在生死線上，等待器官更換。然而，現(xiàn)行的器官移植卻存在諸多的問題，如：供體器官資源緊缺；傳統(tǒng)的器官移植方法造價昂貴；傳統(tǒng)的器官移植存在異體排斥等等。第2頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四科學(xué)家們一直希望找到一種辦法，在體外開設(shè)自身身體部件的“生產(chǎn)車間”，利用自己的材料，為自己生產(chǎn)“零部件”，以用于衰老、壞死、損傷組織或器官的替換。但是，生命好像在和我們開玩笑：癌癥細胞可以穩(wěn)定而持續(xù)地增長；而健康的、正常的細胞離開身體后，很難有效地繁殖。第3頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞研究的突破性進展為生命開拓了新的契機

第4頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

StemCell第一節(jié)干細胞生物學(xué)第二節(jié)干細胞的臨床應(yīng)用和研究狀況5第5頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四MEDICALCELLBIOLOGYMEDICALCELLBIOLOGY6

一、WhatisStemCell?

是具有自我更新、高度增殖和多向分化潛能的細胞群體，即這些細胞可通過分裂維持自身細胞的特性和大小，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。第6頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四7

二.干細胞特性1.干細胞的形態(tài)和生化特點形態(tài)特點：圓形或橢圓形，體積較小，核質(zhì)比較大，核中多為常染色體。

生化特點：a.具有較高端粒酶活性;b.具有不同的生化標(biāo)志：角蛋白15、nestin（巢素蛋白）。第7頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

2，干細胞的增殖特點

能力強：高度增殖是干細胞生物學(xué)特性之一。自穩(wěn)性：會自我更新維持自身數(shù)目的恒定。（self-maintenance）8干細胞維持自穩(wěn)性的機制：對稱分裂和不對稱分裂

第8頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

9

干細胞的對稱分裂和不對稱分裂對稱分裂（symmetrydivision）不對稱分裂（asymmetrydivision）干細胞

分化細胞

干細胞

分化細胞第9頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四10

3，干細胞的分化特點

1）.多潛能性第10頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四11

在不同生長因子刺激下干細胞可表現(xiàn)出不同分化潛能第11頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四12

（內(nèi)胚層）

胃上皮（中胚層）

骨、軟骨、平滑肌、橫紋?。ㄍ馀邔樱?/p>

神經(jīng)表皮、神經(jīng)節(jié)、復(fù)層鱗狀上皮人胚胎干細胞具分化的多潛能性

小鼠皮下注射

混合組織人胚胎干細胞第12頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四13

（1）去分化

一種干細胞向其前體細胞的逆向轉(zhuǎn)化的過程。2）.去分化和轉(zhuǎn)分化的能力第13頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四（2）轉(zhuǎn)分化（transdifferentiation）

一種組織類型的干細胞在適當(dāng)條件下分化為另一種組織類型細胞的過程。

例一：將成年雄性小鼠的造血干細胞移植到雌鼠體內(nèi)，3天后在雌鼠的神經(jīng)膠質(zhì)細胞中檢測到Y(jié)染色體的存在，證明成體動物的造血干細胞可轉(zhuǎn)分化成為神經(jīng)膠質(zhì)細胞。第14頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四15

例二：造血干細胞向骨骼肌細胞的轉(zhuǎn)分化第15頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四全能干細胞多能干細胞單能干細胞按分化潛能按發(fā)育狀態(tài)(來源)胚胎干細胞embryostemcell成體干細胞三，干細胞的分類第16頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四全能干細胞（Totipotentstemcell）

是指具有無限分化潛能,能分化成所有組織和器官的干細胞。換句話說,也就是具有形成完整個體分化潛能。17第17頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四多能干細胞：（pluripotentstemcell）具有分化出多種細胞組織的潛能。如造血干細胞、神經(jīng)干細胞。單能干細胞：（multipotentstemcell）只能向一種或兩種密切相關(guān)的細胞類型分化。如上皮組織基底層的干細胞，肌肉中的成肌細胞。18第18頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四多能干細胞具有增殖、分化兩種功能。

例如骨髓造血干細胞就是典型的多能干細胞。造血干細胞一般條件下處于休止?fàn)顟B(tài)(Go期)，一定條件下能大量增殖、分化，然后由定向干細胞再分化成血液中至少12種類型的血細胞。19第19頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四第20頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四二.干細胞來源上分:來源于胚胎---胚胎干細胞ESC

（EmbryonicStemCell）胚胎性生殖細胞EGC

（EmbryonicGermCell）來源于成體---成體組織來源的干細胞ASC（Adult-derivedStemCell）21第21頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四1981年，最早埃文斯(Evans)和考夫曼(Kaufman)從小鼠早期胚胎中分離出胚胎干細胞并在體外培養(yǎng)建立細胞系。1995年，美國從恒河猴囊胚中分離并克隆建立了第一個靈長類動物的胚胎干細胞系(一)胚胎干細胞第22頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四第23頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四體細胞核移植（SCNT）是得到多能性干細胞的另一種途徑第24頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四成體誘導(dǎo)干細胞（iPS）第25頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四誘導(dǎo)產(chǎn)生的多功能性干細胞2006年，Takahashi和Yamnaka將幾個轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入已分化的小鼠皮膚成纖維細胞，進而獲得了類似于胚胎干細胞的多能性干細胞，稱之為“誘導(dǎo)產(chǎn)生的多功能性干細胞”（inducedpluripotentstemcells,iPS細胞）。這一研究明確地證實了分化的細胞可以通過少數(shù)幾個因子的外源導(dǎo)入而被重編程到具有多能性的狀態(tài)，因而受到了整個生命科學(xué)領(lǐng)域的廣泛關(guān)注。第26頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四1.胚胎干細胞（embryonicstemcell,ES細胞）ESC定義：指從著床前的內(nèi)細胞團或原始生殖細胞獲得的一種具有多潛能性、可發(fā)育成為各種細胞、同時可保持不分化狀態(tài)而持續(xù)生長的克隆細胞系。經(jīng)體外分化抑制培養(yǎng)分離的一種全能性細胞?？梢苑只扇魏我环N組織類型的細胞。27第27頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四2.胚胎干細胞的生物學(xué)特性

(1)ES細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與核型：

各種動物的ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu)，細胞體積小、核大、有1個或多個核仁。

28第28頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

(2)ES細胞的生長特性：增殖速度：18－24h分裂增殖一次

hES必須在含有白血病抑制因子（LIF）的培養(yǎng)基保持不分化狀態(tài)。29第29頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四鳥巢狀生長保持未分化的ES細胞

第一個人體胚胎干細胞（ES細胞)30第30頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四31第31頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

(3)ES細胞高度分化潛能：

第32頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四（二）成體干細胞1.定義：存在于成人各種組織中，具有自我更新和向前分化為一種或多種成熟功能細胞的幼稚細胞。意義：1.負責(zé)更新死亡細胞，維持正常個體、組織、器官的結(jié)構(gòu)和功能的完整性。2.病例情況下，負責(zé)分化和增殖，修復(fù)組織損傷。33第33頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四2.成體干細胞的生物學(xué)特性：（1）具有自我更新和分化潛能（2）數(shù)量少（3）存在于特定的微環(huán)境中（4）處于相對靜止?fàn)顟B(tài)（5）體積小，細胞漿少，細胞核較大（6）成體干細胞的數(shù)量和活性隨年齡增加而減少第34頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四3.成體干細胞的分布第35頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四胚胎干細胞成體干細胞①來自胚泡的內(nèi)細胞群來源于骨髓、外周血、角膜、視網(wǎng)膜、腦、骨骼肌、齒髓、肝、皮膚、胃腸道粘膜層和胰腺等②發(fā)育全能性，可誘導(dǎo)分化為機體分化較局限，部分成體干細胞（造血干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞、神經(jīng)干細胞）有一定跨系、跨胚層的“可塑性”③無限的自我更新能力病理條件下才顯出一定的自我更新潛能④增殖能力強，便于應(yīng)用增殖能力較弱，故不能完全取代胚胎干細胞4.與胚胎干細胞的比較第36頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四37間胚層組織類型干細胞轉(zhuǎn)分化為同胚層另一組織類型細胞間胚層組織類型干細胞轉(zhuǎn)分化為內(nèi)胚層組織類型細胞間胚層組織類型干細胞轉(zhuǎn)分化為外胚層組織類型細胞由此認為，成體干細胞有較大的可塑性。血細胞肌細胞血細胞肝細胞血細胞腦細胞5.成體干細胞的可塑性：第37頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四第二節(jié)干細胞的醫(yī)學(xué)應(yīng)用和研究狀況38第38頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四391999年，Science雜志編者Bloom：“干細胞給人類提供了極大的可能性：用干細胞修復(fù)病損的臟器和細胞缺損”，他還說“最終可能用干細胞制成像腎、肝這樣復(fù)雜的器官”。第39頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

干細胞研究成為繼人類基因組大規(guī)模測序之后最具活力、最有影響和最有應(yīng)用前景的生命學(xué)科研究領(lǐng)域，1999年干細胞研究被美國《科學(xué)》雜志評為1999年度世界十大科學(xué)之冠，2000年干細胞研究再次被《科學(xué)》雜志評為該年度世界十大科學(xué)成就之一。

第40頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞的應(yīng)用最基本的，多能干細胞可以幫助我們理解人類發(fā)育過程中的復(fù)雜事件人體多能干細胞研究也能大大地改變研制藥品和進行安全性實驗的方法人體多能干細胞最為深遠的潛在用途是用來生產(chǎn)細胞和組織，它們可用于所謂的“細胞療法”。

第41頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四第42頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四43源于胚胎干細胞的細胞已能或可能治療許多疾病神經(jīng)細胞心肌細胞B型胰島細胞軟骨細胞白細胞皮膚細胞肝細胞骨細胞視細胞骨骼肌細胞帕金森病心肌梗死糖尿病骨關(guān)節(jié)炎白血病燒傷和創(chuàng)傷肝炎骨質(zhì)疏松癥視網(wǎng)膜退化肌營養(yǎng)不良治療第43頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四44成體干細胞中，造血干細胞（包括骨髓、臍血、羊膜和外周血中的干細胞）已用于治療某些遺傳病或慢性病。第44頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四45成體干細胞及其子代細胞移植或動員腦組織內(nèi)的干細胞治療神經(jīng)退行性疾病已獲初步成效。動物實驗證實移植的神經(jīng)元可替代修復(fù)已損壞的神經(jīng)通路。臨床試驗也證實細胞替代治療可使癥狀緩解。第45頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞治療的特點1.一次性或幾次介入，永久性治療；2.不需要完全了解疾病發(fā)生的確切機理。第46頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四47造血干細胞移植

臨床應(yīng)用

與新進展第47頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四什么是造血干細胞？造血干細胞(HemapoieticStemCell,HSC)是指一群在特定時期能夠分裂的未分化細胞，具有自我更新能力和產(chǎn)生高度特異性的功能后代細胞。第48頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

胸腺、淋巴結(jié)造血干細胞定向造血干細胞造血祖細胞（CFU-GEMM）CFU-LCFU-ECFU-GMCFU--MKCFU-GCFU-M原淋原紅原粒原單原巨幼淋早幼紅早幼粒幼單幼巨中幼紅中幼粒顆粒巨大小淋巴晚幼紅晚幼粒產(chǎn)板巨網(wǎng)織紅裸巨

淋巴

紅細胞

粒細胞單核細胞血小板CD34+MNC第49頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四什么是造血干細胞移植？

造血干細胞移植(HemapoieticStemCellTransplantation,HSCT)是指將異體或自體的造血干細胞植入到受者體內(nèi)，使其造血及免疫功能恢復(fù)。第50頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四根據(jù)供體的不同，HSCT分：

1、同基因(Syngeneic)：指同卵雙胎，供受者基因型完全相同。2、異基因(Allogeneic)：非同卵雙胎，人類白細胞抗原（HLA）相合，來自患者的兄弟姐妹，無關(guān)供髓者，臍帶血。

3、自體(Autologous)：自體解救措施。第51頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四根據(jù)HSCT來源的不同分為：骨髓移植：1～3×108有核細胞/kg

2.外周血造血干細胞移植：>2×106CD34+細胞/kg

3.臍帶血干細胞移植：>3×107有核細胞/kg

第52頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四主要適應(yīng)癥(EBMT)淋巴瘤和骨髓瘤：53％，其中異基因4％，自體96％。白血?。?2％，其中異基因76％，自體24％，包括AML、ALL、CML、MDS、CLL。實體腫瘤：7％，其中異基因8％，自體92％，包括、神經(jīng)母細胞瘤、腦膠質(zhì)細胞瘤、胚胎細胞瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌等。非惡性疾?。?％，其中異基因92％，自體8％，包括再生障礙性貧血、范可尼氏貧血、地中海貧血、嚴重聯(lián)合免疫缺陷癥、自身免疫性疾病等。第53頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞移植過程自體造血干細胞移植：異體造血干細胞移植：供者細胞無須凍存，直接輸注。

合適患者凍存干細胞動員采集患者預(yù)處理支持治療植活40度水浴第54頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四APBSCT治療步驟和策略1、常規(guī)化療4～5個療程白血病患者達到CR后，鞏固治療4～5次；實體腫瘤消失或進入平臺期。2.外周血干細胞動員、采集及冷凍保存。3.預(yù)處理、細胞回輸。4.并發(fā)癥的防治及支持治療。第55頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四目前常規(guī)動員方案可歸納為2種方式:正常健康人采用：

G-CSF5ug/Kg/d×5-7dorGM-CSF5ug/Kg/d+G-CSF5ug/Kg/d病人作自身移植的動員方案為：化療方案+細胞因子（G-CSForGM-CSF+G-CSF）第56頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四三種不同冷藏方法的優(yōu)缺點1．4℃冰箱（直接冷藏）優(yōu)點：方法簡便，不需配制冷凍保存液。缺點：如>72h，細胞存活率及干細胞回收率明顯減少2．-80℃冰箱（緩慢降溫法）優(yōu)點：操作容易，花費時間短。缺點：需要專箱專用，保存時間只能在3—6個月之間。彌補方法：-80℃冰箱保存2小時后，再置入-176℃的液氮，可長期保存。3.程序降溫儀及-196℃液氮保存優(yōu)點：細胞經(jīng)程序降溫，損傷少，細胞存活率高且干細胞回收率高，保存的時間長。缺點：需要相應(yīng)設(shè)備配置，操作時間長第57頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

預(yù)處理預(yù)處理：指移植前給予患者亞致死劑量的化療和全身放療。預(yù)處理的目的

治療腫瘤最大程度清除患者體內(nèi)殘存的腫瘤細胞為移植的干細胞留出空間，以便于其定位、增殖分化免疫抑制治療非腫瘤性疾病免疫抑制清除異常細胞提供細胞植入的空間第58頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞技術(shù)臨床應(yīng)用

目前的研究表明，當(dāng)組織器官受到損傷時，干細胞被激活，對受損的組織進行修復(fù)重建。但這種自身修復(fù)畢竟是有限的，必須通過移植干細胞才能達到治療相關(guān)疾病的目的。但是成體干細胞由于數(shù)量很少，難于克隆而使其應(yīng)用受到限制。

第59頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四比較成熟的干細胞移植

臨床應(yīng)用￥造血干細胞移植1.下肢缺血性疾病：糖尿病足、血栓閉塞性脈管炎、動脈硬化閉塞癥等。2.股骨頭壞死。3.缺血性心臟?。盒墓！?.失代償期肝硬化。5.神經(jīng)系統(tǒng)疾患：腦梗死、肌萎縮性側(cè)索硬化癥（ALS）、腦脊髓損傷（因創(chuàng)傷、缺血、變性疾病等造成神經(jīng)元損傷）等。第60頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四來源大部分來源于骨髓或經(jīng)動員后采集的外周血干細胞。少數(shù)來源于臍血干細胞。第61頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四采集方法骨髓：密度梯度離心分離細胞。吸取單個核細胞。外周血：生長因子動員后細胞分離機采集單個核細胞。第62頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四糖尿病的干細胞治療第63頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

胚胎干細胞的全能性為研究糖尿病的細胞治療開辟了新途徑。研究人員相繼用不同的方法獲得了分泌胰島素的細胞。

第64頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

用胚胎干細胞誘導(dǎo)為胰島素分泌細胞并用于治療糖尿病的策略：

用細胞因子、天然化學(xué)物質(zhì)與胚胎干細胞共培養(yǎng)，將胚胎干細胞誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細胞。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些因子和特定的培養(yǎng)系統(tǒng)結(jié)合，可以誘導(dǎo)胚胎干細胞分化。

第65頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

科學(xué)家將小鼠的胚胎干細胞誘導(dǎo)分化成能分泌胰島素的類似于胰島的結(jié)構(gòu)。他們先將小鼠的胚胎干細胞培養(yǎng)成類胚體，并在此基礎(chǔ)上誘導(dǎo)出了α、β等多種胰島細胞的細胞群。第66頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

這些細胞在植入糖尿病小鼠的皮下后糾正高血糖水平（未到正常），細胞在植入12天后發(fā)生血管化，其形態(tài)類似于胰腺的胰島，并保持著分泌胰島素的能力。

第67頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

最近的研究結(jié)果表明，人胚胎干細胞也能分化成分泌胰島素的細胞。有實驗室培養(yǎng)了人胚胎干細胞，并讓它們自發(fā)形成類胚體；然后用多種生長因子誘導(dǎo)類胚體分化。第68頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

試驗結(jié)果提示了類胚體可以自發(fā)分化成胰島β細胞。也有實驗進一步證實了人胚胎干細胞可自發(fā)分化為β細胞的現(xiàn)象。

第69頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

類胚體中有1%～3%的細胞是胰島β細胞。在葡萄糖存在的情況下，這些細胞可以向培養(yǎng)基中分泌胰島素。第70頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

由胚胎干細胞向胰島細胞分化的研究剛剛起步，如何完善誘導(dǎo)方案以獲得大量純化的功能性β細胞替代物是今后急需解決的問題。

第71頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

干細胞定向分化為胰島β細胞的研究為糖尿病患者點燃了新的希望,也為研究人員提供了新的突破口,其勿庸置疑的成為治療糖尿病的最佳種子細胞,雖然目前存在很多問題,但隨著干細胞生物學(xué)的發(fā)展,相信將來肯定能克服以上困難,用細胞治療攻克糖尿病。第72頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

干細胞移植在糖尿病足臨床研究

2003年11月-2007年4月治療380例，總有效率達87.2%，使患者疼痛、冷感緩解，行走間距延長，潰瘍愈合，免除了截肢致殘的嚴重后果。第73頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞移植術(shù)在手術(shù)室進行干細胞移植術(shù)患者接受全憑靜脈麻醉MNC配制成（1-6）×108細胞/ml細胞懸液按3cm×3cm間距進行肌肉注射

第74頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

移植后臨床情況

疼痛緩解（87.2%）1-28d

冷感消失（90.8%）1-21d

行走間距延長（44.6%）4-6m

潰瘍縮小愈合（92.3%)3-6m

壞疽好轉(zhuǎn)(20.2%）4-6m第75頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四臨床研究病例選擇2004年7月～2007年4月224例股骨頭壞死患者接受動脈內(nèi)骨髓干細胞移植治療病因皮質(zhì)激素、外傷、飲酒、原因不明診斷髖關(guān)節(jié)X線攝片、MRI、CT核素掃描

第76頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四經(jīng)動脈干細胞移植術(shù)

股動脈穿刺DSA血管造影導(dǎo)管超選插入旋股內(nèi)旋股外閉孔動脈骨髓單個核細胞懸液緩慢灌注入動脈內(nèi)第77頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四治療結(jié)果—臨床指標(biāo)

髖關(guān)節(jié)疼痛緩解率82.7%

行走間距延長54%

關(guān)節(jié)功能改善30.2%

總有效率達80.6%第78頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞移植6m血管造影前后對照第79頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四自體干細胞移植

治療失代償肝硬化36例失代償肝硬化:

乙型肝炎肝硬化27例

酒精肝硬化9例第80頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四術(shù)后1、4、8、12周觀察臨床癥狀：12周1.腹水減輕19例52.7%2.食欲改善28例77.7%3.體力好轉(zhuǎn)20例58.3%4.腹脹減輕17例47.2%第81頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四1.谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）逐漸減低

25例69.4%2.總膽紅素逐漸下降22例61.1%3.白蛋白逐漸升高27例75%4.凝血酶原活動度全部不同程度升高。第82頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四干細胞治療:自體骨髓干細胞、自體間充質(zhì)干細胞、人臍帶間充質(zhì)干細胞治療(2005年德國科學(xué)家率先將骨髓細胞治療肝損傷的研究應(yīng)用于臨床，發(fā)現(xiàn)移植的骨髓干細胞可促進肝臟再生.)第83頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四臍血干細胞新技術(shù)預(yù)防和治療老年性癡呆（AD）

第84頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四老年性癡呆即阿爾茨海默病性癡呆（dementiaAlzheimerDisease）:大腦細胞退化萎縮，細胞密度降低的器質(zhì)性疾病。導(dǎo)致死亡的第4位原因，神經(jīng)科疾病的第1位。多種機制下神經(jīng)元的損傷引起臨床用藥受到限制,抗癡呆藥物的研究與開發(fā)相對困難

背景第85頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四創(chuàng)意主體

一．采集臍血干細胞

二．干細胞保存及體外增殖

三.體外培養(yǎng)神經(jīng)干細胞定向誘導(dǎo)及基因修飾

四．神經(jīng)干細胞的植入及植入后監(jiān)測

第86頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四采集臍血干細胞臍帶靜脈血采集臍血庫密度梯度法有核細胞DMSO處理添加保護劑冷凍管程控降溫自動化監(jiān)探的保存系統(tǒng)第87頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四？干細胞的保存問題第88頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四體外增殖模型SCFGM-CSF5ML增殖前增殖后６０ＭＬ庫血第89頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四？神經(jīng)干細胞進入腦的持續(xù)分化如何克服AD患者腦內(nèi)不利環(huán)境第90頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四神經(jīng)干細胞定向誘導(dǎo)、基因修飾及植入

解凍干細胞神經(jīng)干細胞神經(jīng)干細胞體外基因修飾

體外培養(yǎng)加入優(yōu)勢誘導(dǎo)劑

測定細胞因子發(fā)揮將細胞因子排在該球中包被了細胞因子最大效率的時間（Tx）距球心（R-VTx）的球面上的生物降解球測生物可降解球降解速度（v）損壞腦區(qū)定位

定期復(fù)查植入腦內(nèi)第91頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四R-VTxX=1第92頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四神經(jīng)干細胞定向誘導(dǎo)、基因修飾及植入

解凍干細胞神經(jīng)干細胞神經(jīng)干細胞體外基因修飾

體外培養(yǎng)加入優(yōu)勢誘導(dǎo)劑

測定細胞因子發(fā)揮將細胞因子排在該球中包被了細胞因子最大效率的時間（Tx）距球心（R-VTx）的球面上的生物降解球測生物可降解球降解速度（v）損壞腦區(qū)定位

定期復(fù)查植入腦內(nèi)第93頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四社會價值及其優(yōu)越性治療徹底，無復(fù)發(fā)可能；可行性強；利用自身干細胞，不產(chǎn)生免疫排斥；無需長期用藥，對機體不產(chǎn)生副作用；針對性強，成功率高；一次性治愈，減輕病人痛苦；自身干細胞建庫，無須等待移植源；給生命一種保障，減輕患者經(jīng)濟負擔(dān)。減輕家庭負擔(dān)。提高老年人生活質(zhì)量，享有幸福晚年；一定程度上減輕社會負擔(dān)除用于治療外，亦可用于預(yù)防?？赏麑崿F(xiàn)人類夢寐以求的“永葆青春”的愿望。第94頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四造血干細胞第95頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四造血干細胞移植治療白血病造血干細胞移植是從60年代逐漸發(fā)展起來的一種醫(yī)療技術(shù)，最初是通過抽取供體骨髓而救治，使急性白血病的長期生存率提高到50—70％。為發(fā)展此項技術(shù)作出重要貢獻的美國醫(yī)學(xué)家托馬斯（E.D．Thomas）因此而獲得了1990年度的諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。第96頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四造血干細胞移植過程的示意圖HLA配型供體造血干細胞的采集患者超大劑量放化療預(yù)處理，摧毀其免疫系統(tǒng)供體造血干細胞輸入患者體內(nèi)，重建其免疫系統(tǒng)第97頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四造血干細胞的來源骨髓從外周血富集造血干細胞臍帶血提取干細胞解決HLA配型問題*建立骨髓庫發(fā)達國家現(xiàn)已建立了多達數(shù)百萬人的骨髓庫網(wǎng)絡(luò)．多達70％需要移植的病人可獲捐贈造血干細胞而得以挽救生命*臍帶血干細胞庫第98頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四神經(jīng)干細胞過去認為成年腦內(nèi)沒有干細胞,神經(jīng)細胞終生成活，損傷也是永久的；1988年Frederken等在發(fā)育的胚胎中得到干細胞樣細胞---神經(jīng)干細胞成人腦紋狀體培養(yǎng)出干細胞樣CNS多潛能細胞，后在腦內(nèi)不同部位都發(fā)現(xiàn)了神經(jīng)干細胞的存在第99頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四成人腦中至少在3個腦區(qū)存在：室管膜下層（subventricularzone,SVZ）,海馬的齒狀回和嗅回。人類胚胎來源的神經(jīng)干細胞在體外培養(yǎng)，能分化產(chǎn)生神經(jīng)元、星型細胞和少突膠質(zhì)細胞等。對成體神經(jīng)干細胞行為的研究為腦損傷修復(fù)及神經(jīng)細胞功能性疾病的治療提供了新的思路。第100頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四神經(jīng)干細胞的分布Back第101頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四腎臟疾病的干細胞治療第102頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四雄性小鼠骨髓細胞移植雌性小鼠雌性小鼠腎臟遷移腎小管上皮細胞分化腎小管內(nèi)第103頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四

結(jié)果表明，骨髓內(nèi)的干細胞能橫向分化為腎小管上皮細胞，有助于腎小管上皮細胞的正常更新和腎小管損傷后的再生修復(fù)，為干細胞移植治療腎小管壞死提供了理論依據(jù)。第104頁，共121頁，2023年，2月20日，星期四原理：

1.胚胎干細胞一方面可以新生腎小球的毛細血管內(nèi)皮細胞、臟層細