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..微生物試驗室生物平安操作規(guī)程目的:制訂本規(guī)那么,保證明驗室工作人員的安康平安、試驗設(shè)備平安衛(wèi)生以及防止對外界環(huán)境造成污染。適用范圍:適用于微生物試驗室人員人身平安、衛(wèi)生安康平安治理及設(shè)備平安。職責(zé):試驗室工作人員必需嚴(yán)格遵守平安操作規(guī)程。一、操作人員平安操作規(guī)程〔1進(jìn)入試驗室的特別要求及離開試驗室的程序?!?〕制止非工作人員進(jìn)入試驗室。參觀試驗室等特別狀況須經(jīng)試驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)前方可進(jìn)入,做好衛(wèi)生防護(hù),并在有關(guān)人員伴隨下方可進(jìn)入,同時留意做好環(huán)境維護(hù)及保密工作?!?〕進(jìn)展感染性試驗時,制止他人進(jìn)入試驗室,或必需經(jīng)試驗室負(fù)責(zé)人同意前方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必需經(jīng)試驗室負(fù)責(zé)人同意方可在試驗室工作?!?〕接觸微生物或含有微生物的物品后,脫掉手套后和離開試驗室前要洗手?!?〕制止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、扮裝及儲存食物。〔6〕盡量以移液器吸取液體,制止口吸?!?〕試驗過程中,嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作,降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生?!?〕每天至少消毒一次工作臺面,活性物質(zhì)濺出后要隨時用75%乙醇或巴氏消毒液消毒?!?〕工作人員應(yīng)承受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關(guān)的潛在危急學(xué)問的培訓(xùn),把握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要承受一次最的培訓(xùn)。人員暴露于感染性物質(zhì)時,準(zhǔn)時向試驗室負(fù)責(zé)人匯報,并記錄事故經(jīng)過和處理方案。〔10〕制止將無關(guān)動物帶入試驗室。二、無菌室平安操作規(guī)程〔1〕無菌培育室每天都要用0.2%的潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用),紫外線照耀消毒30min7530min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內(nèi)同時紫外線消毒?!?〕無菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。〔3〕無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的潔爾滅溶液,等等?!?〕無菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的干凈度符合要求?!?〕需要帶入無菌室使用的器械、平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌?!?〕工作人員進(jìn)入無菌室前,必需用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換專用工作(75%乙醇等消毒劑再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無菌室進(jìn)展操作。〔730風(fēng)。操作完畢,應(yīng)準(zhǔn)時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。〔8〕供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球消毒外外表?!?〕每次操作過程中,均應(yīng)做陰性比照,以檢查無菌操作的牢靠性?!?0〕吸取菌液時,必需用移液器吸取,切勿直接用口接觸吸管。〔11〕接種針每次使用前后,必需通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培育物?!?2〕帶有菌液的吸管,試管,培育皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時后取出沖洗。〔13〕如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)馬上用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30洗滌?!?4〕凡帶有活菌的物品,必需經(jīng)消毒后,才能在水龍頭下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。〔15〕無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在層流無菌風(fēng)開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌養(yǎng)分530分鐘后,倒置于36℃481001個菌落/平皿,100003個菌落/平皿。如超過限度,應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對無菌室進(jìn)展徹底消毒,直至重復(fù)檢查符合要求為止。三、壓力蒸汽滅菌器的平安使用操作程序〔1〕堆放:將需滅菌的物品予以妥當(dāng)包扎,各包之間留有空隙,依次堆放在滅菌桶的篩板上,以蒸汽穿透,提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否到達(dá)要求。〔2〕加水:在鍋體內(nèi)注入生活用水,水位確定要超過電熱管2厘米以上〔不宜過多使用時,每次操作前,必需補足上述水位,以免燒壞電熱管和意外發(fā)生?!?〕密封:在每次使用高壓鍋前,都必需認(rèn)真檢查高壓鍋的出氣伐和平安閥,確保其狀態(tài)完好,如有故障,在故障排解之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi),蓋上鍋蓋并鎖緊?!?〕加熱滅菌:將滅菌器接通與銘牌全都的電源,按下電源開關(guān),接通電源,指示燈亮,表示電源已正常輸入本器,按下開頭按紐電熱管開頭加熱工作;滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。〔5〕開蓋:滅菌完畢后,切勿馬上將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出,否那么:由于液體物品的溫度未能下降,而壓力蒸汽突然釋放,會使液體猛烈沸騰,造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后,方可開啟鍋蓋。四、生物平安柜操作規(guī)程〔1〕確認(rèn)玻璃窗處于關(guān)閉位置后,翻開紫外燈,對平安柜內(nèi)工作空間進(jìn)展滅菌。滅菌完畢后,關(guān)閉紫外燈。平安柜使用前后均需滅菌?!?使之不要被物品堵塞。在無任何阻礙狀態(tài)下,讓平安柜至少工作10分鐘?!?戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩?!?〕按試驗程序放入試驗材料,要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與干凈物質(zhì)分開放置。盡量將.〔5〕盡量防止使用可干擾平安柜內(nèi)氣流流淌的裝置和程序。在操作期間,防止任憑移動材料,防止操作者的手臂在前方開口處頻繁移動,盡量削減氣流干擾。盡量不要使用明火。〔6〕在操作過程中,假設(shè)有物質(zhì)溢出或液體濺出,在將物品移出平安柜前,要對其外表進(jìn)展消毒,為防止平安柜內(nèi)有任何殘留的污染物,在平安柜工作過程中,就要將平安柜內(nèi)外表全部消毒。全部接觸了污染材料的物體,在從平安柜中取出前,要進(jìn)展外表消毒。全部開口容器,從平安柜中拿出前要蓋好?!?〕全部工作完畢后,用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞潦闷桨补駜?nèi)外表,讓平安柜在無任何阻礙的狀況下連續(xù)至少工作5分鐘,以去除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染?!?〕關(guān)閉照明燈和平安柜風(fēng)機。關(guān)閉玻璃門,翻開UV燈消毒。滅菌完畢后,關(guān)閉UV燈?!?〕定期抬起工作區(qū)域下面板,擦拭或沖洗工作面底下空間。五、標(biāo)準(zhǔn)菌株平安操作規(guī)程〔1〕標(biāo)準(zhǔn)菌株由專人保管。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株名目;名目至少應(yīng)包編號、菌株號、菌種名稱、來源、購置日期、購置數(shù)量、保存方法等。〔2〕標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)做好標(biāo)識后,保存于專用冰箱中?!?〔4〕必需在生物平安柜中進(jìn)展標(biāo)準(zhǔn)菌株試驗,操作過程中,不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域,防止擴大污染范圍?!?〕試驗完畢后,操作過程中全部可能與生物危急物接觸或被污染的試驗器械和物品,能夠高壓消毒的必需高壓消毒,不能進(jìn)展高壓消毒的物品,應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。六、微生物培育物廢棄物平安處理程序〔1,防止利器損傷。非一次性利器必需放入厚壁容器中并運送到特定區(qū)域消毒,最好進(jìn)展高壓消毒?!?應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進(jìn)展消毒。〔3〕全部培育物、廢棄物在運出試驗室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于特地污物袋內(nèi),交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。〔4〕試驗設(shè)備在運出修理或維護(hù)前必需進(jìn)展消毒。七、微生物試驗室緊急事故處理方法〔1〕刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服,清洗雙手和受傷部位,使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑進(jìn)展消毒,必要時進(jìn)展醫(yī)學(xué)處理。同時記錄受傷緣由和相關(guān)的微生物,并保存完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄?!?〕潛在感染性物質(zhì)的食入。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服,進(jìn)展必要的醫(yī)學(xué)處理。報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié),并保存完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄?!?〕潛在危害性氣溶膠的釋放〔在生物平安柜以外露人員應(yīng)承受醫(yī)學(xué)詢問,同時馬上通知試驗室負(fù)責(zé)人和生物平安負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降,在確定時間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi),假設(shè)試驗室沒有中心通風(fēng)系統(tǒng),應(yīng)推遲進(jìn)入試驗室的時間,同時張貼“制止進(jìn)入〞的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后,在生物平安負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下,清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備進(jìn)展污染的去除。〔4〕容器裂開及感染性物質(zhì)的溢出。應(yīng)馬上用布或紙巾掩蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理,已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。假設(shè)用簸箕清理裂開物,應(yīng)對其進(jìn)展高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。全部操作過程中要求戴手套。假設(shè)試驗表格或其他打印或手寫材料被污染,應(yīng)將這些信息復(fù)制后,再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi),按廢棄物處理的方式進(jìn)展處理?!?〕未裝可封閉離心桶的離心機內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生裂開。假設(shè)機器正在30min使氣溶膠沉積。假設(shè)機器停頓后覺察裂開,不開蓋或馬上將蓋子蓋上,并密閉〔如30min清理。全部裂開的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無腐蝕性的、對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進(jìn)展消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中,消毒后回收。離心機內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑屢次擦拭,當(dāng)?shù)囊淮涡允痔?。所使用的全部材料都?yīng)按感染性廢棄物處理?!?〕在可封閉的離心桶〔平安杯〕內(nèi)離心管發(fā)生裂開。全部的密封離心桶都應(yīng)在生物平安柜內(nèi)裝卸。假設(shè)疑心在平安杯內(nèi)發(fā)生破損,應(yīng)松開平安杯蓋子并將離心桶高壓滅菌,也可承受化學(xué)消毒的方法進(jìn)展處理?!?〕生物平安柜內(nèi)生物危害溢出。等待至少5min,讓平安柜布滿氣溶膠,清理時應(yīng)穿戴試驗服,平安眼鏡和手套,且讓平安柜連續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物,進(jìn)展消毒處理應(yīng)保證確定的接觸時間〔至少20min安柜內(nèi)壁、工作臺外表和柜內(nèi)全部設(shè)備。依據(jù)正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì),將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報紙包起20min的消毒處理后再拿出平安柜。最終脫下個人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中進(jìn)展高壓
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