生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法

生化試劑性能評定及穩(wěn)定性測試流程和方法高開顯生化試劑研發(fā)部.10.26生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第1頁內(nèi)容提要

測試介紹測試主要內(nèi)容分析性能測試穩(wěn)定性測試生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第2頁測試介紹定義：是對事物進行評價過程，是為確定某種事物存在特征或真實性而采取方法和伎倆。目標和意義確保設(shè)計開發(fā)質(zhì)量確保產(chǎn)品質(zhì)量確認產(chǎn)品規(guī)格符合規(guī)格需求生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第3頁測試介紹試劑測試特殊性試劑是由生物或者化學物質(zhì)所組成；試劑是批次生產(chǎn)，同一批次內(nèi)含有均勻性和一致性；試劑是一個含有存放使用期和使用使用期物質(zhì)。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第4頁測試主要內(nèi)容規(guī)格驗證：只是一個客戶角度驗證功效/性能驗證：對產(chǎn)品參數(shù)進行驗證，確保產(chǎn)品質(zhì)量法規(guī)標準符合性驗證臨床性能環(huán)境/安全、可制造性、風險管理等生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第5頁測試主要內(nèi)容-法規(guī)標準符合性SFDA注冊國家標準與行標，如：WS/T124-1999臨床化學體外診療試劑盒質(zhì)量檢驗總則、GB臨床化學體外診療試劑（盒）通用技術(shù)要求（報批稿）企業(yè)標準臨床試驗、注冊檢驗、現(xiàn)場質(zhì)量體系審核CE認證IVD指令：98/79EC協(xié)調(diào)標準質(zhì)量體系，自我測試，自我宣稱，現(xiàn)場質(zhì)量體系審核FDA注冊21CFR820FDA指南文件代理機構(gòu)，文檔審核，現(xiàn)場質(zhì)量體系審核生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第6頁測試主要內(nèi)容-標準分類國際標準（ISO）歐盟標準（EN）國家標準行業(yè)標準企業(yè)標準生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第7頁測試主要內(nèi)容-舉例：歐盟協(xié)調(diào)標準98/79ECIVD指令EN13640穩(wěn)定性測試EN13612性能評定EN375產(chǎn)品標識EN980符號使用EN13641傳染性風險降低ISO13485質(zhì)量控制ISO14971風險管理生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第8頁測試主要內(nèi)容-研發(fā)各階段測試任務(wù)小試階段：確保產(chǎn)品功效實現(xiàn)，確認符合預(yù)期規(guī)格；中試階段：從產(chǎn)品級別進行測試階段，是確保產(chǎn)品符合要求最主要階段；試產(chǎn)階段：主要針對可制造性、生產(chǎn)穩(wěn)定性進行測試，確保能夠按要求生產(chǎn)出合格產(chǎn)品；試用階段：產(chǎn)品都未經(jīng)過市場驗證，試用階段主要是從市場使用角度深入驗證產(chǎn)品性能，也包含對正式生產(chǎn)后生產(chǎn)穩(wěn)定性驗證。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第9頁測試主要內(nèi)容-測試工作流程制訂測試計劃，安排測試資源；設(shè)計測試方案，確定詳細測試項目及可接收標準；測試過程實施；統(tǒng)計數(shù)據(jù)，進行分析，編寫測試匯報。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第10頁測試主要內(nèi)容-方案設(shè)計與編制明確該測試目標與要求；查閱相關(guān)法規(guī)和標準（國家標準、行標、產(chǎn)品標準等等）要求；查閱相關(guān)通用測試方案；確定測試范圍以及詳細測試項目；綜合上述要求，制訂適當測試方案。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第11頁測試主要內(nèi)容-測試方案內(nèi)容該項測試任務(wù)及目標；測試所需資源；測試所使用樣品信息；樣品預(yù)處理過程，測試環(huán)境條件；需要進行測試項目；測試所需要到達標準；其它需要說明內(nèi)容。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第12頁測試主要內(nèi)容-測試匯報內(nèi)容測試所依據(jù)方案；測試包括到樣品；全部得到測試結(jié)果；由測試得到結(jié)論。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第13頁分析性能測試-主要內(nèi)容試劑空白吸光度分析靈敏度線性范圍精密度干擾分析準確度生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第14頁試劑空白吸光度每種試劑都有一定空白吸光度范圍，其改變往往提醒該試劑變質(zhì)；標準上，吸光度上升反應(yīng)，其試劑空白吸光度越低越好，不能超出一個高限。反之亦然；試劑空白吸光度限值，常作為程序參數(shù)輸入儀器，如經(jīng)核查超限，儀器會自動報警，提醒更換試劑；舉例：利用Trinder反應(yīng)為原理檢測試劑會因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第15頁試劑空白吸光度-測試方法測定待檢試劑在測定波長、37℃1℃條件下檢測蒸餾水吸光度A；將試劑更換成蒸餾水，再測定吸光度B；試劑空白吸光度值=A-B。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第16頁分析靈敏度定義：檢測系統(tǒng)可檢測樣本中最低分析物濃度；檢測低限：定性含義；功效靈敏度：定量含義。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第17頁檢測低限（LLD）定義：樣本單次檢測能夠到達非空白檢測響應(yīng)量對應(yīng)分析物量。檢測系統(tǒng)或方法對小于或等于檢測低限分析物量只能匯報“無分析物檢出”。計算：通常預(yù)計95%和97.5%兩種可能性95%可能性：LLD=X(空白)+2×SD(空白)99.7%可能性：LLD=X(空白)+3×SD(空白)生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第18頁檢測低限-疑問？？問題：大于檢測低限響應(yīng)信號說明樣品內(nèi)含有分析物，但方法還不能正確匯報定量結(jié)果；原因：在這么低濃度或其它量值范圍內(nèi)，單次檢測樣品反應(yīng)響應(yīng)量重復(fù)性較差；疑問：在多少檢測響應(yīng)量時才能很好地匯報定量結(jié)果呢？結(jié)論：功效靈敏度。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第19頁功效靈敏度（FS）定義：以天間重復(fù)CV為20%時對應(yīng)檢測限樣本含有平均濃度，確定為檢測系統(tǒng)或方法可定量匯報分析物最低濃度或其它量值限值。注意：為預(yù)計FS，須用多個檢測限濃度來確定在低濃度處精密度表現(xiàn)，從中選擇含有或最近于20%CV值對應(yīng)濃度，為可定量匯報最低濃度。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第20頁線性范圍參考文件：CLSIEP6-A:（定量測量程序線性評價：統(tǒng)計方法）。定義：線性：在給定范圍內(nèi)，提供測量結(jié)果與樣品中被檢測物量直接成百分比能力；線性范圍：測試系統(tǒng)可接收線性范圍，即在此范圍內(nèi)非線性誤差小于要求誤差。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第21頁線性范圍-樣本要求證實系統(tǒng)線性范圍：選取5-7個濃度，每個濃度重復(fù)2次；建立系統(tǒng)線性范圍：使用橫跨期望匯報范圍9-11個濃度。更多點和比預(yù)期匯報范圍大30％范圍，可用降低點來發(fā)覺最寬可能線性范圍；5點被認為是可靠描述線性范圍最小數(shù)：更多點將提供對線性更準確描述及更寬線性范圍，即使有些點需要被刪除。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第22頁線性范圍-可接收基質(zhì)分類理想樣本基質(zhì)：病人樣本混合物；高值樣本-添加了分析物病人樣本混合物：假如將一個濃縮分析物溶液添加到混合物中，盡可能小稀釋病人樣本混合物（推薦小于10％）；低值樣本-用處理過低濃度物質(zhì)或混合物質(zhì)稀釋混合物：假如可能，使用低濃度病人樣本混合物。另外，一定處理能夠減小分析物濃度，比如透析，加熱及層析；

其它。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第23頁線性范圍-樣本添加物選擇使用一些推薦天然材料必須考慮溶解度；必須認真選擇天然材料酶起源以確保酶活性和人起源材料相等，而且添加物不影響結(jié)果；假如能夠得到話，人起源酶可能是最適當選擇，然而這些物質(zhì)通常很昂貴；已證實參考物，一些來自NIST和ACS化學物質(zhì)適合許多普通分析物如葡萄糖，鈉，氯化物等；樣本添加物選擇可參考EP-6A文件：表1。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第24頁線性范圍-注意事項分析次序-隨機臨床主要評價濃度最小分析濃度或線性范圍下限；各種醫(yī)學決定水平；最大分析濃度或線性范圍上限。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第25頁線性范圍-計算方法舉例將血清樣本隨機排列，每個樣本重復(fù)測定3次，計算其平均值；以線性上限物加入量為橫坐標（x），測定結(jié)果均值為縱坐標（y）作線性回歸；計算相關(guān)及各測定平均值和線性回歸值相對偏差（S）等。相對偏差S=（實測平均值－線性回歸值）/線性回歸值生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第26頁精密度參考文件：CLSIEP5-A2（臨床化學設(shè)計精密度評價）；定義：在要求條件下，相互獨立測試結(jié)果之間一致程度。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第27頁精密度-分類批內(nèi)精密度批間精密度儀器內(nèi)不精密度（EP5-A2）生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第28頁精密度-批內(nèi)精密度重復(fù)測試20次；計算均值（X）和標準差（S）；變異系數(shù)生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第29頁精密度-批間精密度三個批次試劑測試樣本各3次；計算均值；按公式計算相對偏差。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第30頁精密度-儀器內(nèi)不精密度操作流程分裝準備2個水平待測樣本；天天取出2個標本，每個項目天天測定2批(間隔不得少于2小時)，雙份測試，共測定20天；在此期間，確保試劑批號、測定參數(shù)和定標系數(shù)不變；離群點檢驗：試驗過程中，如每次雙份測定差值超出初步精密度測定時標準差5.5倍，這對數(shù)據(jù)為“離群點”，應(yīng)棄去并重做；按公式計算結(jié)果。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第31頁精密度-儀器內(nèi)不精密度目標：評價整個系統(tǒng)儀器內(nèi)總不精密度；本試驗中沒有合并可能很主要變異源如校準物和試劑批號不一樣，技術(shù)員/操作者不一樣；影響精密度其它一些原因：如樣本預(yù)處理，測試物穩(wěn)定性，攜帶率和漂移等均包含在內(nèi)；可經(jīng)過合并多設(shè)備，多操作者，多批號試劑和校準液及校準周期（假如適當）而降低，但這通常增加精密度標準差。

生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第32頁精密度-基本要求樣品一定要穩(wěn)定，且應(yīng)與新鮮臨床病人標本性能靠近，穩(wěn)定冷凍混合血清是首選；樣本中分析物含量應(yīng)在該項目標醫(yī)學決定水平處，盡可能做兩個水平精密度試驗；采取冷凍保留樣品一定要注意內(nèi)含分析物穩(wěn)定，要嚴格控制凍融、混勻操作；一個分析系統(tǒng)上檢測數(shù)據(jù)只能反應(yīng)該系統(tǒng)精密度性能，不能代表該項目在全部機型上性能，亦不能代表該檢測系統(tǒng)對全部項目檢測性能。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第33頁分析干擾參考文件：EP7-A（臨床化學檢驗干擾評價）定義：指某一物質(zhì)對某分析物濃度或催化活力測定中任何一步驟影響作用成為分析干擾；分析物（analyte）是標本中準備測定成份；干擾物（interferent）也是標本中一個組分，它不是被分析物，但它改變最終結(jié)果。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第34頁分析干擾-干擾對偏倚影響總分析誤差主要有三個原因：不精密度、方法特有偏差和樣品特有偏差；方法評定經(jīng)常僅評定前兩個；樣本偏差（如干擾）通常被認為是特定樣本單獨問題，而不是方法可被定量特征。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第35頁分析干擾-干擾機制化學作用：如干擾物和試劑競爭或抑制指示反應(yīng)；物理作用：如干擾物含有和分析物相同性質(zhì)，如能產(chǎn)生熒光，顏色等；基體效應(yīng)：干擾物可能改變標本基體物理性質(zhì)，如濁度、黏度等；酶抑制：干擾物能經(jīng)過抑制金屬激活劑、和催化點結(jié)合、或氧化必須巰基等改變酶（分析物或試劑）活力；非特異性：干擾物會和分析物以一樣方式參加反應(yīng)；其它。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第36頁分析干擾-干擾物測試濃度為確定在最壞情況下一個物質(zhì)是否存在干擾，應(yīng)該在試驗室分析患者樣本中期望觀察到最高濃度處進行全方面干擾篩選。藥品和代謝物：匯報治療劑量最高濃度2倍處測試；內(nèi)源性物質(zhì)：確定預(yù)期患者群體期望最高濃度；抗凝血劑和防腐劑：5倍推薦添加濃度；進食物質(zhì)：測試2倍期望最大濃度；注：部分干擾物濃度可參考EP7附錄推薦濃度。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第37頁分析干擾-常分析干擾物抗壞血酸黃疸溶血脂血生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第38頁分析干擾-詳細測試步驟干擾原液配制不一樣濃度干擾血清標本制備測試及結(jié)果判斷生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第39頁分析干擾-干擾原液制備干擾物：取得可能干擾物適當純形式，或這種物質(zhì)最靠近循環(huán)形式形式。溶劑：選擇一個足以溶解測試物溶劑，一些可能溶劑按普通優(yōu)先次序以以下出：純水、HCL或NaOH稀釋液、乙烷或甲醇、丙酮、二甲基磺胺、其它有機溶劑。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第40頁分析干擾-干擾原液制備抗壞血酸、黃疸、脂血：分別稱取一定量抗壞血酸純品、膽紅素純品和內(nèi)源性酯純品溶于純水（膽紅素溶于0.1mol/LNaOH溶液中）中，充分混勻后得到干擾原液；溶血：以新鮮全血自制溶血干擾物；搜集普通全血標本，充分離心；吸走上清液，加入5～10mL生理鹽水，適度搖動混勻清洗沉積細胞，離心，吸走上清液；重復(fù)三次上述過程后離心搜集沉淀，加入與沉淀等體積去離子水，混勻，室溫靜置10min后置冰箱-20℃冷凍過夜，復(fù)融后充分離心，搜集上清液，在血液細胞分析儀上測試血紅蛋白濃度，血紅蛋白濃度應(yīng)加去離子水調(diào)整至100g/L。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第41頁分析干擾-不一樣濃度干擾血清標本制備方法將加有干擾原液溶劑新鮮病人血清和加有同體積干擾原液相同病人血清進行梯度混合；注意基礎(chǔ)混合物：最好為沒有吃藥健康個體取得新鮮樣本；其次為冷凍或凍干樣本。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第42頁分析干擾-測試及結(jié)果判斷將不一樣濃度干擾物血清標本分別測試3次；以未加入干擾物血清樣本為標準，計算其它樣本與該樣本相對偏差；普通以相對偏差絕對值超出10%判斷為對待測項目有干擾，以相對偏差絕對值小于10%判斷為該濃度對待測項目沒有顯著干擾。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第43頁準確度定義：一個測量值與可接收參考值之間一致程度。常見方法相對偏差回收試驗比對試驗（重點介紹）生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第44頁準確度-方法（相對偏差）用參考物質(zhì)或有證參考物質(zhì)（CRM）和對應(yīng)參考測量程序?qū)υ噭┻M行測試，取測試均值，計算相對偏差：B%=（M-T）/T*100%其中：M-測試結(jié)果均值；T-有證參考物質(zhì)標示值，或各濃度人血清定值；B-相對偏差。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第45頁準確度-方法（回收試驗）在人血清樣品中加入一定體積標準溶液或純品，每個濃度測定3次，按下式計算回收率：生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第46頁準確度-方法（比對試驗）參考文件：CLSIEP9-A2（用患者樣本進行方法比對及偏倚評定）必要性試驗室準備用一個新檢測系統(tǒng)或測試方法進行病人標本測定前，應(yīng)和原有檢測系統(tǒng)或公認參考方法一起檢測一批病人樣品，從測定結(jié)果間差異了解新檢測系統(tǒng)或方法引入后偏倚；若偏倚不大，或偏倚在允許誤差范圍內(nèi)，說明兩檢測系統(tǒng)或方法對病人樣品測定結(jié)果基本相符，新檢測系統(tǒng)或方法替換原有檢測系統(tǒng)或方法不會對臨床引入顯著偏倚。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第47頁準確度-方法（比對試驗）測試步驟搜集新鮮血清樣本：被測物濃度覆蓋以下范圍，靠近可匯報范圍下限，靠近可匯報范圍上限，醫(yī)學決定濃度水平附近等；測試：參考系統(tǒng)（X）與待檢系統(tǒng)（Y），同時對以上血清樣本進行測試，每種試劑對每個樣本測試最少兩次，取均值，然后以Y對X作圖，得線性回歸方程Y=aX+b及相關(guān)系數(shù)R；普通要求：R≥0.975，0.9≤a≤1.1；R、a及b指代意義。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第48頁準確度-方法（比對試驗）試驗關(guān)鍵點試驗時間最少做5天，長一些更加好，能夠客觀反應(yīng)實際情況；最少做40份病人樣本，多一些更加好。試驗可靠性和有效性隨時間延長及更多樣品量而增加；盡可能50%試驗樣品內(nèi)分析物含量不在參考區(qū)間內(nèi)，各個樣本內(nèi)分析物含量分布越寬越好；不要使用對任一方法已知會干擾標本（如溶血）；將樣本按某次序排列先測一次，做雙份第2次測定時，樣本次序全部倒過來-可最小化批內(nèi)雙份測定均值受攜帶和漂移影響。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第49頁穩(wěn)定性測試參考文件：ISO13640:（體外診療試劑穩(wěn)定性研究）定義：穩(wěn)定性是體外診療試劑必須含有基本屬性、是確保產(chǎn)品在使用過程中安全有效主要指標。穩(wěn)定性研究是依據(jù)產(chǎn)品理化性質(zhì)，設(shè)計合理穩(wěn)定性研究試驗項目，以考查不一樣條件下產(chǎn)品主要質(zhì)量指標隨時間改變情況，為產(chǎn)品保留條件和使用期確實定提供依據(jù)。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第50頁穩(wěn)定性測試-目標確定試劑貯存使用期；確定試劑在第一次打開原裝包裝后使用期限（開瓶使用使用期）；監(jiān)測已經(jīng)進入市場試劑穩(wěn)定性；確認試劑在經(jīng)過可能影響其穩(wěn)定性更改后穩(wěn)定性。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第51頁穩(wěn)定性測試-測試批次要求用于支持測試目標研究最小批次數(shù)目應(yīng)該：

－3批用于確定新IVD試劑使用期（長久穩(wěn)定性）－1批用于模擬運輸過程－1批用于測試使用中穩(wěn)定性，比如，那些經(jīng)過了重新組合或是最初被真空包裝試劑另外還有以下數(shù)目地批次應(yīng)該進行測試：

－3批用于延長了使用期IVD試劑－1批用于經(jīng)過改進IVD試劑生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第52頁穩(wěn)定性測試-內(nèi)容實時穩(wěn)定性研究（real-timestabilitytesting）加速穩(wěn)定性研究（acceleratedstabilitytesting）生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第53頁穩(wěn)定性測試-實時穩(wěn)定性研究長久穩(wěn)定性：在長久穩(wěn)定性研究期間，應(yīng)按要求保留條件（比如溫度、濕度等）進行穩(wěn)定性研究。開瓶穩(wěn)定性：為確定使用過程中穩(wěn)定性，如打開包裝后穩(wěn)定性等，應(yīng)充分考慮到產(chǎn)品在使用過程中可能碰到各種環(huán)境原因，設(shè)置穩(wěn)定性研究試驗條件，考查產(chǎn)品在一定時間內(nèi)穩(wěn)定性。運輸穩(wěn)定性：運輸條件模擬應(yīng)該基于對運輸條件了解（如運輸時間、預(yù)計溫度和濕度）。假如必要，能夠進行調(diào)查來確定實際運輸條件以作為模擬基礎(chǔ)。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第54頁穩(wěn)定性測試-實時穩(wěn)定性研究時間及間隔設(shè)置長久穩(wěn)定性研究考查時間應(yīng)涵蓋所預(yù)期使用期，且應(yīng)包含足夠安全性余量，假如必要，還應(yīng)連續(xù)到能夠確定產(chǎn)品性能出現(xiàn)顯著改變時間。依據(jù)產(chǎn)品理化性質(zhì)，適當選擇穩(wěn)定性研究試驗時間間隔，對于環(huán)境原因敏感產(chǎn)品，應(yīng)適當增加考查時間點。對于因為儀器和試劑而產(chǎn)生變異較大產(chǎn)品，亦應(yīng)適當增加考查時間點，方便能夠從數(shù)據(jù)改變趨勢評價產(chǎn)品質(zhì)量改變情況。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第55頁穩(wěn)定性測試-實時穩(wěn)定性研究時間間隔設(shè)置舉例進行實時穩(wěn)定性測試時，12個月使用期能夠按照3個月時間間隔進行測試（即0，3，6，9，12個月時分別進行測試），24個使用期月能夠按照4個月時間間隔進行測試，在進行長久穩(wěn)定性研究時普通應(yīng)考查至使用期后三個月。注意：間隔時間可適當調(diào)整，可依據(jù)經(jīng)驗前松后緊。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第56頁穩(wěn)定性測試-實時穩(wěn)定性研究項目設(shè)置依據(jù)產(chǎn)品特點、質(zhì)量研究項目和結(jié)果、成品檢定項目和程度，選擇即能夠靈敏地反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量改變情況，又含有可操作性項目作為穩(wěn)定性研究試驗項目，如不穩(wěn)定物理、生物或化學指標、分析靈敏度、測定準確度等。測試項目應(yīng)重點考查表現(xiàn)其功效性能指標。生化試劑通常選擇試劑空白吸光度、質(zhì)控準確度、重復(fù)性和線性范圍等項目進行測試，以監(jiān)控試劑隨保留時間延長引發(fā)性能改變情況。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第57頁穩(wěn)定性測試-實時穩(wěn)定性研究結(jié)果分析實時穩(wěn)定性測試結(jié)果能夠直接作為使用期確定依據(jù)；在沒有足夠?qū)崟r測試數(shù)據(jù)支持情況下，假如要用加速測試結(jié)果來確定IVD試劑在推薦貯存條件下使用期，則要以相同IVD試劑經(jīng)驗和/或者利用阿列紐斯方程或者其它要求模型為依據(jù)。穩(wěn)定性能夠依據(jù)以前數(shù)據(jù)或者類似試劑穩(wěn)定性或者已經(jīng)有經(jīng)驗進行預(yù)測，不過依然必須在隨即實時穩(wěn)定性試驗中得到驗證。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第58頁穩(wěn)定性測試-加速穩(wěn)定性研究定義加速穩(wěn)定性研究是指采取過分條件來增加產(chǎn)品化學或物理降解速度，從而預(yù)測其使用期。加速穩(wěn)定性研究試驗設(shè)計能夠包含升高溫度、升高濕度、光照和震動等。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第59頁穩(wěn)定性測試-加速穩(wěn)定性研究經(jīng)過基于Arrhenius方程加速穩(wěn)定性測試來預(yù)測使用期方法：將每個溫度條件下濃度對數(shù)（y軸）對時間（x軸）作圖，得到回歸方程y=ax+b；依據(jù)定義穩(wěn)定性標準進行計算IVD試劑性質(zhì)不能再被接收時候百分數(shù)。結(jié)果變換為對數(shù)值；在每個溫度條件下，用b）得到濃度對數(shù)值替換a）y，計算出穩(wěn)定時間；按照c）計算出時間換算為對數(shù)時間，以時間對數(shù)（y軸）對絕對溫度倒數(shù)值（x軸）作圖。得到回歸方程y=mx+n；利用d）中方程，能夠計算給定溫度下預(yù)期穩(wěn)定時間。生化試劑性能評估及穩(wěn)定性測試流程和方法第60頁穩(wěn)定性測試-加速穩(wěn)定性研究溫度15℃時濃度隨時間改變時間012