結(jié)核分枝桿菌研究

結(jié)核分枝桿菌研究第1頁/共70頁態(tài)生兩靨之愁，嬌襲一身之病。淚光點點，嬌喘微微。閑靜時如姣花照水，行動時如弱柳扶風(fēng)。

第2頁/共70頁主訴：男，20歲，咳嗽數(shù)周。

病史：病人是新近來自東南亞的移民，1個月前開始疲乏，食欲不振。過1周左右，他感覺發(fā)熱并開始咳嗽，起初為干咳，但過去的1周，他每天咳幾勺綠色帶血絲的痰。近1個月內(nèi)，體重減輕10磅。患者不吸煙，沒有接觸過工業(yè)呼吸道污染物。病例討論第3頁/共70頁

查體：T38℃，P80次/分，R16次/分?；颊叻羌毙圆〔∪?。右上肺葉可聞及啰音。叩診無濁音。胸部X光：右上肺葉后段浸潤提示空洞。

病例討論第4頁/共70頁

問題：

1.應(yīng)做哪二項痰液檢查，才能提供有關(guān)疾病病原的快速診斷？

病程記錄：痰的革蘭染色法顯示，無優(yōu)勢細(xì)菌的混合菌群。抗酸染色法顯示有大量細(xì)長、粉紅色桿菌。痰標(biāo)本送去做分離培養(yǎng)。病例討論第5頁/共70頁問題：

2.最可能的診斷是什么？

3.如何選擇該疾病的抗菌藥物治療？有耐藥性的問題嗎？

4.該菌是怎樣傳播的？

5.怎樣在實驗室培養(yǎng)該菌？目前常用的該菌快速診斷法是什么？

6.對于他的家庭成員應(yīng)做哪些預(yù)防？

病例討論第6頁/共70頁

肺結(jié)核是一種慢性消耗性傳染病。

結(jié)核桿菌不斷侵蝕肺組織，引起肺部各種炎性細(xì)胞的浸潤，使肺組織發(fā)生炎癥，造成滲出、增生、壞死及纖維鈣化等病變。肺結(jié)核

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結(jié)核病危害人類健康已經(jīng)有幾千年的歷史了。結(jié)核病第8頁/共70頁結(jié)核病第9頁/共70頁

20世紀(jì)80年代以來，由于HIV與結(jié)核桿菌混合感染、移民以及耐藥結(jié)核桿菌的出現(xiàn)，結(jié)核病又在全球全面復(fù)活。

目前，結(jié)核病已成為傳染病中的第一殺手和最大死因。結(jié)核病第10頁/共70頁全球已處于結(jié)核病緊急狀態(tài)！

結(jié)核病第11頁/共70頁一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

很早以前，法國杜鮑阿通過尸體解剖發(fā)現(xiàn)，結(jié)核病人肺部有白色的、較硬的，象粟粒大小的一顆顆小結(jié)節(jié)，類似堅果的核，稱之為“結(jié)核”。

1700年，日內(nèi)瓦孟格脫醫(yī)生發(fā)現(xiàn)了“結(jié)核”和“干酪樣物質(zhì)”。第12頁/共70頁

1815年，法國賴萘克醫(yī)生提出結(jié)核病不是一個局部疾病，可以侵犯全身，可在身體任何部位發(fā)生結(jié)核病灶。

1856年，魏立明證明結(jié)核結(jié)節(jié)具有傳染性。一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

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1881年，Koch致力于結(jié)核病病因的研究。

Koch認(rèn)為，“結(jié)節(jié)、結(jié)核”里肯定存在具有傳染性的病原菌。

一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

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1882年，Koch首先在結(jié)核病灶中發(fā)現(xiàn)了一種細(xì)長略帶彎曲的桿菌━結(jié)核桿菌，開創(chuàng)了

結(jié)核病研究的新紀(jì)元，

獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)與生理

學(xué)獎。

一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

第15頁/共70頁

●

營養(yǎng)要求高，結(jié)核桿菌生長十分緩慢，12－18h才分裂一次，在固體培養(yǎng)基上15－30d才出現(xiàn)肉眼可見的象“菜花”一樣的菌落。

●

結(jié)核桿菌具有臘質(zhì)包膜，不易被一般染料著色。

一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

第16頁/共70頁抗酸染色法

用5%石炭酸復(fù)紅初染時，結(jié)核桿菌的分枝菌酸易與酸性復(fù)紅牢固結(jié)合，加上臘質(zhì)包膜的完整性，可抵抗鹽酸酒精脫色，用美藍復(fù)染時，被染成紅色，即結(jié)核桿菌為抗酸性細(xì)菌。非分枝結(jié)核桿菌則被染成藍色。

一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

第17頁/共70頁抗酸染色陽性，分枝狀排列的細(xì)長桿菌一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

第18頁/共70頁結(jié)核分枝桿菌抗酸染色結(jié)核桿菌

為細(xì)長稍彎的桿菌，常單個存在、呈分支狀排列或聚集成團?？顾崛旧珵榧t色。其他細(xì)菌和背景為藍色。第19頁/共70頁

結(jié)核桿菌對紫外線敏感，怕熱，不怕冷，在濕潤或干燥痰中可存活數(shù)周或數(shù)月，在塵埃中10d仍保持傳染性。一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性

第20頁/共70頁抵抗力（四怕）對乙醇敏感對濕熱敏感:62~6315min（巴氏消毒）對紫外線敏感對鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對氨基水楊酸等抗癆藥物敏感，但長期用藥容易出現(xiàn)耐藥性據(jù)我國科學(xué)家調(diào)查，在內(nèi)蒙古農(nóng)牧民肺結(jié)核病人中，有10.6％的患者有喝生牛奶的習(xí)慣。第21頁/共70頁對干燥的抵抗力特別強（干痰中存活6-8月）對酸（3%HCl或6%H2SO4)或堿（4%NaOH)有抵抗力，15min不受影響對堿性染料（孔雀綠）有抵抗力對青霉素等抗生素耐藥抵抗力（四不怕）第22頁/共70頁二、結(jié)核桿菌的致病性

可能致病機制：

①細(xì)菌在組織細(xì)胞內(nèi)大量繁殖引起的炎癥；

②菌體成分和代謝產(chǎn)物的毒性作用；

③機體對菌體成分產(chǎn)生的免疫損傷。第23頁/共70頁

結(jié)核桿菌細(xì)胞壁含有脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和多糖復(fù)合物。

脂質(zhì)主要為磷脂、脂肪酸和臘質(zhì)等。脂質(zhì)含量與細(xì)菌的毒力呈平行關(guān)系。1.致病物質(zhì)二、結(jié)核桿菌的致病性

第24頁/共70頁

磷脂：可引起機體的單核細(xì)胞增生，形成結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪樣壞死。

脂肪酸（如結(jié)核菌酸）：能促進結(jié)核結(jié)節(jié)的形成。

蠟質(zhì)（如硫酸腦苷脂）：抗吞噬作用，使病菌在吞噬細(xì)胞中長期存在；使壞死組織不能完全溶解，而呈結(jié)核病灶中特有的干酪樣壞死狀態(tài)。二、結(jié)核桿菌的致病性

第25頁/共70頁

蛋白質(zhì)（如結(jié)核菌素）：能與蠟質(zhì)結(jié)合注入體內(nèi)可誘發(fā)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。

多糖（如索狀因子）：與結(jié)核桿菌的毒力有關(guān)，能抑制白細(xì)胞游走和引起慢性肉芽腫。

二、結(jié)核桿菌的致病性

第26頁/共70頁

傳播途徑：結(jié)核桿菌主要通過飛沫或塵埃經(jīng)呼吸道傳播。

2.傳染源與傳播途徑傳染源：患者和帶菌者二、結(jié)核桿菌的致病性

第27頁/共70頁3.所致主要疾病肺部感染二、結(jié)核桿菌的致病性

第28頁/共70頁1）原發(fā)感染2）原發(fā)后感染二、結(jié)核桿菌的致病性

第29頁/共70頁原發(fā)感染：結(jié)核分枝桿菌初次感染在肺內(nèi)形成病灶，稱為原發(fā)性肺結(jié)核。結(jié)核分枝桿菌肺泡吞噬細(xì)胞繁殖釋放肺泡滲出性炎癥（原發(fā)灶）肺門淋巴結(jié)淋巴結(jié)腫大纖維化

刺激機體免疫

內(nèi)源性感染來源二、結(jié)核桿菌的致病性

第30頁/共70頁

淋巴節(jié)病變：吞噬細(xì)胞將結(jié)核桿菌沿淋巴管帶至肺門淋巴結(jié)，引起肺門淋巴結(jié)腫大，出現(xiàn)滲出性炎癥，含有豐富的漿液狀的滲出物，使肺組織呈膨脹現(xiàn)象。二、結(jié)核桿菌的致病性

第31頁/共70頁

當(dāng)機體抗感染能力強時，可產(chǎn)生有效的細(xì)胞免疫，將結(jié)核桿菌就地圍殲，阻止它們由淋巴管或血流擴散。

死亡的結(jié)核桿菌、吞噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞、局部壞死肺組織和網(wǎng)狀纖維組成“結(jié)核結(jié)節(jié)”。二、結(jié)核桿菌的致病性

第32頁/共70頁

如果宿主（如嬰幼兒）抗感染能力較弱，在尚未形成細(xì)胞免疫以控制結(jié)核桿菌繁殖之前，原發(fā)感染灶惡化，或結(jié)核破裂，釋放出有毒力的結(jié)核桿菌，結(jié)核桿菌經(jīng)氣管淋巴道或血液播散，形成全身性粟粒性結(jié)核（如粟粒性肺結(jié)核、結(jié)核性腦膜炎、腹膜炎、胸膜炎，腎結(jié)核、骨關(guān)節(jié)結(jié)核等）。

二、結(jié)核桿菌的致病性

第33頁/共70頁

原發(fā)感染的主要病變是結(jié)核結(jié)節(jié)。

機體對大多數(shù)原發(fā)感染能逐步形成細(xì)胞免疫，控制結(jié)核桿菌的感染，發(fā)展結(jié)局大多為良性。二、結(jié)核桿菌的致病性

第34頁/共70頁

結(jié)核壞死，轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N顆粒性的“干酪狀團塊”，并逐漸①纖維化；②鈣化；③液化，產(chǎn)生空洞；④吸收消散，不治而愈。二、結(jié)核桿菌的致病性

第35頁/共70頁

一小部分未被殺死的結(jié)核桿菌長期潛伏。當(dāng)機體抵抗力減弱時，潛伏的結(jié)核桿菌可能復(fù)活，引起繼發(fā)性結(jié)核?。▋?nèi)源性感染）；或從外界吸入結(jié)核桿菌（外源性感染），多發(fā)生于成年人。2）原發(fā)后感染二、結(jié)核桿菌的致病性

第36頁/共70頁繼發(fā)感染：原發(fā)灶內(nèi)結(jié)核分枝桿菌或外源結(jié)核分枝桿菌再次引起的感染。菌體（內(nèi)源、外源）再次感染發(fā)炎

干酪樣壞死

二、結(jié)核桿菌的致病性

液化，病灶進入支氣管、氣管，釋放大量TB至痰液中。第37頁/共70頁

由于機體已形成了對結(jié)核桿菌的特異性細(xì)胞免疫，因此，對再次入侵的結(jié)核桿菌產(chǎn)生強烈的遲發(fā)性超敏反應(yīng)，將侵犯的結(jié)核桿菌控制在局部，而不會讓結(jié)核桿菌長直驅(qū)入引起淋巴－血行播散。二、結(jié)核桿菌的致病性

第38頁/共70頁

如果治療及時合理，肺內(nèi)的炎癥可吸收消散，干酪樣壞死部分也可鈣化，成為殘留的纖維硬結(jié)核灶。

繼發(fā)感染主要破壞肺組織，使之潰瘍、干酪樣壞死。二、結(jié)核桿菌的致病性

第39頁/共70頁

肺內(nèi)空洞形成后，如果治療恰當(dāng)，可使空洞逐漸縮小或閉合；即使肺空洞存在，但肺內(nèi)結(jié)核桿菌可被全部消滅，不再傳染他人。

如果不加以治療，由于組織破壞與修復(fù)交替進行，可發(fā)展為慢性纖維空洞型肺結(jié)核，結(jié)核桿菌經(jīng)氣管播散，成為重要傳染源。二、結(jié)核桿菌的致病性

第40頁/共70頁

由于結(jié)核桿菌是一個頑強的敵人，吞噬細(xì)胞并不能一下子將所有結(jié)核桿菌消滅掉，而是通過輪翻的戰(zhàn)斗，最終控制結(jié)核桿菌的繁殖。這就決定了戰(zhàn)斗的相對持久性，即結(jié)核病是慢性病，療程必須相對長。二、結(jié)核桿菌的致病性

第41頁/共70頁

結(jié)核桿菌引起的結(jié)核病是一種慢性傳染病，全身各臟器均可發(fā)生。但以肺結(jié)核最為多見。肺結(jié)核的臨床表現(xiàn)有：

……黛玉一翻身，卻原來是一場惡夢。喉間猶是哽咽，心頭還是亂跳，枕頭上已經(jīng)濕透，肩背身心，但覺冰冷。二、結(jié)核桿菌的致病性

第42頁/共70頁……一回兒咳嗽起來?！嚣N開了屋門去倒那痰盒時，只見滿盒子痰，痰中好些血星……

……紫鵑一手摟著黛玉坐起，一手端著湯送到唇邊。黛玉微微睜眼喝了兩三口，便搖搖頭兒不喝了。

二、結(jié)核桿菌的致病性

第43頁/共70頁……“林姑娘臉上一點血色也沒有，摸了摸身上，只剩得一把骨頭”。

黛玉掙扎著伸出那只手來狠命的撕那絹子，卻是只有打顫的分兒，那里撕得動。

二、結(jié)核桿菌的致病性

第44頁/共70頁

只見黛玉肝火上炎，兩顴紅赤。

……喘成一處，只是出氣大入氣小，已經(jīng)促疾的很了。

“寶玉，寶玉，你好……”，說到“好”字，便渾身冷汗，不作聲了。二、結(jié)核桿菌的致病性

第45頁/共70頁態(tài)生兩靨之愁，嬌襲一身之病。淚光點點，嬌喘微微。閑靜時如姣花照水，行動時如弱柳扶風(fēng)。

二、結(jié)核桿菌的致病性

第46頁/共70頁

病史：病人是新近來自東南亞的移民，1個月前開始疲乏，食欲不振。過1周左右，他感覺發(fā)熱并開始咳嗽，起初為干咳，但過去的1周，他每天咳幾勺綠色帶血絲的痰。近1個月內(nèi)，體重減輕10磅。胸部X光：右上肺葉后段浸潤提示空洞。

二、結(jié)核桿菌的致病性

第47頁/共70頁肺外感染結(jié)核性腦膜炎腎結(jié)核腸結(jié)核結(jié)核性腹膜炎二、結(jié)核桿菌的致病性

第48頁/共70頁第49頁/共70頁疣狀皮膚結(jié)核第50頁/共70頁疣狀皮膚結(jié)核第51頁/共70頁三、微生物學(xué)檢查法

1）痰液標(biāo)本的抗酸染色法鏡檢2）分離培養(yǎng)3）PCR第52頁/共70頁PH6.5-6.8，生長緩慢，18h分裂一次，2-4W出現(xiàn)粟米大小的粗糙型菌落，菌落乳白或淡黃色，干而粗糙，不透明，許多菌落堆積呈花菜狀。羅氏培養(yǎng)基三、微生物學(xué)檢查法

第53頁/共70頁菌落圖粟米大小的粗糙型菌落，菌落淡黃色，干而粗糙，不透明，許多菌落堆積呈花菜狀。第54頁/共70頁三、微生物學(xué)檢查法

結(jié)核分枝桿菌粗糙型菌落第55頁/共70頁四、防治原則

1.預(yù)防原則1）給新生兒接種卡介苗是預(yù)防結(jié)核病的最有效的措施。第56頁/共70頁四、防治原則

結(jié)核菌素試驗屬于第IV型超敏反應(yīng)皮膚試驗，用來測定受試者對結(jié)核桿菌是否有遲發(fā)型超敏反應(yīng)，可判定受試者是否受過結(jié)核桿菌的感染或接種過卡介苗。

第57頁/共70頁

結(jié)核菌素試驗陰性，一般表示無結(jié)核桿菌感染，機體無免疫力，應(yīng)接種卡介苗。

四、防治原則

純蛋白衍生物第58頁/共70頁2）發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽性者四、防治原則

第59頁/共70頁

國際防癆和肺病聯(lián)合會推薦“直接督導(dǎo)下的短程化療”，即異煙肼、利福平、吡嗪酰胺強化2個月，維持4－6個月，共6－8個月。四、防治原則

2.治療原則第60頁/共70頁①早發(fā)現(xiàn)；

②聯(lián)合用藥，藥物要適量，有規(guī)律地全程用藥，切勿停藥；

③認(rèn)真注意休息，增加營養(yǎng)；

④定期復(fù)查。四、防治原則

第61頁/共70頁

耐藥性變異：結(jié)核桿菌耐藥檢出率為20～50%,多重耐藥率為5%～20%。多重耐藥結(jié)核桿菌(MDRTB)是指至少耐異煙肼和利福平兩種抗結(jié)核藥的結(jié)核桿菌。結(jié)核桿菌的耐藥性變異主要與其染色體基因突變有關(guān)。四、防治原則

第62頁/共70頁

抗