第八章 胚軸的特化與體軸的建立

第九章胚軸的特化與體軸的建立目前一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點胚胎不但要產(chǎn)生不同類型的細胞，而且要由這些細胞構(gòu)成功能性的組織和器官并形成有序空間結(jié)構(gòu)的形體模式（bodyplan）。胚胎細胞形成不同組織、器官，構(gòu)成有序空間結(jié)構(gòu)的過程稱為圖式形成（patternformation）。在動物胚胎發(fā)育中，最初的圖式形成主要涉及胚軸（embryonicaxes）形成及其一系列相關的細胞分化過程。胚軸指胚胎的前－后軸（anterior-posterioraxes）和背–腹軸（dorsal-ventralaxis）。胚軸形成是在一系列基因的多層次、網(wǎng)絡調(diào)控下完成的。目前二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點爪蟾尾芽期胚胎的前后軸、背腹軸和左右軸（中側(cè)軸），互成垂直角度。目前三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點一、果蠅胚軸的形成現(xiàn)已篩選到與胚胎前后軸和背腹軸形成有關的約50個母體效應基因（maternaleffectgene）和120個合子基因（zygoticgene）。通過對這些基因的研究，我們對果蠅胚軸形成的調(diào)控機制已有了一個較為清晰的認識。在果蠅最初的發(fā)育中，由母體效應基因構(gòu)建位置信息的基本網(wǎng)絡，激活合子基因的表達，控制果蠅形體模式的建立。目前四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅的卵、胚胎、幼蟲和成體都具有明確的前-后軸和背-腹軸。果蠅形體模式的形成是沿前-后軸和背-腹軸進行的。果蠅胚胎和幼蟲沿前-后軸可分為頭節(jié)、3個胸節(jié)和8個腹節(jié)，兩末端又分化出前面的原頭（acron）和尾端的尾節(jié)（telson）；沿背腹軸分化為背部外胚層、腹側(cè)外胚層、中胚層和羊漿膜。1.果蠅胚胎的極性目前五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅沿前后軸、背腹軸和中側(cè)軸建立形體模式。目前六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅幼蟲與成體分節(jié)的比較目前七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點早在20世紀初，胚胎學家就注意到很多動物定位于受精卵中特定部位的細胞質(zhì)與胚胎某些特定部位的發(fā)育有關。果蠅卵前、后極少量細胞質(zhì)的流失，會分別造成胚胎缺失頭胸部和腹部結(jié)構(gòu)，其他部位細胞質(zhì)的少量流失都不會影響形體模式形成。這說明果蠅卵子前后極的細胞質(zhì)中含有與果蠅圖式形成有關的信息。目前八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅早期胚軸形成涉及一個由母體效應基因產(chǎn)物構(gòu)成的位置信息網(wǎng)絡。在這個網(wǎng)絡中，一定濃度的特異性母源性RNA和蛋白質(zhì)沿前–后軸和背–腹軸的不同區(qū)域分布，以激活胚胎基因組的程序。有4組母體效應基因與果蠅胚軸形成有關，其中3組與胚胎前–后軸的決定有關，另一組基因決定胚胎的背腹軸。目前九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點決定前后軸的3組母體效應基因包括：前端系統(tǒng)（anteriorsystem）決定頭胸部分節(jié)的區(qū)域，后端系統(tǒng)（posteriorsystem）決定分節(jié)的腹部，末端系統(tǒng)（terminalsystem）決定胚胎兩端不分節(jié)的原頭區(qū)和尾節(jié)。另一組基因即背腹系統(tǒng)（dorsoventralsystem），決定胚胎的背–腹軸。目前十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點在卵子發(fā)生過程中，這些母體效應基因的mRNA由滋養(yǎng)細胞合成轉(zhuǎn)運至卵子，定位于卵子的一定區(qū)域。這些mRNA編碼轉(zhuǎn)錄因子或翻譯調(diào)控蛋白因子，它們在受精后立即翻譯且分布于整個合胞體胚盤中，激活或抑制一些合子基因的表達，調(diào)控果蠅胚軸的形成。這些母體效應基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物又稱為形態(tài)發(fā)生素（morphogen）。目前十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點滋養(yǎng)細胞合成mRNA,rRNA，甚至是完整的核糖體，并通過細胞間橋的胼合體，單向轉(zhuǎn)運到卵母細胞里。目前十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅前后極性的產(chǎn)生果蠅胚胎、幼蟲、成體的前后極性均來源于卵子的極性。對于調(diào)節(jié)胚胎前–后軸的形成有4個非常重要的形態(tài)發(fā)生素：BICOID(BCD)和HUNCHBACK(HB)調(diào)節(jié)胚胎前端結(jié)構(gòu)的形成，NANOS(NOS)和CAUDAL(CDL)調(diào)節(jié)胚胎后端結(jié)構(gòu)的形成。2.果蠅前–后軸的形成目前十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點形態(tài)發(fā)生素調(diào)節(jié)首先表達的合子基因，即缺口基因（gapgene）的表達。不同濃度缺口基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物引起成對控制基因（pair-rulegene）的表達，形成與前后軸垂直的7條表達帶。成對控制基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物激活體節(jié)極性基因（segmentpolaritygene）的轉(zhuǎn)錄，進一步將胚胎劃分為14個體節(jié)。缺口基因、成對控制基因以及體節(jié)極性基因共同調(diào)節(jié)同源異型基因（homeoticgene）的表達，決定每個體節(jié)的發(fā)育命運。目前十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅形體模式建成過程中沿前后軸不同層次基因內(nèi)的表達。目前十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點不同組的基因順序表達沿前后軸建立身體的模式。目前十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點前端系統(tǒng)至少包括4個主要基因，其中bicoid（bcd）基因?qū)τ谇岸私Y(jié)構(gòu)的決定起關鍵的作用。BCD具有組織和決定胚胎極性與空間圖式的功能。

bcd是一種母體效應基因，其mRNA由滋養(yǎng)細胞合成，后轉(zhuǎn)運至卵子并定位于預定胚胎的前極。exuperantia、swallow和staufen基因與bcdmRNA的定位有關。前端組織中心目前十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點bcdmRNA由滋養(yǎng)細胞合成，后轉(zhuǎn)移至卵細胞中并定位于卵細胞的前極。目前十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點BCD具有組織和決定胚胎極性與空間圖式的功能目前十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點bcdmRNA3’末端非翻譯區(qū)中含有與其定位有關的序列。受精后bcdmRNA迅速翻譯，BCD蛋白在前端累積并向后端彌散，形成從前向后穩(wěn)定的濃度梯度，主要覆蓋胚胎前2/3區(qū)域。目前二十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點母源性基因bicoidmRNA在卵子中的分布以及受精后biocoid蛋白的濃度梯度。隨著BCD蛋白在胚胎中的擴散，這種蛋白質(zhì)也開始降解——它有著大約30分鐘的半衰期。這種降解對于建立起前后濃度梯度是非常重要的。

目前二十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點bcdmRNA在受精后迅速翻譯，形成BCD蛋白從前到后的梯度。突變型的BCD均勻分布，不能形成前后濃度梯度目前二十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點bcd基因編碼的BCD蛋白是一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子。另一母體效應基因hunchback（hb）是其靶基因之一,控制胚胎胸部及頭部部分結(jié)構(gòu)的發(fā)育。hb在合胞體胚盤階段開始翻譯，表達區(qū)域主要位于胚胎前部，HB蛋白從前向后也形成一種濃度梯度。hb基因的表達受BCD蛋白濃度梯度的控制，只有BCD蛋白的濃度達到一定臨界值才能啟動hb基因的表達。目前二十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點母源性bicoid蛋白控制合子型基因hunchback的表達。

目前二十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點四種形態(tài)發(fā)生素在果蠅受精卵和胚胎中沿前后軸分布的濃度變化。目前二十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點hunchback又可開啟一些缺口基因如giant、krüppel和knips等基因的表達。缺口基因按一定順序沿前后軸進行表達。目前二十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點krüppel基因的活性受hunchback蛋白的控制。目前二十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點不同靶基因的啟動子與BCD蛋白具有不同的親和力，BCD蛋白的濃度梯度可以同時特異性地啟動不同基因的表達，從而將胚胎劃分為不同的區(qū)域。btd、ems和otd基因很可能也是BCD蛋白的靶基因。目前二十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點后端系統(tǒng)包括約10個基因，這些基因的突變都會導致胚胎腹部的缺失。在這一系統(tǒng)中起核心作用的是nanos（nos）基因。后端系統(tǒng)在控制圖式形成中起的作用與前端系統(tǒng)有相似之處，但發(fā)揮作用的方式與前端系統(tǒng)不同。后端組織中心目前二十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點后端系統(tǒng)并不像BCD蛋白那樣起指導性的作用，不能直接調(diào)節(jié)合子基因的表達，而是通過抑制一種轉(zhuǎn)錄因子的翻譯來進行調(diào)節(jié)。在果蠅卵子發(fā)生過程中，nosmRNA定位于卵子后極。nos基因的編碼產(chǎn)物NANOS（NOS）蛋白活性從后向前彌散形成一種濃度梯度。NOS蛋白的功能是在胚胎后端區(qū)域抑制母性hbmRNA的翻譯。目前三十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點NanosmRNA也是由滋養(yǎng)細胞合成，后轉(zhuǎn)運至卵細胞中，定位于卵細胞的后極。目前三十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點母源性hunchback蛋白濃度梯度的建立

目前三十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點hb基因是在卵子發(fā)生過程中轉(zhuǎn)錄的母體效應基因，hbmRNA在卵子中是均勻分布的。在卵裂階段HB蛋白開始合成。分布在胚胎后部的hbmRNA的翻譯被NOS的濃度梯度所抑制，而在前部BCD蛋白濃度梯度可以激活合子hb基因的表達。結(jié)果HB蛋白的分布區(qū)域只位于胚胎前半部分。NOS對hb和bcd基因表達的抑制作用是在翻譯水平上進行的。目前三十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點另一個重要的母源性產(chǎn)物caudal（cdl）mRNA最初也是均勻分布于整個卵質(zhì)內(nèi)，BCD能抑制cdlmRNA的翻譯。在BCD活性從前到后降低的濃度梯度作用下形成CDL蛋白從后到前降低的濃度梯度。cdl基因的突變導致腹部體節(jié)發(fā)育不正常。目前三十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點四種形態(tài)發(fā)生素在果蠅受精卵和胚胎中沿前后軸分布的濃度變化。目前三十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點前端系統(tǒng)和后端系統(tǒng)蛋白因子之間的翻譯調(diào)控確立了果蠅的前后軸。目前三十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點末端系統(tǒng)包括約9個母體效應基因。這個系統(tǒng)基因的失活會導致胚胎不分節(jié)的部分，即前端原頭區(qū)和后端尾節(jié)缺失。在這一系統(tǒng)中起關鍵作用的是torso（tor）基因。如果前端和后端系統(tǒng)都失活，果蠅胚胎仍可產(chǎn)生某些前后圖式，形成具有兩個尾節(jié)的胚胎。末端系統(tǒng)：TORSO信號途徑目前三十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點Torso系統(tǒng)基因的失活會導致胚胎不分節(jié)的部分，即前端原頭區(qū)和后端尾節(jié)缺失目前三十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點tor基因編碼一種跨膜酪氨酸激酶受體（receptortyrosinekinase，RTK），在整個合胞體胚胎的表面表達。其NH2－基端位于細胞膜外，COOH基端位于細胞膜內(nèi)。當胚胎前、后端細胞外存在某種信號分子（配體）時可使TOR特異性活化，最終導致胚胎前、后末端細胞命運的特化。torso-like（tsl）基因可能編碼這一配體。目前三十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點末端系統(tǒng)：Torso信號途徑目前四十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點受體蛋白torso參與胚胎末端的特化。目前四十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點TOR與配體結(jié)合后，引起自身磷酸化，經(jīng)一系列信號傳遞，最終激活合子靶基因的表達。在卵子發(fā)生過程中，tsl在卵子前極的邊緣細胞和卵室后端的極性濾泡細胞中表達。TSL蛋白被釋放到卵子兩極處的卵周隙中，由于TOR蛋白過量，TSL不會擴散末端區(qū)以外，從而保證tor基因只在末端區(qū)被活化。除TSL外，末端系統(tǒng)所需要的其他成分如trk、fssDN和fssDph在胚胎中都是均勻分布的。目前四十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點Torso信號傳導途徑目前四十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點影響果蠅胚胎前后極性的母體效應基因目前四十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點目前四十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點3.果蠅背–腹軸的形成與果蠅胚軸形成有關的4組母體效應基因中，背–腹系統(tǒng)最為復雜，涉及約20個基因。其中dorsal（dl）等基因的突變會導致胚胎背部化，即產(chǎn)生具有背部結(jié)構(gòu)而沒有腹部結(jié)構(gòu)的胚胎。與此相反，cactus等基因的突變則引起胚胎腹部化，產(chǎn)生只具有腹部結(jié)構(gòu)的胚胎。目前四十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點背–腹系統(tǒng)的作用方式與末端系統(tǒng)有相似之處。通過一種局部分布的信號分子，即定位于卵子腹側(cè)卵黃膜上的配體激活分布于腹側(cè)卵黃膜上的受體，進而調(diào)節(jié)合子基因的表達。背-腹系統(tǒng)對合子靶基因表達的調(diào)節(jié)方式與前端系統(tǒng)相似，通過一種轉(zhuǎn)錄因子的濃度梯度來完成。目前四十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點但背腹系統(tǒng)濃度梯度形成的方式卻與前端系統(tǒng)完全不同。dl基因是這一信號傳導途徑的最后一個環(huán)節(jié)，它編碼一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子。dlmRNA和DL蛋白在卵子中是均勻分布。當胚胎發(fā)育到第9次細胞核分裂之后，細胞核遷移到達合胞體胚盤的外周皮質(zhì)層，在腹側(cè)的DL蛋白開始往核內(nèi)聚集，但背側(cè)的DL蛋白仍位于胞質(zhì)中。從而，使DL蛋白在細胞核內(nèi)的分布沿背腹軸形成一種濃度梯度。目前四十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點DL蛋白定位于細胞核中的機制cactus基因與DL蛋白能否進入細胞核這一調(diào)控過程有關。CACTUS與DL結(jié)合時，DL蛋白不能進入細胞核。目前四十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點toll基因在這一系統(tǒng)中具有及其重要的作用。TOLL是一種跨膜受體蛋白，其配體分子也是母源性產(chǎn)物，是sp?tzle基因編碼蛋白的裂解片段。Sp?tzle蛋白由卵室腹側(cè)的特異性濾泡細胞產(chǎn)生，在胚胎發(fā)育的早期被釋放定位于卵周隙中。Sp?tzle蛋白與DL受體結(jié)合并使之活化，進而激發(fā)一系列細胞內(nèi)信號傳導，最終使CACTUS蛋白降解，DL蛋白釋放進而進入細胞核。目前五十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點DL蛋白的濃度梯度通過對下游靶基因的調(diào)控，控制沿背-腹軸產(chǎn)生區(qū)域特異性的位置信息。這種濃度梯度在腹側(cè)組織中可活化合子基因twist（twi）和snail（sna）的表達，同時抑制dpp和zen基因的表達，進而指導腹部結(jié)構(gòu)的發(fā)育。dpp和zen基因在胚胎背側(cè)表達，指導背部結(jié)構(gòu)的發(fā)育。目前五十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點Toll蛋白的活化導致沿背腹軸方向細胞核之間dorsal蛋白梯度的形成。目前五十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅核蛋白dorsal沿背腹軸的梯度將身體分為不同部分的模型。

目前五十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅卵子發(fā)生過程中，母源性的mRNA和蛋白是如何進入卵子的？它們又是如何定位于卵子中特定位置的呢？滋養(yǎng)細胞（nursecell）合成大量的蛋白和mRNA通過胞質(zhì)橋（cytoplasmicbridge）轉(zhuǎn)運至卵細胞中。濾泡細胞在決定卵軸極性方面發(fā)揮這重要的作用。卵子發(fā)生過程中體軸的極化目前五十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅卵子的發(fā)育目前五十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅卵子與15個滋養(yǎng)細胞相連，被一層濾泡細胞（700個左右）覆蓋。卵細胞和濾泡細胞協(xié)同作用確定將來卵子的背腹軸。圖示一個基因僅在卵細胞背前方的濾泡細胞中表達。目前五十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅的卵細胞進入卵室（eggchamber）的后端，與后端的濾泡細胞建立聯(lián)系。但卵細胞與前端的濾泡細胞被滋養(yǎng)細胞隔開。卵細胞中合成gurkenmRNA，而gurken蛋白在局部分泌。Gurken蛋白與后極濾泡細胞上表達的受體torpedo的結(jié)合引起相鄰的濾泡細胞特化為后極濾泡細胞。目前五十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點后極濾泡細胞發(fā)送信號至卵細胞，重排細胞骨架微管，從而將BCD和oskar蛋白分別定位于卵的前端和后端確定了卵的前后軸。隨后卵細胞的核運動到將來的背側(cè)，gurken蛋白的局部釋放使相鄰的濾泡細胞特化為背部的濾泡細胞，卵子將來的背方也得到確定。目前五十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅卵子發(fā)生過程中前后和背腹軸的特化。濾泡細胞的相互作用可引起卵母細胞前后和背腹軸的特化。目前五十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點在卵子發(fā)生過程中，濾泡細胞背腹極性的獲得是由卵細胞的信號調(diào)控的。這個過程與TOR途徑有相似之處，但是信號傳遞的方式卻相反。這個信號傳遞途徑至少包括7個基因，這些基因的突變會影響卵殼和卵的極性。grk、top或cni的突變產(chǎn)生腹部化的胚胎，而fs(1)k10、sqd、spir或capu的失活則產(chǎn)生背部化的卵和胚胎。目前六十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點分節(jié)基因的功能是把早期胚胎沿前–后軸分為一系列重復的體節(jié)原基。分節(jié)基因的突變可使胚胎缺失某些體節(jié)或體節(jié)的某些部分。根據(jù)分節(jié)基因的突變表型及作用方式可分為三類：缺口基因、成對控制基因和體節(jié)極性基因，這三類基因的調(diào)控是逐級進行的。4.分節(jié)基因與胚胎體節(jié)的形成目前六十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點首先由母體效應基因控制缺口基因的活化，其次缺口基因之間互相調(diào)節(jié)彼此的轉(zhuǎn)錄且共同調(diào)節(jié)成對控制基因的表達，然后成對控制基因之間相互作用，把胚體分隔成為一系列重復的體節(jié)，并且進一步控制體節(jié)極性基因的表達。所以，胚盤末期的每一個體節(jié)原基都具有其獨特基因表達的組合，從而決定每個體節(jié)的特征。目前六十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點缺口基因（gapgene）的表達區(qū)域為一些較寬的區(qū)域，每個區(qū)域的寬度約相當于3個體節(jié)，表達區(qū)之間可有部分重疊。當缺口基因突變時胚胎缺失相應的區(qū)域。缺口基因直接受母體效應基因的調(diào)控。缺口基因最初通常在整個胚胎中都有較弱的表達，然后隨著卵裂的進行逐漸變成一些不連續(xù)的區(qū)域。缺口基因的表達最初由母體效應基因啟動，其表達圖式的維持可能依賴于缺口基因之間的相互作用。目前六十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅胚胎的體節(jié)與副體節(jié)目前六十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點Gap基因Krüppel在果蠅胚胎發(fā)育過程中不同時期的表達。目前六十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點成對控制基因（pair-rulegene)的表達區(qū)域以兩個體節(jié)為單位且具有周期性，在相互間隔的一個副體節(jié)中表達。這些基因的功能是把缺口基因確定的區(qū)域進一步分成體節(jié)。成對控制基因的表達是胚胎出現(xiàn)分節(jié)的最早標志，它們在細胞化胚盤期第13次核分裂時表達。表達圖式沿前后軸形成一系列斑馬紋狀的條帶，將胚胎分為預定體節(jié)。目前六十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅胚胎進行細胞化之前成對控制基因even-skipped（blue）和fushitarazu（brown）的條紋狀表達模式。目前六十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點有三個基因直接受到缺口基因的調(diào)控，即hairy、even-skipped（eve）和runt基因，稱為初級成對控制基因。缺口基因可以識別初級成對控制基因的啟動子。關于缺口基因的作用方式還不是很清楚。有些證據(jù)表明缺口蛋白對成對控制基因表達起抑制作用，但也有實驗表明缺口基因既可以在一定的帶區(qū)活化基因表達，又可同時抑制其他表達帶區(qū)的形成。目前六十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點缺口基因的作用方式：既可以在一定的帶區(qū)活化基因表達，又可同時抑制其他表達帶區(qū)的形成。目前六十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點體節(jié)極性基因（segmentpolaritygene）在每一體節(jié)的特定區(qū)域細胞中表達。engrailed（en）、hedgehog（hh）和wingless（wg）基因是最重要的體節(jié)極性基因。前兩者在每一副體節(jié)最前端的一列細胞中表達，而后者在每一副體節(jié)的最后一列細胞中表達；這兩個基因的表達界限正好確立了副體節(jié)的界線。果蠅晚期胚胎和幼體的每個體節(jié)由前一副體節(jié)的后區(qū)和后一副體節(jié)的前區(qū)構(gòu)成。目前七十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅晚期胚胎（11期）中engrailed基因的表達。

目前七十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點engrailed、wingless和hedgehog的相互作用目前七十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點hedgehog信號途徑。

目前七十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅早期胚胎、晚期胚胎和成體中副體節(jié)和體節(jié)的對應關系。

目前七十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點在體節(jié)界限確定之后每個體節(jié)的結(jié)構(gòu)被進一步特化，此過程由主調(diào)節(jié)基因（masterregulatorygene）或稱為同源異型選擇者基因調(diào)控完成。同源異型選擇者基因的突變或異位表達可引起同源轉(zhuǎn)化現(xiàn)象（homeotictransformation）。同源異型選擇者基因表達圖式的建立受成對控制基因和缺口基因的調(diào)控。果蠅大部分同源異型選擇者基因位于3號染色體相鄰的兩個區(qū)域，其一為觸角足復合體Antp-C，另一個為雙胸復合體BX-C，二者統(tǒng)稱同源異型復合體HOM-C。目前七十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點觸角足復合體Antp-C和雙胸復合體BX-C同源異型框選擇者基因目前七十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點HOM-C結(jié)構(gòu)和表達示意圖目前七十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點雙胸復合體BX-C的突變導致翅膀和平衡棒之間的同源轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。目前七十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點HOM-C基因的結(jié)構(gòu)是十分復雜的，有的基因有多個啟動子和多個轉(zhuǎn)錄起始位點。其另一個重要特征是都含有一段的保守序列，稱為同源異型框（homeobox）。含有同源異型框的基因統(tǒng)稱為同源異型框基因（homeoboxgene）。由同源異型框編碼的同源異型結(jié)構(gòu)域（homeodomain）可形成與DNA特異性結(jié)合的螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋結(jié)構(gòu)（helix-turn-helix）。目前七十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點HOM-C同源異型框形成與DNA特異結(jié)合的螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋結(jié)構(gòu)。目前八十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點果蠅HOM-C的表達使每一個體節(jié)被進一步特化，這一機制在無脊椎動物和脊椎動物中都十分保守。目前八十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點目前對果蠅胚胎早期發(fā)育機制已基本了解，胚胎的前–后軸和背–腹軸分別獨立地由母體效應基因產(chǎn)物決定。這些母體效應基因主要編碼轉(zhuǎn)錄因子，它們的產(chǎn)物通常形成一種濃度梯度并產(chǎn)生特異的位置信息，以進一步激活一系列合子基因的表達。隨著這些基因的表達，胚胎被分成不同的區(qū)域。每個區(qū)域表達特異性基因的組合，沿前–后軸形成間隔性的圖式，即體節(jié)的前體形式。最后每一體節(jié)通過HOM-C基因的特異性表達而確定其特征。不同物種之間圖式形成的機制有著驚人的相似，果蠅圖式形成機制的研究成果對于其他動物的發(fā)育機制研究具有重要的借鑒意義。目前八十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點二、兩棲類胚軸形成兩棲類是調(diào)整型胚胎發(fā)育的典型模型，也是在胚軸形成機制方面了解較多的脊椎動物。脊椎動物胚軸的形成不僅與定位于囊胚期大量分裂球中的各種決定因子相關，更重要的作用機制則存在于以后的發(fā)育階段，發(fā)生在鄰近細胞之間的一系列相互作用。目前八十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點兩棲類胚胎的背-腹軸和前-后軸是由受精時卵質(zhì)的重新分布而決定的。受精時在精子入卵處的對面產(chǎn)生有色素差異的灰色新月區(qū)，由此標志預定胚胎的背側(cè)，精子進入的一側(cè)發(fā)育成為胚胎的腹側(cè)。在動物極附近的背側(cè)形成頭部，而與其相反的一側(cè)形成尾，從而形成胚胎的背-腹軸和前-后軸。中側(cè)軸或左右軸是隨著脊索的形成而確定的。目前八十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點受精時的皮層轉(zhuǎn)動形成兩棲類的左右對稱。目前八十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點在原腸作用過程中，由組織者（organizer）誘導背部外胚層形成中樞神經(jīng)系統(tǒng)的原基—神經(jīng)管，并作用于側(cè)中胚層共同形成背-腹軸和前-后軸。背唇細胞及其衍生物脊索和脊索中胚層雖然還不足以作為整個胚胎的誘導者，在以后器官原基形成和器官形成中都存在誘導作用，但組織者啟動了胚胎發(fā)育中的一系列誘導事件。1.組織者和Nieuwkoop中心目前八十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點組織者細胞在早期胚胎發(fā)育中的重要功能：組織者能夠啟動原腸作用；組織者細胞有能力發(fā)育成背部中胚層包括前脊索板，脊索中胚層等；組織者能夠誘導外胚層背部化形成神經(jīng)板，并使后者發(fā)育為神經(jīng)管。組織者能夠誘導其周圍的中胚層背部化，分化為側(cè)板中胚層，而不是腹側(cè)中胚層。目前八十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點爪蟾和其他脊椎動物胚胎前-后軸的形成在背-腹軸形成之后，胚胎的背部一旦建立隨即開始中胚層細胞的內(nèi)卷運動，并建立前-后軸。最先經(jīng)過胚孔背唇遷入的中胚層細胞產(chǎn)生前端結(jié)構(gòu)，從側(cè)唇和腹唇遷入的中胚層細胞形成后端結(jié)構(gòu)。目前八十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點在兩棲類囊胚中最靠近背側(cè)的一群植物半球細胞，對組織者具有特殊的誘導能力，稱為Nieuwkoop中心（Nieuwkoopcenter）。Nieuwkoop中心是兼具動物極和植物極細胞質(zhì)的特殊區(qū)域，含有背部中胚層誘導信號。原腸作用過程中新形成的中胚層是由其下方的植物極半球預定內(nèi)胚層細胞對動物半球預定外胚層細胞誘導的結(jié)果。Nieuwkoop中心目前八十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點爪蟾組織者和Nieuwkoop中心及中胚層誘導模型目前九十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點

Nieuwkoop中心的分子生物學研究爪蟾的內(nèi)胚層細胞通過誘導預定中胚層細胞表達XenopusBrachyury（Xbra）基因，進而誘導中胚層的形成。最靠近背側(cè)的植物半球細胞，由于表達一些特殊的細胞因子而形成Nieuwkoop中心。β-CATENIN是Nieuwkoop中心的一個主要細胞因子。2.兩棲類胚軸形成的機制目前九十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點組織者的精細結(jié)構(gòu)。組織者特異基因的表達，可以把早期組織者細分成含有不同信息組合的亞區(qū)。目前九十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點β-catenin是一種母體效應基因，其編碼的蛋白質(zhì)β-CATENIN既能錨定細胞膜上的鈣粘著蛋白，又是一個核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子。β-CATENIN在受精時卵質(zhì)的旋轉(zhuǎn)移動過程中在預定胚胎背部累積，在整個早期卵裂階段仍然主要在胚胎背部累積。到卵裂晚期只有Nieuwkoop中心的細胞具有β-CATENIN。β-CATENIN

對于形成背部結(jié)構(gòu)是必要的。目前九十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點β-CATENIN在背腹軸特化中的作用目前九十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點β-CATENIN屬于Wnt信號傳導途徑的一個分子，糖原合成激酶-3（GSK-3）對β-CATENIN有負調(diào)控作用，進而對背側(cè)細胞的分化起抑制作用。在腹側(cè)細胞中GSK-3介導的磷酸化作用引起β-CATENIN的降解，而在背側(cè)細胞中由于存在GSK-3的抑制因子Disheveled（DSH）蛋白，所以背側(cè)的β-CATENIN不會被降解。DSH蛋白開始存在于爪蟾未受精卵植物半球的皮層部，受精時沿微管遷移到胚胎的背側(cè)起作用。目前九十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點β–CATENIN是WNT信號途徑中的成分。目前九十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點DSH將β–CATENIN定位于胚胎背部的機制1目前九十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點DSH將β–CATENIN定位于胚胎背部的機制2目前九十八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點DSH將β–CATENIN定位于胚胎背部的機制3目前九十九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點β-CATENIN與一種普遍存在的轉(zhuǎn)錄因子TCF3結(jié)合形成的復合物能夠激活對胚軸形成具有重要作用的其他基因，如siamois（sms）基因。SMS能激活goosecoid基因的表達。goosecoid基因是Nieuwkoop中心分泌蛋白因子作用的主要靶基因之一。gcdmRNA表達的區(qū)域與組織者的范圍有關。GCD能夠激活腦形成關鍵基因Xotx2，使其在前端中胚層和預定腦外胚層表達。目前一百頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點背部中胚層誘導形成組織者的可能機制目前一百零一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點gcd基因的激活也同時受到定位于植物半球和Nieuwkoop中心的TGF－β家族蛋白產(chǎn)物的協(xié)同作用。這里所涉及的TGF－β蛋白因子是Vg1、VegT和Nodal相關蛋白。β-CATENIN與VG1、VEGT信號相互作用的結(jié)果形成Nodal-相關蛋白從背側(cè)到腹側(cè)的濃度梯度。Nodal-相關蛋白的濃度梯度使中胚層細胞分化。含有大量Nodal相關蛋白的分化為組織者，較少的分化為側(cè)板中胚層，不含Nodal相關蛋白的分化成腹側(cè)中胚層。目前一百零二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點β-CATENIN與TGF－β家族蛋白協(xié)同作用誘導組織者形成的機制目前一百零三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點總之，為維持正常的發(fā)育，在胚胎背部細胞中必須含有β-CATENIN，并使sms基因表達，SMS與TGF-β基因家族的蛋白質(zhì)協(xié)同作用使gcd基因激活，在SMS和GCD等共同作用下才能形成組織者。組織者的形成涉及多種基因的激活，存在于Nieuwkoop中心的分泌蛋白激活位于其上方中胚層細胞中一系列轉(zhuǎn)錄因子，后者再激活編碼組織者分泌產(chǎn)物的一些基因。目前一百零四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點BMP4是最重要的上皮分化和腹側(cè)化誘導因子。對于神經(jīng)發(fā)生而言，它是抑制因子或抗神經(jīng)化因子，其功能與組織者正好相反。組織者分泌的NGN、CHD、Nodal相關蛋白－3和FST對BMP4均有抑制作用。因此組織者的功能是分泌抑制誘導作用的可溶性蛋白因子，而不是直接誘導中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)生。第一類組織者分泌性蛋白因子和BMP抑制因子目前一百零五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點爪蟾卵經(jīng)紫外線照射后引起背部結(jié)構(gòu)的缺失，可以由注射NGN蛋白而挽救。NGN對背部結(jié)構(gòu)的誘導呈劑量依賴性。目前一百零六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點NGN在組織者區(qū)的定位目前一百零七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點ChordinmRNA在組織者區(qū)的定位目前一百零八頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點組織者區(qū)蛋白質(zhì)因子的相互作用目前一百零九頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點咽鰓區(qū)內(nèi)胚層和頭部中胚層形成的內(nèi)-中胚層組織構(gòu)成胚孔背唇的前緣。這些細胞不僅能誘導最前端的頭部結(jié)構(gòu)，而且還能夠阻滯WNT信號傳導途徑。WNT家族的成員之一WNT8與BMP4相似，能夠抑制神經(jīng)誘導。組織者分泌的CERBERUS（CBR）和內(nèi)中胚層分泌的FRZB和DICKKOPF（DCK）蛋白因子可以組織WNT信號傳導途徑。第二類組織者分泌性蛋白因子和WNT抑制因子目前一百一十頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點Xwnt8引起中胚層的腹部化并抑制頭部結(jié)構(gòu)的形成目前一百一十一頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點Xwnt8在緣區(qū)的表達目前一百一十二頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點注射CERBERUS（CBR）可誘導出兩個頭部結(jié)構(gòu)目前一百一十三頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點FRZB的表達與功能。注射FRZB引起軀干部形成的抑制目前一百一十四頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點外胚層分化為上皮和神經(jīng)組織的不同機制目前一百一十五頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點隨著前端神經(jīng)系統(tǒng)的區(qū)域性特化神經(jīng)管，后端開始進行分化。后端的分化由胚胎后端產(chǎn)生后端化因子進行調(diào)控。成纖維細胞生長因子eFGF、WNT3a和視黃酸（Retinoicacid，RA）都是后端化因子。RA主要作用于后腦的圖式形成；eFGF對于脊髓的分區(qū)最為重要；而WNT3a可以抑制前端控制基因的表達，還可以協(xié)調(diào)RA和eFGF的作用。后端化因子目前一百一十六頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點后端化因子RA的作用目前一百一十七頁\總數(shù)一百三十四頁\編于九點脊椎動物中側(cè)軸形成的關鍵事件都是原腸胚左側(cè)側(cè)板中胚層表達的nodal-相關基因調(diào)控。爪蟾的nodal-相關基因-1（Xnr-1）的表達區(qū)域僅限于原腸胚左側(cè)，Xnr-