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一纖維素和纖維素酶一纖維素和纖維素酶第1頁(yè)一、纖維素和纖維素酶1.纖維素在生物圈分布情況纖維素是地球上含量最豐富多糖類物質(zhì)。植物根、莖、葉等器官都含有大量纖維素。棉花是自然界中纖維素含量最高天然產(chǎn)物。一纖維素和纖維素酶第2頁(yè)2.纖維素酶組成及作用
一纖維素和纖維素酶第3頁(yè)3、纖維素分解能分解纖維素微生物有各種細(xì)菌、真菌和少數(shù)放線菌。4、纖維素酶活性測(cè)定試驗(yàn):方法:濾紙瓦解法一纖維素和纖維素酶第4頁(yè)一纖維素和纖維素酶第5頁(yè)以下生物能分解纖維素是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌
A、①②③④⑤B、②③⑤
C、②③④⑤D、③⑤C練一練:一纖維素和纖維素酶第6頁(yè)二、纖維素分解菌篩選
1.纖維素分解菌篩選方法
剛果紅染色法這種方法能夠經(jīng)過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選一纖維素和纖維素酶第7頁(yè)2.纖維素分解菌篩選方法原理
一纖維素和纖維素酶第8頁(yè)1.以下關(guān)于纖維素酶說法,錯(cuò)誤是A.纖維素酶是一個(gè)復(fù)合酶,最少包含三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物細(xì)胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖練一練:一纖維素和纖維素酶第9頁(yè)2.利用剛果紅法能夠篩選出纖維素分解菌,以下說法錯(cuò)誤是A.剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B.剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物
C.剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈,則說明已篩
選出了纖維素分解菌一纖維素和纖維素酶第10頁(yè)三、試驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到判別纖維素分解菌培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈菌落一纖維素和纖維素酶第11頁(yè)土壤取樣一纖維素和纖維素酶第12頁(yè)1、為何要在富含纖維素環(huán)境中尋找纖維素分解菌?
因?yàn)樯锱c環(huán)境相互依存關(guān)系,在富含纖維素環(huán)境中,纖維素分解菌含量相對(duì)提升,所以從這種土樣中取得目標(biāo)微生物幾率要高于普通環(huán)境。想一想一纖維素和纖維素酶第13頁(yè)2、假如找不到適當(dāng)環(huán)境,可將濾紙埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進(jìn)土壤中多深?
將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)集中,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存適宜環(huán)境。普通應(yīng)將濾紙埋于深約10cm左右土壤中。一纖維素和纖維素酶第14頁(yè)選擇培養(yǎng)一纖維素和纖維素酶第15頁(yè)1.選擇培養(yǎng)目標(biāo)增加纖維素分解菌濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需要微生物想一想一纖維素和纖維素酶第16頁(yè)思索:為何選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需微生物?在選擇培養(yǎng)條件下,能夠使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件微生物得到快速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件微生物繁殖被抑制,所以能夠起到“濃縮”作用一纖維素和纖維素酶第17頁(yè)a.旁欄中配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為何?b.這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否含有選擇作用?假如含有,是怎樣進(jìn)行選擇?是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑有選擇作用,本配方中碳源是纖維素,所以能分解纖維素微生物能夠大量繁殖。2.制備選擇培養(yǎng)基一纖維素和纖維素酶第18頁(yè)c.你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照試驗(yàn),說明選擇培養(yǎng)基作用用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照一纖維素和纖維素酶第19頁(yè)梯度稀釋按照課題1稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋,稀釋最大倍數(shù)到106一纖維素和纖維素酶第20頁(yè)涂布培養(yǎng)一纖維素和纖維素酶第21頁(yè)涂布培養(yǎng)一纖維素和纖維素酶第22頁(yè)剛果紅染色法方法一:先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二:在倒平板時(shí)就加入剛果紅思索:這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?一纖維素和纖維素酶第23頁(yè)一纖維素和纖維素酶第24頁(yè)挑選產(chǎn)生透明圈菌落接種到纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基上,在300C-370C培養(yǎng),可取得純培養(yǎng)。挑取產(chǎn)生顯著透明圈菌落,普通即為分解纖維素菌落。采取單菌落(單細(xì)胞)挑取法一纖維素和纖維素酶第25頁(yè)本課題對(duì)分解纖維素微生物進(jìn)行了初步篩選。不過,這只是分離純化第一步。為了確定得到是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶試驗(yàn)。纖維素酶測(cè)定方法,普通采取對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后產(chǎn)生葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。四、課題延伸一纖維素和纖維素酶第26頁(yè)1.在富含纖維素環(huán)境中尋找纖維素分解菌,符合以下哪一生物學(xué)觀點(diǎn)?A.生物結(jié)構(gòu)與功效相適應(yīng)觀點(diǎn)
B.生物結(jié)構(gòu)與功效整體性觀點(diǎn)C.生物與環(huán)境相適應(yīng)觀點(diǎn)
D.生物發(fā)展進(jìn)化觀點(diǎn)練一練:一纖維素和纖維素酶第27頁(yè)2.從土壤中分離取得某種微生物步驟是①土壤取
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