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文檔簡介
微生物的群體生長與環(huán)境條件第1頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六主要內(nèi)容微生物群體生長周期;微生物群體生長的連續(xù)培養(yǎng)方法;環(huán)境條件對微生物生長的影響。第2頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六分批培養(yǎng)中細(xì)菌群體的生長細(xì)菌群體的生長曲線第3頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六細(xì)菌群體的生長周期根據(jù)微生物的生長速率(growthrateconstant),即每小時(shí)的分裂代數(shù)不同,一般可以將典型生長曲線分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。
第4頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六A延滯期(lagphase)特點(diǎn):生長速率常數(shù)等于零;細(xì)胞形態(tài)變大或增長;核酸含量提高;合成代謝活躍,易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶;對外界不良條件反應(yīng)敏感。影響因素:接種齡;接種量;培養(yǎng)基成分第5頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六B指數(shù)期(exponentialphase)特點(diǎn):生長速率常數(shù)最大;細(xì)胞進(jìn)行平衡生長,菌體內(nèi)各成分最均勻;酶系活躍,代謝旺盛
在指數(shù)
期三個(gè)最重要的參數(shù)是繁殖代數(shù);生長速率常數(shù);代時(shí)。
影響因素:菌種;營養(yǎng)成分;營養(yǎng)物濃度;培養(yǎng)溫度第6頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六C穩(wěn)定期(stationaryphase)特點(diǎn):生長速率常數(shù)等于0。穩(wěn)定期到來的原因:①營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;②營養(yǎng)物的比例失調(diào),如C/N不合適;③酸、醇、毒素等有害代謝產(chǎn)物的積累;④pH、氧化還原電勢等物化條件越來越不適宜。第7頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六D衰亡期(declinephase)特點(diǎn):整個(gè)群體出現(xiàn)負(fù)增長(R為負(fù)值)。原因:主要是外界的環(huán)境對繼續(xù)生長越來越不利,從而引起細(xì)胞內(nèi)的分解代謝大大超過合成代謝,繼而導(dǎo)致菌體死亡。
第8頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六以二分裂的細(xì)菌為代表,假設(shè)細(xì)菌培養(yǎng)體在對數(shù)期to時(shí)的總菌數(shù)為No,那么到t時(shí)的菌數(shù)Nt=No×2n;式中n為to到t這段時(shí)間內(nèi)細(xì)菌的繁殖代數(shù)。如果用G來表示世代時(shí)間(或倍增時(shí)間):即群體細(xì)胞數(shù)量增加一倍需要的時(shí)間,則:
------------------G=(t-to)/n(1)
----∵------------Nt=No×2n
----∴------------logNt=nlog2+logNo
------------------n=〔logNt-logNo〕/log2=logNt/N0/0.301(2)
將(2)代入(1)式得:
------------------G=0.301(t-t0)/logNt/N0(3)
----通過實(shí)驗(yàn)可測得No、Nt和時(shí)間to、t,由(3)式可計(jì)算出供試微生物的世代時(shí)間G。第9頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六細(xì)菌群體生長的連續(xù)培養(yǎng)
當(dāng)微生物以單批培養(yǎng)的方式培養(yǎng)到指數(shù)期后期時(shí),一方面以一定的速度連續(xù)流進(jìn)新鮮的培養(yǎng)基,并立即攪拌均勻;另一方面以同樣的流速不斷流出培養(yǎng)物。這樣,培養(yǎng)物就達(dá)到了動(dòng)態(tài)平衡,微生物可以長期保持在指數(shù)期的平衡生長狀態(tài)和穩(wěn)定的生長速率上,這種培養(yǎng)方法就叫連續(xù)培養(yǎng)(continuousculture)。
第10頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六連續(xù)培養(yǎng)兩種方式
恒化培養(yǎng):通過控制培養(yǎng)液的添補(bǔ)速度來保持培養(yǎng)菌體的恒定的生長速度。采用的培養(yǎng)液是一種低濃度的限制性養(yǎng)料。
恒濁培養(yǎng):根據(jù)細(xì)菌生長導(dǎo)致培養(yǎng)液中濁度變化來調(diào)節(jié)添補(bǔ)新鮮培養(yǎng)液的流速,從而保持培養(yǎng)基恒定的渾濁度,以控制菌數(shù)的恒定。
第11頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六連續(xù)培養(yǎng)法裝置示意圖第12頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六三、環(huán)境條件對微生物生長和代謝的影響第13頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六四個(gè)主要的環(huán)境因子溫度酸堿度水可給性氧氣第14頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六微生物生長的溫度類型微生物類型
生長溫度范圍(℃)最低
最適
最高分布的主要處所低溫型專性嗜冷-125~1515~20兩極地區(qū)兼性嗜冷-5~010~2025~30海水及食品冷藏箱中溫型10~2025~4040~50哺乳動(dòng)物生活的環(huán)境高溫型嗜熱3045~6070堆肥和沼氣發(fā)酵池等極端嗜熱3070~90100以上溫泉和沿洋底火山口等第15頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六溫度對細(xì)菌生長率的影響第16頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六
EnzymesexhibitaQ10sothatwithinasuitabletemperaturerangetherateofenzymeactivitydoublesforevery10'Criseintemperature.第17頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六注意
最適生長溫度是指某微生物群體生長繁殖速度最快的溫度,代時(shí)也最短。
但它不等于發(fā)酵的最適溫度,也不等于積累代謝產(chǎn)物的最適溫度,更不等于積累某一代謝產(chǎn)物的最適溫度。在較高溫度條件下,細(xì)胞分裂雖然較快,但維持的時(shí)間不長,容易老化。相反,在較低溫度下,細(xì)胞分裂較慢,但維持時(shí)時(shí)間較長,結(jié)果細(xì)胞的總產(chǎn)量反而較高。同樣,發(fā)酵速度與代謝產(chǎn)物積累量之間也有類似的關(guān)系第18頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六菌名最適生長溫度最適發(fā)酵溫度積累產(chǎn)物的最適溫度灰色鏈霉(Streptomycesgriseus)
(產(chǎn)鏈霉素菌種)37℃28℃----產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)
(產(chǎn)青霉素菌種)30℃25℃20℃北京棒桿菌(Corynebacteriumpekinese)
A.S1299(谷氨酸產(chǎn)生菌)32℃33~35℃----第19頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六水可給性(wateravailability)水活度:表示環(huán)境中水對微生物生長可給性高低的指標(biāo),用aw表示。aw值實(shí)質(zhì)上是以小數(shù)來表示與溶液或含水物質(zhì)平衡時(shí)的空氣的相對濕度,即在相同溫度和壓力條件下,密閉容器中該溶液的水飽和蒸汽壓與純水飽和蒸汽壓的比值。
aw=P/P0=RH×100
----式中:P為溶液或含水物質(zhì)的蒸汽壓
----------P0為純水的蒸汽壓
----------RH為空氣的相對濕度第20頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六微生物生長所要求的水活度aw通常在0.66~0.99之間,細(xì)菌生長的最適aw=0.93~0.99,大多數(shù)酵母菌生長的最適aw=0.88~0.91,絲狀真菌在aw=0.8左右第21頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六滲透壓正常細(xì)胞質(zhì)壁分離細(xì)胞第22頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六微生物pH值最低最適最高氧化硫硫桿菌
嗜酸乳桿菌
大豆根瘤菌
原褐固氮菌
亞硝酸細(xì)菌
硝化細(xì)菌
放線菌
酵母菌
黑曲霉1.0
4.0~4.6
4.2
4.5
7.0
3.8
5.0
3.0
1.52.0~2.8
5.8~6.6
6.8~7.0
7.4~7.6
7.8~8.6
6.5~7.5
7.0~8.0
4.8~6.0
5.0~6.04.0~6.0
6.8
11.0
9.0
9.4
12.0
10.0
8.0
9.0不同微生物對氫離子濃度的適應(yīng)范圍第23頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六氧氣對微生物生長的影響按照微生物與氧氣的關(guān)系,把它們分成好氧菌(aerobe)和厭氧菌(anaerobe)兩大類,并可繼續(xù)分為五類:專性好氧菌(strictaerobe):必須在有分子氧的條件下才能生長,有完整的呼吸鏈,以分子氧作為最終的氫受體,細(xì)胞含超氧化物歧化酶和過氧化氫酶。如綠濃桿菌、白喉?xiàng)U菌等。兼性厭氧菌(facultativeaerobe):在有氧或無氧條件下均能生長,但有氧條件下生長得更好。如釀酒酵母、普通變性桿菌。第24頁,共27頁,2023年,2月20日,星期六氧氣對微生物生長的影響微好氧菌(mircoaerophilicbacteria):只能在較低氧分壓下(0.01~0.03巴)才能正常生長的微生物。如霍亂弧菌。耐氧菌(aerotolerantanaerobe):可在有氧條件下進(jìn)行厭氧生活的厭氧菌,即它們的生長不需要氧氣,但氧氣對它們也無害。如乳鏈球菌、乳酸桿菌等。厭氧菌(
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