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探究酵母菌種群數(shù)量的變化第1頁/共20頁探究:培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化目的要求1、學(xué)習(xí)利用血球計數(shù)板進行微生物計數(shù)的方法2、實驗探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化3、注意樣方法的應(yīng)用4、體會影響種群數(shù)量變化的因素第2頁/共20頁1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厭氧(可進行有氧呼吸和無氧呼吸)回顧思考:出芽生殖第3頁/共20頁例如:酵母菌的種群數(shù)量在營養(yǎng)條件有限的情況下呈S型增長。探究:培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化第4頁/共20頁第5頁/共20頁
介紹:血球計數(shù)板的構(gòu)造1、血球計數(shù)板:是顯微鏡上的外掛物件,可用來測量細胞,細菌等一些微小物體的長度,還有就是測量數(shù)量,如單位體積細胞的數(shù)量。血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個平臺.中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面,刻有一個方格網(wǎng).第6頁/共20頁化放大后的方格網(wǎng)計數(shù)室IHGFEDCBA25×1616×252、方格網(wǎng)的構(gòu)成:方格網(wǎng)上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室,計數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格;另一種是大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格.但是不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造;它們都有一個共同的特點,即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成。第7頁/共20頁3、使用方法:將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片.將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi).加蓋蓋玻片.第8頁/共20頁計數(shù)室有長×寬:1mm×1mm為例,2mm×2mm,3mm×3mm等深度均為0.1mm。5、單位換算:大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3.換算為1mL為0.1/1000即1/10000mL即10-4mL。
4、計數(shù)室的規(guī)格:第9頁/共20頁如果使用16格×25格規(guī)格的計數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).我們用規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù).(五點取樣法)出芽的酵母菌,芽體達到母細胞大小一半時,即可作為兩個菌體計算。
6、如何計數(shù)呢?第10頁/共20頁每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)計算公式(如長和寬各為1mm):(1)16格×25格的血球計數(shù)板計算公式酵母細胞數(shù)/ml=(100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100)×400×稀釋倍數(shù)10-4即(100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100)×4×
106×稀釋倍數(shù)(2)25格x16格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)/ml=(80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80)×400×稀釋倍數(shù)10-4即(80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80)×4×
106×稀釋倍數(shù)7、第11頁/共20頁課本中大方格的長和寬各為2mm,深度為0.1mm,其體積為0.4mm3.換算為1mL為0.4/1000即4/10000mL即4×10-4mL
則:每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)計算公式(如長和寬各為2mm):(1)16格×25格的血球計數(shù)板計算公式酵母細胞數(shù)/ml=(100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100)×400×稀釋倍數(shù)4×10-4即(100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100)×106×稀釋倍數(shù)(2)25格x16格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)/ml=(80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80)×400×稀釋倍數(shù)即(80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80)×106×稀釋倍數(shù)4×10-4第12頁/共20頁使酵母菌混合均勻。可以設(shè)置對照。用無菌水代替培養(yǎng)液培養(yǎng),取樣、計數(shù)、對比。或不需要,因不同時間取樣已形成對照。需要。盡量減少誤差。對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值。第13頁/共20頁
時間(d)
酵母菌細胞數(shù)量(×106個/mL)A組B組C組A1A2A3平均B1B2B3平均C1C2C3平均1234567第14頁/共20頁
.
當(dāng)遇到位于方格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數(shù)下方和左方線上的酵母細胞).稀釋培養(yǎng)液。稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可.
8、血球計數(shù)板的清潔血球計數(shù)板使用后,用自來水沖洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干,或用95%的乙醇,無水乙醇,丙酮等有機溶劑脫水使其干燥.通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物.若不干凈,則必須重復(fù)清洗直到干凈為止第15頁/共20頁
酵母菌的種群數(shù)量在營養(yǎng)條件有限的情況下是呈S型增長。但之后會下降。第16頁/共20頁2.根據(jù)各組平均數(shù)據(jù)畫出的增長曲線有沒有什么總趨勢?如果有,作出說明。如果設(shè)計了無菌水的對照,也畫出增長曲線。第17頁/共20頁0
酵母菌細胞數(shù)(×106個/mL)時間對照組實驗組3.影響酵母菌的種群數(shù)量增長的因素可能是什么?第18頁/共20頁1.取少量酵母菌液放入血球計數(shù)板直接計數(shù),測得的數(shù)目是()
A.活細胞數(shù)B.死細胞數(shù)
C.菌落數(shù)D.細胞總數(shù)A2、探究酵母菌的種群數(shù)量實驗中,某學(xué)生的部分操作過程如下:(1)把酵母菌培養(yǎng)液放置于冰箱中培養(yǎng),(2)從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液計數(shù),(3)到第七天取樣計數(shù),請糾正其錯誤:(1)___________________________(2)__________________________(3)_________________.該同學(xué)用25格x16格,其中長和寬各為2mm,深度為0.1mm的血球計數(shù)板計數(shù),用五點取樣法讀取酵母菌有4
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