基因擴增實驗室室內(nèi)質(zhì)控SOP知識講解

1目的：了解并控制實驗室檢測的精密度的變化2適用范圍：核酸擴增熒光定量檢測，使用Line-Gene基因擴增儀實驗室3操作人：****4操作：4.1自制室內(nèi)質(zhì)控品：a)自制室內(nèi)質(zhì)控品來自臨床收集的已知HBV4-6每收到一份凍存于-20℃。收集到約35ml時，取出樣品，置室溫復(fù)融。將各管倒入無菌帶蓋的小三角燒瓶中充分混勻。b)將以上的混合血清，以每管120ul，分裝于0.5ml離心管內(nèi)，分裝若干管。剩余血清根據(jù)廢物處理及生物防護操作程序處理。c)將上述取約23管裝一小袋，其余20就從-70℃轉(zhuǎn)移1小袋到-20℃冰箱備用。4.2基線測定及計算RCV：在準(zhǔn)備開展質(zhì)控工作當(dāng)月的第一天取上述23管中的三管復(fù)溶，隨病人標(biāo)本、s、cv即R。_x一管，20天后計算各項目的測定結(jié)果的RCV的計算公式：此處的(x)2(xx)2n1xsxssncv100%xnn1_其中為RCV測定中所得23份結(jié)果的均值。Σ表示總和。xn表示結(jié)果的份數(shù),n-1為自由度。4.3繪制RCV圖_____a)計算+2S、-2S、+3S、-3S并在質(zhì)控圖的縱坐標(biāo)上標(biāo)出、xxxxx_x_±2S、±3S的位置，并將其具體值標(biāo)在左側(cè)標(biāo)尺上。x__b)用紅線筆畫出±2S線，用藍筆畫出±3Sxx要儀器等，還應(yīng)填上RCV中測定所得的X、S、CV，測定過程中的特殊情況，（附圖4.4室內(nèi)質(zhì)控：病標(biāo)本測定一管。b)在圖紙下方“日期”的上一行相應(yīng)的日期欄內(nèi)將“測定值”按原始記錄填入，邊填寫邊核對。注意數(shù)據(jù)順序應(yīng)嚴(yán)格按照實際操情況，不得顛倒。未做因。c)畫出每個檢測值所對應(yīng)的圖點。4.5室內(nèi)質(zhì)控圖的使用方法：4.5.1描點線為靶線_±2s為警告線，_±3s為失控線。_a)圖中xxx對于同一批號的質(zhì)控血清不論使用幾個月，其質(zhì)控圖均不變化。只要將圖紙上方的“起止日期”項填入每個月的實際起止日期即可。b)每天將該批號質(zhì)控血清按有關(guān)規(guī)定程序復(fù)融隨同病人的標(biāo)本同時檢測。將面的方法畫出圖上的對應(yīng)點，用直線將該點與前一天的點連接起來。并進行圖形分析和_c)月底計算當(dāng)月全部質(zhì)控血清檢測結(jié)果的x小結(jié)，將質(zhì)量控制圖存入質(zhì)控資料檔案。4.5.2圖形分析：做好的RCV圖中描點。_a)若結(jié)果在±2S線內(nèi)，報告可發(fā)出。x__b)若結(jié)果在±2S線外和±3S線以內(nèi)或出現(xiàn)連續(xù)6點以上在一側(cè)等規(guī)律變xx化，應(yīng)向有關(guān)負(fù)責(zé)人反映并積極尋找原因，但當(dāng)天檢測結(jié)果可以發(fā)出。_d)若結(jié)果在+3Sxe)并將失控情況、必要時復(fù)測標(biāo)本，然后方可發(fā)報告。并將失控情況、查找過程及處理結(jié)果等詳細(xì)記錄登記。4.5.3通過觀察圖形的規(guī)律變化進行誤差分析，消除誤差來源a)號的質(zhì)控血清、操作規(guī)程人員的變換等。在找原因時應(yīng)重點注意“漂移”前的發(fā)生了哪些變動性的因素。b)的降低等。c)連續(xù)多點分布在靶值同一則：目前，一般認(rèn)為質(zhì)控血清的檢測結(jié)果連續(xù)66天以上出現(xiàn)在靶值同一則的可能性小于1.5%.因此凡出現(xiàn)連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一則者均可能性存在非隨機誤差因告可以照常填發(fā)。d)4.5.4通過圖形的資料對比進行誤差分析，消除誤差來源ssa)每個月的月底將該月的全部質(zhì)控血清檢測結(jié)果的和與該測定的和__xx_xs如果當(dāng)月不同則表明檢測的精密度發(fā)生了變化。sb)將使用同一批號的質(zhì)控血清的CT值的和按月份列出。如果逐月上升，__xx_基本一致而s逐月加大，則主要提示常規(guī)工作的精密度下降，應(yīng)重點從操x作、管理上找原因。c)在數(shù)年中，把每個月的CV和失控規(guī)律列成表，可用作檢測質(zhì)量的歷史回顧和趨勢性分析。4.6失控后的處理：4.6.1分析原始數(shù)據(jù)及初步估計失控原因：發(fā)生失控時，對同批實驗檢測的全部原始數(shù)據(jù)結(jié)合近期室內(nèi)質(zhì)控圖和平時經(jīng)驗進行分析，估計失控原因的大體方向。4.6.2對具體檢測過程進行回顧性分析，分析有無特殊情況出現(xiàn)。4.6.3通過選擇性復(fù)查進一步分析判斷失控原因，決定處理辦法。選擇性復(fù)查時應(yīng)包括下述樣品，以便一次性找出原因，及時發(fā)出報告:a)失控時使用的質(zhì)控血清。b)重新打開一瓶相同批號的質(zhì)控血清。c)失控時使用的標(biāo)準(zhǔn)品。d)重新打開一瓶相同批號的標(biāo)準(zhǔn)品。e)新在控并將失控情況、原因和解決方案在檔案中詳細(xì)記錄（見表4.7該程序的變動程序：本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：檢驗科主任、