亂七八糟09本檢驗(yàn)開(kāi)題報(bào)告

IL-10作用下MRL小鼠T淋巴細(xì)胞活化后的增殖情況的研究

姓名:楊菁華專(zhuān)業(yè):醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)指導(dǎo)教師:嚴(yán)丹丹刁騁年級(jí)班級(jí):09級(jí)19班

健康人SLE患者一.研究目的及意義目的：討論IL-10作用下MRL小鼠T淋巴細(xì)胞活

化后的增殖情況，為進(jìn)一步研究IL-10相關(guān)免疫疾病的發(fā)病及進(jìn)展提供有力支持。意義

IL-10通過(guò)與表達(dá)在T淋巴細(xì)胞表面的受體結(jié)合可以抑制T淋巴細(xì)胞的功能，參與對(duì)T細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)。T淋巴細(xì)胞通過(guò)增殖分化發(fā)揮作用，增殖情況的異常與SLE的發(fā)病和進(jìn)展有一定關(guān)系。在MRL小鼠中IL-10R1的改變可能會(huì)引起IL-10對(duì)T淋巴細(xì)胞功能的抑制性調(diào)節(jié)喪失，成為SLE發(fā)病的因素。二、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀SLE是典型的自身免疫性疾病，免疫學(xué)異常是本病發(fā)生的關(guān)鍵。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)本病中B淋巴細(xì)胞的研究比較多，對(duì)T淋巴細(xì)胞的相關(guān)研究比較少。IL-10

作為抑制性的細(xì)胞因子具有多種功能，被發(fā)現(xiàn)與多種自身免疫病發(fā)病及進(jìn)展相關(guān)，被證實(shí)在SLE發(fā)病中起重要作用

。3.IL-10與其特異性受體IL-10R結(jié)合發(fā)揮作用（1）目前IL-10R1的異常引起IL-10生理功能的異常已被重視。

（2）淋巴細(xì)胞表面IL-10R1表達(dá)情況。

1）人類(lèi)未活化：表達(dá)較高水平IL-10R1

活化后：IL-10R1表達(dá)水平有所下調(diào)

2）小鼠：未活化：表面不表達(dá)IL-10R1

活化后：IL-10R1短暫表達(dá)

活化后C57BL/6小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞IL-10R1表達(dá)情況，來(lái)源文獻(xiàn)（刁騁等.2011）anti-CD3和anti-CD28刺激后的CD8+T淋巴細(xì)胞的IL-10R1的表達(dá)情況,實(shí)線為CD8+T淋巴細(xì)胞，陰影為對(duì)照。來(lái)源文獻(xiàn)（ParthaSarathiBiswasetal.2007）3)R1受體在胞漿中呈區(qū)段性分布,MRL小鼠IL-10R1基因在抑制區(qū)段發(fā)生基因突變，導(dǎo)致負(fù)調(diào)節(jié)喪失。4.Ｔ淋巴細(xì)胞在識(shí)別抗原后，經(jīng)過(guò)增殖，分化為效應(yīng)性淋巴細(xì)胞發(fā)揮免疫應(yīng)答作用。據(jù)此我認(rèn)為有必要對(duì)IL-10作用下MRL小鼠T淋巴細(xì)胞活化后的增殖情況進(jìn)行研究。三、研究?jī)?nèi)容和預(yù)期目標(biāo)研究?jī)?nèi)容：

１．闡明C57BL/6小鼠和MRL小鼠中IL-10對(duì)活化后T淋巴細(xì)胞增殖的影響并比較兩種小鼠T細(xì)胞的增殖情況。

２．闡明MRL小鼠中IL-10對(duì)活化后T淋巴細(xì)胞增殖功能的調(diào)節(jié)能力的喪失與SLE發(fā)病的關(guān)系。

C57BL/6小鼠

MRL小鼠預(yù)期目標(biāo)：MRL小鼠中IL-10對(duì)活化后T淋巴細(xì)胞增殖功能的調(diào)節(jié)能力喪失，使T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答水平過(guò)強(qiáng)，與SLE發(fā)病有密切關(guān)系。四、課題擬采用的研究方法步驟研究方法：MTT法。2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)各組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。研究步驟：

1.取各組小鼠脾細(xì)胞。2.采用尼龍毛法去除B淋巴細(xì)胞。3.Anti-CD3和anti-CD28共同刺激下活化T淋巴細(xì)胞。