動物生理學實驗報告 實驗 3-2023修改整理

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（Ⅰ）家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調整

（Ⅱ）家兔離體腸段平滑肌的生理特征

顧昕2022302060生物技術日期04/06/03

目的要求

1.學習直接測定家兔動脈血壓的急性試驗辦法；

2.觀看神經(jīng)、體液因素對心血管活動的影響。

3.學習離體腸段平滑肌的試驗辦法；

4.了解腸段平滑肌的生理特征。

基本原理

在正常生理狀況下，人和高等動物的動脈血壓是相對穩(wěn)定的。這種相對穩(wěn)定性是通過神經(jīng)和體液因素的調整而實現(xiàn)的，其中以頸動脈竇-主動脈弓壓力感觸性反射尤為重要。此反射既可使生高的血壓下降，又可使降低的血壓上升，故有血壓緩沖反射之稱謂。家兔的主動脈神經(jīng)在解剖上獨成一支，易于分別及觀看其作用。

本試驗是應用液導系統(tǒng)直接測定動脈血壓。即由動脈插管與壓力傳感器連通，其內彌漫抗凝液體，構成液導系統(tǒng)，將動脈插管插入動脈內，動脈內的壓力及其變化，可通過封閉的液導系統(tǒng)傳遞到壓力傳感器，并由計算機采集系統(tǒng)記錄下來。

哺乳動物消化管平滑肌具有肌組織共有的特性，如高興性、傳導性和收縮性等。但消化管平滑肌又有其特點，即高興性較低，收縮緩慢，富有舒展性，具有緊急性、自動節(jié)律性，對化學、溫度和機械牽張刺激較敏感等。這些特性可維持消化管內一定的壓力，保持胃腸等一定的形態(tài)和位置，適合于消化管內容物的理化變化，在體內受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調整。將離體組織器官置于模擬體內環(huán)境的溶液中，可在一定時光內保持其功能。本試驗以臺氏液作灌輸液，在體

外觀看及記錄哺乳動物離體腸段的普通生理特性。

動物與器材

家兔、兔手術臺、麥氏浴槽、常用手術器械、止血鉗（4~6把）、眼科剪、支架、燒瓶夾、酒精燈（電爐）或恒溫平滑肌槽、燒杯（500mL3個，100mL1個）、雙凹夾、氣管插管、動脈插管、三通管、動脈夾、計算機采集系統(tǒng)、壓力傳感器、張力傳感器、二聯(lián)球、溫度計（2支）、臺氏液、庇護電極、照明燈、紗布、棉球、絲線、注射器（1ml、5ml、20ml）、生理鹽水、4%檸檬酸鈉、20%~25%氨基甲酸乙酯、肝素（200U/ml）、腎上腺素（1：5000）、乙酰膽堿（1：10000）、阿托品針劑（1支）等。

辦法與步驟

一．家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調整

1.試驗儀器的預備

打開計算機采集系統(tǒng)，接通張力傳感器。從顯示器的“試驗項目”

中找出“循環(huán)試驗”的“家兔血壓的調整”條，使顯示器顯示壓力讀數(shù)。

2.連通液導系統(tǒng)并制壓

將壓力傳感器的下方支管，通過輸液管銜接三通管，再銜接動脈插管。上側管供制壓時排解管內空氣使用。先用裝有20mL4%檸檬酸鈉的

注射器，通過三通管向銜接動脈插管的輸液管內推注，使之彌漫液體（不

要使動脈插管高過壓力傳感器的上方支管）后，再用止血鉗夾住動脈插

管端的輸液管。然后繼續(xù)向三通管內推注，直至彌漫壓力傳感器的上方

支管，并用塞子塞?。ㄗ⒅兀阂簩到y(tǒng)內不行有氣泡）。繼續(xù)向三通管內

推注，同時觀看顯示器上壓力變化。當加壓到120mmHg時即可關閉三通

管。觀看壓力是否發(fā)生變化，假如壓力下降，則需要檢查液導系統(tǒng)的漏

液緣由，并重新制壓。調整血壓顯示器的敏捷度，使30~130mmHg的變

化都能在顯示器上顯然地反映出來。將動脈插管端的導管內彌漫肝素溶

液。

3.動物的預備

（1）麻醉動物取家兔一只，稱重并剪去耳緣靜脈上的被毛。用20ml注射器由耳緣靜脈緩慢推注20%（或25%）氨基甲酸乙酯（1g/kg

體重）舉行麻醉。注射時注重：先從耳緣靜脈盡可能遠心端注射

（第一次注射不勝利時，可稍向近心一些注射），注射時速度要慢，并隨時觀看動物狀況。當動物四肢柔軟、呼吸變深變慢、角膜反

射遲鈍時，表明動物已被麻醉，即可停止注射。

（2）固定與剪毛將動物背位固定與手術臺上，用剪毛剪將頸部手術野的被毛剪去，即可舉行手術。

（3）切開皮膚術者一手的拇指和食指按住家兔頸部兩側，另一手持手術刀，在緊靠喉頭下緣，沿頸部正中線作一長約5~7cm的皮膚

切口。然后用止血鉗或手術剪分別皮下結締組織后，夾住少許皮

膚并向兩側分開創(chuàng)口。

（4）分層分別肌肉術者與助手分離持止血鉗輕輕提起少許氣管正上方的肌肉（距離要盡可能近），然后用手術剪在兩止血鉗夾住的肌

肉之間，縱向（沿肌肉纖維走向）將肌肉層剪開一個小口（亦可

用止血鉗創(chuàng)開口）。用剪刀或止血鉗將創(chuàng)口縱向擴大，再用止血鉗

夾住少許肌肉，向兩側分開肌層。繼續(xù)用兩把止血鉗夾住下層氣

管上方的少許肌肉，輕輕提起，同法剪開并擴大肌肉創(chuàng)口。如此

層層分別肌肉，直至看見肌肉層下方的氣管（假如創(chuàng)口不夠大，

亦可用兩手食指深化創(chuàng)口再向前后方撕裂肌膜，使創(chuàng)口擴大）。用

止血鉗向氣管兩側拉開最后一層肌肉，裸露出氣管。手術時，注

意切口不行偏離氣管上方，不行橫向剪斷肌肉，以免造成血管斷

裂而出血。切口也不要過于擴大，以免造成氣胸。假如發(fā)覺肌肉

或血管有少量出血，可用浸過溫熱生理鹽水的紗布（不行過濕）

輕輕按壓止血；假如出血不止，應立刻用止血鉗夾住出血部位，

然后用棉線結扎止血。

（5）氣管插管普通用麻醉動物試驗時，需行氣管插管術，以免分泌物阻塞氣管致死。氣管插管的辦法是：先用止血鉗在甲狀腺后方

的氣管背面穿過一條粗棉線（切勿損傷甲狀腺及其血管，否則會

出血不止），并打一活結備用，然后在氣管上方作一倒“T”型切

口，將與氣管口徑相近的氣管插管，沿向心方向插入氣管（不行

插入過深，以免傷及氣管）并扎緊備用線，將余線固定于氣管插

管的分岔處，以防氣管插管松脫。本試驗不需使用氣管插管。

（6）分別迷走神經(jīng)家兔頸部的神經(jīng)、頸總動脈被結締組織膜包在一起，形成血管神經(jīng)束，位于氣管兩側，其腹面被胸骨舌骨肌和胸

骨甲狀肌所籠罩。術者用拇指和食指輕輕捏住分別的肌肉和皮膚，使食指向上頂而拇指向外翻，即可將血管神經(jīng)束翻于食指之上。

用彎頭玻璃分針輕輕劃開局部結締組織束膜，認真辨認3種神經(jīng)

與頸總動脈：頸總動脈呈紅色，有波動，壁有較強的彈性：迷走

神經(jīng)最粗，有較好的韌性，色雪白，普通位于外側；交感神經(jīng)較

細，略呈灰色，普通位于內側；主動脈神經(jīng)最細，普通位于兩神

經(jīng)之間。因為神經(jīng)纖細，離開神經(jīng)、動脈束的包膜后則難以辨別，所以應在原自然位置首先找到，并用玻璃分針沿縱向輕輕劃動，

分別出2cm左右（因為神經(jīng)韌性較差，易于拉斷，分別時需非常

當心）。用玻璃分針輕輕挑起分別后的神經(jīng)，再用彎頭眼科鑷由神

經(jīng)下方穿過，將一浸過生理鹽水的彩色絲線放于鑷子內，輕輕收

回夾住絲線的眼科鑷，穿好線并打一活結備用。假如不能辨認出

3條神經(jīng)，則可先在頸總動脈下方穿過一條粗棉線（辦法同上，

但只分別很小一段動脈，需保留起前后的結締組織束膜）。當輕輕

提起動脈時即可看清3條神經(jīng)，同法分別主動脈神經(jīng)、迷走神經(jīng)

并穿線備用。再將止血鉗從頸總動脈下方穿過，輕輕張開止血鉗，分別出2~3cm長的頸總動脈。分別出的頸總動脈外壁應當非常光

潔，外面并無結締組織及脂肪等物。在動脈上穿兩條備用棉線，

分離打上活結。將兩線分離拉至分別出的動脈兩端備用。同樣方

法分別另一側血管與神經(jīng)（一側動脈用于插管測壓，另側動脈實

驗用）。因為家兔的品種不同，個體之間也有差異，常發(fā)覺三條神

經(jīng)的解剖位置有些變異。迷走神經(jīng)的最后確認，需以對血壓的影

響為準。

（7）動脈插管首先用5ml注射器從耳緣靜脈注入肝素（200U/kg體重）以防凝血。然后在一側動脈行動脈插管術以記錄血壓。其方

法如下：將動脈頭端的備用線盡可能靠頭端結扎（務必扎緊，以

防滲血），然后在另一備用線的向心側（盡可能近心端），用動脈

夾夾閉。輕輕提起動脈頭端的結扎線，用鋒利的眼科剪在逼近扎

線的稍后方，沿向心方向斜向剪開動脈上壁（注重：不行只剪開

血管外膜，也切勿剪斷囫圇動脈，剪口大小約為管徑的一半）。一

手持彎頭眼科鑷，將其一個彎頭從剪口處插進動脈少許，輕輕挑

起剪開的動脈上壁，另一手將預備好的動脈插管由開口處插入動

脈管內。假如插入較淺，可用一手輕輕捏住進入插管的動脈管壁，

另一手拿住動脈插管，順勢輕輕推動至6~8mm左右（假如手感滯

澀，說明插管并未進入動脈，必需退出插管，重新剪口再插），用

備用線將動脈連同進入的插管扎緊（插管不行因扎線松動而滑出，

亦不行漏液），并將余線系在插管的固定側支上，以免滑脫。注重：

插管應與動脈血管的方向全都，以防插管尖端扎破動脈管壁。輕

輕取下向心端動脈夾，可見動脈血與插管內液體混合。再取下通

向壓力傳感器的止血鉗，此時顯示器上浮現(xiàn)血壓的波動曲線。的

最

4.試驗結果與分析

（1）觀看正常血壓曲線調整掃描速度與增益，可以顯然觀看到心室射血與主動脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。有

時可以觀看到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級波，呼吸波為二

級波。然后將掃描速度調慢，觀看正常血壓曲線。

（2）刺激迷走神經(jīng)使刺激輸出端銜接庇護電極，輕輕提起迷走神經(jīng)

上的備用線，當心地將神經(jīng)置于庇護電極之上。記錄對比血壓曲

線后，再用中等強度的延續(xù)電脈沖信號，通過庇護電極，刺激神

經(jīng)10~20s。血壓浮現(xiàn)顯然下降后即可停止刺激，等待血壓恢復。

假如血壓并不下降，可調節(jié)刺激強度或刺激頻率再行刺激。任何

刺激都無效時，則表示此神經(jīng)并非主動脈神經(jīng)。需要重新辨認神

經(jīng)后再行試驗。

曲線下降，由于迷走神經(jīng)節(jié)后纖維末梢釋放的遞質作用于心肌，可導致心率減慢，心房肌收縮能力削弱，心房肌不應期縮短，房室傳導速度減慢，血壓降低。

（3）腎上腺素對血壓的影響記錄對比血壓曲線后，用1ml注射器，從耳緣靜脈注入0.1~0.3ml腎上腺素溶液，觀看并記錄血壓變化及

恢復曲線。

曲線升高，由于腎上腺素可使血管收縮，可使血壓升高。

（4）乙酰膽堿對血壓的影響同法注入0.1~0.2ml乙酰膽堿溶液，觀看并記錄注射前后血壓變化。

曲線下降，由于乙酰膽堿可以促使血管舒張，使血壓降低。

二．離體腸段平滑肌的生理特征

1.裝好試驗裝置，麥氏浴槽外的水浴溫度為37℃，浴槽內調溫至37±0.5

℃。

2.制備離體兔腸段

剖開家兔腹腔，找到胃幽門與十二指腸交界處，在十二指腸起始端扎一線，剪取十二指腸、空腸，放入冷臺氏液內。先用20ml注射器沖洗腸內容物，沖洗整潔后剪成若干約1.5cm長的小腸段，在其兩端結扎，一端做一短線環(huán)固定在通氣的L管下方或浴皿內，另一端扎線與張力傳感器相連。將腸段徹低浸浴在調好溫度的麥氏浴槽中，并調節(jié)好臺氏液充氣量（小氣泡銜接不斷）。

3.開啟計算機采集系統(tǒng)，接通與張力傳感器相連的通道。固定L管并調整

扎線于張力傳感器，使腸段運動自如又能牽動傳感器（注重：扎線不行貼壁或過松過緊）。調整增益與掃描速度，使腸段的運動曲線清楚地顯示

在顯示器上并記錄腸段活動曲線。

4.試驗觀看

（1）記錄對比腸段運動曲線。

（2）記錄對比曲線后，加入2滴腎上腺素（1：10000），觀看并記錄曲線變化。

曲線下降，由于腎上腺素可以使腸道舒緩，收縮減緩減慢。

（3）同法加入1~2滴乙酰膽堿（1：10000），觀看并記錄曲線變化。

（4）加入3滴阿托品后立，觀看并記錄曲線變化。

曲線輕微下降，很快又恢復正常。由于阿托品僅為乙酰膽堿的抑制劑，對小腸的調控作用不大，應為下降或不變。

注重事項

1.加藥前必需預備好更換用的37℃臺氏液。上述藥物劑量僅為參考，效果不

顯然可補加，每次加藥浮現(xiàn)效果后，必需立刻更換浴槽內的臺氏液并沖洗3次，待腸肌恢復正?；顒雍笤儆^看下一項目。浴槽內臺氏液要保持一定高度。

2.游離及取出腸段時，動作要快，取兔腸及兔腸穿線時，盡可能不用金屬及

手指觸及。為保持離體腸段的活性，可先預冷充氧的養(yǎng)分液，游離腸段及

穿線在預冷的養(yǎng)分液中舉行。試驗中始終要通氣。

思量題

1.如何證實主動脈神經(jīng)是傳入神經(jīng)？

答：雙結扎主動脈神經(jīng)，從兩結扎線之間剪斷，刺激外周端，血壓無變化，刺激其中樞端，血壓上升，由此可見其神經(jīng)沖動傳導方向為由外周至中樞，因此為傳入神經(jīng)。