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文檔簡介

(優(yōu)選)生化檢驗(yàn)報(bào)告的審核目前一頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)主要內(nèi)容常見的生化反應(yīng)原理檢驗(yàn)報(bào)告審核普遍存在的問題檢驗(yàn)報(bào)告審核的建議總結(jié)目前二頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)終點(diǎn)分析法(平衡法)連續(xù)監(jiān)測(cè)法比濁測(cè)定法

一、常見的生化反應(yīng)原理目前三頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)

終點(diǎn)分析法是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對(duì)光吸收強(qiáng)度的大小,對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量的一類分析方法。反應(yīng)混合物進(jìn)行一定時(shí)間反應(yīng)后,達(dá)到平衡終點(diǎn),即在顯色反應(yīng)處于穩(wěn)定階段時(shí),監(jiān)測(cè)其顏色對(duì)光的吸收強(qiáng)度,以此計(jì)算待測(cè)物濃度。分為一點(diǎn)、兩點(diǎn)終點(diǎn)法終點(diǎn)分析法目前四頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)一點(diǎn)終點(diǎn)法

一點(diǎn)終點(diǎn)法:一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)是使用一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試劑混合后,待測(cè)物與試劑的物理化學(xué)反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)時(shí),測(cè)定吸光度,計(jì)算待測(cè)物質(zhì)的濃度。該法要求試劑本底顏色要深,該法具有代表性的試驗(yàn)有:總蛋白、白蛋白、鎂測(cè)定目前五頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)TP反應(yīng)曲線目前六頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)Mg反應(yīng)曲線目前七頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)

二點(diǎn)終點(diǎn)法:一般是用雙試劑,是自動(dòng)化生化分析儀常用的一種方法。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度以及一些干擾物質(zhì)的影響。代表性的試驗(yàn)有葡萄糖等兩點(diǎn)終點(diǎn)法目前八頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)Cre反應(yīng)曲線目前九頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)

測(cè)定底物的消耗或產(chǎn)物生成的速度的化學(xué)方法稱為連續(xù)監(jiān)測(cè)法(又稱動(dòng)態(tài)分析法、速率法或動(dòng)力學(xué)法)。在反應(yīng)速度恒定期(零級(jí)反應(yīng)期)來連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化。以單位時(shí)間酶促反應(yīng)初速度計(jì)算酶活力的大小和代謝物的濃度。連續(xù)監(jiān)測(cè)法目前十頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線目前十一頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線目前十二頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)典型酶聯(lián)法反應(yīng)曲線目前十三頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)AMY反應(yīng)曲線目前十四頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)ALT反應(yīng)曲線目前十五頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)

通過檢測(cè)物質(zhì)對(duì)光的散射或透射強(qiáng)度來測(cè)定物質(zhì)的方法稱比濁法。比濁法可分為化學(xué)比濁法和免疫比濁法,免疫比濁法又分為透射比濁和散射比濁。全自動(dòng)生化儀常用透射比濁法,常用于特種蛋白測(cè)定。其工作曲線為拋物線。

比濁測(cè)定法目前十六頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)比濁測(cè)定法注意事項(xiàng):抗原或抗體量(測(cè)定物)大大過剩,可出現(xiàn)可溶性復(fù)合物,造成誤差。應(yīng)維持反應(yīng)管中抗體蛋白(底物)始終過剩。易受到脂血的影響。目前十七頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)二、報(bào)告審核中的普遍問題責(zé)任心不強(qiáng),未對(duì)結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真審核對(duì)檢測(cè)儀器或試劑方法學(xué)不夠了解專業(yè)知識(shí)欠缺,工作經(jīng)驗(yàn)不足對(duì)儀器檢測(cè)的結(jié)果及室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果過于相信目前十八頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)三、報(bào)告審核的建議結(jié)合臨床資料審核結(jié)合分析項(xiàng)目間的內(nèi)在聯(lián)系審核(專業(yè)知識(shí))結(jié)合影響檢驗(yàn)結(jié)果因素審核檢驗(yàn)項(xiàng)目的方法學(xué)和線性檢驗(yàn)標(biāo)本的影響檢驗(yàn)儀器性能影響結(jié)合當(dāng)日檢驗(yàn)結(jié)果總體趨勢(shì)審核結(jié)果目前十九頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)結(jié)合臨床資料

結(jié)合病人的性別、年齡、臨床診斷、其他檢查結(jié)果審核

例:某病人檢測(cè)的TP為110g/L,該標(biāo)本沒有脂血等影響檢測(cè)結(jié)果的因素臨床診斷:多發(fā)性骨髓瘤另:胰島素與低血糖、病人輸注藥物對(duì)結(jié)果的影響目前二十頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢驗(yàn)項(xiàng)目間的內(nèi)在聯(lián)系各檢測(cè)參數(shù)間存在大小、比例、邏輯關(guān)系例:HDL-C+LDL-C﹤TC、Dbil﹤TbilCK-MB﹤CK(M+B)

α-HBDH﹤LDH(H+M)原發(fā)性甲亢:T3↑、T4↑

、TSH↓等目前二十一頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素

試劑線性范圍:

了解檢驗(yàn)項(xiàng)目試劑的線性范圍,對(duì)超過或低于范圍的項(xiàng)目,必須進(jìn)行相應(yīng)的減量稀釋或增量后重新測(cè)定。目前二十二頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)線性范圍在實(shí)際工作中,用連續(xù)監(jiān)測(cè)法會(huì)遇到檢驗(yàn)結(jié)果為0或者負(fù)值的情況,此時(shí)不能盲目相信該結(jié)果低就出具低值報(bào)告,應(yīng)查看其反應(yīng)曲線例:某病人的尿液AMY檢測(cè)結(jié)果為0U/L

其反應(yīng)曲線如下圖:目前二十三頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)AMY反應(yīng)曲線目前二十四頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)AMY反應(yīng)曲線分析分析:由于測(cè)定物質(zhì)濃度過高處理:對(duì)測(cè)定物質(zhì)進(jìn)行十倍左右的稀釋再測(cè)定,直到反應(yīng)曲線恢復(fù)正常結(jié)果才可靠目前二十五頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué):要了解該項(xiàng)目試劑采用的方法學(xué):例:某病人在測(cè)定心肌酶譜時(shí),其CK:246U/L、CK-MB:286U/L,標(biāo)本無溶血等因素影響其結(jié)果中CK-MB﹥CK目前二十六頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)分析:CK是由M和B兩類亞基組成的二聚體,其構(gòu)成為CK-MB(心型)約占0-3%、CK-MM(肌型)約占97-100%、CK-BB(腦型)約占0-1%

目前二十七頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)

CK-MB采用的檢測(cè)方法為免疫抑制法

原理:正常人體中,CK同工酶中CK-MM﹥CK-MB﹥CK-BB,其中CK-BB含量極少,可忽略。免疫抑制法正是建立于忽略CK-BB的基礎(chǔ)上。采用抗體抑制其M亞基活性,使CK-MM失去活性,而CK-MB失去一半的活性。單測(cè)定B亞基的活性,其結(jié)果×2即為CK-MB活性目前二十八頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)原因分析:由于在患輕度或中度腦損傷、腦血管意外及腦手術(shù)后、新生兒產(chǎn)程窒息造成腦組織發(fā)生實(shí)質(zhì)性損害的病人中,CK-BB會(huì)升高,這時(shí)該方法測(cè)定的CK-MB的活性相當(dāng)于是CK-MB+2CK-BB的活性之和,造成CK-MB活性假性升高目前二十九頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)為什么CK-MB﹥2CK不可能該測(cè)定CK-MB活性=CK-MB+2CK-BB,如果CK-BB﹥CK-MM,結(jié)果要乘2,即CK-MB+2CK-BB﹥CK-BB+CK-MB+CK-MM,測(cè)定的CK-MB活性﹥CK活性,但CK-MB﹥2CK不可能解決方法:其他方法測(cè)定CK-MB的質(zhì)量

目前三十頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢驗(yàn)標(biāo)本的影響標(biāo)本脂血會(huì)使反應(yīng)濁度增加,透光度下降,吸光度增加,從而造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。如TP、TG、UA顯著增高,GGT顯著下降或?yàn)?標(biāo)本溶血會(huì)使K+、ALT、AST、LDH等檢驗(yàn)結(jié)果顯著升高抗凝劑的錯(cuò)誤使用目前三十一頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)儀器性能影響儀器老化、故障、清洗管道堵塞、水質(zhì)不純等均會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響光路老化:表現(xiàn)為ALT、AST等項(xiàng)目結(jié)果重復(fù)性較差水質(zhì)不純、反應(yīng)杯清洗不干凈:表現(xiàn)為無機(jī)物質(zhì)結(jié)果不準(zhǔn)目前三十二頁\總數(shù)三十四頁\編于十六點(diǎn)檢驗(yàn)結(jié)果的總體趨勢(shì)

即使質(zhì)控在控,也要注意當(dāng)日檢驗(yàn)結(jié)果的總體的分布趨勢(shì)如K+的參考區(qū)間為3.5—5.5,中值為4.5,如果當(dāng)日結(jié)果大部分甚至全部低于4.5,即使當(dāng)日質(zhì)控在控,任要考慮結(jié)果是否偏低,應(yīng)重新校準(zhǔn)、質(zhì)控后再測(cè)定如在質(zhì)控中TC(-1S),HDL(+1S),LDL(+1S),雖然在控,如出現(xiàn)大部分HDL+LDL﹥TC,也應(yīng)考

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