藥用植物學(xué)實驗專家講座

試驗一

顯微鏡使用與植物細(xì)胞觀察

李艷藥用植物學(xué)實驗專家講座第1頁試驗內(nèi)容1.試驗室規(guī)則2.試驗匯報書寫3.暫時裝片制作4.洋蔥表皮細(xì)胞觀察5.葉綠體觀察6.作業(yè)畫圖藥用植物學(xué)實驗專家講座第2頁試驗室守則1.組織紀(jì)律嚴(yán)格恪守，整齊，衛(wèi)生，水電門窗。2.愛護(hù)儀器設(shè)備標(biāo)本等。3.試驗前必須預(yù)習(xí)此次試驗，明確試驗?zāi)繕?biāo)要求、內(nèi)容、方法和步驟。備好教科書，繪圖用具(HB、2H鉛筆各一支，橡皮、尺子等)和試驗統(tǒng)計本。3.試驗時觀察，思索，統(tǒng)計。4.試驗完按時交試驗匯報。藥用植物學(xué)實驗專家講座第3頁試驗匯報書寫要求1.繪圖HB鉛筆2.格式【目標(biāo)要求】、【儀器試劑】、【試驗材料】、【試驗內(nèi)容】、【試驗畫圖】3.按要求時間及時交試驗匯報4.占30%成績藥用植物學(xué)實驗專家講座第4頁【目標(biāo)要求】1．掌握光學(xué)顯微鏡使用與保養(yǎng)2．了解顯微鏡類型與結(jié)構(gòu)2．學(xué)習(xí)“暫時裝片法”及繪制“植物細(xì)胞圖”基本技術(shù)3．掌握植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)藥用植物學(xué)實驗專家講座第5頁【儀器試劑】顯微鏡、載玻片、蓋玻片尖頭鑷、解剖針、刀片、剪刀吸水紙、擦鏡紙、彎盤、表面皿水合氯醛、稀甘油、碘試液、蒸餾水等藥用植物學(xué)實驗專家講座第6頁顯微鏡鏡座鏡柱載物臺鏡臂通光孔壓片夾細(xì)準(zhǔn)焦螺旋轉(zhuǎn)換器粗準(zhǔn)焦螺旋鏡筒目鏡物鏡遮光器反光鏡藥用植物學(xué)實驗專家講座第7頁顯微鏡使用1、取鏡和安放2、對光3、安放玻片（切片）4、調(diào)焦5、觀察6、整理（低倍鏡找，高倍鏡觀察）7、償還顯微鏡（注意事項）藥用植物學(xué)實驗專家講座第8頁光學(xué)顯微鏡觀察樣品必須是透明薄片，待觀察植物材料需切成很薄切片，才能在顯微鏡下觀察。顯微鏡制片分永久制片和暫時制片，永久制片制作方法和步驟復(fù)雜。在教學(xué)過程中，要求同學(xué)們做主要是暫時制片。以下是試驗慣用器材藥用植物學(xué)實驗專家講座第9頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第10頁指用刀片把植物新鮮材料切成薄片，封藏于水中即可觀察（暫時水裝片），通常不經(jīng)染色或簡單染色。亦可經(jīng)脫水與染色制成永久制片。優(yōu)點：暫時水裝片簡單方便；不經(jīng)化學(xué)藥品處理，基本保留了植物活體狀態(tài)。材料不能太大，表面不超出3-5mm。關(guān)鍵是平而薄，無需很完整，只需一角就夠了。暫時制片種類很多，包含涂片、壓片等等

徒手切片法藥用植物學(xué)實驗專家講座第11頁操作過程普通用左手大拇指、食指和中指3個手指拿住材料，使材料略突出在指尖之上，防止切片時割傷手指；用右手平穩(wěn)地拿住刀片，把刀口放在經(jīng)解剖刀削平材料平面中間，輕輕地壓住它，以均勻動作，從刀片刀口下方起，斜著向后拉切。切時用臂力而不是腕力，且無須太用力，不然就不易切薄。藥用植物學(xué)實驗專家講座第12頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第13頁在切過程中，決不能以刀片直接擠壓材料，或以刀片往返拉割材料，而且要一直保持材料與刀片在水平狀態(tài)，不然會因為切面偏斜而影響觀察。切片應(yīng)該薄而透明，形狀不要求非常完整，可用刀不一樣部位一次作幾個切片，然后用蘸水毛筆取下切片，置于盛水培養(yǎng)皿中，備用。

藥用植物學(xué)實驗專家講座第14頁柔嫩器官，比如幼葉，難以直接拿住進(jìn)行切片，需借助一些維持物。普通用胡蘿卜根或土豆塊莖作為維持物，把要切材料夾于其中，進(jìn)行切片，以利于把握操作。將切下薄片放在載玻片上時，要先在玻片中央加一滴水，把材料放到水滴中，然后用鑷子夾住蓋玻片，將蓋片一側(cè)先接觸到載玻片中央水滴，然后用鑷子頂住蓋片另一側(cè)，慢慢放下，使蓋玻片與載玻片之間充滿水，如有氣泡，要掀起蓋片，重新放置。

藥用植物學(xué)實驗專家講座第15頁徒手制作切片能夠直接在光鏡下觀察，也能夠經(jīng)過簡易組織化學(xué)染色，以使結(jié)構(gòu)看得更清楚，同時可觀察到細(xì)胞各部分化學(xué)成份。慣用染料有：0.1％亞甲基藍(lán)、0.5％～1％中性紅或1％番紅水溶液等。染色方法是將切片放在載玻片上后，用吸水紙吸去多出水分，滴上一滴染料，經(jīng)過1～2min后，用水沖洗一下，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察。藥用植物學(xué)實驗專家講座第16頁植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)

將暫時裝片放在低倍鏡下觀察，可看到許多無色透明稍長形細(xì)胞，彼此緊密相連，沒有細(xì)胞間隙。在細(xì)胞中，可見到浸埋在細(xì)胞質(zhì)中圓形細(xì)胞核，如不清楚，可由蓋玻片一側(cè)加稀碘液一滴，用吸水紙在另一側(cè)稍吸；使碘液充滿整個標(biāo)本而染色，幾分鐘后觀察，可見細(xì)胞質(zhì)被染成淺黃色，細(xì)胞核被染成較深黃色，細(xì)胞各部分顯得較為清楚．移動裝片，選擇幾個較清楚細(xì)胞置于視野中央，換用高信物鐃再仔細(xì)觀察；注意識別下例各部分：藥用植物學(xué)實驗專家講座第17頁植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)光鏡下分為四個部分（1）細(xì)胞壁植物細(xì)胞所特有。為細(xì)胞最外層，比較透明。調(diào)整細(xì)調(diào)焦螺旋和光圈、可見兩細(xì)胞間實際上為三層；，兩側(cè)為相鄰兩個細(xì)胞細(xì)胞壁；中間是兩個細(xì)胞共有胞間層。（2）細(xì)胞膜光鏡下不易分辨。（3）細(xì)胞質(zhì)無色透明膠狀物，緊貼在胞壁內(nèi)，被中央大液泡擠成一薄層，僅細(xì)胞兩端較顯著。

藥用植物學(xué)實驗專家講座第18頁

(4)細(xì)胞核埋在胞質(zhì)內(nèi)，貼近胞側(cè)壁呈扁圓形或球形。仔細(xì)觀察，可見包在細(xì)胞核外面核膜，細(xì)胞核內(nèi)有1—3個發(fā)亮顆粒，即核仁。(有細(xì)胞看不見細(xì)胞核是因為該細(xì)胞被撕破，只剩二分之一了）(5)液泡：位于細(xì)胞中央，占細(xì)胞體積大部分(洋蔥表皮細(xì)胞占95%)，因為液泡內(nèi)充滿細(xì)胞液；所以比細(xì)胞質(zhì)更透明。有細(xì)胞含有大量花青素，可有顏色。藥用植物學(xué)實驗專家講座第19頁制作洋蔥表皮暫時裝片從洋蔥鱗莖上剝下一片肉質(zhì)鱗葉，用鑷子撕取其內(nèi)表皮少許，用刀片切取3-5mm大小一塊，按暫時裝片法，置于載玻片上預(yù)先加好水淌中，用鑷子將其展乎，然后將蓋玻片沿水滴一側(cè)慢慢蓋下，預(yù)防產(chǎn)生氣泡，用吸水紙沿蓋玻片一側(cè)吸掉多出酌水。藥用植物學(xué)實驗專家講座第20頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第21頁植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)----洋蔥內(nèi)表皮制作紅皮洋蔥內(nèi)表皮暫時水裝片，鏡下觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)。低倍鏡下細(xì)胞壁較透明，細(xì)胞質(zhì)無色均勻，細(xì)胞核扁球形，高倍鏡下可見其內(nèi)1—3個發(fā)亮核仁。藥用植物學(xué)實驗專家講座第22頁紫皮洋蔥表皮細(xì)胞觀察(基本結(jié)構(gòu))

（凈、滴、取、浸、展、蓋、染）采標(biāo)本裝片放標(biāo)本調(diào)焦觀察與畫圖（細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)與形態(tài)）藥用植物學(xué)實驗專家講座第23頁質(zhì)體(示教)…….葉綠體質(zhì)體植物細(xì)胞中由雙層膜包圍含有光合作用和貯藏功效細(xì)胞器。是有生命。依據(jù)所含色素和功效不一樣，質(zhì)體分為白色體、葉綠體和有色體。（3種質(zhì)體均能夠光合作用，而后含物是沒有生命）。

(1)白色體：撕取紫鴨跖草葉下表皮一小塊，制成暫時裝片；置最先進(jìn)顯微鏡下觀察，可見在細(xì)胞核周圍有很多微小無色顆粒，即白色體。(2)葉綠體：取何首烏葉，撕去葉表皮，用刀片刮取少許葉肉細(xì)胞，涂在載玻片上，制成暫時裝片。鏡檢可見到眾多橢圓形綠色顆粒，即葉綠體。（水裝片）(3)有色體：用解剖針挑取番茄果肉少許，置載玻片上壓碎，制成暫時裝片，鏡檢時可見到有色體，注意其形狀和顏色是否相同。藥用植物學(xué)實驗專家講座第24頁葉綠體白色體有色體藥用植物學(xué)實驗專家講座第25頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第26頁定義葉綠體是綠色植物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行光合作用結(jié)構(gòu)，是一個質(zhì)體。葉肉細(xì)胞中含葉綠體數(shù)通常是數(shù)十到數(shù)百個。已知有一個細(xì)胞含有數(shù)千個以上葉綠體例子，以及僅有一個葉綠體例子。功效幾乎能夠說一切生命活動所需能量起源于太陽能（光能）。綠色植物是主要能量轉(zhuǎn)換者是因為它們均含有葉綠體（Chloroplast）這一完成能量轉(zhuǎn)換細(xì)胞器，它能利用光能同化二氧化碳和水，合成貯藏能量有機物，同時產(chǎn)生氧。所以綠色植物光合作用是地球上有機體生存、繁殖和發(fā)展根根源泉。藥用植物學(xué)實驗專家講座第27頁成份葉綠素（量大）、胡蘿卜素和葉黃素。葉綠體含有葉綠素a、b而呈綠色，輕易區(qū)分於另類兩類質(zhì)體——無色白色體和黃色到紅色有色體。葉綠素a、b功效是吸收光能，經(jīng)過光合作用將光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能。葉綠體主要由脂類和蛋白質(zhì)分子組成，另外在葉綠體基質(zhì)中還有少許DNA和RNA。形態(tài)許多植物葉綠體是直徑5微米，厚2-3微米凸透鏡形狀，呈葉綠體扁球狀。但低等植物中則含有板狀、網(wǎng)眼狀、螺旋形、星形、杯形等非常大葉綠體。光學(xué)顯微鏡高倍鏡觀察葉綠體，呈綠色粒狀結(jié)構(gòu)（基粒）。電鏡觀察，葉綠體由雙層單位膜組成。藥用植物學(xué)實驗專家講座第28頁葉綠體觀察葉肉細(xì)胞含有豐富葉綠體。采標(biāo)本裝片放標(biāo)本調(diào)焦觀察與畫圖（葉綠體分布與形態(tài)）藥用植物學(xué)實驗專家講座第29頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第30頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第31頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第32頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第33頁制作暫時裝片藥用植物學(xué)實驗專家講座第34頁染色藥用植物學(xué)實驗專家講座第35頁藥用植物學(xué)實驗專家講座第36頁有時會看見質(zhì)壁分離現(xiàn)象質(zhì)壁分離后看到無色區(qū)域應(yīng)該是原生質(zhì)體與細(xì)胞壁間隙，在KNO3溶液中發(fā)生質(zhì)壁分離細(xì)胞會吸收K+和NO3-，使細(xì)胞液濃度增大，從而由失水轉(zhuǎn)為吸水，所以質(zhì)壁分離會自動復(fù)原。（壁與質(zhì)間為所吸收液體液泡顏色和位置有改變嗎？，紫皮洋蔥液泡內(nèi)含有大量花青素，有色。質(zhì)壁分離列舉生活實例…蔬菜受凍以后能夠發(fā)生。能夠復(fù)原嗎？施肥過多會出現(xiàn)什么現(xiàn)象呢？鹽堿地栽培作物怎樣？）藥用植物學(xué)實驗專家講座第37頁1、調(diào)整清楚后讓老師驗收！2、清洗載玻片，用紗布擦干放回原處！保持解剖盤干燥！3、廢舊蓋玻片、用過洋蔥、吸水紙放進(jìn)污物杯！藥用植物學(xué)實驗專家講座第38頁顯微鏡使用暫時裝片制作細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)…….1、取鏡安放2、對光3、安放玻片4、調(diào)焦5、觀察6、整理1、擦2、滴